Kir2.1和Kir3.1钾通道mRNA在大鼠平滑肌组织中的比较表达

目的　研究Kir2 1和Kir3 1mRNA在平滑肌及其它组织中表达的差异。方法　用RT PCR方法检测mRNA的表达 ,用光密度扫描法半定量测定表达差异。结果　在大鼠的左心室、大脑皮层、主动脉平滑肌、膀胱平滑肌和呼吸道平滑肌上均有Kir2 1和Kir3 1的表达 ,通过光密度扫描分析显示Kir2 1mRNA在各组织的表达水平 (Kir2 1/GAPDH)依次为主动脉平滑肌 >心脏 =大脑皮层 =气管平滑肌 >膀胱平滑肌 ;Kir3 1mRNA的表达水平 (Kir3 1/GAPDH)依次为主动脉平滑肌 =气管平滑肌 >心脏 =大脑皮层 =膀胱平滑肌。结论　Kir2 1和Kir3 1在不同组织中2 0 0 0 0 4 0 5收稿 国家自然科学基金资助项目 ,No 39770 85 9;国家重点基础研究“973”子课题 ,NoG19980 5 110 6作者简介 :任亚军 ,男 ,30岁 ,博士研究生 ;王晓良 ,男 ,45岁 ,PhD (德国 ) ,研究员 ,博士生导师 ,中国药理学会常务理事的表达量是有差异的 ,这种差异有内在的生理意义。     

豚鼠心肌细胞中Kir2.1对内向整流钾电流组成的贡献

目的 研究心肌细胞中Kir2.1对心肌细胞静息电位中内向整流电流组成的贡献.方法 采用二型胶原酶急性分离豚鼠心室肌细胞,利用膜片钳技术,研究500 mmol/L Ba2+阻断豚鼠心肌细胞内向整流钾电流Kir2.1,从而确定Kir2.1在所有内向整流电流所占比例.结果 Ba2+对豚鼠心肌细胞内向整流钾电流Kir2.1有较...     

Kir2.1/Kir2.3嵌合体的构建与表达

目的构建Kir2.1/Kir2.3通道嵌合体,为进一步研究Kir2.1和Kir2.3通道的调控机制打下基础。方法利用重叠延伸PCR方法构建不同的Kir2.1/Kir2.3嵌合体质粒:N1P3C3,N3P1C1,N3P3C1,N1P1C3,NIP3C1,N3P1C3。将不同的嵌合体质粒分别用NheI线性化后,转录为cRNA表达于非洲爪蟾卵母细胞,用双电极电压钳记录电流。结果不同的Kir2.1/Kir2.3嵌合体质粒构建成功,在非洲爪蟾卵母细胞上可以记录到电流表达。结论成功构建Kir2.1/Kir2.3嵌合体并完成了嵌合体通道的异源性表达和电压钳记录。     

细胞内pH对胆碱能受体介导的Kir3.1/3.4电流的调节

目的　研究细胞内pH对胆碱能受体介导的Kir3 1/3 4电流的调节作用。方法　应用AzideNa、KHCO3 和通过灌流直接降低细胞内 pH ,用双电极电压钳和膜片钳方法观察在蛙卵细胞中表达的Kir3 1/ 3 4钾离子通道电流的变化和M受体激活对Kir3 1/ 3 4电流调节的变化。结果　细胞内 pH降低能抑制Kir3 1/ 3 4的电流 ;Kir3 1/ 3 4对细胞内pH的敏感性介于另外两种Kir通道Kir2 1和Kir2 3之间 ,即这三种通道对细胞内 pH的敏感性依次为Kir2 3>Kir3 1/ 3 4 >Kir2 1;细胞内pH降低能够减弱M1受体激活对Kir3 1/ 3 4的抑制作用 ,加强M2 受体激活Kir3 1/ 3 4电流后的去敏作用。结论　在维持细胞静息电位方面起重要作用的Kir3 1/ 3 4通道在细胞内pH降低的情况下基础电流和M受体激活调节电流均发生了变化 ,这些变化在缺血缺氧引起的细胞 (如心肌细胞 )兴奋性改变中可能有重要的生理学意义     

血管平滑肌ATP敏感性钾通道研究进展

ATP敏感性钾通道 (KATP)广泛存在于各类细胞和组织中 ,是药物作用的重要靶点。KATP是由内向整流钾通道Kir和磺酰脲类受体SUR亚基组成。与血管舒缩特性密切相关的是SUR2B/Kir6 1,电导值小 ,对ATP的抑制作用不敏感 ,需要有NDP才能被开放 ,故这类血管平滑肌KATP又被称为NDP依赖性钾通道。内源性和外源性的很多因子引起的血管舒缩反应与血管平滑肌上的KATP有关 ,此信号途径与PKA、PKC等磷酸化激酶有密切联系。不同血管对钾通道开放剂(potassiumchannelopeners,KCO)的反应有差异 ,KCO对血管的选择性作用机制仍不明确。本文就血管平滑肌KATP的分子结构、电生理、药理学特征、信号转导途径和KCO对血管的选择性作用进行综述     

磺脲类药物对Kir6．2突变的糖尿病患者更为有效

杂合子可激活KCNJ11的突变,该基因编码ATP敏感性钾通道(KATP)的Kir6.2亚单位,它的突变使30%￣58%的病例在6个月以内就确诊为糖尿病。患者出现酮症酸中毒或严重的高血糖,并接受胰岛素治疗。发病机制是由于B细胞的KATP通道损伤,不能关闭,造成细胞内ATP的升高,胰岛素分泌功能受损,从而引发糖尿病。而磺脲类药物可以通过ATP非依赖途径关闭KATP通道,因此Pearson等人评价了磺脲类药物对Kir6.2突变糖尿病患者的疗效(NEnglJMed,355:467-477.)。在这项研究中,共评价了49例有Kir6.2突变、接受适当剂量磺脲类药物治疗后的血糖水平,并在其…     

应用Kir6．2基因敲除鼠研究KATP通道与帕金森病的相关性

目的：阐明ATP敏感性钾通道（KATP）与帕金森病（PD）发生的相关性。方法：应用Kir6．2^-/-小鼠，建立MPTP单次毒性模型和慢性PD小鼠模型，并给予KATP开放剂埃塔卡林（IPT）、二氮嗪（Dia）和克罗卡林（Cro）观察其作用效果。通过对小鼠自主活动和爬竿行为的观察评价行为学改变，应用高效液相色谱法测定纹状体单胺类神经递质含量评价神经生化改变，应用免疫组织化学法观察TH阳性DA能神经元、     

钾通道开放剂的应用前景

钾通道及其调控剂是当前分子生物学，医学，药学研究的热点，钾通道开放剂的应用将日益广泛。本文介绍了钾通道研究的最新进展以及新近开发正在临床试验的钾通道开放剂及其用途。     

钾通道开放剂研究的新进展

目的:介绍钾通道开放剂的结构和分类以及最近几年的研究进展.方法:对国内外大量相关文献进行综合分析和整理.结果:以钾通道为靶标,近年来研制出许多钾通道开放剂(KCO),应用于治疗心血管疾病.结论:KCO用于治疗心血管疾病,特别是在抗高血压和心肌保护方面,具有广阔的前景.     

钾通道调节剂的高通量筛选模型

目的建立钾通道调节剂高通量筛选的细胞模型。方法96孔板上细胞负载荧光染料DiBAC₄(3),测定不同化合物对荧光强度的影响,反映细胞膜电位的变化,间接反映化合物对钾通道的作用。结果高钾去极化和钾通道阻断剂4-AP,TEA,E-4031,glibenclamide,quinidine和nifedipine均能增强细胞的荧光强度,钾通道开放剂cromakalim能减弱细胞的荧光强度,上述化合物在一定剂量范围内均有剂量效应关系。利用该模型筛选76个化合物,发现9个化合物的荧光强度变化值有较好的剂量效应关系,有待膜片钳技术的进一步验证和筛选。结论此方法简单,易于操作,重现性好,适用于钾通道调节剂的高通量筛选。     

ATP敏感性钾通道的阻断剂与开放剂研究进展

ATP敏感性钾通道是高血压、心绞痛、糖尿病及缺血性脑损伤等多种疾病的治疗靶点之一。通过对调节KATP通道药物的选择性、可逆性、作用位点以及相互调节的研究，可以对一些临床用药进行重新评估，并指导开发高选择性的KATP通道阻断剂和开放剂。     

抗心律失常药作用机制研究进展

抗心律失常药作用机制研究进展吴跃进（广东医学院药理教研室，湛江５２４０２３）心律失常的产生与持续是心肌电活动紊乱的结果，而电活动则是离子通过离子通道跨膜流动形成的。抗心律失常药主要通过影响心肌电活动而发挥作用，因而以离子通道作为抗心律失常药物作用的靶...     

作用于钾通道药物的心血管临床研究进展

治疗心血管疾病的钾通道药物越来越受到重视。本文叙述了钾通道药物在心绞痛，高血压，心律失常，心肌缺血，休克和脑血管痉挛等疾病中的作用。     

钾通道开放剂研究进展

有关钾通道的研究已有半个世纪的历史，以往对钾通道的认识多数局限在细胞膜的钾平衡电位上。另外，钾通道的多态性，特别是同一细胞上存在多种类型的钾通道，因而给本领域的研究带来了许多困难。近10年来，由于发现了一些动物毒素（如α－pamin，charybditoxin等）具有特异性的阻断钾通道作用，从而使研究者能揭示出不同类型钾通道的生理功能；加之实验技术及方法学的改进，尤其是全细胞电压钳及离子单通道记录技术的应用［’j，以及在过去5年里利用分子生物学技术，对有功能的细胞膜钾通道的克隆及基因表达，更加拓宽了人们对钾通道的了解…     

钾通道药理的研究进展

钾通道药理的研究进展陈志刚王佩徐建华（浙江医科大学药学系药理学教研室，杭州３１００３１）中国图书分类号Ｒ９７１；Ｒ９７２．４；Ｒ９７４．３钾通道是一类分布很广的膜离子通道。８０年代以来，由于电压钳和单细胞通道记录等新技术的应用，对Ｋ＋通道的认识逐渐深...