嘌呤霉素氨基核苷大鼠模型的研究进展

嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)是研究微小病变型肾病(minimal-change nephropathy syndrome,MCNS)和局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomeruloscleorosis, FSGS)的理想动物模型,但所用剂量、给药途径的不同可使诱发的肾病有所区别.     

黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素诱导的大鼠慢性肾病的作用研究

目的：观察黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素（PAN）诱导的大鼠慢性肾病的作用。方法：Wistar大鼠雄性,40只,130～140g,SPF级,随机分为假手术组、模型组、蒙诺组、黄葵胶囊组。除假手术组外,各组均行颈静脉插管术缓慢推注PAN（40mg/kg体重）后,再进行3次小剂量尾静脉追加（5mg/kg体重）诱导大鼠慢性肾病,假手术组同样行颈静脉插管术和尾静脉追加给等容积0.9%生理盐水,观察56d。颈静脉给药后第5、10、15、20、28、42、56天时检测24h尿蛋白,第57天时处死动物检测血清总蛋白（TP）、血清白蛋白（Alb）、三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平;对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分;采用免疫组化法,观察黄葵胶囊对α-SMA蛋白在肾脏组织表达的影响;取脾脏、胸腺和睾丸,取脏器指数观察该药对免疫系统、生殖系统的影响。结果：黄葵胶囊对PAN诱导的尿蛋白大量排泄有降低趋势,对肾功能的损伤有所改善,对肾小球硬化有显著改善作用（P〈0.01）,对α-SMA蛋白在肾脏组织表达有所降低,脾脏、胸腺和睾丸指数没有变化。结论：黄葵胶囊对PAN诱导的大鼠慢性肾病有一定的治疗作用,但对免疫系统、生殖系统未见毒副作用。     

黄芪甲苷联合糖皮质激素治疗嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠的疗效及其机制

目的:观察黄芪甲苷（astragaloside IV,AS-IV）联合糖皮质激素干预治疗嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside,PAN）肾病大鼠的疗效,并探讨其相关机制。方法:40只150~180 g无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组（PAN组）、黄芪甲苷干预组...     

益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其机理研究

目的：探讨益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷（PAN）诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其作用机制。方法：Wistar大鼠随机分为假手术组、PAN模型组、益肾活血方高剂量组（YHF-H）、益肾活血方中剂量组（YHF-M）、益肾活血方低剂量组（YHF-L）、蒙诺治疗组（FP）。采用颈静脉注射结合尾静脉加强注射PAN的方法制作肾病模型。PAN首次注射后第5、10、15、20、25和30天测定24h尿蛋白定量;31d后处死动物,做血清总蛋白、血清白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等血生化学检查、肾脏组织光学显微镜和电子显微镜检查以及逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分析各组大鼠肾脏骨形态蛋白及其基因表达的情况。结果：益肾活血方能有效抑制由PAN所诱导的尿蛋白排泄增高、血清蛋白降低和血脂升高,减轻肾小管间质病变、抑制BMPRⅡ和Smad1在肾组织内的表达。结论：益肾活血方对PAN诱导的大鼠肾病综合征有治疗作用,其机制可能与调节骨形态蛋白表达有关。     

1,25(OH)2D3抑制嘌呤霉素氨基核苷酸肾病大鼠足细胞凋亡

目的 观察1，25（OH）2D3对嘌呤霉素氨基核苷酸（PAN）肾病大鼠足细胞凋亡的影响。 方法 72只雄性SD大鼠随机分为健康对照组（NC）、PAN组和1，25（OH）2D3治疗组 [1，25（OH）2D3 0.2 μg·kg-1·d-1灌胃]。一次性尾静脉注射PAN 100 mg/kg体质量建立足细胞损伤的PAN肾病动物模型。于3、7、14、21 d分批处死动物，分别检测不同时间点尿蛋白量（24 h）和肾功能。光镜和透射电镜观察肾组织学改变。TUNEL法检测足细胞凋亡。RT-PCR、免疫荧光、免疫组化分别检测nephrin、TGF-β1 mRNA和蛋白的表达。Western印迹检测磷酸化（p）-Smad2/3的表达。 结果 （1）PAN组各时间点BUN、Scr、尿蛋白量（24 h）[7 d时，（20.26±4.87） mg比（1.01±0.41） mg，P < 0.01]均高于同期的NC组，而肾小球足细胞显著减少[14 d时，(10.9±4.2) 个/肾小球切面比(31.9±6.2)个/肾小球切面，P ＜ 0.01]，且足突增宽融合。1，25（OH）2D3治疗组各时间点尿蛋白量（24 h）[7 d时（9.95±3.82） mg]和BUN、Scr显著低于PAN组（P < 0.05），且肾脏病理改变减轻。（2）PAN组7 d时nephrin mRNA和蛋白的表达显著降低，nephrin由正常的沿毛细血管襻线状分布向颗粒状、团快状改变，足细胞凋亡数显著增加[14 d时，（37.4±7.9）个/肾小球切面]。与PAN组相比，1，25（OH）2D3治疗组各时间段nephrin mRNA和蛋白的表达显著增加，且保持着正常的沿毛细血管襻线状分布，足细胞凋亡数显著减少[14 d时，(21.9±6.2) 个/肾小球切面，P < 0.01]。（3）PAN组TGF-β1 mRNA和蛋白的表达以及p-Smad2/3蛋白的表达均高于NC组（P < 0.01），1，25（OH）2D3治疗组TGF-β1 mRNA和蛋白的表达以及p-Smad2/3蛋白的表达低于PAN组（P < 0.01）。 结论 1，25（OH）2D3能有效地抑制PAN诱导的足细胞凋亡，减少尿蛋白，其对足细胞损伤的保护作用可能与抑制TGF-β1信号通路有关。     

肾炎康复片改善大鼠慢性肾损害的作用观察

目的：观察肾炎康复片对氨基核苷嘌呤霉素（PAN）诱导的大鼠慢性肾病的治疗作用。方法：实验大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙诺对照组、肾炎康复片组，利用PAN诱导大鼠肾病综合征伴局灶节段性肾小球硬化模型，观察药物对大鼠24h，尿蛋白定量，血清总蛋白、白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等生化学指标的影响，对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分，探讨肾炎康复片对肾病综合征、蛋白尿、肾小球硬化及肾间质纤维化的治疗作用。结果：肾炎康复片能明显抑制大鼠大量尿蛋白排泄，提升血清总蛋白和白蛋白含量，改善脂代谢紊乱，降低血清尿素氮，改善肾脏病理损伤。结论：肾炎康复片能减轻由PAN诱导的肾组织损伤，减少尿蛋白的排泄，改善肾功能障碍和脂蛋白代谢紊乱。     

黄芪甲苷保护嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞损伤及机制探讨

目的探讨黄芪甲苷对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响及可能机制。方法构建嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞损伤模型,根据不同处理将足细胞分成:Control组、PAN组(50μg/mL嘌呤霉素氨基核苷处理24 h)、AS-IV组(分别用5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL黄芪甲苷处理24 h)、AS-IV+PAN组(先用黄芪甲苷预处理30 min,再用50μg/mL嘌呤霉素氨基核苷处理24 h)。采用CCK-8检测足细胞生长活力,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,免疫荧光法检测足细胞标记蛋白,Western blot检测caspase-3、cleaved caspase-3及VEGFR2/GIV通路的蛋白水平。结果与Control组比较,PAN组足细胞的凋亡率显著增加(P0.05),nephrin、podocin、p-AKT的蛋白水平明显降低(P0.05),cleaved caspase-3、p-VEGFR2、p-GIV的蛋白水平均明显上调(P0.05);与PAN组比较,AS-IV+PAN组足细胞的凋亡率显著降低(P0.05),nephrin、podocin的蛋白水平明显增加(P0.05),cleaved caspase-3的蛋白水平显著下降(P0.05),p-VEGFR2、p-GIV、p-AKT的蛋白水平进一步上调(P0.05)。结论黄芪甲苷可以保护嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞损伤,VEGFR2/GIV通路可能参与其调节的作用机制。     

嘌呤霉素氨基核苷对足细胞信号转导通路影响的研究进展

蛋白尿是原发性肾小球疾病的临床表现之一,引起蛋白尿产生的主要原因是肾小球滤过屏障的完整性受到破坏.而足细胞是肾小球滤过屏障的主要成分,维持着滤过膜的完整性,从各种因素导致的足细胞损伤将会破坏滤过膜的完整性,从而产生蛋白尿.     

黏着斑分子α-parvin在大鼠嘌呤霉素肾病模型中的表达及其意义

目的研究大鼠嘌呤霉素肾病模型中α-parvin的表达变化,探讨其在蛋白尿发生中的作用。方法通过建立嘌呤霉素肾病模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,免疫组织化学法检测α-parvin在肾脏的表达与分布。结果（1）嘌呤霉素肾病4d组大鼠24h尿蛋白含量较对照组即已升高（P〈0．01）,嘌呤霉素肾病7d组达高峰（P〈0．001）。（2）透射电镜显示嘌呤霉素肾病4d组大鼠足突部分融合,嘌呤霉素肾病7d组大鼠足突广泛融合,嘌呤霉素肾病28d组大鼠足突形态有所恢复。（3）免疫组织化学显示随着α-parvin于肾小球的表达,嘌呤霉素肾病4d组α-parvin的表达较对照组即已升高（P〈0．05）。嘌呤霉素肾病7d组表达明显高于对照组（P〈0．01）。嘌呤霉素肾病28d组α-parvin的表达明显低于嘌呤霉素肾病7d组（P〈0．01）。结论大鼠嘌呤霉素肾病模型中,盯parvin的表达增加可引起足突融合,并与蛋白尿产生密切相关。     

嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠模型的病理机制研究进展

嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)大鼠模型是研究微小病变肾病(minimal change nephrotic syndrome,MCNS)和局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)病理损害的理想实验动物模型,该模型最主要的临床特征为大量蛋白尿.对于PAN导致肾脏损害的机制目前尚不十分清楚,然而,人们通过细胞培养和动物实验对其发生发展机制进行不断的深入研究,也取得了可喜的成果.本文对PAN模型肾病导致MCNS大量蛋白尿和FSGS的机制研究进展综述如下.     

环磷酰胺诱导少精子/无精子症大鼠模型所致睾丸、附睾IGF-I的变化

目的:探讨环磷酰胺(CP)对大鼠附睾和睾丸组织中胰岛素样生长因子I(IGF-I)表达的影响;方法:96只8周龄成年雄性SD大鼠,分为6组,每组16只。第1~5组分别给予CP 10、20、40、80、100 mg/(kg.d),第6组为对照组,给予生理盐水2 m l。胃管给药2周和4周后,处死大鼠,采用ELISA法对附睾组织洗脱液IGF-I进行定量检测;同时采用SP免疫组化法检测睾丸组织IGF-I的表达。结果:随着CP处理时间的延长和剂量的增加,IGF-I在大鼠附睾中的浓度逐渐下降,大鼠睾丸组织中IGF-I的表达也降低。结论:CP在引起大鼠少精子/无精子症的同时,可以显著降低大鼠附睾、睾丸IGF-I的含量和表达水平。IGF-I的降低与CP降低大鼠生精功能明显相关。