氯化甲基汞对雄性小鼠的生殖毒作用

以１／５０００ＬＤ５０、１／１０００ＬＤ５０和１／１００ＬＤ５０的氯化甲基汞剂量分别给雄性小白鼠经口染毒７５天后，测定睾丸组织中的ＬＰＯ和ＬＤＨ－ｘ。结果表明，实验组的ＬＰＯ高于对照组；１／１０００ＬＤ５０和１／１００ＬＤ５０组的ＬＤＨ－Ｘ均低于对照组和１／５０００ＬＤ５０组；睾丸脏器系数各组间无差别。同时探讨了甲基汞造成雄性动物生殖能力下降的可能机制。     

甲基汞对小鼠睾丸生殖细胞凋亡作用

目的研究甲基汞对小鼠睾丸生殖细胞凋亡及其作用机制。方法采用原位末端标记（TUNEL）和免疫组织化学方法研究甲基汞对小鼠睾丸生殖凋亡及其凋亡基因的表达。结果甲基汞可使雄性小鼠睾丸生殖细胞的凋亡率增加，随着甲基汞染毒剂量的增加，1150LD50、1／10LD50组凋亡率与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．0S）。1／10LD50剂量染毒组低于1150LD50组，差异无统计学意义（P〉0．05）。Fas、Fas—L、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（caspase-3）表达增强，11100LD50组阳性表达率最高，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），随着染毒剂量的增加。各染毒组的阳性表达率有所下降。结论甲基汞可以诱导雄性小鼠生殖细胞的凋亡。     

利用白消安致BALB/c小鼠生殖毒性建立NOA疾病模型

目的利用白消安对BALB/c雄性小鼠生殖毒性,建立不同损伤程度的NOA(non-obstructive azoospermia,NOA)动物模型。方法本研究取6~8周龄性成熟的BALB/c雄性小鼠共45只,随机分为3组:0 mg/kg组、30 mg/kg组、40 mg/kg组,每组15只。每2周观察并记录小鼠体重,睾丸和附睾湿重,睾丸体积,及生精细胞损伤程度。通过HE染色,判断生精细胞受损情况;通过免疫组化技术检测受损生精细胞停滞的减数分裂阶段,该法主要借助生精细胞减数分裂过程中的三个标记蛋白:STRA8(Stimulated by Retinoic Acid 8,STRA8)减数分裂启动标记蛋白,SCP3(Synaptonemal Complex Protein 3,SCP3)减数分裂中标记蛋白,TNP1(Transition Protein 1,TNP1)减数分裂后标记蛋白。结果注射白消安后小鼠存活良好,注射白消安2周时,生精细胞开始损伤,30 mg/kg组轻于40 mg/kg组;4周时,40 mg/kg组呈唯支持细胞样变化;6-10周时,生精功能开始恢复,30 mg/kg组恢复明显快于40 mg/kg组;40 mg/kg组STRA8、SCP3、TNP1表达在注射4周最低,第8周开始恢复到正常水平。结论白消安40 mg/kg组单次注射4周时,可建立为唯支持细胞型NOA生精障碍模型;单词注射4-8周期间,可建立损伤程度不同的NOA生精障碍模型,为睾丸组织体外培养提供稳定的研究组织。     

Melatonin prevents damage elicited by the organophosphorous pesticide diazinon on mouse sperm DNA

Toxic effects of pesticides are commonly associated with DNA damage. To evaluate the effect of the organophosphate diazinon on sperm DNA and to test whether melatonin could prevent this damage, male mice were intraperitoneally treated with melatonin, diazinon (1/3 or 2/3 LD50) or both; cauda epididymal spermatozoa were obtained on days 1 and 32 postinjection and tested for DNA alterations. On day 1, sperm from diazinon-treated mice showed augmented DNA breakages and reduced chromatin packaging, whilst DNA damage increased only in the diazinon 2/3 LD50 group. Micronucleus test of bone marrow cells demonstrated somatic cell chromosomal damage in both diazinon-treated groups. Pretreatment with melatonin before diazinon acute administration improved all parameters studied on day 1 pi. The organophosphorous pesticide diazinon is a dose-dependent testicular toxicant that alters the sperm DNA structure; melatonin is able to prevent this damage.     

砷染毒大鼠生精细胞凋亡及端粒酶活力的变化

目的观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及端粒酶活力表达的变化。方法将40只健康雄性清洁级SD大鼠随机分成4组,分别为低、中、高剂量(0.375、0.75、1.5 mg/kg)砷染毒组和对照组,以灌胃法连续染毒16周后计算各组大鼠精子头计数,并计算睾丸脏器系数、每日精子生成量(DSP)。采用TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞端粒酶活力的表达。结果与对照组比较,中剂量组(0.75 mg/kg)和高剂量组(1.5 mg/kg)睾丸精子头计数和DSP均显著降低(P<0.01),生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P<0.01),生精细胞端粒酶活力表达明显降低(P<0.01);每日精子生成量与生精细胞凋亡呈负相关(r=-0.563,P<0.01);生精细胞凋亡与端粒酶活力呈负相关(r=-0.896,P<0.01)。结论一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞端粒酶活力,促进生精细胞凋亡而导致精子生成量减少,产生雄性生殖毒性。     

汞蒸气对雄性小鼠的生殖毒性研究

实验小鼠每天暴露于汞蒸气中染毒２ｈ，每周６天，连续２个月。结果发现，汞在睾丸组织呈现一定的蓄积作用。睾丸组织形态学观察发现，染毒组出现曲细精管层次紊乱、层次减少以及退行性变等病理变化。血清睾酮含量降低，与对照组相比有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。睾丸及附睾乳酸脱氢酶同功酶Ｘ相对含量，各剂量组对照组比无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。染毒组精子精量减少、活动能力下降、畸形率增高，０．１４６和０．３３８ｍｇ     

S型氯代甘油醇对雄性ICR小鼠生育力的影响

目的研究S型氯代甘油醇对雄性ICR小鼠生育能力及睾丸、附睾的组织病理学影响。方法雄性性成熟ICR小鼠64只,随机分为4组,每组16只。实验组分别给予1/40、1/20、1/10LD50(小鼠经口LD50117.54mg/kg)S型氯代甘油醇,对照组给予等体积双蒸水。连续灌胃染毒5天后,每组取4只雄鼠按雌/雄1∶1交配,此后每隔2天交配一次,持续2个月,观察S型氯代甘油醇对雄性小鼠交配指数和雄性生育力指数的影响。实验结束后,每组保留6只动物继续染毒至8个月后进行附睾精子计数和睾丸、附睾的组织病理学检查。结果①与对照组相比,染毒S型氯代甘油醇2个月未引起雄性ICR小鼠交配指数和雄性生育力指数显著降低(P>0.05);②染毒8个月未导致附睾精子数量显著降低(P>0.05),睾丸和附睾的组织病理学检查未见明显异常。结论低剂量长期染毒S型氯代甘油醇对雄性小鼠不具有抗生育作用。     

输精管结扎对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的:研究输精管结扎对大鼠曲细精管生精细胞凋亡的影响及其机制。方法:将大鼠输精管结扎,1～10周后利用免疫组化法检测曲细精管生精细胞Bax和Bcl-2的表达情况,并应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测生精细胞的凋亡数目。结果:免疫组化法显示结扎后大鼠生精细胞Bcl-2的表达同假手术组比较无明显差异,而Bax的表达明显升高。结扎后不同时期组与同期假手术组比较,TUNEL法显示生精细胞凋亡数前者均高于后者(P<0.05)。结论:输精管结扎会导致大鼠曲细精管生精细胞凋亡数增加。     

Effects of subchronic exposure of laboratory mice to benzylbutyl phthalate (BBP) on the quantity and quality of male germ cells

The aim of the study was to investigate the effect of 8-weeks exposure of male mice to benzyl butyl phthalate (BBP) on the sperm count and quality of gametes. Pzh:Sfis male mice exposed per os to 450 mg/kg bw (1/16 LD50) and to 1800 mg/kg bw (1/4 LD50) of BBP in olive oil were used in the study. Control mice were treated with olive oil only. Groups of animals were killed 4 and 8 weeks after the start of exposure and 4 weeks after he end of exposure. Sperm count, motility, morphology and DNA damage in gametes were estimated in the study. Sperm counts were diminished 4 and 8 weeks after the start of exposure to BBP. In the same time decrease in sperm motility and dose-dependent increase in the frequency of abnormal sperm heads and slight increase in DNA damage were noted. 4 weeks after the end of exposure, slight decrease in sperm counts in the group of 1/4 LD50 was observed, only. Correlation between sperm count and testes and epididymes weight were noted. Themost sensitive to BBP exposure occurred spermatozoa and spermatids.     

饮用水中2,6-二氯-1,4-苯醌的体内急性毒性和遗传毒性研究

目的研究饮用水中2,6-二氯-1,4-苯醌(2,6-DCBQ)对小鼠的急性毒性和遗传毒性作用。方法选择健康6~8周龄SPF级昆明小鼠进行试验。将50只小鼠随机分为5组,分别为阴性对照(玉米油)组和215、464、1 000、2 150 mg/kg 2,6-DCBQ染毒组,每组10只,雌雄各半。采用一次性经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg。染毒后观察14 d,记录动物死亡数,计算其半数致死剂量(median lethal dose,LD50)。将50只小鼠随机分为5组,分别为溶剂对照(玉米油)组和62.5、125和250 mg/kg 2,6-DCBQ染毒组及阳性对照组(40 mg/kg环磷酰胺),每组10只,雌雄各半。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg,两次灌胃间隔24 h;第二次灌胃后6 h,进行骨髓细胞微核试验。将50只雄性小鼠随机分为5组,分别为溶剂对照(玉米油)组和62.5、125和250 mg/kg 2,6-DCBQ染毒组及阳性对照组(40 mg/kg环磷酰胺),每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg,连续灌胃5 d。染毒后第35天,进行精子畸形试验。结果 2,6-DCBQ对雄性、雌性小鼠经口急性毒性的LD50分别为501 mg/kg(95%CI:344~730 mg/kg)和584 mg/kg(95%CI:430~794mg/kg)。不同剂量2,6-DCBQ染毒组小鼠的骨髓细胞微核率及精子畸形率与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。各组PCE/NCE值均在正常范围内。结论 2,6-DCBQ对小鼠经口急性毒性属于低毒级,且未发现其具有遗传毒性。