模拟失重环境碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨在模拟失重环境下碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响. 方法 试验分对照组、模拟失重组和模拟失重加hPDLF组3组.采用酶消化组织块培养法分离、培养原代hPDLF.应用噻唑蓝比色法,检测模拟失重条件下,不同时间和不同浓度的bFGF对hPDLF增殖的影响. 结果 在模拟失重12h、24h组hPDLF增殖较对照组没有显著差别,在48h、72h模拟失重组较对照组显著降低,差异有统计学意义(t=7.303、8.668,P<0.01).模拟失重48 h时bFGF浓度在50～100μg/L范围内加bFGF组hPDLF增殖高于模拟失重组,差异有统计学意义(P<0.05),而bFGF浓度为1～10μg/L时,两组没有显著差别. 结论 模拟失重在48 h、72 h对hPDLF的增殖有抑制作用,模拟失重环境bFGF浓度在50～100μg/L范围内具有促进hPDLF增殖的效应.     

低氧对成纤维细胞胶原合成的影响

低氧对成纤维细胞胶原合成的影响李月娟高亚兵王德文姚玉陆刘彤作者单位：１００８５０，北京放射医学研究所放射性间质纤维化是放疗和核事故的重要并发症之一，严重时可危及生命，且难以逆转［１］。成纤维细胞是结缔组织的主要细胞成分。使用６０Ｃｏγ射线照射离体培养...     

三维回转模拟微重力对拟南芥根尖基因表达谱的影响

目的从分子水平上分析和阐述植物根尖对模拟微重力效应的反应。方法以三维回转仪模拟微重力效应,回转处理7 d大小的拟南芥幼苗15 min。利用基因芯片技术,分析模拟微重力下拟南芥mR-NA表达谱的变化。结果拟南芥根尖细胞有392个基因的表达发生了显著变化,其中347个基因表达上调,45个基因表达发生下调。结论模拟微重力效应可以影响拟南芥根尖基因的表达,这些差异表达基因的功能涉及到植物的许多生命过程,包括抗逆反应、细胞壁物质合成、基因转录和信号转导等。     

碱性成纤维细胞生长因子的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是成纤维细胞生长因子蛋白(fibroblast growth factors,FGFs)家族中的一员。目前已发现至少22种FGF,其中FGF-1(aFGF)、FGF-2(bFGF)及FGF-7的研究较为深入。bFGF是哺乳动物和人体中一种非常微量的活性物质,因其具有     

力学刺激对肌成纤维细胞转归的影响

成纤维细胞 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＦＢ)是创伤愈合中的主要修复细胞 ,不仅有旺盛的合成功能 ,还可以分化成一种类似平滑肌细胞、具有收缩功能的细胞亚型肌成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＭＦＢ)。ＭＦＢ表达有平滑肌细胞特有的α -平滑肌肌动蛋白 (α -ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ ,α -ＳＭＡ) ,其特征还包括双极型的细胞形态 ,大量的应力纤维及转膜连接的形成。ＭＦＢ的出现促进了伤口收缩 ,有利于创面愈合。ＭＦＢ可短暂地出现在正常愈合的伤口中 (如手术切口 ) ,创面愈合后便很快消失 ,如果ＭＦＢ持续存在 ,则导致…     

成纤维细胞生长因子7、10及其受体2Ⅲb在小鼠肾脏发育中的表达

目的观察成纤维细胞生长因子7、10(FGF7、FGF10)及其受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)在不同发育阶段的小鼠肾脏的表达变化情况,探讨其与肾脏发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d胎鼠和生后N1、3、7、14、21和42d仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定位观察;应用体视学方法及Western blotting法对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定性分析和定量检测。结果免疫组织化学法显示,E12d时,FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb开始在输尿管芽微弱表达;随着肾脏发育成熟,三者主要表达于远端小管和集合管。FGF10在近曲小管表达,近直小管无表达;FGF7和FGFR2Ⅲb在近端小管无表达。生后肾组织及发育各阶段肾小体未见FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb的表达。体视学和Western blotting结果显示,从E14d至N7d,三者在肾脏的表达量明显增加,N7d至N42d表达量逐渐减少。结论 FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb在肾脏发生和发育过程中可能起着重要作用。FGF10主要作用于近曲小管、远端小管和集合管,而FGF7和FGFR2Ⅲb主要作用于远端小管和集合管。     

创面巨噬细胞分泌物对成纤维细胞的调节作用

采用体外培养体系研究家兔不同时期皮肤创面巨噬细胞上清液和冻融液对创面成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的调节作用。用皮下埋置自制不锈钢管法，直接获取手术后７、１４、２１、２８天活化的创面巨噬细胞，贴壁纯化后培养４８小时收集上清液；细胞经－３０℃与３７℃反复冻融３次收集冻融液。从兔皮肤３～５天刨面取新生肉芽组织，经组织培养获取创面成纤维细胞。测定成纤维细胞中３Ｈ－胸腺嘧啶和３Ｈ－脯氨酸的掺入量。结果上清液对成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成具有不同程度的促进作用；冻融液主要表现为抑制作用。说明巨噬细胞能合成或分泌某些生物活性物质调节成纤维细胞的活动，从而控制创伤愈合的进程。     

c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响

目的 研究原癌基因c—ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响，并探讨其可能的机理。方法 采用Annexin—V—FITC—PI标记的方法。通过流式细胞仪检测2—8Gy的软X线照射对培养的大鼠皮肤成纤维细胞凋亡的影响；观察转染c—ski基因后细胞凋亡的变化；并采用Western blot检测c—ski对凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果 软X线照射以剂量依赖的方式增加细胞凋亡，并且随着时间的延长进一步增加，大约在36h时达到峰值。转染c—ski基因使4Gy照射24h后的成纤维细胞凋亡率显著下降。转染c—ski基因48h后，Bax的表达和对照组差异无统计学意义，而Bcl-2的表达显著增加。结论 c—ski可降低成纤维细胞的辐射敏感性，促进Bcl-2的表达可能是其机理之一。     

模拟失重对人牙周膜成纤维细胞生物学性能的影响

目的 观察三维回转模拟失重对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hP-DLFs)形态和功能的影响.方法 回转组hPDLF细胞运用三维回转器(TDC)分别培养48 h,72 h和96 h,对照组常规培养.利用HE染色、细胞计数法、MTT活性检测、流式细胞术、H...     

模拟微重力对猕猴脾脏结构、脾脏免疫细胞及其细胞因子表达的影响

目的 探讨模拟微重力对猕猴脾脏结构及免疫细胞表面分子和相关细胞因子表达的影响.方法 在特殊装置上将猕猴置于头低位-10°以模拟微重力.将15只猕猴随机均分为对照组(NC组)、模拟微重力组(SM组)和模拟微重力后恢复组(MR组),每组5只.完成实验后,猕猴在麻醉状态下放血处死,取脾脏组织标本进行HE和免疫组化染色.观察各组猕猴脾脏大体结构,检测脾脏免疫细胞表面分子CD3、CD4、CD8、CD20、CD68及相关细胞因子(IL-1β、IL-5、IL-6、IL-17、IL-18、IL-22、IL-23)的表达.结果 NC组脾脏组织结构正常,SM组脾脏红、白髓分界不清,白髓缩小,动脉周围淋巴鞘减小,淋巴细胞排列紊乱,MR组改变较SM组轻.免疫组化结果显示,与NC组和MR组比较,SM组脾脏表达CD3+、CD4+、CD20+的免疫细胞数目降低,CD8+免疫细胞数目增高,IL-5分泌水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 模拟微重力可引起猕猴脾脏组织结构损伤,对CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD20+B细胞数目有一定影响,并能影响细胞因子IL-5分泌,这可能与模拟微重力引起免疫系统功能受损有关.     

小鼠尾悬吊法模拟微重力对骨代谢的影响

 目的 研究模拟微重力条件对小鼠骨代谢的影响。方法 8周龄野生型C57小鼠,分别尾悬吊0周(对照组)、2周、4周,检测小鼠血清生化指标(Ca²⁺、ALP、BGP);分离股骨行Micro-CT扫描,检测股骨微观结构的改变;三点弯曲试验检测股骨的力学性能。所得数据用SPSS18.0进行统计学分析。结果 与对照组相比,尾悬吊2、4周组小鼠血清Ca²⁺浓度依次升高,而血清ALP、BGP浓度逐渐降低:血清Ca²⁺在悬吊0、2、4周值为(2.134±0.081)mmol/L,(2.261±0.079)mmol/L,(2.388±0.061)mmol/L,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);血清ALP浓度为(4.598±0.478)U/100 ml,(3.447±0.393)U/100 ml,(3.142±0.328)U/100 ml,差异具有统计学意义;血清BGP浓度(8.529±0.523)ng/ml、(8.108±0.392)ng/ml、(7.832±0.282)ng/ml。股骨Micro-CT扫描结果显示:悬吊组小鼠股骨骨小梁数量减少,间隙增大,厚度降低,其中以骨体积比下降最为明显,悬吊2、4周值为对照组的47.3%、14.3%。三点弯曲结果显示尾悬吊后股骨极限强度及弹性模量均降低,对力耐受减弱,对照组、悬吊2、4周股骨骨折断裂能量为(6.220±0.482)mJ;(4.395±0.301)mJ;(2.855±0.425)mJ,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。结论 尾悬吊法能造成小鼠骨钙流失和骨质疏松,且严重程度与悬吊时间成正相关。     

模拟微重力条件下奥金肽对MC3T3-E1前成骨细胞增殖的影响

目的：研究模拟微重力（simulated microgravity,SMG）条件下奥金肽（osgentide, OST）对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖功能的影响。方法在正常细胞培养环境下,利用MTT法检测6种OST化合物对MC3T3-E1细胞增殖的影响,从中筛选出有效作用浓度的化合物,进一步利用 MTT 实验及流式细胞术分别检测 SMG 条件下1 nmol／L OST5对MC3T3-E1细胞的增殖效应及细胞周期的分布。结果在正常细胞培养环境下,1 nmol／L OST5对MC3T3-E1细胞的增殖具有显著促进作用（P＜0．01）。 MTT实验结果表明,与正常细胞培养环境相比,MC3T3-E1细胞在SMG条件下其增殖受到显著抑制。在SMG条件下,用1 nmol／L OST5处理MC3T3-E1细胞（ OST-SMG）3 d,流式细胞术检测结果表明,SMG促使更多的MC3T3-E1细胞进入G1期。1 nmol／L OST5处理MC3T3-E1细胞后S期比例比SMG条件下显著提高（P＜0．05）,表明OST5能够促进DNA合成。结论在SMG条件下,OST5能够促进成骨细胞的增殖,为研究OST5对模拟微重力相关的骨丢失防治提供了理论依据。     

Effect of UVC radiation on mouse fibroblasts deficient for FAS-associated protein with death domain

Purpose: Ultraviolet (UV) radiation-induced apoptosis enabled us to study the mechanism of DNA damage and to investigate how cells avoid consequences of damaged DNA. Cells with extensive DNA damage activate extrinsic and intrinsic pathways of apoptosis. The extrinsic pathway is coupled to a FAS-associated protein with death domain (FADD), an adaptor protein molecule necessary for mediating apoptotic signals through the cell.

Materials and methods: Viability and apoptosis of wild-type and FADD-deficient mouse embryonic fibroblasts were investigated 1, 3, 24 and 48?h after exposure to three doses (50, 75 and 300 J/m²) of UVC radiation. Morphological changes were observed using DNA binding dyes (Hoechst and propidium iodide) while biochemical changes were monitored using immunodetection of the poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) protein cleavage and caspase-3 activity assay.

Results: Results showed that the difference in cell death response between wild-type and FADD-deficient cells depended on dose and incubation time after exposure to UVC radiation. FADD-deficient cells are more sensitive to UVC radiation. Even though FADD-deficient cells lack an adapter protein of apoptotic extrinsic pathway, higher doses of UVC triggered their apoptotic response, while wild-type cells die mainly due to necrosis. A different pattern of caspase 3 activity and PARP cleavage was observed 24?h after radiation between two cell lines confirming higher apoptotic response in FADD-deficient cells.

Conclusions: Wild-type cells can execute apoptosis via both, the mitochondrial and the receptor-mediated pathway whereas FADD-deficient cells can only activate the intrinsic pathway. There is a difference in UVC radiation response between two cell lines indicating the role of FADD in the selection of cell death modality.     

1 G和模拟微重力下前列腺癌细胞PC-3对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1增殖和活性的影响

目的　探讨1 G和模拟微重力条件下前列腺癌细胞分泌物对成骨细胞增殖和活性的影响,以期今后用于对抗微重力导致的骨质丢失以及常人的骨质疏松。　方法　1 G条件下,将小鼠成骨样细胞MC3T3 E1与人前列腺癌细胞PC 3分别接种在混合培养板的外室和内室中培养48 h, 用MTT法检测MC3T3 E1的增殖、用PNPP法检测MC3T3 E1 的碱性磷酸酶(ALP)活性。回转器模拟微重力条件下,将培养过PC 3的培养液加入到培养24 h的MC3T3 E1培养瓶中,培养瓶固定于回转器,转速20 r/min 下继续培养48 h 后,用MTT 法检测MC3T3 E1 的增殖、用PNPP 法检测MC3T3 E1的ALP活性。　结果　1 G条件下,与PC 3混合培养后,MC3T3 E1的增殖和ALP活性均较对照组有显著增加(P<0 05)。回转模拟微重力条件下MC3T3 E1 的增殖和ALP活性比静止对照组有显著下降(P<0 05),与微重力可导致骨质丢失的现象相一致。回转培养、加PC 3 培养液的MC3T3 E1的增殖和ALP活性比回转对照组有增加趋势,但不具统计学意义(P>0 05)。　结论　前列腺癌细胞确实分泌了某种因子可刺激成骨细胞的增殖和活性,模拟微重力条件的实验结果没有1 G条件的显著,这可能是实验方法不同所导致,有待进一步深入研究。     

阿托伐他汀对心脏成纤维细胞MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的：观察阿托伐他汀（atorvastatin）对心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-9/组织型基质金属蛋白酶抑制因子-1（MMP-9/TIMP-1）表达的影响。方法：体外培养乳鼠心脏成纤维细胞（CF）,做细胞形态观察和心脏成纤维细胞标志性波形蛋白免疫荧光组化检测,明胶酶谱法测定MMP-9的活性,RT-PCR检测MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果：AngⅡ增加MMP-9的活性及mRNA的表达（P〈0.05）,同时TIMP-1的mRNA表达减少（P〈0.05）,阿托伐他汀在某种程度上可逆转上述变化（P〈0.05）。结论：Aorvastatin通过对MMP-9/TIMP-1表达的影响作为预防和治疗房颤的重要机制之一。     

肥大细胞类胰蛋白酶对人肾成纤维细胞MCP-1和PAR-2表达的影响

目的进一步探讨肥大细胞类胰蛋白酶在慢性肾组织纤维化中的作用。方法采用胶原酶消化法从肾肿瘤患者切除的肾标本获取肾组织(经光镜检查,无肿瘤细胞浸润)分离、培养人肾间质成纤维细胞。应用细胞形态学、免疫细胞化学鉴定培养的细胞为人肾成纤维细胞后,分组进行下一步实验。应用RT-PCR检测单核细胞趋化因子1(MEP1)和蛋白水解酶激活受体2(PAR-2)mRNA的表达。结果成功培养了人肾成纤维细胞,肥大细胞类胰蛋白酶(10～500ng／ml)可促进肾间质成纤维细胞：PAR-2和MCP-1mRNA的表达,且依赖于肝素的存在。蛋白水解酶抑制剂苯甲脒(200μmol／L)能抑制类胰蛋白酶的上述效应。TGF-β中和抗体不影响上述效应。结论肥大细胞类胰蛋白酶可能通过PAR-2直接作用于肾问质成纤维细胞,促进人肾成纤维细胞表达MCP-1,参与肾间质纤维化过程。     

模拟失重对苯吸入染毒大鼠细胞免疫及微核形成的影响

目的探讨模拟失重对苯吸入染毒大鼠免疫系统及遗传毒性的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、15 mg/m3苯组、30 mg/m3苯组、尾吊对照组、15 mg/m3苯尾吊组,30 mg/m3苯尾吊组,每组10只。非染毒大鼠吸入新鲜空气,染毒大鼠放入0.9 m3透明染毒柜中,分别吸入苯15 mg/m3和30 mg/m3,连续染毒30天。结果尾吊可使体重明显降低,并可减少苯对脾脏器系数的影响;加剧苯对白细胞、淋巴细胞、NK细胞活性和巨噬细胞功能的影响;可促进苯对外周血淋巴细胞和骨髓细胞微核率升高。结论模拟失重可促进苯吸入染毒大鼠机体的细胞免疫紊乱和遗传毒性作用。     

P物质对病理性瘢痕成纤维细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨P物质(SP)对病理性瘢痕成纤维细胞凋亡相关基因表达的影响。方法 体外培养瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞．采用细胞爬片免疫组织化学方法检测在SP及SP受体拮抗剂Spantide作用下不同成纤维细胞PCNA、bcl-2、bax的表达。结果 SP可促进不同成纤维细胞PCNA、bcl-2的表达．同时抑制其bax的表达。在SP作用下．瘢痕疙瘩成纤维细胞PCNA、bcl-2表达的增强程度及bax表达的受抑程度显著强于增生性癜痕成纤维细胞和正常成纤维细胞．而增生性癜痕成纤维细胞又强于正常成纤维细胞。Spantide可以完全或部分拮抗SP对不同成纤维细胞的作用,结论 SP通过调控成纤维细胞凋亡相关基因的表达参与病理性瘢痕形成,该作用由SP受体介导。