P53及c—myc共同表达与输尿管癌生物学行为的关系

为在分子水平上了解原发性输尿管癌发生、发展的机理，采用免疫组化法对１８例原发性输尿管癌和１４例输尿管息肉组织中Ｐ５３及ｃｍｙｃ表达及共同表达的意义进行了研究。结果：正常输尿管组织Ｐ５３及ｃｍｙｃ表达呈阴性；输尿管息肉分别为１４２９％及３５７１％；输尿管癌为５５５６％及８８８９％，共同表达阳性４４４４％。结论：Ｐ５３及ｃｍｙｃ基因在输尿管肿瘤的发生和发展过程中起着一定作用，共同表达阳性对于判定病理分级、分期，肿瘤复发及患者生存率以及输尿管息肉是否存在恶变潜在性等意义明显优于单一表达。     

p53和c—myc异常表达与胃癌细胞多药耐药性关系的研究

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法研究６７例胃标本中ｐ５３和ｃｍｙｃ的表达与多药耐药性（ＭＤＲ）的关系。结果显示：本组胃癌中ｐ５３阳性３２例，阳性率４７８％；ｃｍｙｃ阳性３７例，阳性率５５２％；Ｐｇｐ阳性３９例，阳性率５８２％。ｐ５３的异常表达与ｍｄｒ１基因表达呈显著正相关（ｒ＝０６３，Ｐ＜００５），而ｃｍｙｃ和ｍｄｒ１的表达无明显相关。提示ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ１基因的表达，从而使胃癌细胞获得ＭＤＲ表型。     

肾癌p53蛋白表达及其点突变相关研究

目的探讨肾细胞癌发病机制中致癌基因突变规律。方法以ｐ５３蛋白表达及其点突变率为实验观测指标,对以往１１６例各类肾肿瘤以免疫组化ＡＢＣ法检测病理切片的ｐ５３表达。并以ＰＣＲＳＳＣＰ观测５９外显子点突变,并以１２例非瘤新鲜肾组织作对照。结果三类恶性肾细胞癌的ｐ５３阳性表达率介于４２％～５４％之间,且随癌细胞恶性度增加及分期增加而升高,而良性瘤及正常肾组织为阴性。点突变率介于２５％～７１％之间,与恶性度及分期相关。第９外显子点突变率明显高于其它区域,良性瘤及正常肾无点突变。结论肾癌发病机制与ｐ５３基因突变密切相关。ｐ５３蛋白阳性表达与其点突变相辅并存,协同一致,二者阳性率与生存期及预后密切相关     

骨组织恶性肿瘤与癌基因mdm2、c-myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。在１０例骨肉瘤标本中发现ｍｄｍ２扩增仅存在于转移的病例中。这些结果表明：癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ与抗癌基因ｐ５３参与骨组织恶性肿瘤的发生和发展，其中ｍｄｍ２扩增与骨肉瘤转移密切相关。     

乳腺癌P62~(C-myc)蛋白表达与雌激素和孕激素受体的关系及其临床意义

为探讨乳腺癌Ｐ６２Ｃｍｙｃ蛋白表达与雌激素和孕激素受体的关系及其临床意义，采用ＬＳＡＢ免疫组化法对１０７例乳腺癌标本进行Ｐ６２Ｃｍｙｃ蛋白检测。结果：Ｐ６２Ｃｍｙｃ蛋白表达阳性率为６３．５５％（６８／１０７），在生存时间≤５年、＞５年＜１０年及≥１０年者，其Ｐ６２Ｃｍｙｃ蛋白表达阳性率分别为９４．００％（４７／５０），６５．００％（１３／２０）和２１．６２％（８／３７），表明Ｐ６２Ｃｍｙｃ蛋白过度表达与乳腺癌的临床分期晚、组织学分级高及腋淋巴结转移有关，而与雌、孕激素受体状况关系不大。由此提示：Ｐ６２Ｃｍｙｃ蛋白表达可作为判断乳腺癌预后的一个重要指标。     

骨组织恶性肿瘤癌基因mdm2,c—myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃ－ｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃ－ｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。     

bcl—2基因蛋白在膀胱移行细胞肿瘤中的表达及意义

为探讨ｂｃｌ２基因蛋白在膀胱移行细胞和移行细胞肿瘤中表达程度的差异及该蛋白表达与移行细胞癌病理分级、临床分期和预后的关系，用抗体ｂｃｌ２（Ｎ１９）及流式免疫学技术对６例正常膀胱粘膜、６例炎性增生粘膜、６例乳头状瘤和４５例移行细胞癌的ｂｃｌ２蛋白表达进行了定量分析。结果表明：ｂｃｌ２蛋白在４种组织标本中均表达，阳性率分别为３３．３％、５０．０％、８３．３％、１００．０％。ＦＩ值呈移行细胞癌＞乳头状瘤＞炎性增生粘膜＞正常粘膜。肿瘤组ｂｃｌ２蛋白表达显著高于非肿瘤组（Ｐ＜０．００１）。在膀胱移行细胞癌中ｂｃｌ２蛋白的表达程度与肿瘤病理分级、临床分期和预后无关（Ｐ＞０．０５）。提示ｂｃｌ２蛋白的异常表达可能在膀胱移行细胞肿瘤发生、发展中起着促进作用。     

癌相关蛋白bcl-2和P53在膀胱上皮异生和移行细胞癌的逆反性表达

应用免疫组化ＡＢＣ法研究了５４例膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）全切标本中ｂｃｌ２和Ｐ５３在正常、异生上皮和癌组织中的表达。结果显示：ｂｃｌ２表达在正常和轻度异生上皮仅限于基底层，在中度和重度异生则可见于中上层，２７例癌标本ｂｃｌ２阳性，并与癌分级显著相关；随着异生恶性度的增加，Ｐ５３阳性病例也逐渐增多（Ｐ＜０．０１），３８例癌组织Ｐ５３呈阳性，并与肿瘤分期分级和生存率明显相关；低分级或浅表型肿瘤的“ｂｃｌ２丢失”现象明显增多，“Ｐ５３逞现”现象则在高分级或浸润型肿瘤更显著；双抗体免疫组化显示，ｂｃｌ２和Ｐ５３通常表达于不同的异生或癌细胞；癌组织中ｂｃｌ２和Ｐ５３均阴性的患者其生存率显著高于两者均阳性者（Ｐ＜０．０５）。结果提示ｂｃｌ２在ＴＣＣ的发生发展过程中可能起重要作用     

癌基因c—erbB2在膀胱移行细胞癌中的扩增与过表达

应用原位杂交和免疫组化对９３例膀胱移行细胞癌中癌基因ｃｅｒｂＢ２进行研究。８例（８６％）显示ｃｅｒｂＢ２的基因扩增，扩增与肿瘤病理分级呈正相关（Ｐ＜００５）。２４例（２５８％）显示ｃｅｒｂＢ２的蛋白过表达，过表达与肿瘤病理分级（Ｐ＜００１）、临床分期（Ｐ＜００５）及复发（Ｐ＜００５）均呈正相关。提示在膀胱移行细胞癌中，ｃｅｒｂＢ２的过表达比扩增具有更重要的临床意义。     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

肾上腺肿瘤增殖细胞核抗原的特征及定量分析

为了明确肾上腺肿瘤细胞增殖特征，对肿瘤恶性度及预后作出判断，应用免疫组化ＳＰ法对３４例肾上腺恶性肿瘤进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测，并与２５例肾上腺良性肿瘤和１２例增生、正常肾上腺组织对比，以真彩色图像分析系统对染色片做积分吸光度测定，并进行ＰＣＮＡ指数计数。结果显示：肾上腺恶性肿瘤ＰＣＮＡ表达高于良性肿瘤，两者又高于增生、正常肾上腺表达。结果表明：图像分析积分吸光度测定对判断肿瘤恶性度和不良预后方面有重要价值，ＰＣＮＡ可用于细胞增殖特征评估。     

反义增殖细胞核抗原cDNA对人膀胱癌裸鼠异体移植瘤生长的抑制作用

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)反义cDNA对人膀胱癌裸鼠移植瘤模型生长的影响。　方法　脂质体介导反义PCNA真核表达载体转染人膀胱癌EJ细胞后 ,接种到裸鼠皮下组织 ,观察体内致瘤及生长情况 ;免疫组化检测瘤体PCNA蛋白表达 ,RT PCR分析瘤体PCNA、wt p5 3、c myc基因mRNA水平 ;并进行瘤体病理学评估。 　结果　反义PCNAcDNA导入后 ,EJ细胞体内致瘤活性降低 ,同对照组比较瘤体体积缩小 5 4 .2 3% (P <0 .0 5 ) ,重量减轻 4 2 .5 4 % (P <0 .0 1) ,瘤组织PCNA蛋白及mRNA水平分别减少 6 1.6 2 % (P <0 .0 1)和 72 .13% (P <0 .0 1) ,c myc基因表达下调4 7.34% (P <0 .0 1) ,wt p5 3表达活性无显著性改变 (P >0 .0 5 ) ,瘤体病理学特征改善。 　结论　转导反义PCNAcDNA能有效逆转肿瘤的恶性表型 ,是膀胱癌基因治疗的合理策略之一     

Differential heparanase-1 expression in malignant and benign pheochromocytomas

INTRODUCTION: Extracellular matrix (ECM) degradation is an essential step that allows tumor cells to penetrate a tissue barrier and become metastatic. Heparanase-1 (HPR) is an endoglycosidase that specifically degrades heparan sulfate proteoglycans, a chief component of the ECM. Previous studies have demonstrated HPR expression in various malignancies and that there is differential HPR expression between benign and malignant tumors. Currently, there is no technique that can reliably predict the malignant behavior of some pheochromocytomas. This study tests whether HPR is differentially expressed in malignant and benign pheochromocytomas. METHODS: Paraffin-embedded specimens from 29 pheochromocytomas were evaluated. The tissues were collected from surgical specimens over a 10-year period from 26 patients (8 males, 18 females) with a mean age of 47 years (range 19-78 years, median 47 years). One female patient underwent 3 separate operations for malignant pheochromocytoma and thus provided 3 specimens. Another female patient had both the primary tumor and a liver metastasis processed, and therefore provided 2 specimens. Patient charts and pathology reports were reviewed to classify the pheochromocytomas as either benign or malignant. Based on clinical behavior and/or pathological evidence of metastasis or invasion into surrounding tissues, 10 specimens were malignant and 19 had benign behavior. As a control, normal adrenal tissue from 3 nephrectomy specimens was included in the study, as was tissue from 1 adrenocortical adenoma. All 33 specimens were tested for HPR gene expression by in situ hybridization (ISH) with an antisense RNA probe and immunohistochemistry (IHC) with an anti-HPR antibody. Statistical analysis was done using the chi(2) test of proportions to determine if HPR expression correlated with malignancy using ISH, IHC, or both tests together. RESULTS: Using ISH, the percentage of HPR expression in the malignant pheochromocytomas was 50% while HPR expression in the benign tumors was 21% (P = 0.11). Using IHC, the percentage of HPR expression in the malignant pheochromocytomas was 80% while HPR expression in the benign tumors was 32% (P = 0.01). Considering both tests cumulatively, all 10 malignant pheochromocytomas stained positive for HPR by ISH and IHC, while only 37% of the benign tumors were positive for HPR expression (P = 0.001). The one adrenal adenoma and the 3 normal adrenal glands processed stained negative for HPR expression by both ISH and IHC. CONCLUSIONS: HPR expression is higher in malignant pheochromocytomas than in benign pheochromocytomas or normal tissue. HPR may contribute to the invasive characteristics of malignant pheochromocytomas and might be used as a marker to distinguish malignant from benign pheochromocytomas. HPR expression might also be used as a prognostic tool in guiding long-term patient follow-up.     

肾上腺偶发瘤临床分析

目的 总结肾上腺偶发瘤的临床、内分泌及病理学特点. 方法回顾性分析97例病理确诊肾上腺偶发瘤患者的临床资料.男53例,女44例.平均年龄45岁.肿瘤位于左侧38例、右侧52例、双侧7例.有较完整内分泌检测资料者74例.肿瘤最大直径由B超确定8例、CT确定54例、MRI确定35例. 结果 97例中恶性肿瘤20例(20.6%),其中肾卜腺皮质癌12例、恶性嗜铬细胞瘤3例、转移癌2例,肉瘤、神经母细胞瘤、恶性神经鞘瘤各1例;肾上腺皮质腺瘤26例(26.8%),良性嗜铬细胞瘤21例(21.6%),髓脂肪瘤9例(9.3%),肾上腺囊肿13例(13.4%),节细胞神经瘤5例(5.2%),神经纤维瘤3例(3.1%).高血压病患者40例(41.2%),功能性偶发瘤21例(28.4%).肿瘤直径<4 cm者25例(25.8%)、4～6 cm者33例(34.0%)、>6 era者39例(40.2%).肿瘤直径<4 cm者中恶性肿瘤仅1例(4%).恶性肿瘤直径(9.9±4.6)cm,良性肿瘤直径(5.6±3.2)锄(P=0.01).恶性肿瘤中直径>6 cm者15例(75.0%),良性肿瘤中27例(35.1%,P=0.001).恶性肿瘤患者体质量减轻者5例(25.0%),良性肿瘤者中2例(2.6%,P==0.004). 结论 肾上腺偶发瘤中皮质腺瘤、良性嗜铬细胞瘤和恶性肿瘤居前3他,偶发瘤均应进行详细的内分泌检测,肿瘤直径<4 cm足筛选无内分泌异常的偶发瘤随访时的一项重要指标.     

多种蛋白在肾上腺肿瘤组织中的表达及临床意义

目的 探讨多种蛋白:增殖细胞相关的核抗原(Ki67)、肿瘤抑制基因p53、细胞角蛋白(CKL)、上皮膜抗原(EMA)、酸性钙结合蛋白S-100、神经元特异性烯醇酶(NSE)、嗜铬素A(CgA)、突触素(syn)、癌胚抗原(CEA)和肿瘤转移抑制基因nm23在肾上腺肿瘤组织中的表达及临床意义.方法 应用单克隆抗体免疫组化技术链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(S-P法)检测163例肾上腺肿瘤组织中多种蛋白的表达,并收集患者的一般资料,包括患者年龄、临床症状、检验结果、病理类型等,进行统计学处理.所有资料应用SAS 6.12软件分析处理,以P＜0.05作为检验标准. 结果 CKL、S-100,NSE、CgA、Syn、nm23在肿瘤组织中表达明显升高(P＜0.05).S-100、CgA、Syn表达与病理类型显著相关(P＜0.05),3种蛋白表达两两互呈正相关性(P＜0.01).CKL,S-100、NSE、CgA、Syu、nm23在肾上腺良恶性肿瘤中的表达无差异(P＜0.05),但明显高于正常肾上腺组织(P＜0.05).Syn在肾上腺皮质腺瘤中的表达明显高于皮质腺癌(P＜0.05),Ki67在肾上腺皮质腺瘤中的表达明显低于皮质腺癌(P＜0.05).EMA、CKL在肾上腺皮质肿瘤中的表达明显高于髓质肿瘤(P＜0.05),S-100、Syn、NSE、CgA在肾上腺皮质肿瘤中的表达明显低于髓质肿瘤(P＜0.05). 结论 CKL、S-100、NSE、CgA、Syn、nm23这6种蛋白为肾上腺肿瘤的良好标志物,可用于肾上腺肿瘤的定性诊断.联合检测Syn和Ki-67对肾上腺皮质肿瘤的鉴别诊断有重要的参考价值.联合检测EMA、CKL、S-100、Syn、NSE及CgA并紧密结合临床则有助于皮髓质肿瘤的鉴别.     

血管内皮生长因子、血小板反应素1在肾上腺皮质肿瘤中的表达及其意义

目的讨论血管内皮生长因子（VEGF）与血小板反应素1（TSP-1）在肾上腺皮质肿瘤中的表达及其临床意义。方法选取经手术治疗且取得完整临床资料的肾上腺皮质肿瘤石蜡包埋标本37例,其中良性组20例,恶性组（ACC组）17例。采用免疫组化技术,检测并分析良、恶性肾上腺皮质肿瘤中VEGF和TSP-1的表达情况。结果TSP-1在ACC组中呈低表达（5／17,29．41％）,在良性组中表达高（13／20,65．00％）,ACC组与良性组之间TSP-1的表达有显著性差异（P〈0．05）。VEGF在ACC组中呈高表达（70．59％）,在良性组中表达较低（25．00％）,VEGF在ACC组中的表达与在良性组中的表达有显著性差异（P〈0．05）。微血管密度（MVD）在ACC组中的表达为（76．40±15．64）／视野,良性组中为（21．05±8．07）／视野,两者之间有显著性差异（P〈0．05）。VEGF的表达和MVD呈正相关（P〈0．01）,TSP-1的表达和MVD呈负相关（P〈0．01）。VEGF的表达和TSP-1的表达呈负相关（rs＇=-0．386）。结论VEGF与TSP-1表达不平衡可能是肾上腺皮质肿瘤肿瘤性血管生成的重要原因,有望为抗肿瘤靶向治疗在ACC中的应用提供相应的理论依据。     

类肝素酶-1和血管内皮生长因子在嗜铬细胞瘤中的表达及其相关性

目的通过检测类肝素酶-1（HPA）、血管内皮生长因子（VEGF）在良、恶性嗜铬细胞瘤中的表达情况,探讨HPA、VEGF能否成为预测恶性嗜铬细胞瘤的指标,并阐明二者间的关系。方法选取1986年10月～2006年8月住院经手术治疗,且具有完整的临床、病理和随访资料的嗜铬细胞瘤患者存档石蜡标本38例,其中良性嗜铬细胞瘤21例,恶性嗜铬细胞瘤17例。恶性嗜铬细胞瘤组中首次手术确诊为嗜铬细胞瘤后随访28～179个月;良性嗜铬细胞瘤组中首次手术确诊为嗜铬细胞瘤后随访93～264个月。另取20例因良性肾疾患行肾切除时获取的同侧正常肾上腺组织作为对照组。采用免疫组织化学技术,检测良、恶性嗜铬细胞瘤及20例正常肾上腺髓质组织中HPA和VEGF的表达情况。结果HPA在恶性嗜铬细胞瘤中高表达（76．47％）,在良性嗜铬细胞瘤中表达较低（28．57％）,在正常肾上腺髓质组织中无表达,恶性嗜铬细胞瘤组与良性嗜铬细胞瘤组及恶性嗜铬细胞瘤组与正常。肾上腺髓质组织组之间HPA的表达有显著性差异（P〈0．05）。VEGF在恶性嗜铬细胞瘤中呈高表达,阳性率为82．40％,在良性嗜铬细胞瘤和正常。肾上腺髓质组织中的阳性率分别为23．80％、5．00％,VEGF在恶性嗜铬细胞瘤中的表达与在良性嗜铬细胞瘤和正常肾上腺髓质组织中的表达有显著性差异（P〈0．05）。在嗜铬细胞瘤中HPA与VEGF的表达呈正相关。结论HPA和VEGF有望成为预测恶性嗜铬细胞瘤的指标。