胆红素氧化酶消除血清肌酐测定中胆红素的干扰

为消除肌酐测定中血清胆红素干扰，采用由卫生部临床检验中心提供的高纯度胆红素氧化酶（ＢＯＸ）和苦味酸试剂，设计了在ＣＯＢＡＳＦＡＲＡ－Ⅱ型全自动生化分析上检测肌酐的新方法，仅需样品８μｌ，ＢＯＸ８μｌ，苦味酸试剂８０μｌ，在１９０秒钟就可完成反应，所得结果表明，用该法对７５份总胆红素在０～６１６μｍｏｌ／Ｌ的标本进行检测，可以有效的消除胆红素对肌酐测定时的干扰。而且结果准确可靠，回收试验，黄疸血清标本用原法回收率仅为４９％～７１％，而用本法回收率可达９４％～１０５％。本法的重复性也较好，批内变异系数（ＣＶ）为２．８％～１２．７％，批间ＣＶ为１４．０％。本法操作简单，标本也不需要作人工预处理，是肌酐测定消除胆红素干扰比较理想的方法。     

毛细管电泳测定尿中尿酸浓度

为了建立一种直接测定尿中尿酸浓度的毛细管电泳方法，用ｐＨ７．２，１２０ｍｍｏｌ／Ｌ ＳＤＳ，３０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液作为电泳缓冲液，利用非涂渍石英毛细管２１ｃｍ×５０μｍ（ｉｄ），用外标法定量，检测波长２３５ｎｍ，电泳运行６分钟，该法线性范围３０００～４７μｍｏｌ／Ｌ，最低检测限为２０μｍｏｌ／Ｌ。本法日内和日间变异系数分别小于３．７２％、４．４８％。其平均回收率为９９．６％。肌酐和尿素及常用     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批向不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５     

酶循环法测定血清总胆汁酸

采用氧化型β－硫烟酰胺腺苷二核苷酸（Ｔｈｉｏ－ＮＡＤ）底物酶循环法测定血清总胆汁酸（ＴＢＡ）,对其方法学进行初步研究。该法灵敏度：试剂空白△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．００４／ｍｉｎ;５０μｍｏｌ／Ｌ△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．０５０／ｍｉｎ;平均回收率９９．２％;线性０￣１５０μｍｏｌ／Ｌ;精密度：批内ＣＶ〈１．０％;批间ＣＶ〈４．５％;该法（Ｙ）和偶联黄递酶比色法（Ｘ）比较：Ｙ＝０．８８Ｘ－１．     

人红细胞血影胰岛素受体放射配体测定法

本法采用肝素抗凝静脉血，分离红细胞。通过低渗Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液溶解红细胞，制成红细胞血影悬液。在此悬液中加入不同浓度的标准胰岛素５０μｌ和Ａ＿（１４）－￣（１２５）Ｉ－胰岛素５０μｌ．４℃孵育２４小时。胰岛素与受体最大特异性结合率（Ｂ／Ｔ）为（７．００±１．８９）％；每个红细胞血影胰岛素受体的高亲和力结合位点数（Ｒ＿１）为３０±１６个，亲和常数（Ｋ＿１）为（３．１２±２．４３）×１０￣（１０）Ｌ／ｍｏｌ；低亲和力结合位点数（Ｒ＿２）为５１２０±３６７２个，亲和常数（Ｋ＿２）为（９．１４±７．３０）×１０￣７Ｌ／ｍｏｌ。平均批内变异系数为８．０５％。     

连续监测法测定血清α—L—岩藻糖苷酶

建立了血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶单一试剂连续监测法。本法与改良Ｔｒｏｏｓｔ终点法比较，２０份血清的测定值经配对ｔ检验，Ｐ＞０．０５，差异无统计意义；同一份混合血清用本法测定，批内ＣＶ＝５．０％，批间ＣＶ＝７．４％；一份３２Ｕ／Ｌ的高值血清经稀释后测定，仍呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９）；胆红素１１５μｍｏｌ／Ｌ、血红蛋白３２ｇ／Ｌ及三酸甘油３００μｍｏｌ／Ｌ对测定值无明显干扰。     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批内不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０．９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５６μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９５）。     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液相色谱测定孕妇尿内总雌三醇的方法，尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ３，蒸于乙醚，残留物用流动相重组，标本成分用Ｃ８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１．２％－１．５％批间ＣＶ分别为２．３％和４．０％本法在４．３３－１３８．７１μｍｏｌ／Ｌ（１．２５－４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．８μｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

溶出伏安法直接测定尿铅研究

本文的方法不需对尿样消化，可直接用溶出伏安法测定尿铅，免去尿样消化处理的步骤。本法检出下限０．０４８μｍｏｌ／Ｌ，变异系数３．８－５．１％，回收率９４．６－１０６．６％，铅含量在０．０４８－０．１９２μｍｏｌ／Ｌ时，与溶出电流峰有良好的线性关系。本法与尿样消化后测定比较，无显著性差异（Ｐ＞０．０５），达到快速，简单，准确，实用的目的。     

苦味酸动力学法测定血清（浆）中的肌酐

本文采用动力学方法，在７２１—型分光光度计上检测血清（浆）中的肌酐。实验结果表明：在０．６ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ和０．０５ｍｏｌ／Ｌ苦味酸中，肌酐在１８０μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，吸光度与浓度呈线性关系，平均回收率９７％，ＣＶ＜４．０％；在动力学方法中，２０ｇ／Ｌ蛋白质、５．０ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖和１００μｍｏｌ／Ｌ丙酮对肌酐的测定基本无干扰。本方法与Ｂｅｃｋｍａｎ７００型自动生化分析仪作比较实验，相对误差＜２０％。本法具有操作迅速，仪器设备简单，无需沉淀蛋白，结果准确等优点，可以作为肌酐测定的常规方法使用。     

偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

高压氧治疗重型闭合性颅脑损伤对血清脂质过氧化物和超氧化物歧化酶的影响

目的观察重型闭合性颅脑损伤高压氧（ＨＢＯ）治疗前中后血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶－１（ＳＯＤ－１）的浓度变化。方法５０名患者分为高压氧＋常规治疗组（ＨＢＯ组）３２例和单纯常规治疗组（对照组）１８例,另有３０名健康志愿者作为正常组：于治疗前中后用硫代巴比妥酸比色法检测ＭＤＡ、用放射免疫法检测ＳＯＤ－１。结果ＨＢＯ组和对照组在治疗前的ＭＤＡ（５．２７±１．５９）μｍｏｌ／Ｌ,（５．７１±１．３４）μｍｏｌ／Ｌ和ＳＯＤ－１（２７１．３±１０２．９）μｇ／Ｌ,（２５６．３±１１２．４）μｇ／Ｌ,差异均无显著性（Ｐ＞０．０５）,但与正常组比较差异均有非常显著性（Ｐ＜０．０１）;ＭＤＡ和ＳＯＤ－１呈负相关;治疗后ＭＤＡ升高和ＳＯＤ－１明显降低者疗效和预后差。ＨＢＯ组ＭＤＡ降低,为（４．１１±０．３５）μｍｏｌ／Ｌ;ＳＯＤ－１升高,为（３８０．５±１１５．３）μｇ／Ｌ及疗效均较对照组显著。结论ＭＤＡ和ＳＯＤ－１与损伤严重程度有关,可用于判断ＨＢＯ的疗效和预后,并有可能作为调整ＨＢＯ治疗方案的依据。     

硝酸盐还原酶测定血清和尿中硝酸盐浓度

目的 建立一氧化氮间接测定方法，方法 硝酸盐还原酶还原硝酸盐（ＮＯ＾－３）至亚硝酸盐（ＮＯ＾－３）过程中所消耗ＮＡＤＰＨ量与ＮＯ＾－３浓度呈正比，用３４０ｎｍ处ＮＡＤＰＨ吸光度下降值推荐ＮＯ＾－３的存在量。结果 血清ＮＯ＾－３浓度为５７．４９±３．５７μｍｏｌ／Ｌ时，批内变异系数（ＣＶ）＝６．２１％，批间ＣＶ＝８．７５％，５０μｍｏｌ／Ｌ和１００μｍｏｌ／ＬＫＮＯ３标准其回收率分别为９７．０２％和     

血清冲胆汁酸酶法测定及其临床应用

为了建立酶法测定血清叫胆汁酸的方法并评价其临床应用价值，对试剂配方和测定条件进行优化实验，并作临床观察。结果，本法灵敏度：５０μｍｏｌ／Ｌ Ａ５００ｎｍ为０．１，线性为０－２００μｍｏｌ／Ｌ精密度；总ＣＶ〈６．０％，批内ＣＶ〈３．０％。本法和日本一化试剂的比较：Ｙ＝０．９７３Ｘ＋２．７２，ｒ＝０．９９６３。     

硝酸盐还原酶测定血清和尿中硝酸盐浓度

目的建立一氧化氮间接测定方法。方法硝酸盐还原酶还原硝酸盐（ＮＯ－３）至亚硝酸盐（ＮＯ－２）过程中所消耗ＮＡＤＰＨ量与ＮＯ－３浓度呈正比，用３４０ｎｍ处ＮＡＤＰＨ吸光度下降值推算ＮＯ－３的存在量。结果血清ＮＯ－３浓度为５７．４９±３．５７μｍｏｌ／Ｌ时，批内变异系数（ＣＶ）＝６．２１％，批间ＣＶ＝８．７５％。５０μｍｏｌ／Ｌ和１００μｍｏｌ／ＬＫＮＯ３标准其回收率分别为９７．０２％和８７．１４％。１８例正常人血清和１５例正常人不定时尿中ＮＯ－３浓度分别为３６．６４±１５．９１和６３３．３５±２６４．７５μｍｏｌ／Ｌ。结论用该方法测定血清及尿中ＮＯ－３浓度简便快速，特异性高，干扰因素少，不需要进行去蛋白等预处理。     

血清结合胆红素的酶法测定

目的 建立用胆红素氧化酶（ＢＯＤ）作为催化剂，选择性地测定血清结合胆红素（ＣＢ）的新方法。方法 测定条件为：０．１ｍｏｌ／Ｌ甘氨酸缓冲液、ｐＨ１０．０，ＢＯＤ活性０．５～０．８Ｕ／反应管，反应时间２分钟。结果 线性至少可达到２２０μｍｏｌ／Ｌ；精密度为批内ＣＶ１．７１～３．９８％、批间ＣＶ８．０～９．７２％；正常参考值范围为０～３．１４μｍｏｌ／Ｌ；与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的Ｃ     

层粘连蛋白的ELISA检测

应用本室的制备的两株抗人胎盘层粘连蛋白（ＬＮ）单克隆抗体３Ａ１５和１Ｂ５及ＬＮ标准，建立了测定血清Ｌ怕双单放夹心ＥＬＩＳＡ法，本法稳定，检测下限为１０μｇ／Ｌ，在１０－５００μｇ／Ｌ之间呈线性关系，两份样本批内平均ＣＶ为６．８％和９．２％，批间ＣＶ为５．６％和６．１％，回收率平均为８８％。     

化学抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶LD1和LD2

本文应用１，６－已二醇为ＬＤ分子中Ｍ亚基的专一抑制剂，用自动生化分析仪直接测定血清中ＬＤ１和活性，加入１，６－已二醇的最终浓度分别为０．７５ｍｏｌ／Ｌ和０．５５ｍｏｌ／Ｌ。ＬＤ同工酶电泳图谱表明，此时血清中ＬＤ２－ＬＤ５和ＬＤ３－ＬＤ５的活性全部被抑制。用本法同常规电沪法平行检测７５例血清ＬＤ１和ＬＤ１＋ＬＤ２的平均回收率分别为９８．０％和９７．５％；线性范围至少可分别达到８４Ｕ／Ｌ和２０５Ｕ／Ｌ     

2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二乙氨基)苯酚显色法测定尿钴

为了建立测定尿液中钴含量的化学方法，依据钴与２－（５－溴－２－吡啶偶氮）－５－（二乙氨基）苯酚及ＴｒｉｔｏｎＸ－１００在ｐＨ５．２缓冲液中生成稳定的红色配合物，经１２ｍｏｌ／Ｌ硫酸酸事，用分光光度计进行测定，本法具有较高的灵敏度（ε＝８．２６×１０＾４Ｌ／（ｍｏｌ·ｃｍ）和较好的选择性，最低检出浓度为３．８μｇ／Ｌ变异系数为４．６％，对于２０ｍｌ尿样，加入不同量钴０．２～０．４μｇ，回收率９３．０     

除蛋白速率法测定高胆红素血浆中肌酐

苦味酸速率法测定肌酐时，高胆红素血浆使结果明显偏低，现用的消除干扰的方法只能减弱干抗。为此，我们建立了一种既能有效地消除干扰又经济方便的方法。即取100g／L磺基水杨酸0．1ml，加高胆红素血浆0．5ml，混匀，离心沉淀，取上清液用速率法测定肌酐，有效地去除负干扰．批内CV=3．6％、n=20，批间CV=5．9％，n=15；平均回收率为98．2％。本法（105±61．1μmol／L），与除蛋白手工法（106．6±62．1μmol／L）呈高度相关（r=0．970），且两法差异无显著意义（P＞0．05）．而速率法仅77．6±47．6μmol／L。本法尤其可保证黄疸病人内生肌酐清除率的准确性。