抑郁症患者药物治疗前后单核细胞中microRNA表达水平变化与抑郁症状的关系

目的探讨抑郁症患者药物治疗前后单核细胞中micro RNA(mi RNA)的表达水平与抑郁症状的关系。方法纳入2012年8月-2013年10月解放军102医院收治的81例未经药物治疗、符合DSM-Ⅳ诊断标准的抑郁症患者作为病例组,纳入同期81例正常人作为对照组。抽取3例患者和3例正常人,采用基因芯片筛查出26种mi RNA,然后以实时荧光定量PCR技术检测两组单核细胞中9种mi RNA(mi R-146b、mi R-1972、mi R-26b、mi R-29b、mi R-338、mi R-4485、mi R-4498、mi R-4743和mi R-874)的表达水平。选取病例组中20例患者,分别在用药前和用药(包括文拉法辛、舍曲林、米氮平等)6周后检测mi RNA表达水平,并采用汉密顿抑郁量表(HAMD)和临床疗效总评量表(CGI)对治疗前及治疗6周后的临床症状及疗效进行评估。结果与对照组比较,病例组单核细胞中5种mi RNA(mi R-26b、mi R-4743、mi R-4498、mi R-4485、mi R-1972)表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。抗抑郁药治疗前后,Δmi RNA-1972、Δmi RNA-4485、Δmi RNA-4498、Δmi RNA-4743与阻滞因子的改善程度呈正相关(P<0.05),Δmi RNA-26b与日夜变化因子的改善程度呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,mi RNA-4485能解释阻滞因子变异量的28.8%(P<0.05)。结论抑郁症患者单核细胞中mi R-26b、mi R-4743、mi R-4498、mi R-4485和mi R-1972可能作为反映抑郁症转归的生物标记物。     

精神分裂症患者外周血microRNA表达水平在抗精神病药物治疗前后的变化

目的观察抗精神病药物治疗前后精神分裂症患者外周血部分micro RNA(mi RNA)表达水平的变化。方法选择2012年7月-2013年5月解放军102医院连续收治的61例精神分裂症患者(病例组)和62例正常对照(对照组),采用实时定量荧光PCR检测两组血浆中9种mi RNA(mi R-181b、mi R-195、mi R-132、mi R-212、mi R-30e、mi R-346、mi R-34a、mi R-432、mi R-7)的相对表达水平。选其病例组中阳性与阴性症状量表(PANSS)总分>70分的25例患者,分别在用药前、用药(包括奥氮平、奎硫平、齐拉西酮和利培酮)3周和用药6周时重复检测mi RNA表达水平,并采用PANSS、大体评定量表(GAS)和临床疗效总评量表(CGI)对不同治疗阶段的临床症状及疗效进行评估。结果与对照组比较,病例组血浆mi R-181b、mi R-30e、mi R-346、mi R-34a和mi R-7表达水平显著增高(P<0.05或P<0.01)。与用药前比较,25例患者用药3周后血浆mi R-132表达水平显著降低(P<0.05),用药6周后血浆mi R-132、mi R-181b、mi R-30e和mi R-432表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。25例患者用药6周后,血浆中9种mi RNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。用药过程中,25例患者血浆mi R-132、mi R-195、mi R-30e和mi R-432表达水平与PANSS总分及GAS得分均呈显著相关(P<0.05)。结论 mi R-181b、mi R-132、mi R-30e和mi R-432可能作为预测精神分裂症疾病转归的联合生物标记物。     

乙型肝炎病毒基因组转染HepG2细胞的microRNA表达研究

目的 检测乙型肝炎病毒(HBV)全基因组转染对人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞中microRNA(miRNA)表达的影响,为进一步探讨肝细胞中HBV复制的分子生物学机制提供平台.方法 分别提取HepG2.2.15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞,实验组)和其亲本HepG2细胞(对照组)的总RNA并分离miRNA,采用含509条探针的哺乳动物miRNA表达谱芯片对两组之间差异表达的miRNA进行分析.用SAM软件针对差异miRNA筛选的标准为在两组之间荧光强度差异4倍以上,差异miRNA的整体假阳性率为0.选择其中2个miRNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法对芯片结果进行验证.结果 HepG2.2.15细胞与HepG2细胞间差异表达的miRNA共27个(占5.3%),其中7个表达上调,20个表达下调.miR-181d和miR-15a的实时荧光定量RT-PCR验证结果与芯片表达结果基本一致.结论 肝细胞中存在着与HBV复制相关的miRNA,这些上调和下调表达的miRNAs可能参与了HBV在肝细胞中的复制.     

microRNA与细胞周期调控

microRNA(miRNA)是一类长度为22～25个核苷酸的小RNA,这类非编码的小RNA分子在转录后水平上特异性地调节基因的表达.研究表明,miRNA可调控在细胞周期进程中直接或间接发挥作用的蛋白质分子;其表达水平的改变会使得细胞周期进程失去控制从而导致肿瘤的发生.此外,miRNA可分别作为癌基因和抑癌基因发挥作用从而参与细胞周期进程的调控,尤其是对细胞周期检查点的调控;它们通过协同调控多个靶基因参与细胞周期进程.     

移植肾慢性排斥反应的miRNAs差异表达研究

目的通过microRNAs芯片技术,探讨microRNAs（miRNAs）在移植肾慢性排斥反应中的差异表达情况。方法纳入4例慢性排斥反应患者肾穿组织为实验组,3例病理检查正常的肾组织皮质为对照组。采用miRNA芯片筛选出差异表达显著的微小RNA,并用实时定量PCR技术验证芯片结果可靠性。结果紫外分光光度法和变性电泳法证明所提取样本总RNA质量良好,可用于后续的芯片实验。芯片实验结果显示CR组中出现差异表达显著的miRNAs 63个,其中表达显著上调35个,表达显著下调28个。其中有9个miRNAs集中在3个miRNAs基因簇位点：14q32.31,22q11.21,xq27.3。随机选择显著差异表达的miRNAs（hsa-miR-637,hsa-miR-648,hsa-miR-516-5p）进行实时定量PCR验证实验,其CR/NC结果（0.034,2.670,7.846）与芯片结果（0.035,2.660,7.857）相符,证明了芯片结果的可靠性。结论miRNAs在慢性排斥反应患者中出现显著差异表达,深入研究miRNAs在慢性排斥反应中的作用机制将为其预防和治疗提供新途径。     

两种造模方式对COPD大鼠肺泡巨噬细胞microRNA表达的影响

目的 通过烟熏加气管内注入内毒素法与单纯烟熏法制备大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,比较两种造模方式的大鼠肺泡巨噬细胞微小RNA(miRNAs)的表达差异.方法 60只雌性Wistar大鼠随机均分为对照组(Ⅰ组、Ⅱ组)、烟熏加气道内内毒素滴注组(模型Ⅰ组)、单纯烟熏组(模型Ⅱ组),采用肺部CT、肺功能检测和肺组织病理学方法进行模型鉴定.分离肺泡巨噬细胞提取总RNA,行微阵列基因芯片分析,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)验证,比较两种造模方式中大鼠肺泡巨噬细胞miRNAs的表达差异.结果 模型Ⅰ组、Ⅱ组胸部CT、肺功能检测结果和肺组织病理均符合COPD的特征.与对照Ⅰ组相比,模型Ⅰ组肺泡巨噬细胞let-7b-3p、miR-675-5p、miR-376c-3p表达显著下调,未发现有miRNAs显著上调.与对照Ⅱ组比较,模型Ⅱ组let-7b-3p、miR-675-5p表达显著下调,miR-200b-3p、miR-665、miR-344b-1-3p、miR-34c-5p、miR-34b-5p、miR-99b-5p、miR-129-1-3p、miR-3557-5p、miR-331-5p、miR-493-5p、miR-200a-3p共11种miRNAs表达显著上调.结论 两种方法均造模成功,但其肺泡巨噬细胞miRNAs表达差异显著.单纯烟熏后miRNAs表达变化趋势与人类肺泡巨噬细胞miRNAs表达变化趋势相近,进行COPD肺泡巨噬细胞相关炎症机制研究时推荐选择单纯烟熏模型.     

精神分裂症circRNA的差异表达及其与症状的关系

目的 探讨精神分裂症circRNA表达水平及其与患者阴性、阳性症状的关系.方法 分别选取5例精神分裂症患者和正常人外周血进行基因芯片筛查,确定9种存在差异表达的circRNA,并在102例精神分裂症患者和103例正常人中进行PCR验证,进一步行精神分裂症阳性和阴性症状量表评估.结果 精神分裂症患者外周血circRNA_102101、circRNA_102315、circRNA_ 104597、circRNA_101835、circRNA_101836的表达水平明显下调(P＜0.05或P＜0.01).circRNA_103102、circRNA_103704的表达水平明显上调(P＜0.01).circRNA_102101、circRNA_103102的△Ct值与阳性症状呈明显正相关(P＜0.01或P＜0.05).circRNA_ 103704与阳性症状、一般精神病理呈明显正相关(P＜0.01或P＜0.05).思维障碍与circRNA_102101、circRNA_103102、circRNA 102315、circRNA 103704、circRNA_102802的ACt值呈明显正相关(P＜0.01或P＜0.05).激活性与circRNA_102101、circRNA_103102、circRNA_104597、circRNA_103704、circRNA_102802的△Ct值呈明显正相关(P＜0.01或P＜0.05).偏执与circRNA_102101、circRNA_103102、circRNA_103704、circRNA_102802的△Ct值呈明显正相关(P＜0.01或P＜0.05).攻击性与circRNA_102101、circRNA_103102、circRNA_103704、circRNA_102802的△Ct值呈明显正相关(P＜0.01或P＜0.05).circRNA_103704进入阳性症状的回归方程(P＜0.01);circRNA_103704、circRNA_102315进入一般病理表现的回归方程(P＜0.01或P＜0.05).结论 circRNA_103704、circRNA_103102与精神分裂症阴性、阳性症状有明显关联,可能是精神分裂症病理过程主导的调控因子.     

抑郁症共病糖尿病患者的皮质醇水平与帕罗西汀治疗的疗效

目的 观察分析抑郁症共病糖尿病患者的皮质醇水平与帕罗西汀临床治疗效果.方法 选择收治的122抑郁症共病糖尿病患者,其中皮质醇升高患者56例,皮质醇正常患者66例,分别命名为皮质醇升高组和皮质醇正常组,对两组患者进行帕罗西汀治疗,观察记录两组患者的临床治疗效果.结果 年龄35～50岁、BMI≥25、HAMD评分≥20分、糖化血红蛋白＞8.0(或＜6.5)为患者皮质醇水平升高的危险因素.结论 年龄、BMI、HAMD评分、糖化血红蛋白等为患者皮质醇水平升高的危险因素,而皮质醇水平与帕罗西汀治疗效果呈负相关,临床上应对于上述异常指标采取及时有效的治疗或是调控,避免其对帕罗西汀临床治疗效果的影响.     

MiRscreen:一种基于遗传算法和支持向量机的microRNA前体识别方法

目的:构建具有高敏感性和高特异性的microRNA前体(pre-miRNA)识别模型.方法:根据300例经实验验证的人pre-miRNA和300例从3'UTR折成茎环结构的片段中随机选取的阴性样本,基于支持向量机方法构建了区分pre-miRNA和pseudo pre-miRNA的分类器MiRscreen.为提高分类器的性能,我们采用遗传算法搜索影响分类器性能的2个重要参数C和γ.结果与结论:该分类器对训练集的敏感性为99.33%,特异性为100%,对剩余的91例人pre-miRNA和91例3′UTR中的pseudo pre-miRNA敏感性和特异性分别达到91.21% (83/91) 和93.41% (85/91).在除人以外的其他20种动物和病毒的1 353例pre-miRNA中,MiRscreen正确判断出其中的1 192例,敏感性达到88.10%,其中马雷克病病毒、猕猴淋巴隐病毒、EB病毒、猿猴病毒40、非洲爪蟾、狗、绵羊和猕猴共计8个物种的敏感性达到100%;在随机抽取的100条RefSeq基因折叠形成的556例pseudo pre-miRNA和随机抽取的797例人19号染色体折叠形成的pseudo pre-miRNA(共计1 353例混合阴性样本)中,MiRscreen的特异性达到85.14%(1 152/1 353).与其他6种同类方法相比,MiRscreen在敏感性和特异性方面均具有较好的性能,分类精度最高,达到86.62%,比其他方法高6%以上;MiRscreen的AUC值达到0.938,也明显高于其他方法.     

荧光定量分析miR-376b在UVB照射的人角质细胞中的差异表达

microRNA(miRNA)可通过对目标mRNA的抑制发挥重要的调节作用,参与如调节细胞周期、信号转导、细胞凋亡和细胞增殖分化等多种生物学过程[1-3].该研究检测了紫外线B(ultraviolet B, UVB)照射后人角质细胞HaCaT中miR-376b的表达情况,旨在对miR-376b是否参与UVB诱导的人角质细胞的损伤机制进行初步探讨.     

Investigation of associations between recurrence of major depressive disorder and spinal posture alignment: A quantitative cross-sectional study

The aim of this study was to investigate associations between poor spinal posture and the recurrence of major depressive episodes and severity of symptoms in patients with major depressive disorder (MDD). This was a cross-sectional quantitative study of MDD patients. Outpatients were recruited from consecutive admissions at a mood disorders unit of a tertiary psychiatric hospital. Of 136 MDD patients, 72 (53 women, 19 men; mean age, 42.4 ± 9.1 years) met all the criteria and completed the study. Forty-one patients were classified with a recurrent episode (RE) of MDD and 31 with a single episode (SE). Quantitative assessments of postural deviations were made using photogrammetry, including kyphosis, shoulder protraction, and head inclination. The severity of depressive episodes was assessed using the Hamilton Depression Rating Scale. The diagnosis and classification of patients were performed according to DSM-IV-TR and SCID criteria. Multivariate analysis of variance indicated that the RE group had greater anterior head inclination (35.39; SD: 1.57), greater scapular abduction (1.69; SD: 0.93), and worse thoracic kyphosis (139.38; SD: 1.19) than the SE group (p < 0.001 for all). Multivariate analysis of covariance showed an interaction between the severity of depressive symptoms and the degree of thoracic kyphosis (p = 0.002). Recurrence of depressive episodes is associated with measures of postural misalignment.     

抑郁症患者脑CT值的定量研究

目的:探讨抑郁症患者颅脑平扫CT值与增强扫描后强化程度的特征,为研究抑郁症发病机制与诊断提供客观数据基础。方法:随机选择符合《中国精神疾病分类方案与诊断标准(第3版)》中抑郁症诊断标准的20例患者作为研究组,选择性别年龄相匹配的健康人20例作为对照组。2组分别行头颅CT平扫与增强扫描,比较各脑叶的平扫CT值及增强扫描后CT值递增峰值。结果:①抑郁组大脑左、右额叶脑组织密度CT值分别为(31.56±1.48)HU、(30.65±1.55)HU,明显低于对照组的(34.52±1.36)HU、(34.78±1.86)HU(P均<0.01)。②抑郁组大脑左、右额叶脑组织密度增强扫描后CT值递增峰值分别为(4.68±0.62)HU、(4.51±0.53)HU,明显低于对照组的(9.52±0.66)HU、(9.69±0.56)HU(P均<0.01)。结论:抑郁症患者大脑左右额叶脑组织密度CT值较正常人低,增强扫描后强化程度较正常人低,这可能是大脑额叶功能损害的神经解剖学基础,脑血流量灌注减少,使得大脑额叶功能改变。     

心房颤动患者循环microRNAs表达谱的初步研究

目的 利用microRNA(miRNA)芯片研究持续性和阵发性心房颤动(房颤)患者循环miRNAs表达谱的改变,为进一步探讨miRNA对房颤的调控机制提供依据.方法 解放军总医院心内科2010年11月-2011年2月持续性房颤患者、阵发性房颤患者和健康对照者各5例,取其全血标本,提取血清总RNA,采用microRNA芯片进行杂交,得到miRNA表达谱,通过Volcano Plot方法寻找差异表达的miRNAs,并采用MEV软件进行聚类分析.结果 和健康对照者相比,阵发性和持续性房颤患者血清中表达都有明显差异的miRNA共有13个,其中表达上调的有8个:miR-3169,miR-3612,miR-634,miR-376a,miR-517b,miR-377*,miR-590-3p,miR-664;表达下调的有5个:miR-1,kshv-miR-K12-5,miR-378c,miR-204,miR-27a.阵发性房颤和持续性房颤患者间miRNA的表达谱也有显著差异.结论 持续性和阵发性房颤患者循环miRNAs表达谱有显著改变,提示循环miRNAs可用于房颤发生和发展过程中调控机制的研究.     

中国北方抑郁症与OPRM1基因多态性的相关性研究

 

目的 为探索抑郁症的发病机制及其基因诊断和治疗提供科学的依据。方法 分析药物效应动力学Mμ阿片受体基因OPRM1(Mμ-Opioid receptor,OPRM1)的遗传多态性数据。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)分析技术检测369例抑郁症患者与738例健康部队官兵OPRM1基因第一外显子区rs1799971C/T与第三内含子区rs648893G/A两个多态性位点的基因型和等位基因频率。运用SPSS13.0和Haploview等软件进行统计学分析。结果 OPRM1基因位点的基因型及等位基因频率分布在抑郁症组与正常对照组间存在统计学意义(P<0.05)。其中,rs1799971A/G的等位基因频率只在男性34～49岁抑郁症组与对照组间存在统计学差异(OR=0.564,95%CI:0.196～0.837,P=0.001),而rs648893C/T位点的等位基因频率在不同年龄的病例组与对照组间不存在统计学意义差异(OR=0.853,95%CI:0.649～1.121,P=0.139)。结论 OPRM1基因第一外显子区rs1799971位点多态性可能是中国北方汉族抑郁症患者的风险因素,可能与抑郁症的发病存在关联。

     

重度抑郁障碍与肿瘤坏死因子α和白细胞介素6基因启动子区多态性的相关性

目的 探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)基因启动子区-308G/A、-857C/T位点,白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)基因启动子-174G/C和-572C/G多态性与重度抑郁障碍症发生的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法检测393例重度抑郁障碍症患者和393名健康者对照各个多态性位点的基因型,采用SPSS 13.0进行统计学分析.结果 TNF-α基因启动子-857C/T位点的基因型及等位基因频率分布在重度抑郁障碍症组与正常对照组间存在统计学意义(P＜0.05).其中,-857T的等位基因频率只在男性重度抑郁障碍症组与对照组间存在显著差异(OR=0.309,95％ CI:0.218 ～0.439,P＜0.01),而-308A位点的等位基因频率只在女性病例组与对照组间存在统计学意义差异(OR=0.399,95％ CI:0.246～0.648,P＜0.01).结论 证实TNF-α基因启动子区多态性可能是中国北方汉族重度抑郁障碍患者的风险因素.TNF-α基因启动子区多态性可能与重度抑郁障碍的发病存在关联.     

Altered functional connectivity of the dorsolateral prefrontal cortex in first-episode patients with major depressive disorder

Background

The aim of this study was to investigate resting-state functional connectivity alteration of the right dorsolateral prefrontal cortex (DLPFC) in patients with first-episode major depressive disorder (MDD).

Methods

Twenty-two first-episode MDD patients and thirty age-, gender- and education-matched healthy control subjects were enrolled. Rest state functional magnetic resonance images and structure magnetic resonance images were scanned. The functional connectivity analysis was done based on the result of voxel-based morphometry (VBM). And the right DLPFC was chosen as the seed region of interests (ROI), as its gray matter density (GMD) decreased in the MDD patients compared with controls and its GMD values were negative correlation with the Hamilton Depression Rating Scale (HDRS) scores.

Results

Compared to healthy controls, the MDD patients showed increased functional connectivity with right the DLPFC in the left dorsal anterior cingulate cortex (ACC), left parahippocampal gyrus (PHG), thalamus and precentral gyrus. In contrast, there were decreased functional connectivity between the right DLPFC and right parietal lobe.

Conclusions

By applying the VBM results to the functional connectivity analysis, the study suggested that abnormality of GMD in right DLPFC might be related to the functional connectivity alteration in the pathophysiology of MDD, which might be useful in further characterizing structure–function relations in this disorder.     

Validation of hippocampal volumes measured using a manual method and two automated methods (FreeSurfer and IBASPM) in chronic major depressive disorder

INTRODUCTION: To validate the usefulness of the packages available for automated hippocampal volumetry, we measured hippocampal volumes using one manual and two recently developed automated volumetric methods. METHODS: The study included T1-weighted magnetic resonance imaging (MRI) of 21 patients with chronic major depressive disorder (MDD) and 20 normal controls. Using coronal turbo field echo (TFE) MRI with a slice thickness of 1.3 mm, the hippocampal volumes were measured using three methods: manual volumetry, surface-based parcellation using FreeSurfer, and individual atlas-based volumetry using IBASPM. In addition, the intracranial cavity volume (ICV) was measured manually. RESULTS: The absolute left hippocampal volume of the patients with MDD measured using all three methods was significantly smaller than the left hippocampal volume of the normal controls (manual P = 0.029, FreeSurfer P = 0.035, IBASPM P = 0.018). After controlling for the ICV, except for the right hippocampal volume measured using FreeSurfer, both measured hippocampal volumes of the patients with MDD were significantly smaller than the measured hippocampal volumes of the normal controls (right manual P = 0.019, IBASPM P = 0.012; left manual P = 0.003, FreeSurfer P = 0.010, IBASPM P = 0.002),. In the intrarater reliability test, the intraclass correlation coefficients (ICCs) were all excellent (manual right 0.947, left 0.934; FreeSurfer right 1.000, left 1.000; IBASPM right 1.000, left 1.000). In the test of agreement between the volumetric methods, the ICCs were right 0.846 and left 0.848 (manual and FreeSurfer), and right 0.654 and left 0.717 (manual and IBASPM). CONCLUSION: The automated hippocampal volumetric methods showed good agreement with manual hippocampal volumetry, but the volume measured using FreeSurfer was 35% larger and the agreement was questionable with IBASPM. Although the automated methods could detect hippocampal atrophy in the patients with MDD, the results indicate that manual hippocampal volumetry is still the gold standard, while the automated volumetric methods need to be improved.     

青年官兵血清5-羟色胺、心率变异、心电图特征与抑郁症的相关分析

目的 探讨5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）、心率变异（heart Rate Variability,HRV）、心电图特征与抑郁症患者的相关关系.方法 测定并比较60例抑郁症组与40例健康对照组血中5-HT的含量;分析血中5-HT含量与症状自评量表（symptom checklist 90,Scl-90）评分的相关性;运用动态心电图系统采集其心电信号并进行HRV分析;描记常规12导联心电图并逐一进行分析.结果 抑郁症组血中5-HT含量（172.08±101.36）ng/ml低于健康对照组（257.34±104.06）ng/ml,差异有统计学意义（P＜0.001）.抑郁症组血中5-HT含量与Scl-90评分的人际关系敏感、抑郁、敌对分数变化相关,相关系数分别为-0.406、-0.384、-0.445,差异有统计学意义（P＜0.01）.抑郁症组24 h内全部正常心动周期的标准差（SDNN）、24 h每5 min正常R-R间期的标准差的平均数（SDANN）、相邻正常心动周期差值的均方根（RmSSD）、相邻两个正常心动周期差值大于50 ms的个数所占的百分比（PNN50）、低频功率（LF）、高频功率（HF）、低频功率与高频功率之比（LF/HF）低于健康对照组（P＜0.001）;抑郁症组心电图中窦性心动过缓、窦性心律不齐、早期复极、早搏检出率高于健康对照组（P＜0.05）.结论 检测血中5-HT含量的方法在抑郁症客观诊断中有重要临床价值,HRV和心电图在该病的诊断中有一定临床参考价值.