益气养阴方对CAM移植瘤组织MMP-2表达的影响

目的 研究益气养阴方对肿瘤诱导鸡胚尿囊膜(CAM)血管生成及对CAM移植瘤细胞细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的效应.方法 将大鼠20只随机分为2组,即药物组和对照组,各10只.药物组予益气养阴方水煎液灌胃,对照组予相同容积的0.9%氯化钠注射液灌胃,制备含药血清和对照血清.制备接种肿瘤细胞的CAM模型,分别予对照血清和含药血清各100 μL,观察肿瘤细胞诱导血管生长情况,于解剖显微镜下观察CAM血管,计数血管数目和血管的面积,观察CAM移植瘤组织生长情况,并取肿瘤组织进行组织学观察,应用免疫组织化学及其组织形态学定量分析方法对MMP-2在CAM移植瘤中的表达进行研究.结果 含药血清组CAM血管数目、血管面积均低于对照血清组,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01);含药血清组MMP-2灰度值高于对照血清组,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 益气养阴方对肿瘤诱导的CAM血管生成有明显抑制作用,降低MMP-2的表达可能是其抑制肿瘤血管生成的主要机制之一.     

益气养阴方对小鼠子宫颈癌U14生长及转移的影响

目的:观察益气养阴方对小鼠子宫颈癌U14生长及转移的影响。方法:小鼠经肌肉接种U14子宫颈癌细胞悬液,观察小鼠实体瘤的瘤质量、抑瘤率、肺部转移率、肺部转移瘤生长情况。结果:益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,并且明显改善化疗对机体的免疫损伤。结论:益气养阴方对肿瘤自发性转移模型有一定的抑制作用,并且增强机体的免疫功能。     

益气养阴方对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的：评价益气养阴方鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法：制备CAM模型，比较大鼠含药血清和无药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响情况。结果：含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成产生明显抑制作用。结论：益气养阴方对活体血管的生成具有抑制作用，在肿瘤和其他病理情况下的血管形成治疗中具有一定的应用价值。     

益气养阴方对小鼠肝癌血道转移的影响

目的 观察益气养阴方对小鼠肝癌血道转移的影响.方法 小鼠经尾静脉接种H22肝癌细胞悬液后14 d,观察中药对荷瘤小鼠的肺部转移瘤生长情况影响等.结果 益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,中药组明显改善化疗对机体的免疫损伤.结论 益气养阴方对H22肝癌血道转移有一定的抑制作用,并且增强机体的免疫功能.     

益气养阴方对小鼠肝癌实验性转移的影响

目的:观察益气养阴方对小鼠肝癌实验性转移(血道及淋巴道转移)的影响.方法:血道转移实验为小鼠经尾静脉接种H22肝癌细胞悬液,观察荷瘤小鼠的肺部转移瘤生长情况;淋巴道转移实验以腹水型肝癌H22瘤株在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射接种,观察小鼠实体瘤的瘤重量、抑瘤率、肺部转移率、淋巴结转移情况等指标的变化;同时观察各组小鼠免疫器官的变化.结果:益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,并且可明显改善化疗对机体的免疫损伤.结论:益气养阴方对H22腹水型肝癌血道及淋巴道两种转移途径均有一定的抑制作用,并且增强机体的免疫功能.     

益气养阴方抗肿瘤诱导CAM血管生成及分子机制的研究

目的：研究益气养阴方抗肿瘤诱导CAM血管生成及对CAM移植瘤细胞血管内皮生长因子（VEGF）和细胞基质金属蛋白酶2（MMP2）表达的效应。方法：应用免疫组织化学及其组织形态学定量分析方法对VEGF和MMP2在CAM移植瘤中的表达进行研究。结果：益气养阴方组VEGF和MMP2的表达均明显低于对照组,差异有显著性（P〈0.01）。结论：益气养阴方对肿瘤诱导的CAM血管生成有明显抑制作用,降低VEGF和MMP2的表达可能是其抑制肿瘤血管生成的主要机制之一。     

复方红豆杉胶囊对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的 采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法观察复方红豆杉胶囊对血管生成的影响.方法 种蛋在孵育7d后制备CAM模型,复方红豆杉胶囊低、高剂量含药血清、生理盐水、硫酸鱼精蛋白、空白血清滴加于CAM表面载体上,作用48h后观察胚胎存活情况,显微镜下计数CAM载体周围的一、二级血管数目.结果 复方红豆杉胶囊低、高剂量组均有抑制CAM血管生成作用,一、二级血管数目明显少于生理盐水和空白血清组(P<0.01).结论 复方红豆杉胶囊具有明显的抑制CAM血管生成的作用.     

大黄虫丸对鸡胚尿囊膜血管新生的影响

目的:观察大黄虫丸对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的影响。方法:采用血清药理学方法制备含药血清,观察含药血清对培养5～7 d鸡胚CAM血管生成的影响,并与生理盐水及正常血清组对照。结果:大黄虫丸含药血清可抑制CAM血管的生成,与生理盐水组比较,大黄虫丸含药血清组的血管指数明显降低(P<0.01)。结论:大黄虫丸具有抑制CAM血管新生的作用。     

凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响

目的探讨凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管抑制作用的机制。方法在8日龄鸡胚CAM上植入凉血活血胶囊空白血清、含药血清,以及生理盐水、不完全1640制备的明胶海绵药膜,孵化72h。解剖显微镜下放大10倍计数给药组和对照组载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目,观察药物对CAM血管新生的影响。结果CAM正常状态的血管呈非特异性的贯穿、包绕、叶脉样、平行生长。解剖显微镜下放大10倍计数载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目。实验结果显示：不同浓度的给药组均出现无血管区或血管断裂现象,与生理盐水组、不完全1640组比较差异有统计学意义（分别P〈0.01）;凉血活血胶囊含药血清对CAM大血管生成未显示明显抑制作用（分别P〉0.05）;但3个浓度对CAM中血管均有一定的抑制作用（分别为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01）;对CAM细小血管均有明显的抑制作用（分别P〈0.01）;不同浓度给药组总血管数与其相应浓度空白组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凉血活血胶囊含药血清对CAM血管新生有显著的抑制作用。     

凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响

目的探讨凉血活血胶囊含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管抑制作用的机制。方法在8日龄鸡胚CAM上植入凉血活血胶囊空白血清、含药血清,以及生理盐水、不完全1640制备的明胶海绵药膜,孵化72h。解剖显微镜下放大10倍计数给药组和对照组载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目,观察药物对CAM血管新生的影响。结果CAM正常状态的血管呈非特异性的贯穿、包绕、叶脉样、平行生长。解剖显微镜下放大10倍计数载体周围5mm范围内的大、中、细小血管数目。实验结果显示：不同浓度的给药组均出现无血管区或血管断裂现象,与生理盐水组、不完全1640组比较差异有统计学意义（分别P〈0.01）;凉血活血胶囊含药血清对CAM大血管生成未显示明显抑制作用（分别P〉0.05）;但3个浓度对CAM中血管均有一定的抑制作用（分别为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01）;对CAM细小血管均有明显的抑制作用（分别P〈0.01）;不同浓度给药组总血管数与其相应浓度空白组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凉血活血胶囊含药血清对CAM血管新生有显著的抑制作用。     

消岩汤药物血清对A549/DDP多药耐药逆转作用的研究

[目的]探讨消岩汤药物血清对接种S180昆明小鼠肿瘤的抑制作用,及对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/耐顺铂(DDP)的耐药逆转作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,观察消岩汤对小鼠S180移植肿瘤生长的影响;以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验(MTT)方法,探讨消岩汤对肺癌耐药细胞的多药耐药逆转作用。[结果]消岩汤高、低剂量组的抑瘤率分别是48.36%和27.87%;消岩汤荷瘤动物含药血清高、低剂量组分别与DDP合用时,对耐药细胞A549/DDP的杀伤作用分别是DDP组的1.78倍和1.57倍。[结论]消岩汤可改善小鼠生活质量,拮抗恶病质,并能够抑制肿瘤生长;消岩汤含药血清对A549及A549/DDP均有生长抑制作用,且能增强DDP对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用,具有耐药逆转作用。     

灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠COX-2蛋白表达的影响

[目的]研究灵芪胶囊(LQC)的抗肿瘤作用的机制。[方法]以免疫组化方法检测荷瘤小鼠血管生成因子环氧化酶-2(COX-2)、表达的变化,研究LQC对肿瘤血管生成的抑制作用。[结果]LQC能够下调血管生长因子COX-2的表达而抑制肿瘤生长。[结论]LQC通过影响COX-2的表达,抑制肿瘤新生血管生成,发挥抗肿瘤作用。     

解毒祛瘀法对肿瘤血管生成影响的实验研究

[目的]证实中医解毒祛瘀法能够抑制血管生成，调控血管生长基因，抑制肿瘤生长和转移作用。[方法]1)采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型，将含有解毒祛瘀法提取液的载体置于7d胚龄的CAM上，作用48h观察抑制血管生成情况，并予氢化可的松相比较。2)采用家兔角膜移植肿瘤模型观察解毒祛瘀法对肿瘤血管生成抑制作用。3)解毒祛瘀法对荷瘤小鼠肿瘤生长及血管生成抑制作用研究。[结果]解毒祛瘀法能够使CAM及家兔角膜移植瘤的血管生成明显减少甚至消失。抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，抑瘤率为49．6％，降低血管密度，促进肿瘤血管内皮细胞凋亡。[结论]中药复方解毒祛瘀法能够抑制CAM、家兔角膜移植瘤及荷瘤小鼠肿瘤生长和血管生成作用，提示解毒祛瘀法能够通过抑制肿瘤血管生成起到抑制肿瘤生长作用。     

西黄丸调控MDSCs改善乳腺癌肺转移的作用及机制研究

[目的]探讨西黄丸对三阴性乳腺癌肺转移的机制。[方法]构建三阴性乳腺癌4T1-BALB/c原位荷瘤小鼠,流式细胞术检测荷瘤小鼠血液、骨髓、肺组织内骨髓源性抑制细胞（MDSCs）;通过苏木精-伊红（HE）染色确定小鼠肺转移微环境形成时间;利用蛋白质印迹（Western blotting）检测肺组织相关蛋白水平;通过对比各组小鼠肺转移微环境形成时间、肺组织骨髓及外周血中MDSCs数量、肺转移结节、肺转移组织相关蛋白探究西黄丸对乳腺癌肺转移的作用及机制。[结果]西黄丸及乳香、没药药对均在第14天对移植瘤有显著抑制作用;西黄丸能够延长乳腺癌肺转移出现时间（17 d vs. 14 d）,且可以显著减少乳腺癌肺转移结节灶的数量;西黄丸能够抑制4T1-BALB/c荷瘤小鼠外周血及肺组织中MDSCs数量,且显著降低肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP9)、S100A8/A9表达量。[结论]西黄丸可通过调控外周血及肺组织中MDSCs数量,抑制MMP9、S100A8/A9表达重塑乳腺癌肺转移微环境形成,达到抑制乳腺癌肺转移目的。研究为西黄丸临床抗肿瘤转移应用奠定基础。     

肺抑瘤合剂对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1表达影响的实验研究

[目的]探讨肺抑瘤合剂的抗肿瘤作用机制.[方法]制备小鼠Lewis肺癌模型,研究肺抑瘤合剂与化疗药物单独或联合应用对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其对肺癌组织细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达的影响.[结果]肺抑瘤合剂对Lewis肺癌小鼠局部肿瘤生长有显著抑制作用,对环磷酰氨抗肿瘤有协同增效作用(P＜0.001);肺抑瘤合剂配合化疗能有效抑制肿瘤细胞cyclinD1的表达(P＜0.05).[结论]肺抑瘤合剂可能是通过降低肿瘤细胞cyclinD1的表达,使肿瘤细胞停止于G1期,从而通过调控基因表达,起到抗肿瘤的作用.     

魟鱼软骨多糖的分离纯化及生物活性的研究

目的研究魟鱼软骨多糖(raycartila geglycosam inoglycans,RCG)的提取、分离与纯化方法,并初步探讨其生物活性。方法采用盐酸胍提取、丙酮分级沉淀、膜超滤、Sephadex凝胶柱色谱分离、纯化获得魟鱼软骨多糖,由HPLC确定其相对分子质量和质量分数;建立Lewis肺癌小鼠模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量(500、250、125mg/kg)鱼软骨多糖组、环磷酰胺(CTX,60mg/kg)组,观察小鼠肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤与肺转移灶数抑瘤率,免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(MVD),采用RT-PCR检测瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)基因表达。结果经HPLC检测,该组分为单一多糖,其质量分数达99%以上。生物活性检测结果表明,与生理盐水组比较,该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,原发瘤抑瘤率、肺转移灶数与生理盐水组比较差异显著(P<0.05、0.01);与生理盐水组比较,鱼软骨多糖各剂量组MVD显著减少、VEGFmRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,并可抑制肿瘤的血管形成。     

茯苓多糖对B16黑色素瘤人工肺转移模型的影响

[目的]探讨茯苓多糖对B16黑色素瘤小鼠人工肺转移的影响,并对其作用机制进行初步研究。[方法]C57BL/6小鼠接种B16黑色素瘤,分为茯苓多糖高、低剂量组、顺铂组、模型组,茯苓多糖高、低剂量组分别给予每只小鼠茯苓多糖0.5 mg、0.33 mg,顺铂组给予顺铂0.04 mg,模型组给予生理盐水,接种瘤细胞后第2天开始尾静脉注射给药,隔天给药1次。观察小鼠一般状态,造模后21 d取肺,计数肺表面转移灶个数、HE染色检测肺微小转移灶个数,并检测外周血白细胞数量及脾质量、脾指数。[结果]顺铂能够抑制肺转移,同时降低小鼠体质量、外周血白细胞数量、脾质量和脾指数。而茯苓多糖高、低剂量组对B16荷瘤鼠的体质量无明显影响,茯苓多糖高剂量可明显降低肺表面转移灶个数,茯苓多糖高、低剂量可减少肺微小转移灶个数,高剂量组外周血白细胞数量明显降低,低剂量组与模型组无统计学差异,低剂量可增加B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数,高剂量对B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数无明显影响。茯苓多糖高、低剂量组脾质量和脾指数均高于顺铂组。[结论]茯苓多糖能够抑制尾静脉注射B16荷瘤小鼠肺转移,增加其脾质量和脾指数,无明显增加其外周血白细胞数量的作用,推测活化外周血白细胞,增强免疫功能可能参与茯苓多糖抑制肿瘤转移的机制。     

石见穿多糖通过PTEN通路对骨肉瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能的影响

[目的] 探讨石见穿多糖（PSSC）通过第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）通路对骨肉瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能的影响。[方法] 选取60只BALB/C雌性裸鼠,取12只作为对照组,剩余48只采用MG-63人骨肉瘤细胞注射法建立骨肉瘤小鼠模型,成功建模42只,随机分为模型组（11只,腹腔注射生理盐水10 mL/kg）、PSSC低剂量组（11只,腹腔注射PSSC 10 mg/kg）、PSSC高剂量组（10只,腹腔注射PSSC 100 mg/kg）、顺铂组（10只,腹腔注射顺铂2 mg/kg）,干预2周,绘制小鼠肿瘤生长曲线观察移植瘤体积变化,流式细胞仪测定小鼠外周血CD4⁺、CD3⁺T细胞比例,测定小鼠移植瘤质量,苏木精-伊红（HE）染色观察肿瘤病理组织变化,统计肿瘤细胞凋亡率,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测移植瘤组织PTEN、磷酸肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白表达。[结果] PSSC能降低骨肉瘤小鼠移植瘤体积及质量,提高外周血CD4⁺、CD3⁺T细胞比例,减轻肿瘤病理组织变化,提高肿瘤细胞凋亡率,促进PTEN蛋白表达,抑制PI3K、p-Akt蛋白表达,且具有剂量依赖性,高剂量PSSC抑瘤作用更为明显,肿瘤抑制效用与顺铂化疗效用相当。[结论] 采用PSSC治疗骨肉瘤小鼠,能提高小鼠免疫能力,减轻肿瘤病理变化,促进肿瘤细胞凋亡,抑制移植瘤体积及质量,可能与PSSC可激活抑癌基因PTEN有关。     

肺一丸对肺癌血管生成及转移影响的实验研究

【目的】证实中药肺—丸抑制肺癌血管生成和抗转移的作用。【方法】1)采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型，将含有肺—丸提取液的载体置于7d胚龄的CAM上，作用48h观察抑制血管生成情况。并予氢化可的松相比较。2)采用家兔角膜移植肿瘤模型观察肺—丸对肿瘤血管生成抑制作用。3)采用LA795肺腺癌皮下接种T739小鼠模型，灌胃给药法及局部给药法，观察中药肺—丸对肿瘤血管生成及肺转移的抑制作用。【结果】肺—丸能够使CAM及家兔角膜移植瘤的血管生成明显减少甚至消失。抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，抑瘤率为49．6％，降低血管密度，肺转移抑制率为60％。【结论】中药复方肺—丸能够抑制CAM、家兔角膜移植瘤及肺腺癌移植瘤的血管生成，并具有抗肿瘤转移作用。提示肺—丸能够通过抑制肿瘤血管生成起到抑制肿瘤生长、抗转移作用。