SLE患者外周血Th17细胞的表达及其临床意义

目的：探讨Th17细胞与系统性红斑狼疮（SLE）的发生及疾病活动性的相关性。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测正常人和SLE患者外周血单个核细胞（PBMCs）刺激培养上清液中IL-17的水平,并用流式细胞术（FCM）分析PBMCs中Th17细胞的频率。结果：与正常对照组相比,稳定期和活动期SLE患者PBMCs刺激后产生IL-17的量明显增高（P〈0.01）,Th17细胞的频率也高于正常对照组（P〈0.01）。与静止期患者相比,活动期SLE患者PBMCs产生IL-17的水平和Th17细胞的频率也明显增高（P〈0.05）。结论：Th17细胞可能通过分泌细胞因子IL-17参与了SLE发病及病情发展,其水平高低部分反映SLE疾病的活动性。     

干燥综合征患者Th17与调节性T细胞免疫失衡的观察

目的 检测干燥综合征（Sjogren＇s syndrome,SS）患者唇腺组织及外周静脉血中Th17细胞和调节性T细胞（Treg）相关细胞因子的表达水平,分析Th17/Treg免疫平衡在SS发病机制中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法,检测60例SS（实验组）和30例正常唇腺组织（对照组）中IL-17A、FOXP3mRNA的表达水平;另采用ELISA检测上述两组血清中IL-17、IL-10的含量.结果与对照组相比,SS患者唇腺组织内IL-17AmRNA的表达显著升高（P〈0.05）（SS者唇腺组织中FoxP3mRNA的表达降低（P〈0.05）SS患者血清IL-17水平明显高于对照组（P〈0.05）,SS患者血清IL-10水平明显低于对照组（P〈0.05）.结论 SS患者唇腺组织和外周血中Th17细胞应答增强,而Treg细胞免疫抑制下降;Th17/Treg免疫失衡可能参与SS的发生发展.     

冠状动脉粥样硬化患者外周血Th17细胞与 IL-17的水平及意义

目的 探究冠状动脉粥样硬化患者外周血Th17细胞与IL-17水平变化的意义。方法 收集青岛阜外心血管病医院冠状动脉粥样硬化患者200例,根据疾病类型分为心肌梗死（AMI）组（52例）、不稳定型心绞痛（UA）组（68例）、稳定型心绞痛（SA）组（80例）,另外选取同期200例体检者作为对照组。采用流式细胞术检测患者Th17细胞频率,ELISA法检测各组血清中IL-17、CRP表达水平。结果 流式细胞检测结果显示,与对照组比较,各组Th17细胞的频率表达均升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,且AMI组升高水平高于SA组和UA组,差异具有统计学意义（P＜0.05）; ELISA检测结果显示,与对照组比较,各组IL-17及CRP表达水平均升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,且AMI组升高水平高于SA组和UA组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 冠状动脉粥样硬化患者血中Th17及IL-17水平的升高,可能是导致冠状动脉粥样硬化患者板块不稳定的原因。     

IL-23在慢性乙型肝炎免疫调节中的作用研究

目的 探讨IL-23在慢性乙型肝炎免疫调节中的作用。方法 选取我院收治的32例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者为研究对象,根据ALT水平分为ALT≥120 IU/ml患者16例,ALT＜120 IU/ml患者16例,另外选择我院健康体检中心20例体检者作为健康对照组,采用酶联免疫分析法（ELISA）检测血清IL-23水平,采用流式细胞仪检测Th17细胞百分率。结果 与健康对照组相比,HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清IL-23表达及外周血Th17细胞百分率均升高,差异有统计学意义（P＜0.05）; ALT≥120 IU/ml患者血清IL-23浓度（394.81±101.84）pg/ml高于ALT＜120IU/ml的（283.69±85.65）pg/ml,ALT≥120 IU/ml患者Th17细胞百分率（3.25±0.70）%高于ALT＜120IU/ml的（2.68±0.61）%,差异均有统计学意义（P＜0.05）;慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞百分率、血清IL-23浓度与ALT程度呈正相关（P均＜0.05）;Th17细胞百分率与血清IL-23浓度呈正相关（P＜0.05）。结论 IL-23可能通过影响Th17细胞的免疫调节参与慢性乙型肝炎患者炎症,为临床提供了新的靶标。     

替比夫定治疗的慢乙肝患者中Th17细胞释放IL-26的变化研究

目的通过检测替比夫定治疗的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者中IL-26的动态变化及与其它炎症因子的相关性,揭示其在CHB疾病中可能的促炎作用。方法将51个CHB患者和28个健康人纳入本研究。收集患者在替比夫定(tebivudine,LdT)治疗期间(0、12、24、36和52周)外周血,分析HBsAg、HBeAg、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和HBV病毒载量等临床数据。流式细胞仪分离CD4~+T、CD4~-T细胞,酶联免疫吸附检测血浆中IL-26、IL-17蛋白水平,荧光定量PCR检测IL-26、RORγt的mRNA水平。结果与健康对照组相比CHB患者血浆IL-26水平显著升高,LdT治疗期间IL-26水平呈时间依赖性下降。治疗期间血浆IL-26浓度与T辅助17(Th17)细胞分泌IL-17水平呈相似的下降趋势。CHB患者外周血单个核细胞中IL-26~+CD4~+细胞百分率明显高于IL-26~+CD4~-细胞百分率,CD4~+T细胞表达的IL-26和RORγt的mRNA水平呈正相关,且随治疗进程其表达水平逐渐降低,提示Th17细胞可能是IL-26主要源细胞。结论在CHB患者的外周血中,IL-26主要由Th17细胞产生,是一种潜在的CHB预后和治疗的生物标志物。     

Th17/Treg及其相关细胞因子在结肠癌中的表达并与肿瘤分期的相关性

研究结肠癌患者肿瘤组织中Th17细胞、Treg细胞及患者外周血中相关细胞因子的表达水平,探讨其表达与肿瘤分期的相关性及可能机制。运用流式细胞分析(FACS)技术检测30例结肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中Th17细胞及Treg细胞的比例;采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测20例结肠癌患者外周血中Th17、Treg相关细胞因子IL-23和IL-10的表达水平。结果显示结肠癌肿瘤组织中Th17细胞和Treg细胞的比例明显高于癌旁正常组织(P<0.05),进展期肿瘤组织中Treg细胞的比例高于早期(P<0.05),而Th17细胞的比例较早期无明显差异(P>0.05),进展期肿瘤组织中Th17/Treg细胞的比例比早期偏低(P<0.05)。结肠癌患者外周血中IL-23、IL-10的mRNA水平升高,与健康对照组差异明显(P<0.05),且进展期与早期结肠癌IL-10mRNA的表达水平差异显著(P<0.05),而IL-23mRNA在两组间无明显差异(P>0.05)。随着结肠癌病程的进展,肿瘤组织内Th17细胞及Treg细胞的比例逐渐升高,且Treg细胞比Th17细胞升高更加明显。相关细胞因子IL-23和IL-10在患者外周血中的变化趋势和Th17、Treg细胞在肿瘤组织中的变化趋势相一致,提示Th17、Treg细胞在结肠癌的表达可能与肿瘤免疫微环境中相关的细胞因子调节有关。     

食管鳞癌患者肿瘤微环境中Th17细胞的表达及临床意义

目的:了解Th17细胞在食管鳞癌患者肿瘤微环境中表达水平,探讨其在食管鳞癌进展中的作用。方法:收集健康人外周血、食管鳞癌患者外周血、癌旁组织、癌组织标本,流式细胞术检测Th17细胞水平;实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测RORγt、IL-17a mRNA表达水平。结果:食管鳞癌患者外周血、癌旁组织、癌组织中Th17细胞水平和RORγt、IL-17a mRNA表达水平较健康人外周血均升高,且癌组织>癌旁组织>患者外周血>健康人外周血,差异有统计学意义(均P<0.05)。食管鳞癌患者外周血中Th17细胞水平升高与患者性别、年龄、肿瘤大小无明显关系,但与有无淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.01)。结论:食管鳞癌患者肿瘤微环境中Th17细胞水平和RORγt、IL-17a mRNA表达水平均升高,Th17细胞可能通过RORγt和IL-17a参与食管鳞癌进展过程。     

Th17/Treg失衡在重症肺炎中的作用及其意义

目的：探讨Th17/Treg在评估重症肺炎病情和预后中作用。方法收集2011年6月至2013年6月我院确诊并住院治疗的重症肺炎患者400例,正常对照者200例。流式细胞术分析重症肺炎组和对照组外周血Th17细胞和Treg细胞的百分率,酶联免疫吸附实验( enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测各组外周血细胞因子IL-17和IL-10的表达水平。结果重症肺炎患者外周血Th17和Treg的百分率及细胞因子IL-17较对照组均明显升高,而IL-10表达水平明显低于对照组,差异均具有统计学意义( P<0．05)。进一步分析显示重症肺炎中继发多器官功能衰竭综合症( multiple organ dysfunction syndrome, MODS)组患者Th17和Treg的百分率,外周血IL-17表达水平均明显高于非MODS组,外周血IL-10表达水平明显低于非MODS组,差异均具有统计学意义( P<0．05)。死亡患者Th17和Treg的百分率,外周血IL-17表达水平均明显高于存活组,外周血IL-10表达水平明显低于存活组,差异均具有统计学意义( P<0．05)。结论 Th17/Treg失衡参与了重症肺炎的发生发展,检测外周血Th17和Treg的百分率及其相应细胞因子水平对评估重症肺炎的病情和预后有重要的临床意义。     

梅毒血清固定患者外周血Th17细胞的检测

目的检测梅毒血清固定患者外周血Th17细胞的细胞比例和相关细胞因子的变化,初步探讨Th17细胞在梅毒血清固定现象中的作用。方法梅毒血清固定患者30例,同时以30例健康体检人作为对照组。采用流式细胞术(Flow cytometry, FCM)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cel s, PBMC)中Th17细胞在CD4+T细胞中的比例;采用实时定量PCR方法检测Th17细胞特异性转录因子孤独受体γt（orphan nuclear receptor gammat , RORγt）及细胞因子IL-17mRNA的表达。结果梅毒血清固定患者外周血Th17细胞比例及RORγt和IL-17的表达量显著低于健康对照组（P<0.05）。结论 Th17细胞的异常可能是梅毒血清固定现象形成的重要原因之一。     

Th17和 Treg 细胞及其相关细胞因子在结核性胸膜炎患者中的变化及意义

目的检测健康人和结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞和调节性T细胞（ Treg细胞）（ CD4＋CD25＋Foxp3＋）在CD4＋T细胞中的表达率以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β血清水平和患者胸水中的IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,研究Th17细胞和调节性T细胞以及IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β在结核性胸膜炎发病机制中的作用。方法使用流式细胞术检测患者以及健康对照人群外周血Th17细胞和调节性T细胞表达率,ELSIA方法定量检测血清以及胸水中IL-17、IL-23、IL-6、TGF-β水平,使用SPSS17．0统计学软件,分析健康人和结核性胸膜炎患者上述指标之间的差异以及各指标间的相关性。结果结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞表达率（1．02％±0．20％）明显高于健康人外周血Th17细胞表达率（0．89％±0．13％,P＝0．002＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血调节性T细胞表达率（4．64％±0．77％）明显低于健康人外周血调节性T细胞表达率（5．10％±0．90％,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者Th17/Treg细胞的比率（0．25±0．07）明显高于健康人（0．17±0．05,P＝0．000＜0．05）;结核性胸膜炎患者外周血IL-17（17．49 ng/L±3．94 ng/L）和IL-23（90．42 ng/L±23．06 ng/L）水平和胸水中IL-17（26．13 ng/L±5．98 ng/L）和IL-23（122．26 ng/L±31．71 ng/L）水平显著高于对照组外周血IL-17（14．45 ng/L±3．81 ng/L）和IL-23（77．55 ng/L±20．26 ng/L）的水平,P值分别为0．022、0．039、0．000、0．000;患者胸水中IL-17和IL-23浓度也显著高于本人血液中的IL-17和IL-23浓度,P值为0．000和0．000;患者胸水中IL-6的浓度（5．31 ng/L±0．74 ng/L）显著高于患者血液中IL-6的浓度（4．54 ng/L±1．02 ng/L）和对照组血液中IL-6的浓度（4．26 ng/L±0．91 ng/L）,P值分别为0．003和0．000,患者血液与对照组血液中IL-6的浓度没有显著差别（P＝0．274）;对照组外周血液TGF-β浓度（3．95 ng/L±0．79 ng/L）显著高于患者外周血液TGF-β浓度（3．32 ng/L±0．80 ng/L）及胸水中TGF-β浓度（3．12±0．77）,P值分别为0．005和0．000,患者血液及胸水中TGF-β水平之间没有显著差别（P＝0．365）;结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其Treg细胞在外周血的表达率呈显著负相关（r＝-0．684, P＝0．000＜0．05）,结核性胸膜炎患者外周血Th17细胞的表达率与其外周血中的IL-17、IL-23、IL-6水平呈明显的正相关（r＝0．479,0．441,0．326,P＝0．013,0．015,0．017）;患者血液中TGF-β水平与Treg细胞在外周血的表达率呈明显的正相关（r＝0．297,P＝0．024）,与Th17细胞表达率没有明显相关性（r＝0．091,P＝0．659）。结论 Th17和Treg细胞可能参与了结核性胸膜炎的免疫病理机制,有关细胞因子的变化可能参与了Th17和Treg细胞变化的调控以及炎症反应, Th17和Treg细胞以及有关细胞因子的变化可能是结核性胸膜炎重要的免疫病理机制。     

Th17细胞及其分泌的IL-17在自身免疫性溶血性贫血患者中的变化及意义

目的:观察辅助性17 T细胞(Th17)及其分泌的细胞因子IL-17在自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者中的变化并探讨其临床意义.方法:应用流式细胞术(FCM)检测治疗前与糖皮质激素治疗后AIHA患者和健康人外周血中Th17细胞的比率,同时用ELISA法检测血浆中IL-17的水平.结果:治疗前AIHA患者外周血中Th...     

CD4~+效应T细胞在自身免疫性溶血性贫血患者外周血的变化研究

目的研究自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者外周血中效应T细胞亚群Th1和Th17数量和比例的变化,探讨其在AIHA发病中的作用。方法选择30例AIHA患者,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测Th1和Th17细胞频率,用ELISA测定培养上清中IFN-γ和IL-17水平,并与健康对照组比较。结果 AIHA患者PBMC中IFN-γ+Th1和IL-17+Th17细胞频率均显著高于健康对照组(P<0.01);而且,AIHA患者外周血IL-17水平明显高于健康对照组(P<0.05),但IFN-γ水平在患者和正常人之间差异不显著。结论Th17与Th1细胞亚群可能参与AIHA患者的免疫学发病机制。     

Higher levels of interleukin IL‐17 and antigen‐specific IL‐17 responses in pulmonary sarcoidosis patients with Löfgren's syndrome

Sarcoidosis is a granulomatous disorder of unknown aetiology. The presence of Mycobacterium tuberculosis catalase-peroxidase (mKatG) in sarcoidosis tissue has been reported. T helper type 1 (Th1) responses against mKatG have previously been observed. However, little is known about interleukin (IL)-17 and Th17 responses in sarcoidosis. Here, we investigated the levels of IL-17 and frequencies of IL-17-producing cells responding to mKatG in sarcoidosis patients with different prognosis. Peripheral blood and bronchoalveolar lavage (BAL) cells were obtained from sarcoidosis patients with or without Löfgren''s syndrome (often associated with spontaneous recovery), and also stratified according to human leucocyte antigen (HLA) type. Cells producing IL-17 and interferon (IFN)-γ after stimulation with mKatG were enumerated by enzyme-linked immunospot (ELISPOT). The level of IL-17 in the BAL fluid of sarcoidosis patients and healthy controls was measured by quantitative immuno-polymerase chain reaction (qIPCR). We also performed flow cytometry and immunohistochemistry for further characterization of IL-17 expression. Patients with Löfgren''s syndrome had a higher frequency of IL-17-producing cells responding to mKatG in BAL fluid compared to patients without Löfgren''s syndrome (P < 0·05). The HLA-DR3⁺ sarcoidosis patients with Löfgren''s syndrome (known to have a particularly good prognosis) also had a clearly higher level of IL-17 in BAL fluid compared to healthy controls and sarcoidosis patients without Löfgren''s syndrome (P < 0·01) and (P < 0·05), respectively. No such difference between patient groups was observed with regard to IFN-γ and not with regard to either cytokine in peripheral blood. These findings suggest that IL-17-producing cells may be a useful biomarker for the prognosis of sarcoidosis and play a role in the spontaneous recovery typical of patients with Löfgren''s syndrome.     

乙肝病毒蛋白对慢性乙型肝炎患者PBMCs功能的影响

目的：乙肝病毒蛋白对不同感染状态慢性乙型肝炎患者的外周血单核细胞（PBMCs）功能的影响。方法：收集乙肝表面抗原（HBeAg）阳性丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常者40例（A组）， 乙肝e抗原（HBeAg）阳性ALT持续正常者20例（B组）， HBeAg及 乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）阴性ALT正常者20例（C组），另外选择15例各型肝炎病原学标志检测均为阴性的健康体检者为正常对照组，分离培养外周血单核细胞，加入植物血凝素（PHA）、HBeAg、HBcAg, 培养48 h后，1 500 r/min 离心10 min,收集上清液-20 ℃保存，统一检测IFN-γ、IL-10含量。采用流式细胞仪检测外周血CD8＋CD28＋T细胞亚群。结果：IFN-γ在HBeAg阳性ALT正常组，HBeAg阳性ALT异常组中的含量明显低于正常对照组和HBeAg及 HBV-DNA阴性ALT正常组；IL-10在HBeAg阳性ALT正常组，HBeAg阳性ALT异常组中的含量明显高于正常对照组和HBeAg及 HBV-DNA阴性ALT正常组。CD8＋CD28＋T细胞在HBeAg阳性ALT正常组中明显低于其它各组。结论：HBeAg阳性的患者，Th1型细胞免疫反应明显低下，Th2型细胞免疫反应明显增高，CTL的数量减少。     

外周血Th17细胞对慢性阻塞性肺疾病症状严重程度及预后的评估价值

 目的: 观察Th17细胞水平与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者症状严重程度及预后因素的相关性,以期探讨Th17细胞水平在判断COPD临床预后方面的可能价值。方法: 选取2013年5月～2014年12月我院就诊的110例COPD患者为研究对象,40例健康体检者为对照组。根据COPD全球倡议(GOLD)将COPD患者分为A组(低危、症状轻)、B组(低危、症状重)、C组(高危、症状轻)及D组(高危、症状重),给予吸入性糖皮质激素/长效β₂受体激动剂或吸入性糖皮质激素/长效β₂受体激动剂+长效胆碱能药物治疗,收集患者治疗前及治疗3个月后相关临床资料,包括外周血Th17细胞比例、细胞因子(IL-17和IL-6)、慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT)评分、年龄、体重指数、肺功能指标及诊断前12个月COPD急性加重(AECOPD)次数,分析Th17细胞水平与其它临床特征间的相关性。结果: COPD患者外周血Th17细胞、IL-17及IL-6水平显著高于对照组(P < 0.05)。随着COPD症状严重程度的增加,B、D组COPD患者外周血Th17细胞、细胞因子(IL-17和IL-6)水平及CAT评分显著高于A、C组患者(P < 0.05)。单变量相关分析发现,治疗前B、D组外周血Th17细胞水平与CAT评分呈正相关(P < 0.05),而与FEV₁ 、FEV₁%Pred、FVC及FVC%Pred呈负相关(P < 0.05);A、C组外周血Th17细胞水平与CAT评分、FEV₁、FEV₁%Pred、FVC及FVC%Pred无明显相关性。治疗后外周血Th17细胞水平与CAT评分呈正相关(P < 0.05),而与FEV₁、FEV₁%Pred、FVC及FVC%Pred呈负相关(P<0.05)。结论: 外周血Th17细胞水平与COPD患者IL-17、IL-6、CAT评分及肺功能指标有较好的相关性,具有评估COPD患者症状严重程度及预后的潜在临床价值。     

Activation of Peripheral Th17 Lymphocytes in Patients with Asthma

A recently identified interleukin (IL)-17-producing T-helper (Th) lymphocyte subset, which comprises Th17 cells producing hallmark cytokines IL-17A, IL-17F and IL-22, is involved in chronic inflammatory diseases. Elevated gene and protein expressions of IL-17 are manifested in allergic asthma. We further characterized the activation of Th17 cells in asthmatic patients. Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were purified from 31 asthmatic patients and 20 sex- and age-matched control subjects. The number of IL-17A secreting cells in peripheral blood was enumerated by enzyme-linked immunosorbent spot assay. Cell surface expression of Th17-related chemokine receptor CCR6, and plasma level of IL-17A, IL-17F and IL-22, and ex vivo production of IL-17A and IL-22 were measured by flow cytometry and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. The number of peripheral Th17 lymphocytes, expression of CCR6 on Th cells, and ex vivo IL-23, anti-CD3 and anti-CD28 induced production of IL-22 by PBMC were significantly elevated in asthmatic patients compared with control subjects (all p < 0.01). This clinical study further confirmed increased number of peripheral Th17 lymphocytes and cell surface expression of CCR6 receptors on Th cells in asthmatic patients. Pro-inflammatory cytokine IL-23 can exacerbate disease severity by activating pathogenic Th17 lymphocytes to release downstream inflammatory cytokine IL-22 in asthma.