ABCG2与肾癌干细胞的研究进展

随着对干细胞研究的不断深入和研究技术的不断提高,人们逐渐认识到包括肾癌在内的恶性肿瘤是一种干细胞疾病,最近先后在不同的恶性肿瘤中找到了肿瘤干细胞的分子标志物.ABCG2转运蛋白首先是在人肿瘤组织中发现的一种耐药蛋白,根据其分子功能作为SP细胞(侧群干细胞)的分子标志.肾癌的一大特性是对化疗极不敏感,并且根据ABCG2在肾癌中表达的研究,认为ABCG2可作为肾癌干细胞的表面标记,有可能为肾癌的药物治疗提供新的思路.本文综述了肿瘤干细胞的概念,ABCG2的结构、作用及其与肾癌干细胞可能的关系.     

人肝癌干细胞标志物在大鼠肝癌中的表达

目的:分析8种人肝癌干细胞标志物在化学药物诱导的大鼠原发性肝癌中的表达情况。方法:应用二乙基亚硝胺及N-亚硝基吗啉建立化学药物诱导的大鼠原发性肝癌模型。用免疫组织化学方法检测8种人肝癌干细胞标志物CD133、CD90、CD44、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)、上皮细胞黏附分子(EpCAM)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、OV6和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenases,ALDH)在大鼠肝癌组织及癌旁组织中的表达,并通过13点评分法及Image-Pro Plus 6.0软件对图像进行半定量分析。结果:ABCG2、CD133、CD44和AFP在肿瘤组织中的表达显著高于癌旁组织,其余4个标志物无显著差异。结论:化学药物诱导的大鼠肝癌细胞中含有肿瘤干细胞标志物阳性细胞。     

ABCG2在原发性肝细胞性肝癌中的表达及临床意义

目的:分析ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member2)在原发性肝细胞性肝癌(primaryhuman hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达状况及其临床意义。方法:应用免疫组化S-P法和原位杂交的方法检测HCC150例﹑肝硬化50例﹑肝炎组织50例﹑正常肝组织10例中ABCG2蛋白及mRNA的表达情况。结果:HCC﹑肝硬化﹑肝炎和正常肝组织的ABCG2蛋白的阳性率分别是78.67%(118/150)﹑40.00%(20/50)﹑60.00%(30/50)和30.00%(3/10),四者之间差异有统计学意义(χ2=32.25,P<0.05)。ABCG2mRNA在HCC﹑肝硬化﹑肝炎和正常肝组织的阳性表达率分别是69.33%(104/150)﹑36.00%(18/50)﹑50.00%(25/50)和20.00%(2/10),差异有统计学意义(χ2=24.93,P<0.05)。结论:ABCG2在肝癌和肝炎组表达率增高,在肝硬化和正常肝组织表达率降低且ABCG2蛋白与有无转移有关,推测ABCG2参与肿瘤耐药,可能成为治疗HCC临床耐药的分子靶点。     

悬浮球培养法制备ABCG2阳性表达胃癌细胞株

目的:探讨悬浮球培养法制备具有干细胞特性(ABCG2阳性表达)胃癌细胞株MKN45的可行性。方法:采用悬浮球培养法在含成纤维细胞生长因子(bFGF)及表皮生长因子(EGF)的无血清培养基中培养人胃癌细胞株MKN45,观察细胞球体的形成过程,并检测球体细胞及原代贴壁细胞中干细胞标志物ABCG2的表达水平。结果:在无血清培养基培养条件下,胃癌细胞MKN45能形成悬浮球体;球体细胞ABCG2表达水平高于原代贴壁细胞,差异有统计学意义(P0.05)。结论:悬浮球培养法可制备具有肿瘤干细胞特性的ABCG2阳性表达胃癌细胞株,为后续研究奠定了基础。     

CD44+/CD24-/low/ABCG2-乳腺癌干细胞与临床治疗及预后的关系

目的:探讨CD44+/CD24-/low/ABCG2-细胞与临床治疗及预后的相关性。方法:选取我科2005-2008年经手术治疗乳腺浸润性导管癌患者,收集病理组织的石蜡标本43份,其中2年内复发(实验组)23例,2年内无复发(对照组)20例。免疫组化检测ABCG2-的表达情况,并分别于治疗前及化疗2周期后抽取乳腺浸润性导管癌患者空腹静脉血4mL,流式细胞仪检测CD44+/CD24-/low/ABCG2-的细胞比例,分析其与治疗效果的相关性。结果:ABCG2-主要定位于细胞膜和细胞浆,少数可见肿瘤间质染色,无细胞核染色。全组阳性表达者30例(69.8%),高表达者18例(41.9%)。流式细胞检测CD44+/CD24-/low/ABCG2-的细胞在实验组的数量为1～3725个/105(中位数为679个/105),对照组中该细胞数为0～98个/105(中位数为12个/105)。ABCG2-的表达情况与年龄、肿瘤分期、雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、孕激素受体(progestinreceptor,PR)、腋窝淋巴结转移等无相关性,两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乳腺癌组织中,CD44+/CD24-/low/ABCG2-的比例与患者的预后相关,而2年内复发乳腺癌患者外周血中的CD44+/CD24-/low/ABCG2-的细胞数高于2年内无复发者,其与临床疗效的相关性仍需进一步研究。     

胶质瘤与恶性脑膜瘤患者肿瘤组织ABCG2、IGFBP-2表达及预后的关系分析

目的探讨胶质瘤与恶性脑膜瘤患者肿瘤组织三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达及预后的关系。方法选取资阳市第一人民医院确诊胶质瘤患者96例和恶性脑膜瘤患者38例,采用免疫组化法检测患者肿瘤组织中ABCG2、IGFBP-2阳性细胞的表达,计算其阳性细胞百分率并划分阳性等级,并对比两组ABCG2、IGFBP-2表达差异及与预后死亡和复发的关系。结果胶质瘤组肿瘤组织ABCG2、IGFBP-2总阳性率与恶性脑膜瘤组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。胶质瘤组随访中复发率和病死率与恶性脑膜瘤组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。生存分析曲线结果显示,ABCG2、IGFBP-2高表达组出现不良事件(死亡、神经功能中度缺损)时间提前于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论随着胶质瘤、恶性脑膜瘤患者肿瘤组织ABCG2、IGFBP-2阳性细胞百分率等级的升高,其预后的复发率与病死率也逐级升高。     

人骨肉瘤细胞系HOS肿瘤干细胞样细胞亚群的分离与鉴定

目的探索无血清培养基培养人骨肉瘤细胞系HOS细胞,筛选并鉴定人骨肉瘤细胞系HOS中肿瘤干细胞相关亚群。方法通过无血清悬浮培养初步富集骨肉瘤细HOS肿瘤干细胞,观察其形成肿瘤干细胞球过程中的细胞形态,并在有血清培养基中诱导其分化。各种浓度化疗药物顺铂(CDDP)和阿霉素(DXR)分别处理HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞,MTT法检测两种细胞对化疗药敏感性。Real-time PCR检测HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3表达情况。将HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞分别接种于BALB/c裸鼠,观察成瘤情况。结果人骨肉瘤细胞系HOS细胞能够在无血清培养基中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球。HOS悬浮细胞球对于化疗药物的敏感性较HOS贴壁细胞高。Real-time PCR结果显示HOS悬浮细胞球较HOS贴壁细胞高表达肿瘤干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3。HOS悬浮细胞球体内成瘤能力较HOS贴壁细胞强。结论无血清悬浮培养可以初步富集人骨肉瘤细胞系HOS悬浮细胞球,且这些细胞具有肿瘤干细胞特性。     

乳腺癌耐药相关蛋白与多药耐药关系的研究进展

肿瘤细胞对各种药物的耐药性是导致乳腺癌患者化疗失败的主要原因之一.肿瘤细胞在药物诱导下对结构和功能不相关的药物产生耐药,是多药耐药(MDR)现象.MDR与几种转运蛋白相关: P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP1～7)和乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP/ABCG2),这些蛋白都属于ATP结合盒(ABC)膜转运蛋白超家族.它们作为药物排出泵,可以导致胞内的细胞毒药物浓度降低,使肿瘤细胞对多种抗肿瘤药物产生耐药.BCRP(ABCG2)作为其中发现最晚的1个家族成员,近年来关于ABCG2的结构、分布、功能、作用底物、基因表达及调节等相关方面的研究逐渐开展起来.     

新辅助化疗对三阴性乳腺癌患者ABCG2、P-gp、BR-CA1及FOXA1水平的影响

目的分析新辅助化疗对三阴性乳腺癌患者转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporerG2,ABCG2)、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、乳腺癌易感基因(breast cancer1,BR-CA1)、叉头框蛋白AI(foxhead box A1,FOXA1)水平的影响。方法将我院2012年5月～2017年5月收治的54例三阴性乳腺癌手术患者随机分为A组和B组各27例。A组术前应用表柔比星化疗,B组应用紫杉醇脂质体与表柔比星联合化疗,对比分析两组ABCG2、P-gp、BR-CA1及FOXA1水平。结果化疗后,B组BR-CA1、FOXA1、ABCG2及P-gp表达水平均低于A组,差异有统计学意义(P0.05)。结论新辅助化疗能改善三阴性乳腺癌患者ABCG2、P-gp、BR-CA1及FOXA1水平,临床价值颇高,建议推广。     

ABCG2蛋白抑制声动力治疗对体外胶质瘤干细胞的杀伤作用

目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)对声动力治疗(SDT)杀伤体外胶质瘤干细胞(GSCs)的影响及其机制。 方法 以悬浮培养法自胶质瘤细胞中分离和培养GSCs;以流式细胞术、免疫荧光细胞化学染色方法分析ABCG2蛋白在GSCs上的表达;利用ABCG2蛋白特异性阻断剂Fumitremergin C(FTC)分析其对细胞内声敏剂Photofrin的外排作用;通过检测细胞内ROS产量、细胞存活率、细胞凋亡率,分析FTC对SDT治疗效果的影响。 结果 成功分离和培养了GSCs;ABCG2蛋白在GSCs上过表达;FTC可抑制ABCG2蛋白对细胞内Photofrin的外排作用;FTC通过提高细胞内Photofrin的浓度而提高细胞内ROS的产量,进而增强SDT导致的细胞存活率下降和凋亡率升高作用。 结论 ABCG2蛋白在GSCs上过表达;抑制ABCG2蛋白的药物外排作用可提高SDT对GSCs的杀伤作用。     

肺癌干细胞分离与鉴定研究进展

随着肿瘤干细胞学说的兴起,肺癌干细胞研究也方兴未艾,肺癌干细胞可能在肺癌发生、进展过程中发挥关键作用。目前已发现肺癌发生可能与肺内成体干细胞有关,同时也有较多证据支持肺癌内存在肿瘤干细胞,但进一步研究肺癌干细胞的前提和基础是对其进行有效分离与鉴定,这是目前对肺癌干细胞进行深入研究所面临的主要障碍之一。CD133、ABCG2、ALDH等的表达可能与肺癌干细胞有关,现就文献中依靠上述标志物对肺癌干细胞进行分离及鉴定的方法与结果进行归纳探讨。     

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2与高尿酸血症

摘要：三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(adenosine triphosphate binding box transporter G2，ABCG2)在肠道和肾脏转运尿酸，介导尿酸外排。ABCG2基因单核苷酸多态性与高尿酸血症的发生密切相关，其中Q141K突变发挥着重要作用。雌激素可调控ABCG2基因的表达，可能与临床高尿酸血症的风险增加相关。目前，越来越多的研究利用不同方法检测了高尿酸血症患者ABCG2基因Q141K突变。该文概述了ABCG2基因Q141K突变及雌激素调控等因素对高尿酸血症的影响，同时比较了不同ABCG2基因Q141K突变检测方法的优缺点，以期为ABCG2基因的临床应用及Q141K突变检测提供依据。     

食管鳞癌干细胞的研究进展

自Bonnet等[1]于1997年在急性粒细胞白血病患者分离获得白血病干细胞后,人们又相继在多种实体肿瘤(如乳腺癌、肝癌、结肠癌等)中发现了肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs), 肿瘤干细胞学说越来越受到肿瘤学界的密切关注和广泛支持.该学说的核心思想是提出了在肿瘤组织中存在少量干细胞样的肿瘤细胞亚群,该类细胞是肿瘤形成的起始细胞,具有自我更新、多向分化能力、高侵袭转移能力以及抗化疗、抗辐射等特点,与肿瘤发生、发展、转移以及复发等过程有着密切关系[1-2].     

血清癌抗原15.3和组织多肽特异性抗原表达水平与临床价值

癌抗原 (ＣＡ) 15 3是一种肿瘤相关抗原 ,其抗原决定簇位于细胞膜粘液型糖蛋白上[1] ,能被Ｍａ6 95单克隆抗体特异识别。组织多肽特异性抗原 (ＴＰＳ)其Ｍ3抗原决定簇位于细胞角蛋白 18的可溶性片段上。ＣＡ15 3和ＴＰＳ在正常细胞中含量很少 ,但在肿瘤细胞增殖和分裂的不同时期 ,其含量均有所变化。我们对血清ＣＡ15 3与ＴＰＳ表达水平与乳腺癌的相关性进行研究 ,并探讨其临床应用价值。一、材料和方法1 研究对象 :乳腺癌患者 112例 ,按恶性肿瘤国际临床分期分类 ,其中Ⅰ、Ⅱ期 2 2例 ,Ⅲａ期 36例 ,Ⅲｂ期 31例 ,Ⅳ期 2 3例。年龄 32～…     

ABCG2在人多发性骨髓瘤细胞株中的表达及甲基化调控

ABCG2是三磷酸腺苷结合盒(ATP-binding cassette,简称ABC)转运蛋白超家族中G亚家族第2个成员,又被称作乳腺癌耐药蛋白,作为一种跨膜半转运蛋白,介导了对多种化疗药物的外排,引起多药耐药.Bailey-Dell等[1]发现该基因转录起始点上游312 bp区域,具有启动子活性,该区域存在大量的CpG岛,ABCG2表达很可能受启动子甲基化调节.     

大肠癌组织中ABCG2的表达及临床病理意义

目的 通过检测大肠癌组织中ABCG2在蛋白和mRNA水平的表达量,分析该基因及蛋白的表达与大肠癌临床病理的关系.方法 分别采用SYBR Green实时定量RT-PCR技术及免疫组化SP法检测35例大肠癌患者的癌组织及相应癌旁和远端正常组织中ABCG2基因的mRNA及蛋白的表达;评价其基因及蛋白的表达与临床病理参数的关系.结果 大肠癌组织中ABCG2蛋白的阳性表达率显著高于正常组织(P＜0.05);ABCG2 mRNA在癌组织中的表达显著高于癌旁及正常组织(P＜0 05);ABCG2的表达高低与肿瘤直径有关(x2=5.55,P=0.018);肿瘤低分化患者ABCG2 mRNA阳性表达率明显高于肿瘤中-高分化患者;ABCG2的表达与患者性别、年龄、淋巴结转移、Duke分期及组织浸润深度无明显关系.结论 大肠癌ABCG2的表达水平与患者肿瘤发生、发展及分化程度密切相关,检测其表达水平不但可以预测大肠癌患者预后而且对指导制订化疗方案有一定参考价值.     

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2基因单核苷酸多态性与痛风发病的相关性

尿酸代谢异常被看作是高尿酸血症和痛风的主要病因之一,尿酸盐转运蛋白的功能异常是导致尿酸代谢异常的最主要原因,其影响了肾脏对尿酸的重吸收和排泄功能.近年来三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2 (ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)作为最受关注的尿酸盐转运蛋白,得到国外国内学者的较多研究报道.ABCG2定位在细胞膜,表达在近曲小管上皮细胞刷状缘侧,可以转运尿酸.其功能性障碍阻碍了肾脏和肠道对尿酸的排泄,从而引起高尿酸血症并引发痛风.本文就ABCG2基因单核苷酸多态性与痛风发病相关性的研究进展作一综述.     

ABCG2与恶性血液病耐药相关性的研究进展

ABCG2作为一种跨膜半转运蛋白,参与了内源及外源有害物质的外排,对机体正常组织起到了保护作用,但同时也介导了对多种化疗药物的外排,引起多药耐药,使许多恶性肿瘤患者对化学药物治疗不敏感,直接影响到临床预后。本文将对ABCG2基因的单核苷酸多态性（SNP）、ABCG2与干细胞和酪氨酸激酶抑制剂（TKI）之间的关系的一些研究进展做简要介绍,同时还对ABCG2与恶性血液病耐药相关性的临床研究结果做回顾性分析,从中可以看出目前研究中存在的问题及未来的研究方向。     

顺铂作用于人肝癌细胞系HepG2后对肿瘤干细胞标志物的影响

目的研究顺铂作用于人肝癌细胞系HepG2后对肿瘤干细胞标志物的影响。方法培养HepG2人肝癌细胞,以对数生长期的细胞为研究对象,分成对照组和实验组,对照组不予特殊处理,实验组予以顺铂处理并测定细胞生长抑制率、移行愈合率,并测定相关肿瘤标记物P53、caspase-3、caspase-8、CD133、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)等的表达变化。结果细胞生长抑制率:随着药物浓度增加而增强,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。细胞移行愈合率:实验组细胞移行愈合率明显低于对照组(P0.05),9μmol/L顺铂组移行愈合率明显低于6μmol/L顺铂组(P0.05)。相关肿瘤标记物P53、caspase-3、caspase-8随着药物浓度增加而各指标表达增强,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。细胞免疫荧光方法显示随着顺铂浓度的增加,CD133、ABCG2、ICAM-1的表达增强。结论顺铂可能通过上调肿瘤标记物P53、caspase-3、caspase-8的表达,从而抑制人肝癌细胞HepG2的生长,并抑制HepG2细胞的迁移愈合,但会使其耐药性也增加。     

5-氟尿嘧啶对乳腺癌MCF7细胞中干细胞相关基因Oct4、Bmi-1表达的影响

背景：国内外研究证明乳腺癌干细胞可能是起始乳腺癌生长及辅助治疗后复发和远处转移的根源。目的：观察5-氟尿嘧啶对人乳腺癌MCF7细胞Oct4、Bmi-1表达的影响。方法：应用0.1mg/L5-氟尿嘧啶处理MCF7,RT-PCR检测处理前G0及处理后6代细胞G1～G6中Oct4、Bmi-1 mRNA的表达,免疫细胞化学检测处理前G0、G1～G5中Oct4的表达。结果与结论：5-氟尿嘧啶处理后,Oct4、Bmi-1 mRNA表达水平在G3和G5均较处理前明显增高,OCT4蛋白表达呈现出降低-升高-更高-降低-升高的趋势。提示MCF7中可能存在肿瘤干细胞样细胞;5-氟尿嘧啶可能诱导MCF7中肿瘤干细胞样细胞的数量或比例增加。