Runx3基因在肝细胞癌中甲基化状态分析及临床意义

目的通过检测肝细胞癌组织中Runx3基因启动子区域甲基化状态,探讨Runx3基因启动子区域异常甲基化在肝细胞癌发生、发展过程中的临床意义。方法采用DNA甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）（MSP）技术对81例肝细胞癌患者肿瘤组织及其癌旁正常组织Runx3基因启动子区域甲基化状态进行检测。结果在肝细胞癌组织中,Runx3基因启动子区域甲基化率占43．2％（35／81）,而在相对应的癌旁正常组织中,Runx3基因启动子区域仅发现1例异常甲基化现象,其甲基化率占1．2％（1／81）（P〈0．01）;Runx3基因启动子区域甲基化状态与临床病理参数的关系差异均无统计学意义。结论Runx3基因启动子区域甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一,与肝细胞癌发生早期密切相关,可作为肝细胞癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。     

Runx3基因启动子区甲基化与胃癌的关系

目的通过检测胃癌Runx3基因启动子区域甲基化状态，来探讨Runx3基因启动子区域甲基化在胃癌发生和发展过程中的临床意义。方法采用DNA甲基化特异性PCR（MSP）技术对37例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织Runx3基因启动子区域甲基化进行检测。结果Runx3基因在37例胃癌及其癌旁组织中甲基化率分别为40．5％（15／37）和8％（3／37）。结论Runx3基因启动子区甲基化可能是肿瘤特异性的（P＜0．05），可作为胃癌早期诊断的分子标记物。     

Runx3基因甲基化与大肠癌发生和转移的关系

目的 探讨Runx3基因启动子甲基化与大肠癌发生发展过程的关系。方法 采用蛋白印迹技术（Western-Blot）检测30例大肠癌组织及肿瘤周围正常黏膜组织中Runx3mRNA的表达，同时用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Runx3基因启动子甲基化情况。结果 30例大肠癌组织标本中Runx3基因的表达（6409．1042±298．2028）较肿瘤周围正常组织中表达明显下调（34565．3921±1108．2163），差异有统计学意义（P〈0．01）。正常黏膜组织中未发现有Runx3基因启动子的甲基化，30例大肠癌组织中有16例检测到Runx3基因启动子的甲基化，大肠癌组织Runx3基因启动子甲基化率显著增高（P〈0．05）。大肠癌标本中Runx3蛋白的表达与其病理临床特征密切相关，在低分化和有淋巴结转移大肠癌组织标本中Runx3蛋白的表达显著下调（P〈0．05）。结论 Runx3基因启动子甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一，并且与大肠癌的发生发展密切相关。     

Runx3基因启动子甲基化检测对乳腺癌患者早期诊断的临床意义

目的 探讨血浆Runx3基因启动子甲基化检测对诊断早期乳腺癌的临床意义.方法 2009年10月～2010年10月收集经病理确诊的乳腺癌患者60例,采用DNA甲基化特异性PCR方法检测60例乳腺癌患者的癌组织、癌旁正常组织及血浆中Runx3基因启动子异常甲基化情况.GraphPad Prism 4统计软件对乳腺癌组织和血浆中Runx3基因甲基化行x2检验分析.结果 癌旁正常组织中Runx3异常甲基化为6.67％,癌组织中Runx3异常甲基化率为58.33％,血浆中为78.33％,血浆中甲基化改变与癌组织甲基化改变具有显著相关性.Runx3基因甲基化与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小无相关性(x2分别为0.951,0.287,P＞0.05),而与患者临床分期和淋巴结转移密切相关(x2=5.188,P=0.023),其中癌组织中Ⅰ期+Ⅱ期患者甲基化率与Ⅲ期+Ⅳ期患者甲基化率比较差异显著(x2=8.625,P=0.003).结论 血浆Runx3基因启动子甲基化检测对早期诊断乳腺癌有一定诊断参考价值.     

骨肉瘤外周血Runx3基因启动子甲基化检测及临床意义

目的研究骨肉瘤患者外周血Runt相关转录因子3(Runx3)基因启动子甲基化及临床意义。方法选择骨肉瘤患者及健康人作为研究对象,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测两组研究对象外周血Runx3基因启动子甲基化并比较其差异,分析骨肉瘤患者Runx3基因启动子甲基化与临床病理因素的关系。结果骨肉瘤患者外周血Runx3基因启动子甲基化率(57.1%)显著高于健康人(2.0%),差异有统计学意义(P0.05)。在不同性别、年龄、肿瘤部位和病理类型的骨肉瘤患者之间,外周血Runx3基因启动子甲基化率的差异无统计学意义(P0.05),在不同KPS评分、肿瘤最大径、病理性骨折、组织学分级和Enneking分期的骨肉瘤患者之间,差异均有统计学意义(P0.05)。KPS评分低于70分、肿瘤最大径大于或等于10cm、有病理性骨折、组织学分级G3+G4及Enneking分期晚的骨肉瘤患者,其Runx3基因启动子甲基化率显著高于KPS评分大于或等于70分、肿瘤最大径小于10cm、无病理性骨折、组织学分级G1+G2及Enneking分期早的骨肉瘤患者。结论骨肉瘤患者外周血Runx3基因启动子呈高甲基化状态,与KPS评分、肿瘤最大径、病理性骨折、组织学分级和Enneking分期密切相关,可用于评估骨肉瘤患者病情及预后。     

抑癌基因Runx3与肿瘤

Runx3基因是LevanonD等于1994年发现的，最初被命名为急性髓性白血病2基因，以后又被称作多瘤病毒强化因子结合蛋白2基因、核心结合因子3基因，因其在小鼠胚胎发育过程及人类多种恶性肿瘤的发生发展中起重要作用而倍受关注。但是，Runx3基因的抑癌机制尚没有完全研究清楚，本文就Runx3基因的结构、抑癌机制及在肿瘤中研究现状做一综述。     

Runx3和fascin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的研究Runx3与fascin在胃癌中的表达,以及二者与胃癌临床病理之间的关系,探讨它们与胃癌临床预后关系。方法采用免疫组织化学方法对150例胃癌的石蜡标本进行Runx3与fascin蛋白表达的检测,观察不同蛋白的表达对患者预后的情况。结果Runx3在胃癌组织中阴性表达48例,阳性表达102例,阴性表达与TNM分期有关（P〈0．05）;fascin在胃癌组织中阴性表达90例,阳性表达60例,阳性表达与TNM分期有关（P〈0．05）;相同TNM分期,不同Runx3、fascin蛋白表达的患者5年生存率有明显差异（P〈0．05）。结论Runx3及fascin蛋白在胃癌中的异常表达与TNM分期有关,相同TNM分期的胃癌患者组织中Runx3和fascin的异常表达对生存率有影响;术后检测Runx3和fascin有助于预后的判定。     

甲基化特异性PCR法检测胰腺癌组织E-cadherin基因甲基化

目的:探讨胰腺癌组织E-cadherin(E-cad,上皮钙粘附素)5’-CpG岛异常甲基化情况;进一步讨论DNA异常甲基化在临床早期诊断、预后中的应用。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)检测27例胰腺癌组织和9例良性胰腺组织E-cad基因甲基化情况。结果:①在9例胰腺良性肿瘤及正常胰腺组织中,E-cad基因非甲基化PCR扩增均为阳性,未见甲基化PCR扩增。②在27例胰腺癌组织E-cad基因甲基化PCR扩增阳性9例(33.33%,9/27),其中完全甲基化6例,部分甲基化3例;而非甲基化PCR扩增阳性为18例(66.67%,18/27)。③E-cad基因异常甲基化与性别、年龄大小、肿瘤大小之间均无显著性差异(P>0.05),但与肿瘤的组织学分级相关。结论:在胰腺癌组织中E-cad基因异常甲基化是胰腺癌组织区别于其它胰腺良性病变的生物学标志之一。     

人胃癌组织中Runx3表达水平与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨胃癌组织中Runx3表达水平与淋巴结转移的关系。方法选取2018年1月至2019年1月在九江市第三人民医院经胃镜、病理活检确诊为胃癌并行手术治疗的患者30例为研究对象,根据患者淋巴结活检是否存在第2站及以上淋巴结转移分为未转移组(13例)、转移A组(7例,发生第2站淋巴结转移)和转移B组(10例,发生第2站以上淋巴结转移);采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例胃癌患者胃癌组织中Runx3的表达水平,分析Runx3表达水平与淋巴结转移的相关性。结果未转移组、转移A组、转移B组患者胃癌组织中Runx3表达水平分别为0.787±0.227、0.583±0.135、0.362±0.040,3组比较,差异有统计学意义(F=7.425,P<0.05)。相关性分析结果显示,Runx3表达水平与胃癌淋巴结转移距离呈明显负相关(r=-0.993,P<0.05)。结论Runx3可作为判断胃癌患者是否存在淋巴结转移的检测指标,且其表达水平随着转移距离的增加而下降。     

RUNX3基因甲基化和去甲基化与肿瘤的研究进展

人RUNT相关转录因子3(RUNX3)属于RUNT家族成员之一,是目前热门研究的一个抑癌基因。阐述RUNX3基因的结构特点,综述RUNX3基因的甲基化和去甲基化情况与肿瘤发生发展的关系,得出通过甲基化抑制剂可以诱导抑癌基因的重新表达,从而达到治疗肿瘤的目的。     

胃癌细胞系中甲基化与叶酸干预对多种基因的调控研究

目的：胃癌的发生从分子发病水平上说是一个涉及多种癌基因、抑癌基因、凋亡相关基因等的异常和积累的多步骤的过程。DNA甲基化在基因表达中起调控作用已成为共识[1]。各种肿瘤的发生过程中有癌基因的低甲基化和抑癌基因的高甲基化，因为甲基化程度与基因表达呈负相关，所以引起抑癌基因的表达减弱或缺失及癌基因的表达增强。5-氮脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine, 5-aza-dC）通过抑制甲基化酶使基因去甲基化，通过5-aza-dC干预能够观察甲基化对基因表达的影响。胃癌发生中也有抑癌基因的高甲基化及癌基因的低甲基化现象，但是迄今为止未见同时研究同一细胞系的多种基因的甲基化对基因表达和细胞周期的影响。本研究对此作了有益的探讨，以期为以后的胃肠道肿瘤的治疗提供分子水平的依据。本文主要探讨不同分化的胃癌细胞系在不同浓度的5-氮脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine, 5-aza-dC）和甲基化食物供体叶酸的化学干预下癌基因、抑癌基因和与凋亡有关的基因与甲基化调控的关系。方法： 培养高分化、中分化和未分化的胃癌细胞MKN－45、MKN－28、HGC－27，分别以不同浓度的5-aza-dC干预细胞，以同一浓度的叶酸干预细胞，部分细胞48小时后再以不同浓度的5-aza-dC干预。提取细胞的RNA，用RT-PCR的方法检测p16INK4A、p21WAF1、p73、c-myc、c-Ha-ras等多种基因的表达情况。结果：在不同分化的三种胃癌细胞中基因表达受甲基化调控的程度也不同。抑癌基因中p16INK4A在干预前MKN－45和HGC－27细胞表达，而在用5-aza-dC干预后表达增强，且不同的胃癌细胞株表达增强与5-aza-dC干预的时间与浓度不同有关，p21WAF1、p73没有明显变化；癌基因中的c-myc、c-Ha-ras变化不明显；所有胃癌细胞系中叶酸干预及叶酸联合5-aza-dC干预前后所以基因的mRNA表达没有明显变化。结论：不同分化人胃癌细胞中，甲基化修饰对癌基因、抑癌基因、与凋亡有关的基因的调控差异明显。其中的机制研究是否与个体差异有关。但是在肿瘤细胞中的叶酸干预后对甲基化的调控不敏感，可能是因为肿瘤细胞对叶酸的甲基化供体已经不起作用，与癌前病变补充叶酸不同。     

The promise of methylation on beads for cancer detection and treatment

Despite numerous technical hurdles, the realization of true personalized medicine is becoming a progressive reality for the future of patient care. With the development of new techniques and tools to measure the genetic signature of tumors, biomarkers are increasingly being used to detect occult tumors, determine the choice of treatment and predict outcomes. Methylation of CpG islands at the promoter region of genes is a particularly exciting biomarker as it is cancer-specific. Older methods to detect methylation were cumbersome, operator-dependent and required large amounts of DNA. However, a newer technique called methylation on beads has resulted in a more uniform, streamlined and efficient assay. Furthermore, methylation on beads permits the extraction and processing of miniscule amounts of methylated tumor DNA in the peripheral blood. Such a technique may aid in the clinical detection and treatment of cancers in the future.     

Enforced expression of Runx3 improved CAR-T cell potency in solid tumor via enhancing resistance to activation-induced cell death

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胃癌前病变中H.pylori感染下调RUNX 3的表达

目的:探讨幽门螺杆菌(H.priori)感染与RUNX3表达在胃癌前病变发生中的作用.方法:收集2005年～2008年间癌前病变43例,十二指肠溃疡41例和功能性消化不良25例的临床资料.所有研究对象均检测血清CEA、CA199和胃泌素水平,尿素酶检测胃组织中H.pylori.RT-PCR检测胃粘膜Runx3基因的表达.结果:癌前病变和十二指肠溃疡和功能性消化不良3组的CEA、CA199无明显差异.H-pylori的阳性率三组之间也相似(P＞0.05).而癌前病变者血清胃泌素低于其他2组.H.pylori阳性胃癌前病变者RUNX3基因表达明显低于H.pylori的阴性者(P=0.03),但在其他两组无此差异.RUNX3基因的表达与血清胃泌素水平存在正相关(R=0.81,P=0.012).结论:H.pylori通过下调RUNX3基因参与了胃癌前病变/胃癌的发生.     

胰腺癌EGFR和HER3的蛋白表达与基因状态分析

目的 探索胰腺癌EGFR和HER3的基因状态、蛋白表达与胰腺癌临床病理因素之间的关系,分析它们之间的相关性,探讨EGFR和HER3在胰腺癌中的作用.方法 分别采用荧光原位杂交(FISH)和免疫组织化学(IHC)方法,检测55例中国人胰腺癌及癌旁组织EGFR和HER3基因状态和蛋白表达,结合临床病理资料进行统计学分析.结...     

APOBEC3B expression in drug resistant MCF-7 breast cancer cell lines

APOBEC3B belongs to a protein family of cytidine deaminases that can insert mutations in DNA and RNA as a result of their ability to deaminate cytidine to uridine. It has been shown that APOBEC3B-catalysed deamination provides a chronic source of DNA damage in breast cancers. We investigated APOBEC3B expression in four drug resistant breast cancer cell lines (Doxorubicin, Etoposide, Paclitaxel and Docetaxel resistant MCF-7 cell lines) using a novel RNA in situ hybridization technology (RNAscope) and compared expression levels with drug sensitive MCF-7 cell line. After RNAscope staining, slides were scanned and saved as digital images using Aperio scanner and software. Quantitative scoring utilizing the number of punctate dots present within each cell boundary was performed for the parameters including positive cell percentage and signal intensity per positive cell. In Doxorubicin and Etoposide resistant MCF-7 cell lines, APOBEC3B expression was approximately five-fold increased (23% and 24% respectively) with higher signal intensity (1.92 and 1.44 signal/cell, respectively) compared to drug sensitive MCF-7 cell line (5%, 1.00 signal/cell) with statistical significance. The increase of APOBEC3B expression in Docataxel resitant and Paclitaxel resistant MCF-7 cell lines was not very high. In conclusion, APOBEC3B expression was increased in some population of tumor cells of drug resistant cell lines. At least for some drugs, APOBEC3B expression may be related to drug resistance, subjecting to some tumor cells to frequent mutation.