致病性钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制作用

目的通过比较不同毒力钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨固有免疫在钩端螺旋体病发病机制中的作用。方法用三种不同毒力的钩体（致病性问号钩端螺旋体赖型有毒株Lai株、赖型无毒株IPAV株以及非致病性双曲钩端螺旋体Patoc型PatocI株）分别感染体外培养的豚鼠腹腔巨噬细胞,并分别于感染后0．5、1．5、3和6h加入热灭活表皮葡萄球菌孵育30min,通过计算巨噬细胞对灭活表皮葡萄球菌的吞噬率和吞噬指数,检测钩体对巨噬细胞吞噬功能的影响;感染后3h透射电镜观察巨噬细胞对钩体的吞噬、降解和细胞超微结构的变化;用激光共聚焦显微镜观察细胞对钩体的吞噬和巨噬细胞细胞骨架的变化。结果3h和6h Lai株、IPAV株及Patoc Ⅰ株感染组与对照组相比吞噬率和吞噬指数均明显降低（P〈0．05）;巨噬细胞对三种不同毒力的钩体均有吞噬作用,但有毒株Lai株可以抵抗巨噬细胞的杀伤和降解,而无毒株IPAV和非致病株PatocⅠ株则无此功能。结论致病性钩体可以抵抗巨噬细胞的杀伤和降解,逃避固有免疫反应的清除作用,有利其在机体内播散。     

致病性钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制作用

目的 通过比较不同毒力钩端螺旋体对豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨固有免疫在钩端螺旋体病发病机制中的作用.方法 用三种不同毒力的钩体(致病性问号钩端螺旋体赖型有毒株Lai株、赖型无毒株IPAV株以及非致病性双曲钩端螺旋体Patoc型PatocⅠ株)分别感染体外培养的豚鼠腹腔巨噬细胞,并分别于感染后0.5、1.5、3和6 h加入热灭活表皮葡萄球菌孵育30 min,通过计算巨噬细胞对灭活表皮葡萄球菌的吞噬率和吞噬指数,检测钩体对巨噬细胞吞噬功能的影响;感染后3 h透射电镜观察巨噬细胞对钩体的吞噬、降解和细胞超微结构的变化;用激光共聚焦显微镜观察细胞对钩体的吞噬和巨噬细胞细胞骨架的变化. 结果 3 h和6 h Lai株、IPAV株及PatocⅠ株感染组与对照组相比吞噬率和吞噬指数均明显降低(P＜0.05);巨噬细胞对三种不同毒力的钩体均有吞噬作用,但有毒株Lai株可以抵抗巨噬细胞的杀伤和降解,而无毒株IPAV和非致病株PatocⅠ株则无此功能. 结论 致病性钩体可以抵抗巨噬细胞的杀伤和降解,逃避固有免疫反应的清除作用,有利其在机体内播散.     

豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬钩端螺旋体的机制研究

目的 研究豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬钩端螺旋体毒力株的机制,探讨天然免疫在钩端螺旋体病发病机制中的作用.方法 提取豚鼠腹腔巨噬细胞,感染1 h前分别加入细胞微丝阻断剂cytochalasin D、微管阻断剂colchicine和PI3K信号通路阻断剂LY294002,同时设立不含阻断剂的对照组,1 h后检测细胞活性.与致病性问号钩体赖型Lai株共同孵育3 h后,激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞吞噬钩体的形态学特征,流式细胞术检测各组吞噬率.结果 对照组巨噬细胞对钩体的吞噬率为(38.98±0.91)%;cytochalasin D组、colchicine组和LY294002组的吞噬率分别为(23.99±1.40)%、(40.81±0.91)%和(39.64±3.56)%;cytochalasin D组吞噬率明显低于对照组(P<0.05);colchicine组和LY294002组与对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05).结论 微丝参与了豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬毒力钩体的过程,微管在吞噬过程中不起关键作用,微丝的变化不依赖PI3K信号通路.     

豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬钩端螺旋体的机制研究

目的 研究豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬钩端螺旋体毒力株的机制,探讨天然免疫在钩端螺旋体病发病机制中的作用。方法 提取豚鼠腹腔巨噬细胞,感染1 h前分别加入细胞微丝阻断剂cytochalasin D、微管阻断剂colchicine和PI3K信号通路阻断剂LY294002,同时设立不含阻断剂的对照组,1 h后检测细胞活性。与致病性问号钩体赖型Lai株共同孵育3 h后,激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞吞噬钩体的形态学特征,流式细胞术检测各组吞噬率。结果 对照组巨噬细胞对钩体的吞噬率为（38.98±0.91）%;cytochalasin D组、colchicine组和LY294002组的吞噬率分别为（23.99±1.40）%、（40.81±0.91）%和（39.64±3.56）%;cytochalasin D组吞噬率明显低于对照组（P<0.05）;colchicine组和LY294002组与对照组比较差异无统计学意义（均P>0.05）。结论 微丝参与了豚鼠腹腔巨噬细胞吞噬毒力钩体的过程,微管在吞噬过程中不起关键作用,微丝的变化不依赖PI3K信号通路。     

问号钩端螺旋体全基因组的更新注释

目的对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中未注释的基因进行重新注释,并寻找可能的新致病基因.方法将钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中功能未知的编码序列(CDSs)在BLASTP/NCBI数据库中比较,初步预测基因功能,对可能的致病基因及其编码产物运用多种生物学软件进行深入分析.结果未知CDSs中有82个与NCBI数据库中的编码蛋白序列有很高的同源性,其中LA0063和LA3291编码金属蛋白酶,可能与致病有关.结论通过钩端螺旋体黄疸出血群赖株全基因组数据库中功能未知的CDSs进行定期比对,可以不断完善该数据库的功能注释,同时可以发现新的致病基因,有助于钩端螺旋体病致病机理的最终阐明.     

钩端螺旋体病豚鼠模型肾小球超微结构的病理改变

作者用扫描电镜、透射电镜和冷冻复型技术观察钩体病豚鼠模型的肾小球超微结构,发现病变集中在滤过膜,主要表现为滤过膜结构破坏导致肾小球出血,足细胞形态异常,表面有大量钩体粘附。     

洪涝灾害对钩端螺旋体病流行的影响

目的 研究洪涝灾害对钩端螺旋体病流行的影响，以便制定对策控制钩端螺旋体病的流行。方法 采取回顾性研究和现况研究相结合的方法，通过法定传染病报告系统收集发病情况，在相关单位收集水气象资料，按全国爱卫办颁布的鼠密度调查方法开展鼠情监测。将获得的资料进行直线相关等统计学分析。了解气象水等洪涝灾害和钩端螺旋体病发病之间的关系、水气象与鼠类密度之间的关系、鼠密度和钩端螺旋体病发病之间的关系；结果 长江水位与钩端螺旋体病发病和流行无相关关系，鼠密度与钩钩端螺旋体病发病率呈正相关。当野外鼠密度大于10％(夹夜法)可引起钩钩端螺旋体病流行。结论 鼠密度可作为钩端螺旋体病监调和疫情预测预报的一项重要项目和指标。     

几个血清型钩端螺旋体DNA碱基组成的测定

作者用热变性温度法测定了几个血清型钩端螺旋体的DNA碱基组成(G+C mo 1％)。问号钩端螺旋体赖型017株为36.8％,黄疸出血型8244株为35.5％,波摩拿型109株为36.1％,犬型611株为35.2％,双曲钩端螺旋体帕托克型Patoc Ⅰ株39.1％,其中赖型017株的DNA碱基组成属首次报道。     

Tuftsin对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

将实验鼠随机分为4组:(1)正常小鼠注射tuftsin组;(2)正常对照组;(3)切脾后注射tuftsin组;(4)脾切除组。以5%淀粉液诱导各组小鼠腹腔巨噬细胞产生,并观察其对鸡红细胞的吞噬功能。结果发现腹腔巨噬细胞功能在(1)组最强,(4)组最弱,(2)组与(3)组相比无显著性差异。提示,脾切除降低腹腔巨噬细胞功能,tuftsin则可增强其活力,tufsin还可以补偿脾切除后已减弱的腹腔巨噬细胞功能。     

致病性与非致病性钩端螺旋体蛋白电泳及单克隆抗体识别抗原的比较

作者用SDS-PAGE和Western印迹分析了三株钩体全细胞蛋白电泳图谱及McAb识别的抗原分子。致病性问号钩端螺旋体017株、606株蛋白电泳图谱平均相似性为90％,与非致病性双曲钩端螺旋体patoc Ⅰ株相比,分别为32％,31％;与McAb LB_1 识别的抗原图谱相比,017株与606株基本一致,与patoc Ⅰ株均完全不同。提示该分析方法在区分致病性与非致病性钩体上具有一定意义。     

问号钩端螺旋体全基因组的更新注释

目的对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中未注释的基因进行重新注释，并寻找可能的新致病基因。方法将钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株全基因组数据库中功能未知的编码序列(CDSs)在BLASTP／NCBI数据库中比较，初步预测基因功能，对可能的致病基因及其编码产物运用多种生物学软件进行深入分析。结果未知CDSs中有82个与NCBI数据库中的编码蛋白序列有很高的同源性，其中LA0063和LA3291编码金属蛋白酶，可能与致病有关。结论通过钩端螺旋体黄疸出血群赖株全基因组数据库中功能未知的CDSs进行定期比对，可以不断完善该数据库的功能注释，同时可以发现新的致病基因，有助于钩端螺旋体病致病机理的最终阐明。     

持续性游泳对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

目的：观察持续性游泳对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法：采用体内吞噬法,计算吞噬率和吞噬指数。结果：小鼠在持续性游泳30－60min的情况下,它的吞噬功能与对照组相比显增强（P＜0．001）。结论：适量运动训练能够提高机体的免疫功能。     

钩端螺旋体在不同宿主巨噬细胞内存活能力的比较

目的通过比较钩端螺旋体(钩体)在人和小鼠单核-巨噬细胞内的存活情况,探讨固有免疫在钩端螺旋体病致病机制中的作用。方法将钩体秋季血清群强毒株56606v株及其经体外多次传代的弱毒株56606 a株在体外分别感染经佛波酯(PMA)诱导分化的人单核细胞系THP-1和小鼠单核-巨噬细胞系RAW 264.7。感染后2、24、72 h,采用免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察并计算两种细胞的含菌细胞百分数;感染后2、12、24、48和72 h,采用Real-Tim e PCR技术定量检测可间接反映细胞内钩体存活数量的钩体16S rRNA的表达。结果随着感染时间的延长,两种细胞的含菌细胞百分数逐渐降低;Real-Tim e PCR检测结果显示:随着感染时间的延长,两种细胞内钩体16S rRNA的表达逐渐下调,细胞内钩体的存活数量逐渐减少。结论钩体在人和小鼠单核-巨噬细胞内均不能存活和繁殖,提示致病性钩体通过抗巨噬细胞的杀灭降解而在胞内的存活和繁殖可能不是钩体感染人类宿主的主要致病途径,其发病机制有待进一步阐明。     

聚合酶链反应检测致病性钩端螺旋体微量DNA的研究

Leptospirosis is a severe zoonosis in the world. The methods for detecting leptospira are not sensitive and specific so far. The problems in early diagnosis and epidemiological identification of Leptospirosis remain unsolved. Two recombinant DNA fragments of serogroup Icterohaemorrhagiae, Leptospira were selected by repeated molecular cloning and screening in this study firstly. One of them can hybridize with the DNA of various serogroups of Leptospira interrogans; the other can only hybridize with the DNA of serogroup Icterohaemorrhagiae. After the nucleotides sequence analysis, from these 2 recombinant DNA fragments, 2 pairs of polymerase chain reaction (PCR) oligonucleotide primers were synthesized, named primer B 1, 2 and primer B 3, 4 PCRs were carried out with these 2 primers for detecting the microquantity (0.1 ng) of various serovars, serogroup of leptospires. All the DNA of Leptospira interrogans can be amplified by primer B 1, 2, and only the DNA of serogroup icterohaemorrhagiae, Leptospira reacted specially with primer B 3, 4. The DNA of non-pathogenetic Leptospira and some other microbes, however, had no amplification at all. This study is first reported at home and abroad. The results demonstrate that PCR is a very sensitive and specific technique of DNA amplification, which can be used as a powerful tool in the early diagnosis and epidemiological identification of leptospirosis.     

安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 观察安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响.方法 取体重18～22g昆明小鼠50只,随机分为生理盐水组、环磷酰胺组和安坎速低、中、高剂量组.治疗2周后腹腔注射5%鸡红细胞悬液,8-12h后处死动物,抽出腹腔洗液,油镜下计数玻片巨噬细胞,计算吞噬指数和吞噬百分率.结果 安坎速低、中、高剂量组与生理盐水组及环磷酰胺组比较,吞噬指数、吞噬百分率均显著性升高(P＜0.01),而环磷酰胺组与生理盐水比较,吞噬指数、吞噬百分率两项指标略有降低,但无统计学意义(P＞0.05).结论 安坎速能显著性提升小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率,提示其可促进机体免疫状态.     

小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定

目的建立小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定方法,并测定其吞噬率.方法 用6%淀粉肉汤诱导小鼠腹腔产生巨噬细胞,体内吞噬5%鸡红细胞,并测定其吞噬率.结果 小鼠腹腔巨噬细胞成活率>98%,平均吞噬百分率和平均吞噬指数分别是38.04%和0.39.结论本实验方法可以用于小鼠腹腔巨噬细胞的相关研究.     

赖型钩湍螺旋体基因库的构建及致病性钩端螺旋体DNA同源序列...

A gene bank of the main pathogen of pulmonary diffuse haemorrhage type leptospirosis (PDH), L. interrogans serovar lai strain 017, was first constructed with plasmid vector pUC9, which contained 610 recombinant clones and laid the foundation for further investigation of molecular characteristics of leptospires with strong virulence. Recombinant plasmids which have homological sequences of pathogenic leptospires were screened from the gene bank. A recombinant plasmid, designated pCX7, could detect 1.7 kb fragment of strain 017, 9.0 kb of strain 601 and 30.0 kb of strain 610 respectively without cross hybridization with nonvirulent leptospires such as L. biflexa strain Patoc I and Leptonema illini. pCX9, another recombinant plasmid, could detect 1.9 kb fragment of strain 017 and had no hybridization with other pathogenic or nonpathogenic leptospires. The results showed that the degree of homology between pathogenic and non-pathogenic leptospires was very low and the degree of homology was very high among the pathogenic leptospires.     

钩端螺旋体病的临床表现

本文介绍钩端螺旋体病的临床表现。     

临泽红枣对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

本实验用测定小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的方法，观察临泽红枣对小鼠免疫功能的影响。实验显示：１００％、５０％红枣溶液组在８、１６ｈ实验观察小鼠腹腔巨噬细胞，其吞噬率和吞噬指数明显高于盐水对照组，以１６ｈ，提高最明显。实验说明：临泽红枣能提高体内单核一吞噬细胞系统的吞噬功能。     

锌对腹腔巨噬细胞吞噬功能影响的初步研究

目的：探讨饲料锌对腹脸巨噬细胞（Ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＰＭΦ）吞噬功能的影响及其机理，方法；建立大鼠缺锌，高锌模型，测定大量ＰＭΦ吞噬率，吞噬指数及ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，结果（１）缺锌（ＺＤ）组ＰＭΦ吞噬率，吞噬指数均非常显著地低于配对（ＰＦ）组及自由喂养（ＡＬ）组，经补锌后得以恢复，高锌（ＺＥ）组明显低于ＡＬ组。（２）ＰＭΦ经体外脂多糖（ＬＰＳ）作用后胞内ｃＡＭＰ含量，ｃＡＭＰ