CEFTAZIDIME耐药细菌的β-内酰胺酶研究

应用药物梯度琼脂筛选法获得绿脓杆菌和阴沟杆菌的Ceftazidime耐药菌株(MIC≥64μg/ml)。采用紫外分光光度法检测了耐药菌的β-内酰胺酶活性,酶对12种β-内酰胺抗生素水解的“底物轮廓”以及抑酶活性;应用超薄层分析等电聚焦电泳技术检测了β-内酰胺酶的等电点(pI),并与标准产酶菌株的β-内酰胺酶进行了比较。结果提示:细菌对Ceftazidime耐药后,β-内酰胺酶活性增加13～107倍;这类β-内酰胺酶具有如下特点:(1)水解头孢菌素类强于水解青霉素类;(2)舒巴克坦(5μg/ml)对这类酶无抑制作用,而同等剂量的邻氯青霉素却能明显抑制,(3)pI均≥8.0,与标准质粒介导的β-内酰胺酶的性质不同,符合染色体介导的头孢菌素酶的性质。此外,作者发现pI为8.2或8.4的4株耐药菌的β-内酰胺酶尚未见文献报道。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶的底物动力学研究

目的:对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌所产β-内酰胺酶进行底物动力学研究。方法:从我院2008年分离并经Nitrocefin鉴定的产β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中各随机挑选4株,以Kirby-Bauer法进行药敏试验检测,采用L-B作图法得出Km和Vmax。结果:8株细菌对β-内酰胺类抗生素均耐药,而对碳青霉烯类抗生素高度敏感;所产β-内酰胺酶对青霉素均有较强的水解作用,对第1代头孢菌素头孢唑林及头孢噻吩也有一定的水解作用,对第2代头孢菌素头孢呋辛和第3代头孢菌素头孢他啶及头孢噻肟的水解活性差异较大。结论:产β-内酰胺酶菌株所致感染首选碳青霉烯类抗生素治疗,不同产酶菌株所产β-内酰胺酶水解底物轮廓有较大差异。     

八种头孢菌素体外抗菌活性比较

以试管双倍稀释法测定头孢噻吩、头孢唑啉、头孢孟多、头孢呋新、头孢噻肟、头孢哌酮、Ceftazidime和头孢三嗪等八种头孢菌素对从烧伤创面分离的绿脓杆菌、枸橼酸杆菌、硝酸盐阴性杆菌、大肠杆菌、克氏肺炎杆菌、产气杆菌、摩根氏变形杆菌、金葡菌等共146株菌株的MIC和MBC。结果显示头孢噻吩、头孢唑啉和头孢孟多对耐药性金葡菌呈高度抗菌活性。而头孢呋新和第三代头孢菌素对耐药性金葡菌抗菌活性则显著低于第一代头孢菌素和头孢孟多。第三代头孢菌素对绿脓杆菌有一定的抗菌活性,但差异较大,其中 Ceftazidime最强,其次为头孢哌酮、头孢三嗪最差,对肠杆菌科细菌的敏感性头孢噻肟除对产气杆菌的敏感性低于Cef-tazidime外为最佳; Ceftazidime对绿脓杆菌、硝酸盐阴性杆菌、产气杆菌和摩根氏变形杆菌有高度抗菌活性,但对其他肠杆菌科的细菌则不及头孢噻肟。     

AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶研究进展及临床治疗对策

产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制.AmpC酶是对第三代头孢菌素耐药而不能被β-内酰胺酶抑制剂所抑制,有染色体介导的AmpC酶和质粒介导AmpC酶,前者分诱导表达和非诱导表达,后者可随耐药质粒复制、接合、转化及转座子移位,在革兰阴性杆菌内或种间传播.ESBLs是由质粒介导的能水解大多数青霉素、头孢菌素和氨曲南等β-内酰胺类抗生素且活性能被酶抑制剂抑制的一类β-内酰胺酶,主要由肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生,也可由其它肠杆菌科细菌、不动杆菌属、铜绿假单胞菌产生.碳青霉烯类抗生素是治疗产AmpC酶和ES-BLs革兰阴性杆菌感染的首选药物.     

阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药前后的β—内酰胺酶比较

用紫外分光光度法与超薄层分析性等电聚焦电泳技术对Ceftazidime敏感与耐药阴沟肠杆菌的β-内酰胺酶进行了检测与比较,结果表明:1)酶活性明显增加;敏感菌酶活性为5～40单位,耐药后酶活性为149～820单位,增加了13～107倍。2)“底物轮廓”谱扩大;敏感与耐药菌酶对青霉素类均有一定程度水解,但耐药菌酶对第一代头孢菌素的水解明显增强(P<0.01),还扩大了对第二、三代头孢菌素CMD与CPZ的水解。3)等电点(pI)一致;7株敏感与耐药菌酶的pI相等,且pI均≥0.8。     

超广谱β-内酰胺酶研究进展

超广谱p内酰胺酶（extended spectrum β-lactam ases,ESBLs）由质粒介导的能使细菌对第三代头孢菌素类,单酰胺类及青霉素类耐药的一类酶,可在菌株间转移和传播,在体外试验中可使三代头孢和氨曲南的抑菌环缩小,但不一定在耐药范围,临床对β-内酰胺药物（包括青霉素类和头孢类）耐药。ESBLs主要由革兰阴性杆菌产生,尤以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为代表。     

β-内酰胺类抗生素的体外抗菌作用

本文报道17种β-内酰胺类抗生素对临床分离的424株革蓝氏阳性和阴性菌的体外抗菌作用.第一代头孢菌素和亚氨甲基thienamycin对多数革蓝氏阳性菌有强大抗菌作用,但对肺炎链球菌、化脓性链球菌和草绿色链球菌的活性并不优于青霉素类抗生素.肠球菌对头孢菌素类抗生素皆耐药,对亚氨甲基thienamycin比较敏感,半数菌株对脲基青霉素敏感.第三代头孢菌素和3种非典型β-内酰胺类抗生素对肠杆菌科细菌有极强抗菌活性,明显优于5种青霉素类抗生素和庆大霉素.流感杆菌对本实验采用的所有抗生素均敏感.硝酸盐阴性杆菌比较耐药,仅亚氨甲基thienamycin、Ceftazidime、头孢噻肟、头孢三嗪和哌拉西林对某些菌株有抗菌作用.多形模仿菌对5种青霉素类抗生素、第二代、第三代头孢菌素类抗生素(除头孢哌酮外)和亚氨甲基thienamycin敏感者约占半数.Ceftazidime对绿脓杆菌的作用最强,次为头孢哌酮和哌拉西林,再次为味苄青霉素、阿洛西林、Aztreonam、亚氨甲基thienamycin和头孢三嗪.除头孢哌酮外,第三代头孢菌素类抗生素和亚氨甲基thienamycin对产碱杆菌有较强活性.     

比较头孢唑肟与其他14种β内酰胺类抗生素对β内酰胺酶的稳定性

目的研究头孢唑肟对β内酰胺酶，特别是对CTX—M型超广谱酶的稳定性，并与临床常用β内酰胺抗生素比较。方法以超声破碎细菌得粗制β内酰胺酶，紫外分光光度法测定抗菌药物浓度，计算酶对底物水解率，并以头孢噻吩水解率为100％，计算其他被测药物的相对水解率。结果青霉素类以及第1代头孢对各型β内酰胺酶的稳定性均较差；14个酶中，11个对头孢呋辛的相对水解率在50％以下；第3代头孢菌素的酶稳定性较青霉素类及第1，2代头孢菌素增加；头孢唑肟、头孢他啶的酶稳定性最好，与氨曲南、头孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟相当，大多数酶对其相对水解率〈10％，且对CTX—M型酶的稳定性明显优于头孢噻肟和头孢曲松；美洛培南对各型酶均呈高度稳定；MIC值与酶稳定性结果一致。结论头孢唑肟对所测β内酰胺酶稳定性强，与头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南相当，对CTX—M型酶的稳定性优于头孢噻肟、头孢曲松。     

阴沟肠杆菌Amp C酶的特性研究

本文对阴沟肠杆菌ＡｍｐＣ酶进行了以下５个方面研究。其内容和结果分别为：（１）联合药敏实验：用平皿二倍稀释法研究第四代头孢菌素头孢吡肟,第三代头孢菌素头孢他啶、头孢噻肟、头孢呋辛与－β－内酰胺酶抑制剂舒巴坦联合对３４株头孢他啶耐药菌,６株头孢他啶中敏菌及１５株头孢他啶敏感菌的体外抗菌活性。结果表明舒巴坦使头孢他啶对３２．７％（１８／５５）的阴沟肠杆菌的抗菌作用有明显抗菌增效作用。９６．４％（５３／５５）的阴沟肠杆菌对第四代头孢菌素头孢吡肟敏感。（２）酶稳定性实验：紫外测定法测定４株标准菌和６株临床分离菌产生的ＡｍｐＣ酶对β－内酰胺类抗生素的水解率。结果表明阴沟肠杆菌产生的β－内酰胺酶对第一代头孢菌素头孢唑林、头孢氨苄,第二代头孢菌素头孢克洛,第三代头孢菌素头孢哌酮及青霉素、氨苄西林、哌拉西林的水解率高,对第二代头     

β-内酰胺酶抑制剂

众所周知,细菌对青霉素类和头孢菌素类耐药的最重要的机制之一是产生β-内酰胺酶。这种酶广泛地存在于革蓝氏阳性和阴性细菌中。近年来,许多重要的病原菌中产β-内酰胺酶菌株明显增加。表1列出伦敦一家医院从门诊病人分离出的耐药金葡菌出现的频率。从中看出,分离菌株中已有80％以上     

国产“万古霉素”主要成分的结构鉴别

国产“万古霉素”华北制药厂自投产至今已有十多年的历史,但与国外万古霉素相比,显示的生物效价与色谱行为不完全相同。经核磁共振(¹HNMR和¹³CNMR)、快原子轰击质谱(FABMS)及其水解产物的分析测定,表明国产“万古霉素”分子中不含N-甲基亮氨酸而只含亮氨酸。分子的其余结构部分与万古霉素完全相同。从而证明国产“万古霉素”实际上是N-去甲基万古霉素。     

中药地枫皮的化学成分研究

从中药地枫皮(Illicium difengpi K.I.B.et K.I.M.)中分离出3个化合物,经理化常数和波谱数据解析,分别鉴定为地枫皮素(Ⅰ),厚朴酚(Ⅱ)和β-谷甾醇(Ⅲ)。化合物Ⅰ为一新化合物,其化学结构为4-allyl-2,6-dirnethoxyphenyol cinnamate,命名为地枫皮素(difengpin)。化合物Ⅱ为首次从八角属植物中分离得到。     

中药独活活性成分香豆素及其甙的化学研究

独活为伞形科重齿毛当归(Angelica pubescens Maxim.F.biserrataShan et Yuan)的根及根茎,为常用中药,有祛风通络,活血舒筋,宜通百脉的作用。治腰膝酸痛,手脚挛痛。本研究证明独活有抑制血小板聚集抗血栓形成的作用,可能为独活善行血分,活血舒筋,宜通百脉的作用机制之一。我们将湖北资丘产独活以CH_2Cl_2,C_2H_5OH及H_2O提取,各提取部位分别按Born     

“山乌龟”的研究

本文对主要采自广西和云南的大量“山乌龟”原植物标本进行了研究,经鉴定共17种千金藤属植物。还研究了16个种的块根的药材特征,涉及生物碱的薄层层析和药材粉末的显微观察。薄层层析结果表明它们在生物碱的组分上是有差异的。对药材粉末的主要显微特征——淀粉粒、石细胞和草酸钙结晶作了描述与附图。从而为鉴定药材提供了依据。     

西藏红景天资源的调查

调查１０余种西藏红景天，其中大花红景天、狭叶红景天、四裂红景天、喜马红景天与云南红景天等五种，分布广，储藏量大，具有开发价值。     

“母婴乐”挂面催乳效果的临床观察

为观察“母婴乐”的催乳效果，选择３０例产后无乳或少乳，婴儿每日需加喂牛乳量超过生理需要量１／’２的产妇为“母婴乐”实验组。另取３０例为阳性对照组。实验组产妇每日食用“母婴乐”挂面１２５ｇｇ，分３次；对照组自行选食民间催乳食品，以相同的方法进行观察。     

马尾连的原植物与生药学研究

本文将调查采集到的商品及民间代黄连用的马尾连共20种,作了植物分类鉴定、生药形态组织观察,对其中10种作了生物碱的薄层鉴别及小檗碱含量分析等研究;结果证明20种马尾连均系唐松草属植物,其生药形态组织鉴别特征比较明显,有四种(金丝、昭通、高原、多叶)马尾连的小檗碱含量在1%以上。     

母鸡在排卵周期和抱窝血浆“黄体生成素类似物”和孕酮的浓度变化

本文用放射免疫分析法(RTA)测定了泰和母鸡在排卵周期和抱窝的不同生殖阶段,血浆“黄体生成素类似物”(“LH”)和孕酮(P)的浓度。结果表明:母鸡在排卵周期血浆“LH”和P的平均值分别为3.67±0.60ng/ml(x±SE)和459.50±30.87pg/ml,排卵前6～3h,血浆“LH”和P均出现浓度高峰,其峰值比相应的平均值高出1.1和1.3倍,差异非常显著(P<0.01)。抱窝鸡血浆“LH”和P在24h内的平均值分别为2.27±0.22ng/ml和319.46±12.15pg/ml,显著地低于母鸡在排卵周期的平均值(P<0.05),且在24h内的不同时间,未见有浓度高峰出现。