脊髓损伤与基因治疗

随着分子生物学技术的日益成熟,不少学者在中枢神经系统（ＣＮＳ）损伤方面进行了潜心研究,并取得一定成绩,为脊髓损伤后神经再生寻找到新的途径。一、影响脊髓损伤后神经再生的因素成熟神经元再生轴突的能力依赖于以下几个因素：（１）再表达生长相关基因的能力;（２）再生轴突能攀附及伸展的有效基质分子;（３）促进及引导轴突再生的有效神经营养因子;（４）是否存在损害轴突延伸的伴髓生长抑制因子［１］。脊髓组织作为成熟的中枢神经系统,其神经元已失去分裂和再生新神经元的能力,其髓鞘由少突胶质细胞而不是雪旺细胞组成,成熟…     

脊髓损伤的实验性治疗

脊髓损伤后之所以恢复困难，主要原因包括中枢神经系统轴突再生能力极其有限、成年人脊髓的少突胶质细胞不能像神经膜细胞那样在轴突断裂后引导轴突生长并形成髓鞘，以及神经因子分泌不足、轴突再生微环境中存在抑制因素、脊髓损伤后胶质瘢痕和空洞的形成阻止了轴突进入远端等。纵观脊髓损伤实验性治疗的历程，主要集中在药物治疗、神经营养因子治疗、拮抗轴突生长抑制因素，以及细胞或组织移植、组织工程治疗和基因治疗等方面，现分类综述如下。     

嗅鞘细胞在神经系统损伤修复中的作用

嗅鞘细胞是一种特殊的神经胶质细胞,也是目前唯一应用到临床治疗脊髓损伤的细胞。在神经系统损伤修复中,嗅鞘细胞具有改善损伤微环境、促进轴突再生、穿越胶质瘢痕、亲和神经元和导向神经再生方面的作用,为神经系统损伤修复及病变治疗提供了广阔的临床应用前景。     

脑源性神经营养因子与抑郁症关系的研究进展

神经营养因子（neurotrophin,NT）是一类能促进神经细胞生长、发育和分化的多肽或蛋白质,能调节神经元存活,激活酶的活性,阻止成年神经元损伤后的死亡,具有促进神经元损伤后的修复以及轴突再生,     

腺病毒介导脑源性神经营养因子基因转移对神经根损伤后神经元的保护和促轴突再生作用

目的：探讨腺病毒向脊髓内转移脑源性神经营养因子（BDNF）基因能否在脊髓水平修复神经根损伤。方法：在大鼠神经根切断吻合模型基础上，通过显微注射法在立体定位仪上将2μl复制缺陷型重组腺病毒载体（AxCA-BDNF)直接注入大鼠神经根损伤部相应的脊髓腹角。观察伤后脊髓尼氏染色神经元和轴突计量及形态学改变。结果：与单纯损伤组比较，注射AxCA-BDNF可明显增加神经根伤后尼氏染色阳性神经元的百分率、有髓神经纤维数目以及髓鞘厚度。结论：神经根重建结合BDNF基因治疗可明显减少神经根伤后尼氏染色神经元的死亡以及促进轴突再生，是一种新的有效的治疗神经根损伤方法。     

胚胎干细胞在脊髓损伤中的应用

神经干细胞具有自我增殖、分化、迁移及建立突触联系的特征,并可促进损伤神经组织的修复与再生。最近发现,经胚胎干细胞诱导的神经前体细胞植入受损伤的脊髓中,可分化为神经元和神经胶质细胞,并能促进脊髓功能的恢复,提示胚胎干细胞在中枢神经系统的治疗中具有广阔的应用前景。     

骨髓间充质干细胞移植促进脊髓损伤修复的机制

目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对损伤脊髓神经功能恢复的影响及其机制.方法 采用纽约大学脊髓重物坠落仪制作大鼠脊髓损伤模型.脊髓损伤后7d,在损伤中心周围移植BMSCs( BMSCs组)或注射PBS( PBS组).采用BBB评分评价大鼠脊髓功能.测定脊髓空洞体积,透射电镜观察脊髓损伤中心轴突的数量.采用绿色荧光蛋白(GFP)转基因大鼠的BMSCs示踪移植细胞,观察BMSCs移植后在脊髓中的存活及向神经细胞分化的情况.采用脊髓埋管模型,研究BMSCs移植对损伤脊髓轴突再生的影响.结果 BMSCs组BBB评分显著高于PBS组,而其脊髓空洞体积明显小于PBS组.电镜下可见,在脊髓损伤中心BMSCs组的轴突数量明显多于PBS组.细胞移植后4周,在脊髓损伤中心周围可见大量BMSCs - GFP细胞.免疫荧光染色结果表明,脊髓移植的BMSCs并不表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的表面标志性蛋白.脊髓埋管实验发现,在种有BMSCs的导管内可见有NF阳性的神经纤维的长入,而未种有BMSCs组的导管内未见神经纤维的生长.结论 脊髓损伤后进行BMSCs移植可促进损伤脊髓功能的恢复,其机制与BMSCs移植促进神经元轴突再生的作用有关.     

脑源性神经营养因子与外伤性脑损伤

脑损伤(BI)后,大脑神经元具有一定再生能力,但需要有神经营养因子(NTFs)的参与.脑源性神经营养因子 (BDNF)在大脑神经元以及胶质细胞中均可合成,不仅具有神经元保护和促进神经细胞的分化和再生功能,还对大脑损伤后脑功能的恢复起重要作用.进一步研究BDNF在脑损伤后的含量变化与损伤时间、损伤程度是否具有相关性,有可能为临床脑损伤的治疗、损伤时间、损伤程度的判断、以及判断预后提供新的方法.     

脑源性神经营养因子与外伤性脑损伤

脑损伤（BI）后，大脑神经元具有一定再生能力，但需要有神经营养因子（NTFs）的参与。脑源性神经营养因子（BDNF）在大脑神经元以及胶质细胞中均可合成，不仅具有神经元保护和促进神经细胞的分化和再生功能，还对大脑损伤后脑功能的恢复起重要作用。进一步研究BDNF在脑损伤后的含量变化与损伤时间、损伤程度是否具有相关性，有可能为临床脑损伤的治疗、损伤时间、损伤程度的判断、以及判断预后提供新的方法。     

问题4：脊髓损伤后对脊髓保护的药物有哪些进展？

解答：（1）甲泼尼龙是唯一一种经过前期临床试验的神经保护药；（2）促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）在缺血性脊髓损伤中能防止运动性神经元调亡，促进神经功能恢复，有效减轻受损脊髓细胞的脂质过氧化反应；（3）抗生素米诺环素能明显减少神经元轴突的坏死，能明显降低少突胶质细胞的调亡，减少损伤部位轴突的死亡。     

大鼠脊髓组织CNTFRα mRNA的表达及其坐骨神经损伤后表达的变化

目的：通过对大鼠脊髓组织中睫状神经营养因子受体α（ＣＮＴＦＲα）的分布与细胞定位及其在坐骨神经损伤后表达变化的研究，来探讨ＣＮＴＦ在脊髓组织中的可能作用。方法：利用原位杂交和点杂交的方法，对ＣＮＴＦＲα在大鼠脊髓组织中的分布与坐骨神经损伤后的表达变化进行研究。结果：ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ几乎存在于所有脊髓神经元与胶质细胞中；坐骨神经损伤后１ｄ表达增加，以后降到较低水平，到１４ｄ再次升高，但第２峰较第１峰为低。结论：ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ在大鼠脊髓组织中的广泛分布，表明ＣＮＴＦ对脊髓组织各类神经元与胶质细胞均有神经营养作用。坐骨神经损伤后１ｄ，ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ表达的增加，可能与损伤应激相关；１４ｄ的再次升高是否由于再生过程中，雪旺细胞大量增殖，ＣＮＴＦ大量表达所诱导，还有待进一步的研究；ＣＮＴＦＲα表达的改变，可能是损伤神经元在损伤与再生修复过程中，神经元本身代谢适应性改变的一部分     

移植神经干细胞促进脊髓全横断大鼠结构与功能修复的研究

目的　探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。方法　在脊髓全横断处移植神经干细胞 6 0d后 ,在横断处下方 3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元 ,用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化 ,同时用体视学方法观测脑干细核和大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层的神经元密度变化。用BBB评分法和爬网格法观测大鼠后肢运动功能的恢复等。结果　移植的神经干细胞能在宿主内存活并向前后方向迁移到脊髓内 ,部分神经干细胞分化为GFAP、NF - 2 0 0和GAP -43阳性细胞。移植神经干细胞后在红核和感觉运动区内锥体细胞层可见有被荧光金荧光金标记的神经元胞体 ,脊髓横断处附近脊髓组织的溃变程度减轻 ,红核及躯体感觉运动区内神经元密度高于未移植组 ,大鼠后肢的自主运动功能明显好于未移植组。结论　神经干细胞移植入损伤脊髓后能分化为神经元及神经胶质细胞 ,能减轻脊髓的继发性损伤 ,保护受损伤的神经元 ,促进运动功能的恢复     

脊髓损伤再生与修复的研究进展

脊髓损伤 (ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ ,ＳＣＩ)后的中枢神经再生 ,一直是生物医学界研究的前沿课题 ,尤其近10余年来进展较快 ,综述如下。1　影响中枢神经轴突再生的因素1 1　中枢神经再生的抑制性环境　 1981年 ,Ｄａｖｉｄ等[1] 研究证明 ,成年大鼠中枢神经细胞的轴突有能力再生 ,前提是必须为其提供有利的环境。在未损伤的中枢神经中 ,轴突与星形胶质细胞和少突胶质细胞相接触。ＳＣＩ后 ,发生了创伤性细胞反应 ,星形胶质细胞分裂 ,并衍化为“瘢痕性”胶质细胞 ;微胶质细胞和原始少突胶质细胞增殖并移向损伤区。中枢神经损伤区存…     

神经营养因子在脊髓的分布及其对脊髓损伤后再生的作用

神经营养因子是促进神经元发育、维持神经元特殊形态与功能的一类分泌性多肽.现在有大量证据表明NTFs在神经系统老化、创伤、神经退行性变等情况下能调节神经元的可塑性和神经再生.本文对神经营养因子及其受体在正常与受损伤脊髓的分布,以及对脊髓损伤的修复作用等进行了综述.     

神经生长因子与周围神经病变相关性研究进展

神经生长因子（nerve growth factor,NGF）是目前研究最为清楚的一种神经营养因子（NTFs）,具有营养、保护神经元及促进受损神经的再生和修复等多种生物学功能。研究表明NGF对周围神经系统的神经再生、生长发育、血管生成和轴突形成具有重要作用,提示NGF可应用于周围神经再生和修复。现将NGF对周围神经病变的作用机制和特点综述如下。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

来源于嗅觉系统的嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)具有外周与中枢胶质细胞特性,能够终生促进哺乳动物嗅神经再生。动物实验表明,OECs 移植治疗脊髓损伤能促进受损的运动、呼吸等功能恢复[1],且已在临床用于人类脊髓损伤的治疗。笔者就OECs生物学特性、OECs在脊髓损伤部位的迁移、促进轴索再生、提供神经营养、形成轴索髓鞘、OECs移植治疗脊髓损伤的安全性与可靠性、临床应用等方面的研究进展作一综述。     

酪氨酸受体激酶B在胚胎脊髓修复成鼠损伤脊髓过程中的变化

目的确定酪氨酸受体激酶Ｂ（ｔｒｋＢ）在胚胎脊髓修复成鼠脊髓损伤过程中的变化。方法将妊娠１４天胚胎脊髓植入急性损伤的成体脊髓后１，３，５，７，１０，１５和３０天，用原位杂交、斑点杂交和免疫组化技术对ｔｒｋＢｍＲＮＡ与蛋白作定性和定量观察。结果定性观察表明，在正常大鼠脊髓内，ｔｒｋＢｍＲＮＡ杂交产物主要分布在神经元和胶质细胞，神经纤维杂交反应不明显；脊髓损伤后阳性神经元和胶质细胞都有所增加，但阳性神经纤维增加的数目略为突出；胚胎脊髓植入损伤脊髓后，上述各阳性反应成分进一步增加，尤其是阳性神经纤维的增加更为显著。定量观察显示的ｔｒｋＢｍＲＮＡ的分子杂交反应与定性观察结果大体一致。免疫组化显色的ｔｒｋＢ蛋白，无论分布还是反应强度都与其ｍＲＮＡ的变化大致相符。结论损伤脊髓在移植修复过程中能够以调整受体合成的方式来适应营养环境的变化，但胶质细胞受体合成增加可能起了与神经成分争夺神经营养因子的副作用     

神经营养因子及其在周围神经损伤修复中的作用机制

作为一类神经生物活性物质，神经营养因子（neurotrophic factors NTFs）的发现为周围神经损伤修复的研究开辟了新的思路。周围神经损伤后，NTFs主要由神经膜细胞（schwann cells SCs）和神经末梢分泌，通过损伤的轴突逆行运输到神经元的相应胞体，对轴突再生和髓鞘化起促进作用。目前已发现的NTFs有20多种，其化学结构、分子量已明确，并可从动物神经组织中提取，其中少数已可人工合成，部分已应用于临床并取得良好效果。     

组织工程脊髓支架治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤后由于脊髓连续的中断、神经元细胞缺失、神经营养因子缺乏、胶质瘢痕和空洞形成等导致的脊髓损伤治疗困难.组织工程脊髓即通过建立脊髓支架,复合相应的种子细胞和神经营养因子,并植入脊髓损伤部位以达到治疗脊髓损伤的目的.其中支架材料的选择是制备组织工程脊髓的关键,随着近年来组织工程技术的不断发展,脱细胞技术已在组织工程心瓣膜[1]、角膜[2]、骨[3]、软骨[4]、血管[5]、皮肤[6]、膀胱[7]、肌肉[8]、周围神经[9]中广泛应用,并被证明免疫排斥反应轻微.组织工程脊髓是有可能治疗脊髓损伤的,但是无论从种子细胞的选择还是支架材料的构建,都还处于不断探索之中.笔者就近年来脊髓支架的研究现状及进展进行综述.     

人脑少突胶质细胞的培养与鉴定

少突胶质细胞是中枢神经的成髓鞘神经胶质细胞，它包绕神经纤维的轴突形成髓鞘，对轴突正常的电传导功能有重要作用。将少突胶质细胞移植人髓鞘形成障碍或脱髓鞘的中枢神经系统内，可揭示髓鞘形成和再生机制。由于体外培养的少突胶质细胞与其在体内的特性相关,因此通过体外培养研究可了解少突胶质细胞的存活、增殖、分化和发育过程中的细胞生物学变化。然而中枢神经系统具有细胞多样性，它包括神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞，所以必须对少突胶质细胞进行体外纯化。