癌基因Ras在脑胶质瘤中的表达及意义

大鼠肉瘤癌基因 （ Rat sarcoma, RAS）包含Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因（V-Ki-ras2 Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog, KRAS） ,naivety鼠肉瘤病毒癌基因（ V-ha-ras harvey rat sarcoma viral oncogene homolog, HRAS）和神经母细胞瘤癌基因（ neuroblastoma RAS viral oncogene homolog, NRAS）,均为原癌基因家族成员,三种基因编码蛋白具有鸟苷三磷酸酶活性,统称为p21蛋白。     

Aurora-A基因在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的通过检测人脑胶质瘤患者肿瘤组织中Aurora-A基因的表达水平,探讨Aurora-A基因与胶质瘤的关系。方法采用荧光实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测了42例人脑胶质瘤组织和20例正常脑组织中Auro-ra-AmRNA表达水平,分析其表达水平与胶质瘤的关系。结果Aurora-AmRNA在胶质瘤组、Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组、Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组及对照组中的表达量分别为1.414±0.157%、0.380±0.067%、2.050±0.144%、0.040±0.004%。统计显示Aurora-AmRNA表达水平在胶质瘤组明显高于对照组(P0.05),且在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组及Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组中均明显高于对照组(P0.05),同时Aurora-AmRNA表达水平在Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组中显著高于Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组(P0.05)。结论Aurora-A基因在人脑胶质瘤组织中有高表达,说明Aurora-A基因在胶质瘤的发生、发展过程中起重要作用;Aurora-A基因在Ⅲ-Ⅳ级恶性程度高的胶质瘤组织中有更高表达,说明Aurora-A基因可能与胶质瘤的恶性程度存在密切关系。     

IASPP在胶质瘤组织中的表达及其意义

目的通过检测人脑胶质瘤患者肿瘤组织中p53凋亡刺激蛋白抑制因子（inhibitorymemberoftheASPPfamilY）的表达水平,探讨其在肿瘤的发生、发展及预后中的作用。方法采用RT—PCR法检测p53凋亡刺激蛋白抑制因子（IASPP）mRNA在45例脑胶质瘤组织和13例正常脑组织中的表达水平。结果IASPP在胶质瘤Ⅱ～Ⅳ级中的表达均明显高于正常脑组织,而且在低分化组（Ⅲ～Ⅳ级）胶质瘤中的表达量显著高于高分化组（I～Ⅱ级）。结论IASPP在胶质瘤组织中高表达,而且表达水平和恶性程度有密切联系。IASPP的检测可作为胶质瘤恶性程度判断的参考,为从基因水平上探讨胶质瘤的生物学行为、预后及治疗提供新的思路。     

内皮抑素和血管内皮生长因子在脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨内皮抑素(ES)和血管内皮生长因子(VEGF)在人脑胶质瘤中的表达和意义。方法采用免疫组织化学方法,对45例脑胶质瘤和5例正常脑组织标本中ES和VEGF的表达进行测定。结果Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤中ES和VEGF表达水平明显高于Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤和正常脑组织,差异有显著性意义(P<0.01);Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤中VEGF表达水平显著高于正常脑组织(P<0.05);胶质瘤中ES与VEGF的比值和胶质瘤的分级呈负相关。结论ES和VEGF的协同作用可能在人脑胶质瘤细胞侵袭性生长及恶性发展中起重要作用,且有可能与胶质瘤的恶性程度及预后有关。     

SYBR Green实时定量PCR检测人原发脑胶质瘤中REV3和REV7基因的表达

目的 运用实时定量PCR检测跨损伤修复基因REV3和REV7在人脑原发脑胶质瘤组织中的表达水平,探讨其和肿瘤级别之间的关系.方法 采用SYBR Green实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测跨损伤修复基因REV3和REV7的mRNA在85例原发胶质瘤(Ⅱ级20例、Ⅲ级20例和Ⅳ级45例)和14例正常脑组织中的表达水平,统计学分析表达水平和肿瘤级别之间的关系.结果 与正常组织相比,REV3和REV7在各病理级别胶质瘤中均表达上调(P＜0.05);并且REV3在Ⅳ级胶质瘤中的表达比在Ⅱ级和Ⅲ级中都要高(P＜0.05).秩相关分析表明:REV3的表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性(r=0.454,P＜0.001).结论 REV3和REV7在胶质瘤组织中均高表达,而且REV3表达水平和恶性程度有密切联系.     

结缔组织生长因子及其胶原在硬皮病组织中的表达

背景：近年来，大量文献报道结缔组织生长因子作为转化生长因子β的下游效应因子，是最重要的致纤维化生长因子，在多种纤维化疾病中高表达。 目的：观察结缔组织生长因子在硬皮病组织中的表达情况及与其上、下游效应基因表达的关系，探讨结缔组织生长因子在硬皮病组织中的促纤维化机制。 设计、时间及地点：对照观察实验，于2008-05/11在解放军广州军区广州总医院医学实验科完成。 材料：组织标本均来源于解放军广州军区广州总医院整形外科患者，正常皮肤来自整形手术中切除的多余皮肤。 方法：收集硬皮病皮肤组织、增生性瘢痕组织及正常皮肤组织标本，免疫组化检测结缔组织生长因子的表达，反转录-聚合酶链式反应方法检测结缔组织生长因子、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原mRNA表达，Western blotting检测结缔组织生长因子蛋白的表达。 主要观察指标：①结缔组织生长因子蛋白在硬皮病皮肤组织中的表达和定位情况。②结缔组织生长因子、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的相对表达量。③比较增生性瘢痕、硬皮病和正常皮肤组织中结缔组织生长因子蛋白表达量的情况。 结果：免疫组织化学染色发现，结缔组织生长因子在基底细胞和角质形成细胞中有强阳性表达，在真皮成纤维细胞中亦有阳性表达。硬皮病皮肤组织及增生性瘢痕组织中结缔组织生长因子、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA过表达，而正常皮肤组织无或仅有极弱表达。Western blotting结果显示硬皮病皮肤组织有明显的结缔组织生长因子蛋白表达带。 结论：在硬皮病纤维化过程中，结缔组织生长因子可能是重要的调控因子之一，结缔组织生长因子可能与转化生长因子β1协同作用促进细胞外基质合成。     

脑胶质瘤石蜡包埋组织中微小RNA-184表达与临床病理特征的关系

目的探究脑胶质瘤石蜡包埋组织中微小RNA-184表达与临床病理特征的关系,观察其对脑胶质瘤患者预后中的研究价值。方法选取2007-05—2012-03在河北省人民医院就诊的76例胶质瘤患者和24例脑组织正常患者,对其采用实时定量PCR和微阵列芯片法(microarray chip)检测微小RNA-184表达,同时对胶质瘤患者的无病生存期及总生存期情况采用乘法极限估计法(Kaplan-Meier)进行分析。结果胶质瘤患者石蜡包埋组织中微小RNA-184表达下降,采用实时定量PCR对其进一步验证。KPS评分、WHO分级、生存时间及复发时间与微小RNA-184的低表达显著相关。乘法极限估计法分析结果显示,微小RNA-184高表达患者的无病生存期和总生存期与微小RNA-184低表达患者比较,差异具有统计学意义(P0.05)。多因素分析结果表明,微小RNA-184的表达差异是预测无病生存期和总生存期的独立危险因素。结论胶质瘤患者预后和微小RNA-184的表达密切相关,在预测胶质瘤患者预后情况中微小RNA-184可作为独立的标志物。     

VEGF及CTGF的表达与脑胶质瘤分级的相关性研究

目的通过检测脑胶质瘤患者肿瘤组织中血管内皮生长因子和结缔组织生长因子的表达水平,探讨其和肿瘤级别的关系及作用机制。方法应用免疫组化SP法检测49例胶质瘤手术标本中的VEGF和CTGF的表达水平,统计分析表达水平和肿瘤级别之间的关系。结果VEGF和CTGF在胶质瘤高级别组（Ⅲ-Ⅳ级）中的表达均明显高于低级别组（Ⅰ-Ⅱ级）,说明随着肿瘤级别的升高VEGF和CTGF表达也增强。结论VEGF和CTGF在胶质瘤组织中高表达,而且表达水平和恶性程度有密切联系。VEGF和CTGF的检测可作为胶质瘤恶性程度判断的参考,为从基因水平上探讨胶质瘤的生物学行为、预后及治疗提供新的思路。     

NDRG1基因在胶质瘤中的表达及意义

目的 分析NDRG1基因在人脑胶质瘤组织中的表达情况. 方法 收集北华大学附属医院和第四军医大学西京医院神经外科自2006年2月至2007年6月手术治疗的83例胶质瘤患者的瘤组织(Ⅰ级19例、Ⅱ级22例、Ⅲ级25例、Ⅳ级17例)及12例正常脑组织,应用实时荧光定量PCR和蛋白印迹(Western blot)检测脑组织中NDRG1 mRNA和NDRG1蛋白的表达水平.结果胶质瘤组织中NDRG1 mRNA表达量和NDRG1蛋白表达量均明显低于正常脑组织,且PCR结果显示除Ⅱ、Ⅲ级比较无明显变化外,分级从Ⅰ级到Ⅳ级逐渐上升的过程中,NDRG1的表达逐渐下降,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 NDRG1在胶质瘤组织中呈低表达,而且其表达高低与胶质瘤的分级有关,提示其对胶质瘤的发生或发展有重要作用.     

结缔组织生长因子表达水平与垂体腺瘤侵袭性之间关系

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在垂体腺瘤中表达水平与垂体腺瘤侵袭性之间的关系,为侵袭性垂体腺瘤的诊断和生物学治疗提供理论依据。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)和蛋白免疫印记杂交(Westernblot)方法检测16例非侵袭垂体腺瘤及52例侵袭性垂体腺瘤组织中CTGF的表达水平。结果 52例侵袭性垂体腺瘤和16例非侵袭性垂体腺瘤均可见CTGF的表达。在mRNA和蛋白水平上,侵袭性垂体腺瘤较非侵袭性垂体腺瘤CTGF表达高,且CTGF的表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CTGF在侵袭性垂体腺瘤中表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤,且与肿瘤的大小相关。     

脊椎动物中枢神经系统CTGF免疫反应阳性细胞的比较发育

采用免疫组织化学方法研究了鲢、蛙、蛇、鸡、牛、犬和大鼠中枢神经系统（ＣＮＳ）结缔组织生长因子（ＣＴＧＦ）免疫反应阳性细胞的分布和发育规律。低等脊椎动物链、蛙和蛇ＣＮＳ仅有少量ＣＴＧＦ免疫反应阳性神经元,分布于脊髓灰质腹侧角、延髓的一些核团、丘脑前核、下丘脑背侧核、下丘脑腹侧核。鸡ＣＮＳ的ＣＴＧＦ免疫反应阳性神经元除广泛分布于脊髓和脑干外,小脑、间脑和大脑纹状体的多数脑区阳性神经元亦较多。哺乳动物牛     

不同冷冻方法对人卵巢组织血管内皮生长因子表达及血管生成的影响

背景：人卵巢组织冷冻已成为一种保存生育能力的手段,卵巢组织移植后必须经过血管重建过程才能恢复血供,冷冻保存和复苏技术是影响移植后卵巢组织血管重建的关键。目的：比较新型玻璃化冷冻和慢速冷冻后人卵巢组织血管内皮生长因子表达情况及微血管密度,探讨不同冷冻方法对人卵巢组织血管重建的影响。方法：8份卵巢组织标本取自子宫内膜癌患者手术切除的正常卵巢组织,将每份卵巢皮质切成1.5 mm×1.5 mm×1.0 mm大小的组织块共12块后,随机数字表法分为3组：对照组(新鲜组)、新型玻璃化冷冻组和慢速冷冻组。将新型玻璃化冷冻组卵巢组织块依次在含体积分数7.5%乙二醇+体积分数7.5%二甲基亚砜+体积分数20%胎牛血清的TCM-199培养液和含体积分数15%乙二醇+体积分数15%二甲基亚砜+0.5 mol/L蔗糖的TCM-199培养液中平衡脱水,然后直接浸入液氮并装入冷冻管保存,解冻时按浓度梯度1.0,0.5,0.25 mol/L蔗糖和含体积分数20%牛血清的TCM-199培养液依次洗脱冷冻保护剂。将慢速冷冻组人卵巢组织块放入盛有1 mL冷冻液(含 1.5 mol/L二甲基亚砜+体积分数20%牛血清+0.1mol/L蔗糖的TCM-199培养液)的1.8 mL冷冻管内平衡,然后放入程序冷冻仪中按设定程序进行冷冻。解冻时按浓度梯度1.0 mol/L 二甲基亚砜+0.1 mol/L蔗糖、0.5 mol/L二甲基亚砜+0.1 mol/L蔗糖、0.25 mol/L二甲基亚砜+0.1 mol/L蔗糖和0.1 mol/L蔗糖依次洗脱冷冻保护剂。冻融组及对照组均进行体外培养。免疫组织化学观察培养0,2,4,6 d各组人卵巢组织血管内皮生长因子和CD34表达情况,并进行微血管计数。结果与结论：3组人卵巢组织培养前后间质细胞中均见血管内皮生长因子成斑片状弱表达,培养2 d 血管内皮生长因子表达均增加并达到峰值,培养4 d均开始减弱,6 d时进一步减弱;与慢速冷冻组相比,新型玻璃化冷冻组血管内皮生长因子表达更接近对照组。3组人卵巢组织培养2 d 微血管密度均增加并达到峰值,对照组和新型玻璃化冷冻组明显高于慢速冷冻组(P < 0.05);慢速冷冻组培养4 d时微血管密度较培养2 d时显著下降(P < 0.05);3组培养6 d时微血管密度较培养2 d时显著下降(P < 0.05)。与慢速冷冻法相比,新型玻璃化冷冻法能更好地保存人卵巢组织间质细胞和细胞外基质,对卵巢组织血管内皮生长因子表达及微血管生成的影响更少。     

香烟提取物影响大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子的表达*

背景：血管平滑肌细胞增殖是心血管系统组织变化的基础。 目的：观察不同浓度香烟提取物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响。 方法：取第3代大鼠主动脉平滑肌细胞,分别用体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物进行干预。 结果与结论：实时定量RT-PCR结果显示,体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物作用12 h均可促进大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,以体积分数5%香烟提取物的作用最明显,且其刺激大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达在24 h内呈时间依赖性。提示香烟提取物可上调大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,导致大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖。     

Increased expression of connective tissue growth factor in amyotrophic lateral sclerosis human spinal cord

Connective tissue growth factor (CTGF) is a secreted protein involved in a variety of cellular events such as survival, proliferation, and extracellular matrix production. Recent studies suggest a role for this protein also in the repair processes of the central nervous system. The distribution and significance of CTGF in human brain is, however, poorly understood, particularly under pathological conditions. In the present study the expression of CTGF protein was investigated in the spinal cord of control and both sporadic and familial amyotrophic lateral sclerosis (sALS and fALS) patients. Western blot analysis showed a consistent increase in CTGF expression in six sALS patients compared with controls. Immunoreactivity signal for CTGF was equally present in blood vessels of control and ALS spinal cord, but was dramatically increased in reactive astrocytes of the ventral horn and white matter in both sALS and fALS. Increased expression was also observed in the cytoplasm of motor neurons of sALS and fALS patients with long duration of the disease. Our data indicate a role for CTGF in the complex reactive process that is associated with the progression of ALS spinal cord damage. The up-regulation in reactive astrocytes supports a role for CTGF in the molecular mechanisms underlying astrogliosis. However, the altered CTGF expression observed in neurons might represent an additional mechanism involved in motor neuron dysfunction and changes in glial-neuronal communication in the course of the neurodegenerative process.The first two authors contributed equally to the present work.     

人脑胶质瘤中ING4和CTGF的表达及其意义

目的 探讨人脑胶质瘤中生长抑制因子4(ING4)及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA的表达及其意义.方法 采用荧光实时定量聚合酶链式反应法检测ING4和CTGF mRNA在30例脑胶质瘤组织和5例正常脑组织中的表达水平,统计分析表达水平和肿瘤级别之间的关系以及二者表达水平的相天性.结果 ING4 mRNA在Ⅰ～Ⅱ级...     

核因子κB及相关基因产物的表达

背景：川芎嗪延缓肝纤维化形成的机制尚不清楚。 目的：观察川芎嗪对肿瘤坏死因子α刺激的肝星状细胞增殖及结缔组织生长因子、核因子κB及其相关基因产物白细胞介素6表达的影响。 方法：体外培养HSC-T6细胞株,取对数生长期的细胞用于实验。实验分为4组：对照组仅加入细胞;TNF-α组加入10 μg/L TNF-α;川芎嗪干预组先加入终浓度为10 μg/L的TNF-α作用30 min后,分别加入川芎嗪50,100,200,400,600, 1 000 mg/L;PDTC组先加入终浓度为10 μg/L的TNF-α作用30 min后,再加入终浓度18 μmol/L的核因子κB阻断剂PDTC。 结果与结论：MTT结果显示100,200,400,600,1 000 mg/L的川芎嗪均能抑制HSC-T6增殖,且呈剂量依赖性。免疫细胞化学染色及Western blot检测发现10 μg/L的肿瘤坏死因子α刺激后,HSC-T6细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达明显增多(P < 0.01或P < 0.05),200,400,600 mg/L的川芎嗪及18 μmol/L的PDTC均可明显降低肿瘤坏死因子α刺激后HSC-T6细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达(P < 0.01),且随着川芎嗪质量浓度的增加,抑制作用增强,PDTC的抑制作用最明显。相关性分析结果显示HSC-T6细胞结缔组织生长因子和核因子κB的表达呈正相关(r=0.980,P < 0.01)。说明川芎嗪可以抑制肝星状细胞结缔组织生长因子、核因子κB及白细胞介素6的表达,抑制肝星状细胞的增殖。     

Immunohistochemical localization of connective tissue growth factor in the rat central nervous system

Connective tissue growth factor (CTGF) is an immediate early growth-responsive gene but its distribution and significance in the central nervous system (CNS) are unknown. We investigated the distribution of CTGF-like immunoreactivity (CTGF-IR) in the rat CNS using a specific antiserum against CTGF oligopeptide. The majority of CTGF-IR was observed in astrocytes. Ependymal cells lining the wall of the cerebral ventricle and tanycytes lining the central canal of the spinal cord showed the strongest CTGF-IR, while there was a diffuse but weak signal in the gray matter of the spinal cord. CTGF-IR was also detected in the cytoplasm of a subpopulation of pyramidal neurons in the cerebral cortex. Our results showed that CTGF-IR is widely distributed in the CNS at both regional and cellular levels, suggesting a complex functional role in the CNS.