丁胺卡那霉素抑制和解离抗凝剂依赖的假性血小板聚集作用研究

目的研究抑制和解离因抗凝剂所致的假性血小板聚集，建立假性血小板减少症患者血小板准确计数方法。方法对1例罕见的多种抗凝剂依赖假性血小板减少症患者进行追踪试验，观察不同抗凝剂对血小板计数的影响；在EDTA—K2抗凝血内分别加入不同浓度的维生素B6、庆大霉素、氨茶碱、丁胺卡那霉素等抗血小板凝聚剂，在不同的时间段作血小板计数，同时观察血涂片中血小板形态与分布。优选出能确保血小板稳定的抗凝聚剂；并对被优选的抗凝聚剂浓度进行考察。观察取血前和取血后加入抗血小板凝聚剂对血小板聚集的影响。结果EDTA—K2、肝素、柠檬酸钠、氟化钠等抗凝血在室温4h内的观察中，血小板数均有不同程度的下降；在各种抗凝血中分别加入4种抗凝集剂后，除丁胺卡那霉素抗凝聚剂能保持血小板数稳定外，其他抗凝聚剂使血小板数随放置时间延长而下降；将丁胺卡那霉素加在各种抗凝血中无论在抽血前还是抽血后15min内加入，其血小板数在室温4h内保持相对稳定，而且与丁胺卡那霉素浓度呈正相关并趋于稳定，最佳的丁胺卡那霉素浓度为5mg／ml血。结论丁胺卡那霉素可以抑制和解离因多种抗凝剂所致的假性血小板聚集，既可保持血细胞形态稳定利于血细胞分析又可以进行血小板准确计数。     

盐酸噻氯匹定体外纠正血小板假性减少的实验研究

目的：探讨盐酸噻氯匹啶在体外纠正血小板聚集引起血小板假性减少中的抑制作用，建立假性血小板减少患者血小板准确计数方法。方法：对91例假性血小板减少患者采用浓度为200umol／L盐酸噻氯匹啶在体外对血小板聚集的观察，观察EDTA抗凝血样在加盐酸噻氯匹定前后PLT MPV以及涂片结果前后比较，并以及手工血小板计数为参照。结果：加入盐酸噻氯匹啶EDTA-K2的抗凝剂样本在2小时血小板计数与不加盐酸噻氯匹啶EDTA-K2的抗凝剂样本结果有显著性差异（P〈0．01）而与间接手工法计数无显著性差异（P〉0．05）。结论：盐酸噻氯匹啶是一种强效抗血小板活化药物，对血小板聚集有很好的抑制作用，适用临床血小板聚集的测定，达到准确计数血小板的目的。     

乙二胺四乙酸三钾导致血小板假性减少分析

目的探讨乙二胺四乙酸三钾（EDTA-K3）在体外引起血小板（PLT）聚集的原因及NaF在体外对EDTA依赖性血小板聚集的抑制作用。方法对6例典型EDTA依赖性血小板假性减少患者和40例对照人群不同抗凝情况下静脉血通过血液分析仪进行血液分析，同时用手工计数血小板作为参考值。结果EDTA-K3抗凝血结果与手工法结果差异有统计学意义（P〈0．001）；EDTA-K3抗凝血结果与不使用抗凝剂手指末梢血的结果差异有统计学意义（P〈0．001）；而手工法结果与不使用抗凝剂手指末梢血的结果相比差异无统计学意义（P〉0．05）；加NaF的抗凝血结果与手工法结果和不使用抗凝剂手指末梢血的测定结果相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论EDTA-K3对血小板可以产生聚集作用，造成血小板计数出现假性偏低；NaF对EDTA依赖性血小板聚集具有抑制作用。     

丁胺卡那霉素对EDTA依赖性凝集血小板的解离及其机制

目的研究丁胺卡那霉素对EDTA抗凝剂依赖的聚集血小板的解离作用和机制,为血常规标本中血小板凝聚提供可靠的解决方法。方法在EDTA依赖的假性血小板减少症(PTCP)患者的EDTA-K2抗凝血样本中,于不同时间段加入不同浓度丁胺卡那霉素进行凝集血小板的解离试验,通过血小板计数和涂片观察解离效果;用流式细胞仪检测血小板膜表面CD41、CD61、CD62p、PAC-1和IgG的表达百分率。结果抽血后1h内加入丁胺卡那霉素对血小板凝集的解离作用明显,血小板计数可恢复到即时检测的水平,血小板CD62p、PAC-1和IgG的表达量被显著抑制,而CD41和CD61未受明显影响。结论PTCP患者血常规样品抽血后1h内加入丁胺卡那霉素能有效解离凝集的血小板,作用机制可能与抑制患者血小板膜表面CD62p、PAC-1和IgG的表达有关;此法有助于解决EDTA所致的血小板计数的假性减少。     

阿米卡星在1例多抗凝剂依赖性假性血小板减少症中的应用研究

目的 :研究阿米卡星在多抗凝剂依赖性假性血小板减少症中抑制血小板聚集的机制。方法 :采集1例乙二胺四乙酸(edathamil,EDTA)依赖性假性血小板减少症患者的乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)及枸橼酸钠抗凝血,在不同时间段分别加入阿米卡星,依次用血细胞分析仪进行血小板计数,并行血涂片镜检,用流式细胞仪检测血小板膜表面标志物CD61、CD42b、PAC-1、CD62p的表达率。结果:采血后1 h内在EDTA-K2抗凝血中加入阿米卡星,能在不影响其他血细胞形态和分布的情况下,抑制血小板的聚集并解离聚集血小板,同时抑制血小板膜表面标志物CD62p活化,且血小板计数能在室温下4 h内维持稳定。枸橼酸钠抗凝血则随时间延长,血小板计数结果明显下降。结论:阿米卡星能纠正多抗凝剂依赖性假性血小板减少症患者的血小板计数,起到抑制血小板聚集并解离聚集血小板的作用,其机制可能与抑制了血小板膜表面标志物CD62p的表达有关。     

抗凝剂EDTA-K_2致血小板假性减少探讨

目的探讨乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂对假性血小板减少(PTCP)的影响及解决方法。方法对10例PTCP患者及30名健康体检者在EDTA-K2抗凝静脉血放置1 h后,用全自动血液分析仪进行分析,同时用手工计数血小板(PLT)作为参考值,并以不加抗凝剂的指血直接稀释后在全自动血液分析仪上测定。结果EDTA-K2抗凝血PLT计数结果与手工法相比,差异有统计学意义(P<0.001);EDTA-K2抗凝PLT计数结果与不使用抗凝剂指血相比,差异有统计学意义(P<0.01);而手工法PLT计数结果与不使用抗凝剂指血结果相比,差异无统计学意义(P>0.05),患者加EDTA-K2抗凝血作涂片瑞-姬染色,发现血片中有大量PLT聚集,聚集的PLT大小不一、数量不等,而不加抗凝剂的患者指血,则无PLT聚集现象。结论EDTA-K2对PLT可产生聚集作用,引起PTCP。     

抗凝剂EDTA-K2致血小板假性减少探讨

目的 探讨乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂对假性血小板减少(PTCP)的影响及解决方法 .方法 对10例PTCP患者及30名健康体检者在EDTA-K2抗凝静脉血放置1 h后,用全自动血液分析仪进行分析,同时用手工计数血小板(PLT)作为参考值,并以不加抗凝剂的指血直接稀释后在全自动血液分析仪上测定.结果 EDTA-K2抗凝血PLT计数结果 与手工法相比,差异有统计学意义(P<0.001); EDTA-K2抗凝PLT计数结果 与不使用抗凝剂指血相比,差异有统计学意义(P<0.01);而手工法PLT计数结果 与不使用抗凝剂指血结果 相比,差异无统计学意义(P>0.05),患者加EDTA-K2抗凝血作涂片瑞-姬染色,发现血片中有大量PLT聚集,聚集的PLT大小不一、数量不等,而不加抗凝剂的患者指血,则无PLT聚集现象.结论 EDTA-K2对PLT可产生聚集作用,引起PTCP.     

阿米卡星在EDTA依赖性假性血小板减少的探讨

目的探讨乙二胺四乙酸盐(EDTA-K2)抗凝血在检测时出现假性血小板减少的临床解决思路。方法 5例假性血小板减少的患者分别采集2管EDTA-K2抗凝血标本和1管枸橼酸钠(1∶9)抗凝血标本,其中1管EDTA-K2抗凝血标本在采血0.5h后加入阿米卡星,然后用全自动血细胞分析仪分别检测不同时间段各管抗凝血标本的血小板计数,并做血涂片染色镜检。结果 4例患者的EDTA-K2抗凝血标本加入阿米卡星后,血小板计数结果正常且聚集的血小板解离;1例患者的EDTA-K2抗凝血标本加或未加入阿米卡星,血小板计数结果都会随着时间的延长恢复到正常水平;枸橼酸钠(1∶9)抗凝血在采血10min内检查血小板计数结果正常,但随时间延长会出现聚集导致血小板减少。结论阿米卡星可以解离EDTA-K2抗凝血中的血小板聚集,避免患者重复抽血检查。但加入阿米卡星后效果不明显时,需重新抽取枸橼酸纳(1∶9)抗凝血10min内进行检测,以获得准确的血小板计数结果。     

纠正EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少方法的探讨

目的探讨纠正EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少的方法。方法用Sysmex XE-2100型全自动血液分析仪检测20例健康体检者不同时间3种抗凝血血小板数值及11例EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA-PTCP）患者不同抗凝血在15min血小板数值,同时作手工血小板计数。结果 15~30min内健康体检者EDTA-K2抗凝血血小板数值与手工血小板计数值相比差异无统计学意义（P〉0.05）,不同时间的枸橼酸钠和肝素锂抗凝血血小板数值与手工血小板计数值相比差异有统计学意义（P〈0.05）。EDTA-PTCP患者枸橼酸钠和肝素锂抗凝血在15min内测定的血小板数值与手工血小板计数值相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论枸橼酸钠和肝素锂抗凝剂不可替代EDTA-K2抗凝剂用于全自动血液分析仪血小板的检测,手工血小板计数是目前最为理想的纠正EDTA-K2抗凝剂致假性血小板减少的方法。     

EDTA-K2和枸橼酸钠1：4抗凝剂均引起血小板假性减少1例报道

患者,男,20岁,2013年6月5日被发现流浪街头,行为混乱,胡言乱语半天,以精神异常入院。一般检查及处理：（1）无肝、脾、淋巴结肿大,右手虎口皮肤有2cm左右裂伤,全身无其它出血点;（2）心电正常;（3）血常规：SYSMEX-2100血球仪检测得白细胞（WBC）9.93×109／L、血红蛋白（Hb）131g/L、血小板（PLT）251×109／L;（4）用药头孢拉定针2.0静滴bid,破伤风针肌注,清创包扎等外科处理。病人6月15号再次送检血常规SYSMEX-2100血球仪检测得白细胞（WBC）9.05×109／L、血红蛋白（Hb）149g/L、血小板（PLT）9×109／L 仔细检查标本无凝块, SYSMEX-1000i上复查血小板（PLT）8×109／L。发现血小板直方图有血小板（platelet,PLT）聚集现象。另外发现白细胞直方图第一群细胞前出现异常小峰,EDTA抗凝血涂片瑞氏染色可见大量血小板聚集,聚集的血小板数量不等、大小不一,怀疑是EDTA-K2依赖性血小板假性减少症（EDTA -PTCP）。让病房分别用枸橼酸钠1：4和EDTA-K2抗凝剂重抽无凝块标本并及时送检,检测得EDTA-K2抗凝剂血小板（PLT）19×109／L,枸橼酸钠1：4抗凝剂血小板（PLT）35×109／L。两种抗凝标本涂片瑞氏染色均发现血小板有聚集现象。怀疑EDTA-K2和枸橼酸1：4抗凝剂敏感引起的血小板假性减少。再次采集枸橼酸钠1：4,EDTA-K2,枸橼酸钠1：9抗凝血各一份,同时采集末梢血进行血小板手工计数,按《全国临床检验操作规程》,并且分别于抽血后1min、5min,30min进行计数,情况如表1。     

EDTA依赖性假性血小板减少的实验室解决思路

目的探讨乙二胺四乙酸(EDTA)依赖性假性血小板减少的临床解决思路。方法采集5例EDTA依赖性假性血小板减少患者的EDTA及枸橼酸钠抗凝血,每位患者的EDTA-K2抗凝血均在不同时间段分别加入6.5 mg/mL阿米卡星,并依次采用血液分析仪检测及血涂片检查。结果 3例患者在抽血前或抽血后1.5 h内在其EDTA抗凝血中加入阿米卡星后能在不影响其它血细胞形态和分布的情况下解离凝集血小板,其血小板计数能在室温下4 h之内维持稳定。余下2例患者,加或不加阿米卡星,其血小板数均会随着时间的延长逐渐增加,最终基本恢复正常水平,阿米卡星起到加速作用。结论添加阿米卡星的血小板检测结果在4 h保持稳定,结果明显优于更换枸橼酸钠抗凝剂。该药在医院抗菌药物中使用普遍,且在临床实际工作中,可以减少患者重复采血,缩短报告等候时间。阿米卡星可作为处理EDTA依赖的假性血小板减少的一线方法在临床普及。     

乙二胺四乙酸盐对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响

目的 探讨乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2）对肝素钠抗凝后血小板聚集的影响.方法 对38名血小板数量正常的体检者抽取静脉血标本,分别使用EDTA-K2、肝素钠抗凝20min、肝素钠抗凝20 min加入EDTA-K2、肝素钠抗凝60 min加入EDTA-K2的抗凝标本,进行计数及血涂片瑞氏染色观察.结果 肝素钠抗凝静脉血血小板计数结果为（93.7±32.18）× 109/L;EDTA-K2抗凝血血小板计数结果为（210＋58.39）×109/L.组间差异有统计学意义（t=16.74,P＜0.001）.肝素钠抗凝静脉血静置20min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（212.05 ＋60.20）× 109/L;与EDTA-K2抗凝血结果（210＋58.39）× 109/L比较,组间差异无统计学意义（t=1.844,B0.05）.肝素钠抗凝静脉血静置60 min后加入EDTA-K2抗凝剂结果为（56.74＋ 15.33）× 109/L,与EDTA-K2抗凝血结果（210t58.39）× 109/L比较,组间差异有统计学意义（t=22.88,P＜0.001）.结论 EDTA-K2钙离子螯合剂可可逆性地使初发聚集的血小板解聚.     

抗凝剂EDTA导致血小板假性减少现象的分析

目的：研究EDTA-K2作为血细胞分析抗凝剂对血小板的影响并寻找解决方法。方法对8例无皮肤紫癜、牙龈出血、鼻出血等临床症状的血小板计数明显减少患者采用手工计数和更换抗凝剂(肝素钠)的办法重新计数血小板并涂片、染色观察。结果手工计数和使用抗凝剂肝素钠检测的血小板计数数值均正常,两种方法计数无明显差异(P>0.05),两种方法计数结果明显高于使用抗凝剂EDTA-K2检测的结果(P<0.05)。使用EDTA-K2抗凝剂的血涂片,血小板明显聚集,末梢血血涂片血小板散在无聚集。结论 EDTA-K2作为血细胞分析抗凝剂在检测血小板时可导致个别人血液中血小板发生聚集引起假性血小板减少,日常工作中应引起重视,加强复查,防止误诊。     

27例乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少特点及临床分析

目的分析乙二胺四乙酸(EDTA)导致血小板聚集的特点,探讨与此现象有关的危险因素。方法用Sysmex XN-3000对2014年1月至2015年8月间的30 700例EDTA-K3抗凝标本测定,其中27例发生EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP)。再次采集27例患者的EDTA-K3和枸橼酸钠抗凝血标本进行测定并制作血涂片,显微镜检观察血小板分布,同时采集指血手工计数血小板。分析27例患者的生化指标,并与50例非EDTA-PTCP体检健康者结果对比。结果 EDTA抗凝血血小板数明显低于枸橼酸钠抗凝血,差异有统计学意义(P0.05),而枸橼酸钠抗凝血与手工法结果相近(P0.05)。EDTA-PTCP患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血糖(Glu)、三酰甘油(TG)比健康者高,而高密度脂蛋白(HDL)要比健康者低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 EDTA引起假性血小板减少的程度取决于患者对EDTA的敏感度,该现象的存在可能与高血脂、高血糖有关。当发生EDTA-PTCP时,应更换抗凝剂或者手工计数血小板,从而避免漏诊。     

抗凝静脉血放置时间与EDTA依从性假性血小板减少检出相关性的实验观察

目的探讨抗凝静脉血放置时间对血小板计数的影响。方法对门诊患者EDTA.K2抗凝静脉血在采血后不同时间进行检测,比较各组间血小板计数结果有无明显差异;1例EDTA.K2依从性假性血小板减少患者抗凝静脉血,在采血后不同时间进行检测,比较血小板计数结果有无明显差异。结果 100例门诊患者采集EDTA-K2抗凝静脉血之后的5、10、15、20、30、40min,血小板计数检测结果间差异均无统计学意义(P>0.05);1例EDTA-K2依从性假性血小板减少患者抗凝静脉血,在采血后5、10、15min的血小板计数检测结果差异有统计学意义,而在20min之后的1h内检测结果差异无统计学意义。结论为保证血小板计数的准确性,尤其是为避免EDTA-K2抗凝剂导致的假性血小板减少患者的漏诊,静脉血采集后至少放置20min再行自动化检测。对于血小板数低于正常者,需镜下观察血小板是否聚集或重新采集抗凝血以纠正血小板计数误差。     

EDTA依赖性假性血小板减少症1例及实验室解决思路

正对某校2015级1 224例新生进行入学体检,用全自动血细胞分析仪进行全血细胞计数,发现1例出现乙二胺四乙酸(EDTA)依赖性假性血小板减少。国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐使用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为全自动血细胞分析仪的抗凝剂,浓度为1.4~1.6mg/mL血。EDTA依赖性假性血小板减少是一种在EDTA盐作用下发生的一种免疫介导的血小板聚集[1-2]。这一现象的发生率很低,据国外     

乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少的分析

目的探讨乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP)的原因及鉴别要点和防范措施,减少或防止误诊误治。方法对2013年1~12月钟祥市人民医院检验科发现的3例EDTA-PTCP患者分别用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管、肝素抗凝管和枸橼酸钠抗凝管采集静脉血,而后用全自动血液分析仪分别测定血小板数量,并用毛细血管血进行血小板手工计数,且制作EDTA-K2抗凝血涂片和毛细血管血涂片,并用瑞氏染色镜检。结果 EDTA-K2抗凝血的机测血小板结果均很低(50×10~9/L),血小板直方图存在曲皱、尾部上翘、拖尾、无拟合曲线等异常;枸橼酸钠抗凝血和肝素抗凝血机测结果正常,血小板直方图也正常;手工计数血小板数量正常,且涂片可见分布正常。3例均明确为EDTA-PTCP。结论 EDTA-K2抗凝剂可引起血小板聚集,造成血小板假性减少。用全自动血细胞分析仪检测EDTA-K2抗凝血时,若出现血小板减低而患者无出血倾向、血栓形成等相关血小板减少症时,应进一步进行人工计数、血涂片复查和更换抗凝剂等方法复检,以减少或避免误诊误治。     

EDTA-丁胺卡那抗凝管稳定期的研究

目的研究观察EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管的稳定期。方法以新鲜配制的EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管为测定管,批量制作的EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管为对照管,在不同的时间段(一个月、三个月、六个月、一年)测定多名由于EDTA依赖而造成血小板假性减少症患者的血小板数,分析不同时间段EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管血小板计数情况,观察其稳定性。结果与新鲜配制的EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管相比,第一个月:批量配制的EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管,在4h内血小板数稳定;第三个月及半年:批量配制的EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管、1h内血小板数稳定,随着时间的推移血小板计数呈下降趋势;一年:批量配制的EDTA-K2丁胺卡那霉素抗凝管半小时内血小板计数稳定,其后随着时间的延长而下降。结论新鲜配制的EDTA-K2丁胺卡那霉素可以有效抑制和解离因血小板凝集而造成的血小板假性减低,4h内血小板计数稳定;而批量制作的EDTA-K2丁胺卡那霉素作血小板计数以4h为界限的话,其稳定性(有效期)只能维持一个月,介于这种情况,不适宜大批量生产,机理有待进一步探讨。     

EDTA-K2依赖性血小板假性减少现象分析及纠正方法探讨

目的 探讨抗凝剂乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)所致血小板聚集对血小板及白细胞计数结果的影响及纠正.方法 对17例EDTA-K2依赖性血小板假性减少症(PTCP)患者的EDTA-K2抗凝血分别于0,5,15,30 min测定血小板(PLT)和白细胞(WBC),另外对同时抽取的新鲜血(不加抗凝剂)即时上机测定和手工法测定PLT和WBC;均取上述标本进行涂片染色显微镜镜检.结果 EDTA-K2抗凝血PLT计数检测结果随待测时间延长越来越低,5,15 min和30 min时测定的PLT数量与0 min时测定的血小板数量比较差异有统计学意义;5 min和15 min时测定的WBC数与0 min时测定的WBC数量差异无统计学意义(P＞0.05),30 min时测定的WBC数少于0 min时测定的WBC数量(P＜0.01);EDTA-K2抗凝血混匀后0 min时测定的WBC和PLT结果与新鲜血(不加抗凝剂)仪器法、手工法测定的结果差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EDTA-K2引起PTCP患者的血小板聚集导致血小板假性减低和白细胞假性增高;在临床检验工作中应加强镜检复核,对于首次检测血小板数值减低的标本均应涂片镜检,以确认是否存在抗凝剂所致血小板聚集的现象.对PTCP患者应采用新鲜血(不加抗凝剂)仪器即测法、手工法或EDTA-K2抗凝血混匀后即测等方法检测.     

EDTA致假性血小板减少一例

假性血小板较罕见，原因有；一是使用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝剂且血中含EDTA依赖性抗体，二是标本中含血小板自身抗体的冷凝集素．最近我们发现一例因EDTA所致的假性血小板减少。现报道如下。1方法1．1仪器法　　采集静脉血1．0ml加入盛有EDTA·K（15g／dl）20μl的硅化试管中，于MedonicCA－610型血细胞分析仪，按操作规则进行分析，全套试剂由Medonic公司提供．1．2手工法　　用许汝和稀释液按《全国临床检验操作规程》（第二版）的操作步骤进行计数．1．3涂片镜检法　将抗凝血及非抗凝血分别推片，在显微镜下观察血小板有无簇…