牛磺酸对心肌细胞缺氧—再给氧损伤的保护作用

在心肌细胞缺氧－再给氧模型上，发现缺氧及再给氧后细胞膜荧光偏振度明显增加；线粒体，肌原纤维等结构受损；细胞内脂质过氧化物荧乐强度及荧光比率升高，上述变化再给氧组均比缺氧组更明显。     

预处理对心肌细胞的保护作用

为探讨缺氧和缺血预处理对心肌细胞的保护作用,分别在培养的乳鼠心肌细胞缺氧／复氧模型、离体大鼠灌注和在体大鼠心肌缺血／再灌注模型中,观察缺血和缺氧预处理对心肌细胞再次长时间缺氧／复氧或缺血／再灌注损伤的保护作用,结果发现,在培养原乳鼠心肌细胞中,缺氧预处理组细胞存活率和超氧化物歧化酶含量较缺氧／复氧组增加（Ｐ〈０．０１）,乳酸脱氢酶的释放和丙二醛含量则减少（Ｐ〈０．０１）。对离体或在体大鼠心脏的缺血     

腺苷A1受体激动剂对心肌细胞缺氧再给氧脂质过氧化损伤的保护作用

目的观察腺苷A1受体激动剂对培养的心肌细胞缺氧再给氧脂质过氧化损伤的影响。方法以培养的心肌细胞为模型,在缺氧再给氧损伤细胞后,给予腺苷A1受体激动剂R(-)N6-(2-phenylisopropyl)adenosine(R-PIA)(0.1及1μmol/L),测定培养液上清液中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的含量及细胞MTT代谢率的变化。结果腺苷A1受体激动剂可以使培养液上清液中LDH和MDA的含量明显降低,SOD的活性增强,细胞MTT代谢率明显升高,且呈现剂量依赖性。而且这种作用可被腺苷A1受体拮抗剂8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine(CPDPX)所拮抗。结论腺苷A1受体激动剂对缺氧再给氧损伤培养的心肌细胞有保护作用。     

硒对培养乳鼠心肌细胞缺氧—再给氧损伤影响的实验研究

硒与克山病发病率、冠心病死亡率呈负相关,临床上已用硒和vitE合剂治疗心绞痛。有人在整体心脏模型中证实了硒对缺血缺氧心脏具有保护作用。但无法排除全身体液、激素水平变化及心脏内各类型细胞的相互影响。本实验通过建立培养乳鼠心肌细胞缺氧—再给氧损伤模型,研究不同剂量的硒对心肌细胞缺氧—再给氧损伤的作用,这有利于临床硒的合理应用。     

硫化氢对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的:研究不同浓度的硫化氢(H_2S)对缺氧不同时间的乳鼠心肌细胞损伤的直接影响及其对复氧损伤的间接影响,分析其对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用.方法:原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧硫氢化钠(NaHS)0组、缺氧硫氢化钠 100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧硫氢化钠400 μmol/L组以及缺氧-复氧硫氢化钠0组、缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 400 μmol/L组.在缺氧24 h、48 h、72 h后及复氧2 h后均检测细胞存活数量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:缺氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h和72 h后与各自时间点缺氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.01),差异均有统计学意义;缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组在缺氧培养24 h后较缺氧硫氢化钠100 μmol/L组心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.05～0.01),差异均有统计学意义.缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧缺氧-复氧硫氢化钠400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h、72 h并复氧2 h后较各自时间点缺氧-复氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、复氧后心肌细胞乳酸脱氢酶漏出量降低(P<0.01),差异均有统计学意义.结论:100~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧-复氧心肌细胞具有保护效果.200~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧24 h的心肌细胞保护作用较好.     

1，6－二磷酸果糖对培养心肌细胞膜缺氧－再灌注损伤的保护作用

用培养的原代心肌细胞建立缺氧－再给氧方法，对缺氧６０分钟、１２０分钟及缺氧后再给氧３０及６０分钟时心肌细胞搏动、ＬＤＨ活性、（５１）￣Ｃｒ释放率、苔盼蓝摄取率、扫描电镜观察及１，６－二磷酸果糖对其影响进行了研究。结果显示：缺氧２小时可引起心肌细胞搏动频率减慢，再给氧后搏动频率加快；ＬＤＨ活性、（５１）￣Ｃｒ释放率和苔盼蓝摄取率增加，电镜显示心肌细胞膜受损。１，６－二磷酸果糖对心肌细胞膜具有保护作用。     

心肌细胞缺氧再给氧损伤的形态变化及药物保护作用

本实验利用体外培养心肌细胞的方法,研究了心肌缺氧再给氧损伤的形态学变化和中药生脉散的保护作用。实验发现缺氧再给氧能引起心肌细胞挛缩,超微结构表现为肌原纤维断裂,挛缩带形成,钙盐沉积。乳酸脱氢酶释放增加。生脉散能明显减轻上述改变,稳定心肌细胞的形态,对缺氧再给氧损伤具有良好的保护作用。     

麦冬皂苷D对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨麦冬皂苷D对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制.方法:体外培养心肌细胞H9c2,实验分为心肌细胞未行任何干预的对照组、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D组(H/R+OpD组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)过表达组(H/R+OpD+PI3K组)、缺氧复氧+麦冬皂苷D+pcDN...     

镁对缺氧再给氧心肌保护作用的实验研究

实验研究心肌细胞缺氧－再给氧（ＡＯ－ＲＯ）时镁对细胞对脂质过氧化物（ＬＰＯ），Ｃａ＾２＋荧光强度及超微结构的影响，结果：心肌细胞ＡＯ－ＲＯ后，细胞线粒体肿胀，变性及排列紊乱，结果受损、细胞内ＬＰＯ、Ｃａ＾２＋荧光强度升高，低镁０．３ｍｍｏｌ／Ｌ＋ＡＯ－ＲＯ组比单纯ＡＯ－ＲＯ组再明显，Ｐ〈０．０１，镁２．０ｍｍｏｌ／Ｌ和０．８ｍｍｏｌ／Ｌ组，上述改变得到明显改善，这与镁具有抗ＬＰＯ保护细胞膜结构完整性及阻止Ｃａ＾２＋内流，减轻Ｃａ＾２＋超载从而降低心肌Ａ０－ＲＯ损伤等作用有关。     

牛磺酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护

目的探讨牛磺酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 SD雄性大鼠44只,分为假手术组(4只),对照组(20只)牛磺酸组(20只)。应用Bederson评分方法对大鼠脑缺血6、24 h进行神经功能评分。激光多普勒血流仪测量脑血流变化。HE染色检测神经元核周体。结果牛磺酸组较对照组神经功能评分减小,神经功能改善;牛磺酸组缺血24 h后脑血流量增加,脑组织血流供应改善;假手术组脑组织未出现神经元坏死的特征,牛磺酸组神经元核周体损伤体积明显低于对照组(P<0.01)。结论牛磺酸对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

生脉注射液对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的探讨生脉注射液对纯化培养的乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用纯化培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为正常对照组、缺氧复氧损伤组、缺氧复氧损伤＋维拉帕米组、缺氧复氧损伤＋生脉注射液组,分别测定其乳酸脱氢酶（LDH）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）及ATP水平。结果生脉注射液可明显提高LDH、SOD活性,降低MDA、提高ATP水平。结论生脉注射液具有明显的抗缺氧复氧损伤、保护心肌的作用。     

缺氧—复氧对培养的大鼠心肌细胞损伤与细胞凋亡的影响

目的探讨培养的大鼠心肌细胞在缺氧（缺血）和缺氧－复氧（再灌注）状态下心肌细胞损伤和细胞凋亡情况。方法采用１～３天新生ＳＤ大鼠,常规方式的培养心肌细胞,给予模拟缺氧（缺血）液、模拟复氧（再灌注）液以及干预因素（终浓度为２００Ｕ／ｍＬ的ＳＯＤ）处理,分为缺氧－复氧损伤组（Ｈ／Ｒ组）、缺氧－复氧损伤组＋ＳＯＤ（Ｈ／Ｒ＋ＳＯＤ组）、缺氧预处理组（ＨＰ组）和正常对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ组）,进行以下指标观察：     

“缺氧后处理”对大鼠缺氧—复氧心室肌细胞的保护作用

采用模拟再灌的缺氧－复氧模型，在细胞水平直接观察到缺氧－复氧可致心肌细胞产生一氧化氮明显增加，并诱导心肌细胞凋亡，首次发现“缺氧后处理”可减轻心肌复氧损伤，明显提高心肌细胞存活率（Ｐ〈０．０５）。为更有效救治心肌缺血提供了新的依据。     

缺氧预处理对乳兔心肌细胞缺氧复氧损伤的保护研究

目的：观察预处理（ＰＣ）对乳兔心肌细胞缺氧复氧（Ａ－Ｒ）损伤的影响。方法：采用心肌细胞Ａ－Ｒ模型，用短暂缺氧进行预处理。结果：缺氧预处理能提高Ａ－Ｒ后心肌细胞存活率（７７．２１±３．１０ＶＳＡ－Ｒ组５９．８３±２．１０．Ｐ＜０．０１）．减少ＭＤＡ产生（０．７５±０．０２ＶＳＡ－Ｒ组１．６１±０．０８ｎｍｏｌ／ｍｇｐｒ，Ｐ＜０．０１）及乳酸脱氢酶的漏出（Ｐ＜０．０１）。结论：离体乳兔心肌细胞存在ＰＣ保护现象。     

牛磺酸对心功能不全心肌细胞保护作用的初步研究

作者在３１例心功能不全病人及离体大鼠心脏缺血－再灌注模型上给予牛磺酸治疗后，观察铜、锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎＳＯＤ）、脂质过氧化终产物丙二醛（ＭＤＡ）水平的改变及其与心功能变化的关系。结果发现心功能不全患者的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、ＭＤＡ随心衰严重程度而增加，应用牛磺酸治疗２周后，血中ＳＯＤ、ＭＤＡ水平显著降低，且随疗程的延长效果更显著。牛磺酸与血管扩张剂、利尿剂及强心剂联合应用，较单用牛磺酸治疗效果更佳。大鼠心脏缺血、再灌注损伤后，心功能降低，心肌组织脂质过氧化终产物ＭＤＡ的含量明显增加，补充牛磺酸后，心功能明显改善，ＭＤＡ显著降低，证实牛磺酸是正常机体的内源性抗氧化剂，具有清除自由基的作用，因此有可能作为临床防治心衰的辅助药物。     

莱菔硫烷对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:H9C2心肌细胞随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧组(H/R组)和SFN预处理组(10μmol/L SFN预处理细胞12 h后,进行缺氧/复氧处理)。采用倒置显微镜观察各组细胞形态及凋亡程度,CCK8法检测各组H9C2心肌细胞存活率,Western blot法检测血红素氧化酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比,H/R组和SFN预处理组心肌细胞存活率均降低(P均0.01),HO-1、NQO1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平及Bcl-2/Bax均升高(P均0.01)。与H/R组相比,SFN预处理组的细胞生长状态较好,细胞存活率明显提高[(76.00±0.52)%对(55.73±0.43)%,P0.01],HO-1(3.24±0.01对1.86±0.01,P0.01)、NQO1(1.67±0.01对0.95±0.01,P0.01)和Bcl-2(0.70±0.00对0.48±0.01,P0.01)蛋白表达水平及Bcl-2/Bax(1.22±0.01对0.56±0.00,P0.01)均明显升高,Bax蛋白表达水平明显降低(0.57±0.00对0.85±0.01,P0.01)。结论:SFN对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,可能与促进HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达有关。     

川芎生物碱对大鼠心肌细胞损伤的保护研究

目的通过观察川芎生物碱对大鼠心肌缺血产生损伤模型的影响,探讨其对缺血性心肌细胞损伤的保护作用。方法选取Wistar大鼠40只,雌雄各半,随机分为正常对照组、模型组及川芎生物碱高剂量组、低剂量组,每组各10只;各组均正常饲养,川芎生物碱高、低剂量组于实验前7d给予川芎生物碱50mg/kg·d和12.5mg/kg·d腹腔注射;建立大鼠心肌缺血损伤模型,记录心电图变化,测定血清各项相关生化指标。结果高剂量组可改变实验性大鼠急性心肌缺血的心电图S-T段变化幅度,减少心律失常发生率,提高心肌SOD活力,抑制CK活性,增加MDA含量。结论川芎生物碱能通过抑制心肌细胞凋亡以减少心肌缺血损伤,起到保护心肌作用。     

薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用

目的研究薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用体外培养乳鼠心肌细胞，建立缺氧／复氧损伤模型，以薯蓣皂苷进行干预。心肌细胞随机分为5组：空白对照组（C组）；缺氧／复氧组（A／R组）；薯蓣皂苷（Dioscin）低、中、高剂量干预组（Dioscin＋A／R组）。分别观察各组心肌细胞搏动频率；MTr法测细胞存活率；用Rhl23荧光探针标记线粒体，检测荧光强度以反映线粒体膜电位（△ψm）变化；Fluo-3负载心肌细胞，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子浓度变化。结果薯蓣皂苷干预组心肌细胞搏动频率、细胞存活率、△ψm与A／R组比较明显升高；细胞内平均钙离子荧光强度显著低于A／R组。结论从细胞水平初步证实薯蓣皂苷预处理心肌细胞对A／R损伤有一定保护作用，保护机制可能涉及对线粒体膜保护和防止细胞内钙超载等。     

福辛普利拉预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的预防作用

目的:探讨福辛普利拉对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的预防作用。方法:取SD新生大鼠(1~3 d),培养成心肌细胞,在培养的第4天随机分为5组:①正常对照组,②A/R组,③0.2 mmol/L福辛普利拉预处理组(F1组),④0.6 mmol/L福辛普利拉预处理组(F2组),⑤1.8 mmol/L福辛普利拉预处理组(F3组)。分别观察各组心肌细胞搏动频率、细胞存活率、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌细胞肌浆网钙泵(SERCA)mRNA的表达水平和心肌细胞内游离[Ca2 ]浓度。结果:①细胞搏动频率:A/R组比正常对照组明显减低(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著加快(P<0.01),比正常对照组稍慢(P>0.05)。②细胞存活率:A/R组比正常对照组明显降低(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显增高(P<0.01),而与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。③LDH活性:A/R组比正常对照组明显升高(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P<0.01),与正常对照组相比虽有升高但差异无统计学意义(P>0.05)。④SER-CA mRNA的表达水平:A/R组比正常对照组mRNA表达下调,为正常对照组的(0.78±0.30)倍(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组显著上调(P<0.01)。⑤心肌细胞内游离[Ca2 ]浓度:A/R组比正常对照组明显升高(P<0.01);福辛普利拉各剂量组比A/R组明显降低(P<0.01),而与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:福辛普利拉预处理后对A/R心肌细胞损伤具有预防作用,其机制可能与SERCA表达上调、减轻细胞内Ca2 超载有关。     

牛磺酸对心肌缺血／再灌注损伤的保护作用及机制探讨

离体大鼠心脏灌流模型的实验表明，牛磺酸除明显减轻再灌注心肌的钙超载和脂质过氧化外，还显著改善心肌肌浆网（ＳＲ）的钙转运功能，牛磺酸使肌浆网的钙─三磷酸腺苷酶活性较缺血／再灌注组升高１．１１倍，摄钙初速率和最大摄钙量分别升高６１．７±１．１％和４０．９±６．４％。牛磺酸可直接拮抗氧自由基灌流导致的心肌细胞和ＳＲ的损伤，对离休ＳＲ无直接作用，对心肌局部的肾素─血管紧张素系统也未见有影响。研究结果显示，牛磺酸的心肌保护作用还与其降低再灌注时心肌的脂质过氧化有关。