荧光原位杂交技术联合尿脱落细胞学、膀胱肿瘤抗原对尿路上皮细胞肿瘤的诊断效能分析

目的分析UroVysion荧光原位杂交技术、尿脱落细胞学联合膀胱肿瘤抗原(BTA)诊断上尿路上皮细胞癌的效能,为上尿路上皮细胞癌的诊断提供理论依据。方法选取2014-2017年鄂州市鄂钢医院泌尿外科经膀胱镜活检确诊为上尿路上皮细胞癌患者105例作为观察组,选取同期来鄂州市鄂钢医院进行健康体检者100例作为对照组,观察并分析UroVysion荧光原位杂交技术、尿脱落细胞学联合BTA诊断上尿路上皮细胞癌的效果。结果 UroVysion荧光原位杂交技术检测诊断上尿路上皮细胞癌的灵敏度、特异度分别为81.90%、92.00%,尿脱落细胞学联合BTA检测诊断上尿路上皮细胞癌的灵敏度、特异度分别为37.14%、93.00%,前者灵敏度明显高于后者,差异有统计学意义(P0.05),而二者特异性比较,差异无统计学意义(P0.05)。2种方法随上尿路上皮细胞癌分级的升高检测阳性率逐渐升高,且各类型上尿路上皮细胞癌比较,UroVysion荧光原位杂交技术检出率明显高于尿脱落细胞学联合BTA,差异有统计学意义(P0.05)。3种方法联合检测诊断上尿路上皮细胞癌的灵敏度、准确度均明显高于单独使用UroVysion荧光原位杂交技术、或尿脱落细胞学联合BTA检测。结论 UroVysion荧光原位杂交技术检测上尿路上皮细胞癌的灵敏度、特异度均较好,是一种快速、无创、安全的检测方法,联合尿脱落细胞学与BTA检测可显著提高诊断上尿路上皮细胞癌的准确度,具有良好的应用前景。     

基质金属蛋白酶9在鉴别肾细胞癌和肾盂移行细胞癌中的意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-9在鉴别肾细胞癌和肾盂移行细胞癌中的应用。方法：采用酶联免疫法对肾细胞癌患者,肾盂移行细胞癌患者和正常人血清及尿中基质金属蛋白酶-9的浓度进行测定。结果：肾细胞癌和肾盂移行细胞癌组患者尿基质金属蛋白酶-9均高于正常对照组（P〈0.05）;肾盂移行细胞癌组尿基质金属蛋白酶-9的浓度亦明显高于肾细胞癌组（P〈0.05）;而各组血清中基质金属蛋白酶-9值差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：检测尿中基质金属蛋白酶-9的浓度对于鉴别肾细胞癌和肾盂移行细胞癌有重要意义。     

MMP-9 mRNA在人膀胱肿瘤中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达。方法应用RT-PCR方法检测MMP-9mRNA在26例正常和31例TCCB组织。结果MMP-9mRNA在膀胱肿瘤组织水平明显高于正常膀胱组织。结论MMP-9mRAN的过度表达和膀胱肿瘤侵润转移密切相关。     

MMP-9 mRNA在人膀胱肿瘤中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达.方法应用RT-PCR方法检测MMP-9 mRNA在26例正常和31例TCCB组织.结果MMP-9 mRNA在膀胱肿瘤组织水平明显高于正常膀胱组织.结论MMP-9 mRAN的过度表达和膀胱肿瘤侵润转移密切相关.     

膀胱肿瘤中端粒酶逆转录酶和c-myc的表达研究

目的检测膀胱肿瘤组织、尿脱落细胞和外周血中的端粒酶逆转录酶(hTERT)和c-myc mRNA表达,探讨二者的临床意义及关系.方法采用RT-PCR法同时检测28例膀胱移行细胞癌(TCCB)患者和15例对照的组织、尿脱落细胞和血细胞中的hTERT和c-myc mRNA表达.结果肿瘤组织hTERT和 c-myc的mRNA阳性表达率分别为100%(28/28) 和 67.8%(19/28),对照组为0(0/15)和26.7%(4/15);两指标在尿脱落细胞中的阳性率分别为85.7%(24/28)和71.4%(20/28),对照组为13.3%(2/15)和26.7%(4/15);血细胞中为78.6%(22/28)和57.1%(16/28),对照组为6.7%(1/15)和33.3%(5/15);肿瘤组与对照组比较具有显著性差异(P＜ 0.01),两指标不同组间比较具有相关性(P＜ 0.01).结论 hTERT和c-myc mRNA在TCCB中的表达具有相关性,在TCCB不同标本中表达具有一致性,可作为膀胱肿瘤的良好诊断指标,hTERT较c-myc优;以尿脱落细胞对TCCB的诊断更准确和方便.     

MMP-9在腺性膀胱炎及膀胱移行细胞癌组织中的表达与意义

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在腺性膀胱炎和膀胱移行细胞癌（TCCB）组织中的表达规律,探讨其与肿瘤的侵袭和转移关系.方法通过免疫组织化学的方法研究了15例腺性膀胱炎和27例膀胱移行细胞癌组织中MMP-9的表达情况,并以8例正常膀胱组织作对照. 结果 MMP-9在正常膀胱组织中不表达或微量表达,在腺性膀胱炎和膀胱移行细胞癌组织中呈不同程度的阳性表达. 结论 MMP-9在膀胱病变中发挥重要作用.     

尿环氧化酶-2蛋白诊断膀胱移行细胞癌的价值

目的:分析比较尿环氧化酶-2(Cox-2)蛋白检测与尿脱落细胞学检查诊断膀胱移行细胞癌的临床价值。方法:选择35例膀胱移行细胞癌和30例作为对照组的前列腺增生症患者,分别行尿Cox-2蛋白和尿脱落细胞学检查,比较2种方法的敏感性、特异性和阳性预测值。结果:尿Cox-2蛋白和尿脱落细胞学的敏感性分别为82.9%和25.7%,差异有显著性(P<0.01),特异性分别为79.1%和100.0%,阳性预测值分别为60.4%和100.0%。结论:尿Cox-2蛋白检测是一种简单、敏感性高、无创的早期诊断膀胱移行细胞癌的方法,适合于膀胱移行细胞癌的诊断与随访。     

膀胱移行细胞癌各分期分级中荧光原位杂交检测敏感性比较

目的评价荧光原位杂交(FISH)在诊断膀胱移行细胞癌各分期分级中的敏感性。方法应用荧光标记的3、7、17号染色体及p16基因探针检测138例血尿患者尿液中脱落细胞的染色体及基因畸变情况,根据诊断标准计算FISH诊断膀胱移行细胞癌的敏感性。同时留取上述患者尿液送病理科行尿找瘤细胞检查,并比较两种方法对膀胱移行细胞癌的诊断效能。结果 FISH图像中细胞核大且不规则者更易观察到染色体基因异常情况,并可见具有较多染色体改变的细胞呈花斑状的染色图像。FISH和尿细胞学诊断膀胱移行细胞癌的总敏感性为83.9%和36.8%,在各分期分级中敏感性为T1期83.6%和31.3%,T2-4期100%和55.6%,G1级36.3%和9.1%,G2级95.2%和42.9%,G3级100%和50%。FISH诊断膀胱移行细胞癌的总敏感性及在肿瘤各种分期分级中敏感性与尿细胞学结果比较均有统计学差异(P<0.05)。FISH诊断膀胱移行细胞癌敏感性高于尿细胞学。结论 FISH对膀胱移行细胞癌的诊断有较高的敏感度。     

肝细胞癌患者血清血管内皮细胞生长因子和基质金属蛋白酶-9的水平变化及其意义

目的:检测肝细胞癌患者血清血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9含量并分析与临床分期的相关性。方法:用ELISA法检测30例健康对照者和146例肝细胞癌患者血清血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9含量,分析血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9对肝细胞癌的诊断价值和临床分期的关系。结果:肝细胞癌组血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9水平显著高于健康对照组水平(P<0.01)。肝细胞癌患者血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9水平与肿瘤大小呈正相关(P<0.01),肝细胞癌术后转移和复发患者血清血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9水平明显升高(P<0.05),TNMⅢ、Ⅳ期患者血清血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9水平也明显高于I、Ⅱ期患者(P<0.01)。结论:血清血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶-9测定可作为诊断肝细胞癌和临床分期的重要指标。     

核基质蛋白22及尿膀胱癌抗原在膀胱移行细胞癌诊断中的价值

目的 探讨核基质蛋白22(NMP22)及尿膀胱癌抗原(UBC)的检测用于早期诊断膀胱移行细胞癌(BTCC)的可行性及影响因素.方法 膀胱移行细胞癌患者60例,泌尿系良性疾病患者25例,健康对照组20名,采用酶联免疫(ELISA)方法检测尿NMP22及UBC.膀胱镜检查前取尿样分别进行NMP22、UBC和脱落细胞学检测,分析比较3种方法的敏感性、特异性、阳性和阴性预测价值.结果 以大于正常对照组尿液NMP22水平上限10 U/ml为NMP22阳性界值,以12μg/L为UBC诊断膀胱移行细胞癌的临界值时,NMP22和UBC诊断膀胱移行细胞癌的敏感性分别为88.3%和86.7%,与脱落细胞学(40.0%)比较,差异均有统计学意义(P均<0.01),3种方法诊断膀胱移行细胞癌的特异性分别为80.0%、84.0%和92.0%,阳性预测值分别为91.4%、92.9%和92.3%,阴性预测值分别为74.1%、72.4%和38.9%.结论 尿NMP22和UBC检测技术简单,有较高的敏感性和特异性,可作为早期诊断膀胱移行细胞癌的肿瘤标记物.     

MMP-9、CD34在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及相关性研究

【目的】探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、人白细胞分化抗原-34（CD34）在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义。【方法】应用免疫组织化学法（S-P法）,检测60例膀胱尿路上皮癌组织及15例正常膀胱组织中MMP-9表达及CD34标记的肿瘤微血管密度（MVD）值。【结果】①膀胱尿路上皮癌组织中MMP-9的阳性表达率为58．33％（35/60）,CD34标记M VD平均值为20．91±8．83,明显高于正常膀胱组织的6．67％（1/15）和9．49±2．73,且两组相比差异均有显著性（P ＜0．01）。②在膀胱尿路上皮癌组织中MMP-9的阳性表达率和CD34标记M VD平均值与肿瘤组织学分化程度,浸润深度（临床分期）,肿瘤大小有相关（P＜0．05）,与单发或多发、年龄、性别无关（ P＞0．05）。③在MMP-9的阳性表达的病例中,CD34标记MVD值随MMP-9表达强度的增加而增加,两者呈明显的正相关（P＜0．01）。【结论】MMP-9的表达及CD34标记M VD值在膀胱尿路上皮癌中的表达明显升高,可作为判断膀胱尿路上皮癌恶性程度及预后的重要参考指标。     

荧光原位杂交（FISH）技术在尿路上皮肿瘤诊断中的应用研究

目的应用荧光原位杂交（FISH）技术探索中国人群中3、7和17号染色体及9p21位点异常与尿路上皮肿瘤发生、发展的关系,评估其用于中国人群尿路上皮肿瘤诊断的可行性及临床应用前景。方法收集102例以血尿症状就诊,证实为尿路上皮肿瘤患者的新鲜晨尿,连续留取3d,将标本分别以FISH技术和尿脱落细胞学方法加以检测。收集20名正常成人新鲜晨尿,同法操作并计算正常成人对照组参考值。收集临床资料,明确肿瘤临床分期和病理分级。以正常成人对照组参考值判定患者FISH结果,比较其与尿脱落细胞学检测方法诊断的阳性检出率。统计分析3、7和17号染色体及9p21位点畸变率与性别、年龄、肿瘤初发、复发、单发、多发、临床分期及病理分级的相关性。结果①各染色体及区带均呈现较高的畸变发生率。多体畸变发生率由高到低为98.0%（7号）、97.1%（3号）、96.1%（17号）和83.3%（9p21位点）;单体畸变发生率由高到低为95.1%（9p21位点）、68.6%（17号）、67.4%（7号）和66.7%（3号）;缺失畸变则仅见于9p21位点（31.4%）。②尿脱落细胞学检查的肿瘤阳性检出率为64.7%,FISH则为98.0%,两者差异有统计学意义（χ^2=30.25,P〈0.01）。③各染色体畸变与患者的性别、年龄、肿瘤初发、复发、单发、多发及肿瘤临床分期均未见显著相关性。④3号染色体单体畸变与肿瘤病理分级间呈正相关（r=0.198,P=0.046）,其余染色体不同类型的畸变情况均未显示出与不同病理分级间存在显著相关性。⑤3、7及17号染色体主要以多体畸变为主,而9p21位点主要以单体畸变为主（χ2=166.426,P〈0.001）,尚无证据表明各染色体与缺失畸变间的倍性关系。结论①FISH技术是通过尿液样本检测尿路上皮肿瘤染色体畸变的有效方法,可作为早期诊断尿路上皮肿瘤的重要辅助手段。②尿路上皮肿瘤在3、7和17号染色体及9p21位点同时存在多种畸变类型,且各畸变类型均具有较高的畸变率。③3号染色体的缺失或单体畸变可能对尿路上皮肿瘤的进展具有一定预测意义。     

窄带光成像在膀胱癌早期诊断及复发监测中的应用研究

目的探讨窄带光成像（narrow band imaging,NBI）在膀胱癌早期诊断和随访中的作用。方法64例患者,其中48例为初发可疑膀胱癌患者,16例为膀胱癌术后随访患者。采用随机方法分别对同一病例使用普通白光成像（white light imaging,WLI）和NBI进行观察,对可疑病灶标记并进行活检病理学检查。结果本组共46例诊断为膀胱癌,其中34例WLI和NBI均可发现,另12例只能通过NBI发现。WLI诊断灵敏度为78．8％,NBI为100％（P=0．038）;WLI诊断假阳性率为27．3％,NBI为23．3％（P〉0．05）。结论NBI较WLI对膀胱肿瘤更敏感,有利于早期诊断膀胱肿瘤。     

膀胱尿路上皮癌患者外周血CK20、CD105及CD146表达的临床意义

目的检测膀胱尿路上皮癌患者外周血中血清肿瘤标志物CK20、CD105和CD146的表达,探讨CK20、CD105和CD146作为膀胱尿路上皮癌微转移指标的应用价值。方法采用流式细胞仪检测50例膀胱尿路上皮癌患者、30例健康志愿者外周血中CK20及CD105/CD146的表达情况。分析膀胱尿路上皮癌患者外周血中CK20及CD105/CD146的阳性表达率及其与临床病理学指标的关系;CK20及CD105/CD146在膀胱尿路上皮癌患者外周血中表达的相关性及联合检测的意义。结果CK20和CD105/CD146在膀胱癌组中的阳性表达率分别为28.0%和48.0%,其表达与肿瘤分期、病理分级、有无远处转移、肿瘤直径、病灶数量等相关（P〈0.05）,而与患者性别、年龄无相关性（P〉0.05）。患者中有10例同时出现CK20及CD105/CD146阳性表达,两者的表达有相关性（χ2=4.276,r=0.281,P〈0.05）。联合检测与单独检测CK20相比,阳性率有所提高,差异有统计学意义（P=0.005）;联合检测与单独检测CD105/CD146相比,阳性率差异无统计学意义（P=0.423）,但阳性率仍有提高。结论CK20及CD105/CD146对于预测膀胱尿路上皮癌微转移具有较高的敏感性。联合检测CK20及CD105/CD146与单项检测相比,具有更高的敏感性。CK20及CD105/CD146可以作为膀胱尿路上皮癌微转移早期诊断、早期治疗和预后判断的生物学指标。     

B7-H4在膀胱尿路上皮癌组织和血清中的表达及临床意义

目的了解膀胱尿路上皮癌组织及患者血清中B7-H4的表达情况及其临床意义。方法应用免疫组化方法检测49例膀胱尿路上皮癌患者组织中B7-H4的表达,ELISA检测45例患者外周血可溶性B7-H4（sB7-H4）的含量,分析癌组织和血清中B7-H4的表达水平及与患者临床病理指标的相关性。结果膀胱尿路上皮癌组织中B7-H4阳性表达率为49.0%（24/49）,而正常膀胱组织中无B7-H4表达（P〈0.05）,其表达水平与患者的肿瘤TNM分期和组织学分级密切相关（P〈0.05）;膀胱尿路上皮癌患者血清中sB7-H4的浓度较正常人显著增高（P〈0.05）,高级别患者表达量显著高于低级别患者（P〈0.05）。结论 B7-H4在膀胱尿路上皮癌中表达上调,在膀胱尿路上皮癌的发生、发展及免疫逃逸中发挥着重要作用,封闭肿瘤组织中的B7-H4有可能干预膀胱尿路上皮癌的复发与进展。     

荧光原位杂交技术在尿路上皮癌筛查中价值

目的评估尿脱落细胞学及荧光原位杂交技术（fluorescenceinsituhybridization,FISH）检测在筛查尿路上皮癌中的特异性及敏感性,分析各畸变染色体与尿路上皮癌的关系。方法对156例血尿患者（血尿组）和20例体检健康者（对照组）分别行普通细胞学和FISH检测。以手术或组织活检病理检测结果验证FISH检测技术及细胞学检测结果的准确性,比较2种检测技术在尿路上皮癌筛查中的敏感性和特异性,分析3、7、17号染色体及p16位点在尿路上皮癌中的畸变概率。结果血尿组FISH检测和尿脱落细胞学检测诊断尿路上皮癌的敏感性分别为91．6％和40．2％,二者比较差异有统计学意义（χ2=33．802,P=0．000）;特异性分别为95．9％和97．7％,二者比较差异无统计学意义（P〉0．05）;3、7、17号染色体及p16位点畸变的概率分别为63．0％、64．1％、67．4％、75．0％。结论FISH检测可明显提高尿路上皮癌术前诊断准确性,可了解尿路上皮癌患者尿脱落细胞染色体畸变情况。     

荧光原位杂交技术诊断上尿路上皮癌的临床研究

目的评价荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术检测尿液脱落细胞对诊断上尿路上皮癌（upperur inary tract urothelial carcinoma,UUT—UC）的临床意义及价值。方法对26例临床可疑uuT—UC患者和20例健康对照者的尿液标本行FISH检测和尿脱落细胞学分析,再将22例临床病理确诊为UuT—UC患者的结果与4例临床病理为良性泌尿系疾病和20例健康对照者的结果进行比较。FIsH检测使用荧光标记DNA探针混合物与细胞核上3、7、17号染色体着丝粒和p16基因（9p21）位点进行杂交,并分别计算其在UUT—UC患者尿脱落细胞中的畸变率。结果FISH和细胞学检测UUT—UC总的敏感度分别为90．9％（20／22）和59．1％（13／22）,FISH敏感度较高（P〈0．05）;特异度分别为100％（24／24）和95．8％（23／24）,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。uuT—UC的3、7、17号染色体着丝粒和p16基因（9p21）位点的畸变率分别为90．9％（20／22）、86．4％（19／22）、63．6％（14／22）和68．2V00（15／22）。结论FISH技术对诊断uuT～UC有较高的敏感度和特异度,其敏感度明显高于尿脱落细胞形态学检测,而特异度则与之相近。作为一种无创检测方法,该技术有着很好的临床应用前景。     

膀胱尿路上皮癌组织中AIB1和PI3K的表达及意义

目的应用免疫组化方法检测膀胱尿路上皮癌组织中AIB1和PI3K的表达,分析两者表达的相关性及其临床病理学意义。方法收集52例行全膀胱切除术治疗的膀胱尿路上皮癌患者手术标本,采用免疫组化法检测52例肿瘤组织、10例非肿瘤组织中的AIB1和PI3K表达情况。结果 AIB1和PI3K阳性表达率在膀胱尿路上皮癌组织明显高于非癌膀胱组织,AIB1表达与患者性别、年龄、病理分级、肿瘤数目等没有相关性。T3期膀胱癌AIB1阳性表达率显著高于T1、T2期膀胱癌（P=0.044）。AIB1与PI3K的表达呈正相关（r=0.302,P=0.030）。结论 AIB1是膀胱癌预后不良的分子标记;PI3K/AKT信号通路可能是AIB1促癌作用的重要机制。     

多探针荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮癌诊断中的意义

目的探讨多探针荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）在膀胱尿路上皮癌诊断的可行性,并探讨其与肿瘤临床分期和病理分级的关系。方法收集经膀胱镜检查诊断为膀胱移行细胞癌35例患者,及10例非肿瘤病人,10例正常人群的新鲜尿液标本,应用FISH检测膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中的3、7、17、9号染色体异常,并进行尿细胞学检测（Urinary cytological examination,UCE）。统计学分析FISH和UCE诊断膀胱癌的灵敏性和特异性,并分析FISH检测染色体突变与膀胱肿瘤分期及分级的相关性。结果多探针联合FISH技术与UCE诊断膀胱癌的灵敏度分别为82.86%和37.14%（P〈0.05）,特异度分别为95.0%和100%（P〉0.05）。3、7及17号染色体着丝粒特异性探针及9号染色体长臂2区1带（9p21）的p16位点特异性探针联合应用诊断膀胱癌的灵敏度为82.86%,而单一探针诊断膀胱癌的灵敏度最高仅为65.71%。膀胱癌患者中发生3、7、17号染色体畸变及9号染色体p16基因畸变均与不同病理分级（G1-G3）有关（P〈0.05）;3、7号染色体畸变与临床分期（T0-T4）有相关性（P〈0.05）,而17号染色体及9号染色体p16基因畸变与临床分期无相关性（P〉0.05）。结论多荧光探针FISH诊断膀胱尿路上皮癌敏感性高、特异性强、无创,且与肿瘤分期和分级有一定相关性,临床应用价值高。     

PTEN基因和FHIT基因在膀胱尿路上皮癌中的表达和意义

目的探讨磷酸酶和张力蛋白同源（phosphatase and tensin homolog,PTEN）基因及脆性组氨酸三联体（fragile histindine triad,FHIT）基因在膀胱尿路上皮癌组织中的表达水平及临床意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测14例正常膀胱黏膜及37例膀胱尿路上皮癌组织中的PTEN及FHIT基因的表达水平。结果在14例正常膀胱组织中PTEN与FHIT基因均表达阳性或强阳性。在37例膀胱尿路上皮癌组织中PTEN基因阳性表达率为56.8%（21/37）,其中阳性9例,强阳性12例,FHIT基因阳性表达率为48.6%（18/37）,其中阳性8例,强阳性10例。随着肿瘤分期、分级的增加PTEN和FHIT基因表达均显著减少;PTEN基因的表达与FHIT基因的表达呈正相关（P〈0.01）。结论PTEN与FHIT基因可能成为估计膀胱尿路上皮癌恶性程度及肿瘤侵袭性的一项有用的指标,联合检测PTEN和FHIT基因在膀胱尿路上皮癌中的表达,有助于对膀胱肿瘤的细胞分化程度及诊断做出正确评价。