DNA甲基转移酶在胃癌中的表达及其意义

背景:DNA甲基化在胃癌发生、发展中起重要作用,但DNA甲基化需要DNA甲基转移酶(DNMTs)的修饰。目的:探讨DNMTs在胃癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:采集80例胃癌组织及其癌旁正常组织,以免疫组化法检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b蛋白表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测4种胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞株中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA和蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中DNMT1阳性表达率显著升高(68.8%对10.0%,P0.01)。胃癌组织中DNMT1阳性表达率显著高于DNMT3a和DNMT3b(68.8%对38.8%、40.0%,P0.05),而癌旁组织中DNMT1阳性表达率显著低于DNMT3a和DNMT3b(10.0%对60.0%、52.5%,P0.05)。DNMT1阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期明显相关(P0.05),而DNMT3a和DNMT3b与胃癌临床病理特征均无关。与正常胃黏膜上皮GES-1细胞相比,胃癌细胞株中DNMT1 mRNA和蛋白表达明显增加,而DNMT3a和DNMT3b mRNA和蛋白表达明显降低。DNMT1表达与胃癌细胞分化程度有关(P0.05)。结论:DNMT1可能在胃癌的发生、发展中起有重要调节作用。     

抑癌基因PTEN、p27在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:研究胃癌患者癌组织中抑癌基因PTEN、p27的表达,探讨其与胃癌侵袭、转移发生的关系.方法:SP免疫组织化学法对90例胃癌组织及癌旁正常对照胃组织中PTEN、P27表达进行观察.结果:胃癌组织PTEN蛋白表达的阳性率显著低于对照正常组织,其表达水平与胃癌分化程度、淋巴结转移有关.P27在胃癌中表达,其阳性表达率亦明显低于正常组织,P27的表达也与胃癌分化、淋巴结转移均有关.PTEN、P27之间阳性表达呈正相关.结论:PTEN、P27蛋白表达水平与胃癌组织的分化程度及淋巴结转移发生显著相关,胃癌组织分化程度越差,有淋巴结转移的PTEN、P27蛋白表达水平低.     

胃癌组织中DMBT1蛋白的表达变化及意义

目的 观察胃癌组织中DMBT1蛋白的表达变化,并探讨其在胃癌发生、发展中的作用.方法 采用免疫组化法检测50例人胃癌组织及其相应癌旁正常胃黏膜组织中的DMBT1蛋白.结果 胃癌组织中DMBT1蛋白表达明显低于癌旁正常组织(P＜0.01);低、未分化癌组织中DMBT1蛋白表达明显低于高、中分化癌,Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期,伴淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(P均＜0.05).结论 胃癌组织中DMBT1表达变化与胃癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关,DMBT1可能参与胃癌的浸润、转移及恶性转化.     

Beclin 1和PTEN蛋白在胃癌中的表达及预后价值

目的 探讨Beclin 1和PTEN蛋白在胃癌发生过程中的意义及其对预后的影响.方法 应用组织芯片和免疫组织化学法检测199例胃癌及相应癌旁正常组织中Beclin 1和PTEN蛋白的表达,分析其与胃癌的关系;用Western印迹方法检测15例新鲜胃癌及相应癌旁组织中Beclin1和PTEN蛋白的表达率.所有标本均来自上海长征医院.结果 免疫组织化学法检测提示癌组织中Beelin 1和PTEN蛋白阳性表达率分别为47.2％(94/199)和55.8％(111/199),均低于相应癌旁组织的表达率[94.5％(188/199)和92.5％(184/199),P＜0.01].胃癌组织中Beelin 1和PTEN蛋白的低表达均与性别、分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移以及疾病分期有关(P＜0.05).胃癌组织中Beclin 1和PTEN的表达呈正相关(r=0.680,P＜0.01).生存分析表明Beclin 1和PTEN均是判断胃癌患者预后的独立因素.Beclin 1阳性患者的5年生存率为67.0％(63/94),阴性者为33.3％ (35/105);PTEN阳性患者的5年生存率为71.2％ (79/111),阴性者为21.6％(19/88)(P值均＜0.01).Western印迹方法检测结果提示胃癌标本中Beclin 1和PTEN蛋白含量明显低于相应癌旁正常组织(P值均＜0.01).结论 Beclin 1和PTEN的异常表达可能和胃癌的发生发展相关.     

胃癌中血管生成素-2的表达及意义

应用免疫组织化学方法检测55例胃癌组织、12例癌旁胃组织和正常胃组织中的血管生成素-2(Ang-2)蛋白的表达及微血管密度(MVD).发现Ang-2蛋白表达及MVD在胃癌组织中均显著高于癌旁正常组织及正常胃黏膜组织;胃癌中Ang-2表达与浸润深度、淋巴结转移、病理分期、肿瘤分化程度密切相关.认为Ang-2可能在胃癌的发生、发展中起重要作用,有望作为胃癌抗血管治疗的靶点.     

胃癌组织中CTGF蛋白表达及其临床意义

目的探讨结缔组织生长因子（CTGF）蛋自在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测10份正常胃黏膜组织、50份胃癌组织及其癌旁组织中CTGF蛋白表达情况。结果胃癌组织中CTGF阳性表达高于癌旁组织及正常胃黏膜组织,P〈0．05;癌组织CTGF阳性表达率明显高于正常黏膜组织（P〈0．01）,CTGF的高表达与胃癌分化程度、淋巴结转移密切相关（P均〈0．05）;与肿瘤浸润的深度无明显关系。结论CTGF蛋白可作为胃癌前病变及胃癌早期诊断和预后判断的指标。     

PUMA、caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的通过检测PUMA、caspase-3蛋白在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达水平,从而探讨两者在胃癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法针对40例胃癌组织标本及30例癌旁正常组织标本,通过免疫组化方法对其PUMA、caspase-3蛋白的表达进行测定。结果 PUMA蛋白在胃癌组织中的表达阳性率为22.5%(9/40),在癌旁正常胃组织中表达阳性率为66.7%(20/30),两者比较差异具有统计学意义;caspase-3在胃癌组织中的表达阳性率为25.0%(10/40),在癌旁正常胃组织中表达阳性率为70.0%(21/30),两者比较差异具有统计学意义。PUMA的表达与临床病理分期、肿瘤病理分化程度、是否伴有淋巴结转移有关,PUMA与caspase-3蛋白在胃癌组织中表达呈正相关。结论 PUMA与caspase-3蛋白在胃癌的发生发展中起重要作用,可能会成为胃癌的分子标记物或胃癌治疗的新分子靶点。     

鸟苷酸环化酶C和尾型同源盒转录因子2在胃癌及癌前病变组织中的表达及意义

目的 研究鸟苷酸环化酶C(GC-C)和尾型同源盒转录因子2(CDX2)基因与蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达并探讨其临床意义.方法 收集30例手术切除的胃癌及相应癌旁5 cm胃黏膜组织,另32例非胃癌患者胃镜下取活检标本,其中23例肠上皮化生、9例异型增生.应用逆转录(RT)-PCR检测GC-C和CDX2 mRNA在胃癌及癌旁组织中的表达,Western印迹和间接免疫荧光组化技术检测GC-C和CDX2蛋白的表达,同时检测两者在肠上皮化生和异型增生中的表达.结果 RT-PCR显示GC-C和CDX2 mRNA在胃癌中的表达率分别为20/30和19/30,显著高于癌旁组织(0/30和0/30,P值均=0.000).Western印迹检测GC-C和CDX2蛋白在胃癌组织中表达率分别为19/30和17/30,显著高于癌旁组织(0/30和0/30,P值均=0.000).免疫荧光检测GC-C和CDX2在癌旁组织中不表达,在肠上皮化生组织中表达率为39.1 %和39.1%、异型增生组织为55.6%和55.6%、胃癌组织为56.7%和60.0%,与癌旁组织间差异有统计学意义(P值均=0.000).但在肠上皮化生、异型增生和胃癌间阳性率比较差异无统计学意义(P值均＞0.05).两者在肠型胃癌中的表达高于弥漫型(P值分别=0.009和0.024),但与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度和淋巴结转移等因素无关(P值均＞0.05).在肠上皮化生和胃癌中GC-C与CDX2的表达呈正相关(r分别=0.4524和0.3845,P分别=0.0371和0.0408).结论 GC-C和CDX2的异常表达与胃黏膜癌变的发生有关,可能参与人胃腺癌致癌过程的调节,检测GC-C与CDX2有助于早期胃癌和胃癌前病变诊断.     

MTA1蛋白在胃癌中的表达及临床意义

应用免疫组化SP法检测67例胃癌、31例癌旁非典型增生及20例正常胃黏膜组织的MTA1蛋白表达,分析其与胃癌发生发展、浸润转移的关系.结果显示,MTA1蛋白在正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中的表达率分别为5.00%、22.58%和67.16%,组间比较均有统计学差异(P均<0.05);MTA1蛋白表达与胃癌浸润程度、分化程度及淋巴结转移密切相关(P均<0.05).提示MTA1参与胃癌的发生发展.     

胃腺癌组织RBMS1、AKAP12表达变化及其临床意义

目的 探讨胃腺癌组织RNA结合基序单链相互作用蛋白1(RBMS1)、A激酶锚定蛋白12(AKAP12)表达变化及其临床意义。方法 选择胃腺癌患者102例,取手术切除的胃癌组织及其癌旁组织(距肿瘤组织边缘5 cm以上,经病理检查明确为正常胃组织),采用免疫组化法检测RBMS1、AKAP12表达。比较胃癌组织与癌旁正常组织RBMS1、AKAP12阳性表达率,采用Pearson线性相关分析法分析胃癌组织RBMS1阳性表达与AKAP12阳性表达的关系。分析胃癌组织RBMS1、AKAP12阳性表达与临床病理特征的关系以及二者表达与预后的关系。结果 胃癌组织RBMS1阳性表达率显著高于癌旁正常组织,AKAP12阳性表达率显著低于癌旁正常组织(χ2分别为75.583、53.204,P均<0.05)。胃癌组织RBMS1阳性表达与AKAP12阳性表达呈负相关关系(r=-0.625,P<0.05)。胃癌组织RBMS1、AKAP12阳性表达与TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤部位、组织分化程度无关(P均>0.05)。所有患者术后随访2～36个...     

人宫颈癌基因在消化系肿瘤中的表达及其临床意义

人宫颈癌基因（HCCR）是在宫颈癌中发现的一个新的癌基因，可能通过负向调节p53而促进肿瘤发生。目的：检测HCCR在人胃癌、结肠癌、肝癌中的表达，探讨其与肿瘤临床病理特征的关系。方法：以免疫共沉淀法检测HCCR在消化系肿瘤患者外周血中的表达，以细胞免疫荧光和免疫细胞化学染色检测HCCR在消化系肿瘤细胞株中的定位和表达．以免疫组化方法检测HCCR在肿瘤组织中的表达，并分析其与肿瘤临床病理特征的关系。结果：HCCR在消化系肿瘤患者外周血中有表达，肿瘤细胞株中其表达定位于细胞膜和细胞质。HCCR在人胃癌、结肠癌、肝癌组织中的阳性表达率显著高于相应正常或癌旁组织（P〈0．05）。HCCR的阳性表达率与胃癌部位和肝癌组织学分级显著相关（P〈0．05），与其他肿瘤临床病理特征均不相关。结论：HCCR在人消化系肿瘤细胞和组织中表达较强，可能与肿瘤的发生、发展有关，有望成为消化系肿瘤诊断的标记物。     

胃癌组织中EphA2基因的表达及其与细胞凋亡、增殖的关系

目的 探讨EphA2基因在胃癌组织中表达的生物学意义及与细胞凋亡、增殖的关系.方法 利用免疫组织化学法(immunohisochemistory,IHC)检测82例胃癌手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜中EphA2的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹技术对其中随机选取的30例标本进行EphA2 mRNA及其蛋白的定量检测,分析其表达与临床病理参数的关系.采用流式细胞术(FCM)检测82例癌组织中细胞凋亡率及增殖指数(PI),分析EphA2表达与细胞凋亡、增殖的关系.结果 IHC结果显示EphA2在癌组织中的表达显著高于癌旁组织及正常胃黏膜(P<0.01),且随胃癌分化程度降低、浸润深度增加及淋巴结转移而升高(P<0.05),但与肿瘤大小、患者年龄无关(P>0.05);RT-PCR结果显示EphA2 mRNA在各组中的表达水平无显著性差异(P>0.05);Western印迹与IHC结果一致,显示EphA2蛋白在癌组织中异常高表达(P<0.01).FCM结果显示EphA2高表达组细胞凋亡率显著低于低表达组(P=0.018),而其PI显著高于低表达组(P=0.002).结论 EphA2在胃癌组织中表达明显上调,可抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,在胃癌的发生发展中发挥重要作用,其机制与EphA2 mRNA的转录异常无关,而可能是其翻译水平上调或蛋白质稳定性增高所致.     

胃腺癌组织中PINCH、COX-2蛋白的表达变化及意义

目的观察胃腺癌组织中PINCH蛋白、环氧合酶（COX）-2蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫化SP法检测30例正常胃黏膜组织和73例胃腺癌组织中的PINCH、COX-2蛋白。结果胃腺癌组织中PINCH、COX-2蛋白阳性表达率分别为75.34%、76.71%,明显高于正常胃黏膜组织的43.30%、40.00%,P均〈0.05。胃腺癌组织中PINCH、COX-2阳性表达与淋巴结转移有关（P均〈0.05）。胃腺癌组织中PINCH、COX-2的表达呈正相关性（r=0.587,P〈0.05）。结论胃腺癌组织中PINCH、COX-2高表达,其可能参与了胃腺癌的发生和转移。     

缺氧对人肝癌细胞株SMMC7721中HCCR表达的影响及其调控机制

背景：缺氧是实体瘤微环境的基本特征之一。人宫颈癌基因（HCCR）是新近发现的一种癌基因．在多种人类肿瘤中过表达。然而,尚缺乏HCCR在肿瘤缺氧环境中的表达及其调控机制的研究。目的：探讨缺氧对人肝癌细胞株SMMC7721中HCCR表达的影响及其调控机制。方法：SMMC7721细胞分别接受缺氧培养以及LY294002（P13K特异性抑制剂）和PD98059（MEK1特异性抑制剂）预处理＋缺氧培养,以蛋白质印迹法检测HCCR表达：将含HCCR启动子片段的荧光素酶报告基因质粒转染SMMC7721细胞,检测缺氧对HCCR启动子转录活性的影响。结果：缺氧环境下SMMC7721细胞中HCCR蛋白表达和转录活性均较常氧环境中升高,LY294002和PD98059可抑制缺氧环境下HCCR蛋白表达。结论：缺氧状态下人肝癌细胞株SMMC7721中HCCR蛋白表达和启动子转录活性增高。可能是肿瘤细胞在缺氧实体瘤组织中存活和快速增殖的重要机制之一。缺氧状态下HCCR蛋白表达受P13K／Akt和MAPK这两条信号通路的调节。     

Relationship between expression and distribution of cyclooxygenase-2 and bcl-2 in human gastric adenocarcinoma

AIM: To explore expression and distribution features of COX-2 and bcl-2 in human gastric adenocarcinoma tissues and to study its biological significance. METHODS: Totally 36 human gastric carcinoma samples were enrolled in this study (cardiac adenocarcinoma 16 cases, distal gastric adenocarcinoma 20 cases). The expressions of COX-2 and bcl-2 in cancerous tissues and corresponding para-cancerous tissues were investigated by immunohistochemistry using COX-2 polyclonal antibody and bcl-2 monoclonal antibody. The normal gastric mucosa tissues were used as control. RESULTS: The expressions of COX-2 and bcl-2 in gastric carcinoma were significantly higher than that in the para-cancerous tissues (77.8% vs 47.2%, P<0.01, 80.56% vs 58.33%, P<0.05). The expression of COX-2 in cardiac adenocarcinoma was remarkably higher than that in the distal gastric carcinoma (93.8% vs 65.0%, P<0.01). The expression of COX-2 was mainly localized in the cytoplasm of tumor cells and partly in the nucleus. There is a transition of the COX-2 cytoplasmic positivity to nucleic in tumor cells with the increase of gastric carcinoma pathological grade. Interstitial macrophages, fibroblasts and vascular endothelial cells also expressed COX-2. The tissues with higher expression of COX-2 also expressed high level of bcl-2 protein. CONCLUSION: Abnormal expression pattern of COX-2 within the tissues of human gastric cancer is correlated with tumor location and lymph node metastasis. COX-2 may regulate expression of apoptosis suppressor gene (bcl-2) through interaction of tumor cells and stromal cells and play an important role in the generation and development of tumors, which will be of great help in developing new methods for antitumor therapy.     

MCM2和Rb蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨微小染色体维持蛋白2（MCM2）和视网膜母细胞瘤易感基因（Rb）在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测MCM2和Rb蛋白在80份胃癌组织（胃癌组）、30份非典型增生组织（增生组）及20份正常胃黏膜（正常组）中的表达,以标记指数（LI）量化其阳性表达,并分析两者表达的相关性及其与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组、增生组MCM2蛋白的LI明显高于正常组,Rb蛋白的LI明显低于正常组,P均〈0.05;MCM2和Rb蛋白表达与胃癌临床分期、浆膜浸润、术后复发、肝转移及淋巴结转移密切相关,与肿瘤大小及组织学类型无明显相关。胃癌组织中MCM2和Rb的LI表达呈显著负相关。结论MCM2表达升高和Rb蛋白表达下降与胃癌的发生、发展密切相关,检测MCM2和Rb有助于判断胃癌恶性程度及预后。     

胃癌及癌前病变中p53蛋白的检测及意义

探讨p53蛋白表达与胃癌及癌病变的相互关系,方法：用免疫组化染色示检测33例肠化,26例异型增生和26例胃癌组织中p53蛋白的表达。结果：p53蛋白在胃癌组织中表达率最高（61．5％）,在异型增生和肠化组织中的表达率分别为34．6％和12．1％,组间有显著差异,各期胃癌组织中p53蛋白的表达无显著差异,结论：p53蛋白在胃癌前病变中已有阳性表达,在肠化、异型增生及胃癌组织中,其表达率依次增高,p53蛋白积累主要发生在癌前病变晚期及胃癌早期,其表达与胃癌发生密切相关。     

胃癌组织cyclinE表达的临床病理意义

目的　Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 蛋白在细胞周期的Ｇ１ 晚期起作用,加速Ｇ１Ｓ期转化,与人类肿瘤有关． 本研究探讨ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 蛋白在胃癌的意义．方法　用敏感而特异的免疫组化ＳＰ 法测定胃癌石蜡切片中ｃｙｃｌｉｎ Ｅ蛋白的异常表达．结果　Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 在胃癌中表达６２ ％ （ｎ ＝ ６０ ,Ｍ＝ ４３ ,Ｆ＝ １７ ,３２岁～７３ 岁） ,与癌旁组织２６ ％ 相比有显著差异（ Ｐ＜ ０－０５） ．Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ表达与组织病理分化程度呈负相关． 分化差的胃癌组织ｃｙｃｌｉｎ Ｅ蛋白表达越强,ｃｙｃｌｉｎ Ｅ与肿瘤侵袭、淋巴结转移、远处转移无明显关系．结论　Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ 蛋白与胃癌发生有关,与胃癌进展无关．ＣｙｃｌｉｎＥ 蛋白可做为胃癌的一个潜在的诊断和判断预后的指标．     

COX-2与MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的　探讨COX 2和MMP 2蛋白在胃癌组织中的表达、相互关系及意义。方法　应用免疫组化S P法检测 45例胃癌及 2 0例正常胃组织MMP 2、COX 2蛋白的表达情况。结果　 45例胃癌组织COX 2的表达阳性率为 60 % ( 2 7/ 45 ) ,2 0例正常胃组织COX 2的表达阳性率为 15 %O( 3 / 2 0 ) ,COX 2在胃癌组织中的表达阳性率显著高于正常胃组织中的表达阳性率 (P <0 0 1) ;45例胃癌组织中MMP 2的表达阳性率为 64 4% ( 2 9/ 45 ) ,2 0例正常胃组织MMP 2表达阳性率为 2 5 % ( 5 / 2 0 ) ,MMP 2在胃癌组织中的表达阳性率显著高于在正常胃组织中的表达阳性率 (P <0 0 1) ;在胃癌组织中MMP 2、COX 2蛋白的表达之间存在显著正相关 (rs=0 5 69,P <0 0 1)。结论　胃癌组织中存在COX 2、MMP 2的高表达 ,且两者之间的表达强度具有等级相关性。COX 2蛋白可通过诱导MMP 2蛋白的表达上调 ,增加胃癌细胞的侵袭力 ,从而成为其促进胃癌浸润、转移的途径之一     

Combined expression of gastrointestinal hormone SP and anti-apoptosis geneBcl-2 in gastric carcinoma

AIM To study the combined expression of gastrointestinal hormone substance P and anti-apoptosis gene Bcl-2 in gastric carcinoma and its significance.METHODS Substance P and Bcl-2 protein expression was examined by the S-P immunohistochemicalmethod in 33 cases of gastric carcinoma, 17 adjacent the carcinoma and 13 normal gastric mucoma.RESULTS Positive expression of SP in gastric carcinoma was higher than that of both adjacent and normalmucosa (P < 0.001). There was no statistical difference in the positive expression between adjacent andnormal mucosa (P > 0.05). The expression of bcl-2 both in gastric carcinoma and adjacent tissues werehigher than that of normal gastric mucosa (P< 0.05-0.01). But the positive expression of Bcl-2 had nostatistical significance between gastric carcinoma and adjacent tissues.CONCLUSION Both gastrointestinal hormone SP and Bcl-2 gene have synergistic expression in gastriccarcinoma, indicating that they all take part in the occurrence of gastric carcinoma. Abnormal expression ofBcl-2 gene occurred in benign gastric pathological changes, once they become carcinoma, the positiveexpression of cell is no more increased, possibly because that there is no more increase of the intensity of Bcl-2 inhibition of cell apoptosis.