杂交瘤细胞大量培养的现状

1975年Kohler和Milstein创建的杂交瘤细胞培养技术,在短短的10年时间里,得到了很大的发展。现在从细胞融合到抗体生产,直至抗体的纯化和应用都有了惊人的进展。美国FDA(食品和药物管理局)已批准了60套以上由单克隆抗体(McAb)制成的诊断试剂。至少有100家公司正在致力开发抗体产品。Damon Biotech和Bio-Response公司正在筹建一套能生产近千克抗体的设     

IgY技术及其医药应用:理论基础

卵黄抗体技术 (IgY技术 )正在成为生物技术领域和医药研究中的新热点 ,并且越来越得到国内同仁的重视。因为卵黄抗体 (IgY)化学性质稳定 ,产量高、成本低 ,以及动物种系发生学距离的优势 ,更适于生产特异性抗体 ,具有开发功能性食品和新药的潜能。该文述及该技术发展的背景和理论基础 ,详细综述了禽类的免疫学系统、IgY技术的生物学基础、理化参数和稳定性     

鼠源抗体的基因改造工程的发展与未来

抗体技术发展经历了三个阶段,杂交瘤技术出现使第一 代抗体-血清多克隆抗体,发展到第二代抗体-单克隆抗体, 其在理论和实践上的应用成为解决生物学、医学等许多重大 问题的手段。由于异源蛋白会引起人抗鼠抗体反应,而人源性单抗的生产有许多技术问题,因此随着基因工程技术的发展人们开始对鼠源单抗的基因进行种种改造,目的在于尽量减少抗体中的鼠源成份,但保留原特异性。主要包括合抗体 片段的杂合分子、鼠源单克隆抗体的人源化和小分子抗体。 嵌合抗体(Chimeric　Antibodies) 嵌合抗体是抗体基因工程的早阶段产物,由于抗体的特异性决定于…     

免疫鸡产生IgY抗体的技术

IgY技术正在成为生物技术领域和医药研究中的新热点 ,并且越来越得到国内同仁的重视。因为卵黄抗体 (IgY)化学性质稳定 ,产量高、成本低 ,以及动物种系距离的优势 ,更适于生产特异性抗体 ,具有开发功能性食品和新药的潜能。作为系列介绍的第二部分 ,本文详细介绍和探讨免疫鸡产生IgY抗体技术的主要技术环节和实践应用方面的具体信息 ,包括动物饲养 ,对鸡的免疫 ,抗体特性 ,IgY提取技术 ,鸡单克隆抗体的制备等方面。     

内分泌激素的磁分离酶联免疫技术检测

磁分离酶联免疫技术(MAIA)是20世纪80年代中期由瑞士Serono诊断中心发明的一种非同位素免疫检测的先进技术(美国专利号4659678)，亦称为磁性抗体免疫技术。这种技术是与免疫酶系统(磁性颗粒)结合，使用两种高亲和力单克隆抗体的一种测定法，它使双抗体夹心酶联免疫技术在对游离型标记抗体和抗原即抗体复合物分离中完全快速地分离。     

06051 抗体的R＆D和生产

据PhRMA(美国药物研究与制造商协会)最新估计，在369个处于开发中的生物技术药物中有约70个是单克隆抗体(MAb)。一些公司在开发人MAb的同时，还加强抗体生产技术和规模的研究。     

用获自大肠杆菌的人α2干扰素预防鼻病毒性感冒

本文报道用 DNA 重组技术从大肠杆菌生产的人α2干扰素(HuIFNα2)预防鼻病毒性感冒的效果。把41名受试前对人鼻病毒9型(HRV9)的中和抗体滴度≤24的志愿者,分为干扰素组和安慰剂组两组。用 DNA 重组技术制备的     

高活性抗体

日本 Kyowa公司正在开发一种可产生高活性抗体 ( Ab)的新方法 ,它将作为公司的核心技术用于制备新型治疗性 Ab。这项技术可使具有强烈细胞介导的细胞毒性( ADCC)的 Ab制品进行商品化生产。降低 Ab中岩藻糖量能增强 ADCC的活性。动物研究证实 ,此法生产的 Ab的抗肿瘤作用比传统 Ab强 1 0 0倍。公司希望这种改变能减少治疗剂量和副作用。已在变态反应模型中检测这种 Ab,发现 Ab具有很高活性。高活性抗体@陈敏     

抗体工程——发展单克隆抗体的策略

抗体工程是指能分离出可产生某一种预定性质抗体的杂交瘤的选择工程。本文综述杂交瘤技术的进展,并阐述单克隆抗体(McAb)的体外生产及其用于诊断试剂、工业化提纯和治疗等方面的前景。杂交瘤技术的近况一、免疫免疫的目的是取得分裂活跃并能产生特异性抗体的B淋巴细胞。在免疫过程中有许多变化因素:如被激活的B淋巴细胞的来源(动物和器官的种类)和免疫程序(包括抗原量、佐剂的选择和免疫途径)等。所以,现用     

一种三特异性抗体设计以及功能研究

设计三特异性抗体并对其生物活性进行检测。利用已有的单克隆抗体和FIT-Ig(Fabs-in-tandem immunoglobulin)双特异性抗体,通过IgG1 cFAE(Controlled Fab-arm-exchange)技术方法进行Fab交换,获得三特异性抗体。使用SEC-HPLC分析方法初步鉴定抗体的单体纯度;通过Octet Red系统鉴定三特异性抗体对3个抗原的结合活性;LC-MS检测其分子量从而确定三特异性抗体的结构正确性。37℃放置实验检测其稳定性。通过FAE的方式成功合成的三特异性抗体纯度达到94%,结构稳定可长时间保存,有效保留了3个抗原结合的活性。结合实验结果显示,三特异性抗体对三个靶点都具有很好的亲和力。文章所述方法可成功产出同时靶向ROR1,CD3和CMET三个靶点的三特异性抗体,很好地保留了抗体的Fc和Fab结构;同时,三特异性抗体结构和功能效应稳定,该生产技术和标准的大规模抗体制造兼容,有很好的工业生产前景。随着多靶点抗体在疾病治疗中的不断探索,三特异性抗体的研发和成功制备可为多种疾病治疗奠定新的大分子结构基础。     

抗体收获澄清技术及工艺影响因素

随着抗体生产上游工艺强化, 细胞培养密度增加、抗体表达滴度提高, 对收获澄清工艺造成前所未有的挑战。抗体收获澄清的工艺质量直接影响到下游纯化、精纯及最终抗体的产量和质量。此文整理并介绍了目前业内常用的抗体/重组蛋白收获澄清技术的优缺点和适用性, 并重点介绍了新型收获澄清技术, 如层析式澄清技术;进一步分析了影响收获澄清工艺方案确定的主要因素:适用性(浊度、处理量、收率、处理规模)、澄清效率和经济效益。深层过滤技术在浊度控制、载量、收率和效率方面均具备一定优势, 是目前抗体/重组蛋白收获澄清工艺应用最广泛的技术, 但也有其应用局限性。生产商需要结合项目特点、自身资源及综合成本对收获澄清技术进行全面考察。     

单克隆抗体用于人类疾病的治疗、预防和体内诊断

1989年5月在荷兰乌德勒支召开了国际生物标准化协会会议.会议介绍和讨论了生产稳定和高质量抗体的技术和临床应用中引起的一些问题以及新的检测方法.为了产生更复杂、有效的单克隆抗体(McAb),需要一些新方法,其中有些是崭新的如DNA重组技术,有些则是常规杂交瘤技术的改进.通过选择合适的异体骨髓瘤,产生了能较长期保持良好的稳定性和生产率的人杂交瘤,其程度取决于淋巴细胞的来源.用EB病毒(EBV)转化法获得了人抗恒河猴(Rh)因子的单克隆抗体,已证明这些细胞系的稳定性超过3年,生产的抗体浓度为     

Octapharma与Fresenius Kabi公司达成有关HESylated重组蛋白的协议

BioSante制药公司的蛋白表达技术2A/Furin技术获得两项美国专利。第一个美国专利覆盖生产重组抗体的方法，专利号为763059。在病毒载体上表达抗体时结合应用2A／Furin技术，有可能快速产生稳定、抗体高产的细胞系，这样可减少商业化抗体生产的时间和成本。     

Ⅰ型脊髓灰质炎病毒壳体蛋白VP1在大肠杆菌中的表达

脊髓灰质炎(以下简称脊灰)病毒壳体多肽中的VP1能诱生中和性抗体,在探索用DNA重组技术生产亚单位脊灰疫苗时,应研究VP1在大肠杆菌中的纯化和表达。     

单克隆抗体生产技术的现状与前景

自从Kohler和Milstein于1975年发明杂交瘤技术以来,该技术已广泛应用于医学基础研究,临床诊断治疗及其他科学领域的研究.随着机械化工、计算机学科的发展,单克降抗体(mAb)的生产技术日益丰富.本文对体内外生产mAb的技术及其优缺点作一综述,力图展示近年来mAb技术的最新动态及发展前景.       

抗体技术的研发现状与展望

伴随着抗体的发现和对抗体认识的不断加深,抗体技术的研究正在不断拓展,同时抗体技术的创新加速了新的抗体药物的研发和生产水平的提升.根据发展历程,抗体技术分为多克隆抗体技术、杂交瘤单克隆抗体技术和基因工程抗体技术3个阶段.目前,最新抗体技术主要有杂交瘤单克隆抗体技术、抗体文库展示技术、转基因动物技术和单细胞测序技术等,各有...     

Rh(D)阴性孕妇备血策略

目的:根据Rh(D)阴性的孕妇血型及不规则抗体检测结果,做好产前准备,保证孕妇安全生产。方法:用微柱凝胶法检测孕妇血型及不规则抗体,并据此准备合适的血液。结果:为血型Rh(D)阴性及不规则抗体检测阳性的孕妇及时准备了异体或自体血液,全部孕妇均安全生产。结论:根据孕妇的血型,制订相应的备血策略,对保证孕妇生产和生命安全有重要意义。     

抗ENA抗体及抗核抗体的检测在系统性红斑狼疮中的临床意义

系统性红斑狼疮(SLE)是一种慢性多系统的疾病,因伴有多种血清自身抗体,被认为是一种典型的自身免疫性疾病。较高的特异性自身抗体已作为疾病的血清标记抗体广泛应用临床诊断,我们采用免疫印迹法技术(IBT)对SLE病人血清中核抗原(ENA)多肽抗体谱和抗核抗体(ANA)进行了检测。     

2010年中国人免疫球蛋白中EV71中和抗体效价的比较研究

目的:了解2010年我国生产的静注人免疫球蛋白(IVIG)中抗-EV71中和抗体效价的情况,为治疗EV71引起的手足口病(HFMD)提供特异性治疗药物。方法:采用经典微量细胞病变法,应用近2年分离自中国大陆的2株肠道病毒71型(EV71)病毒株,对我国不同血液制品厂家生产的97批IVIG进行抗-EV71中和效价检测,比较不同批次IVIG的EV71中和效价。结果:19家生产企业生产的97批IVIG的EV71中和效价几何平均滴度(GMTs)为1∶180(1∶170～1∶191)。其中有7家生产企业生产的12批制品的中和效价大于1∶256,以S公司生产的20100406批制品效价最高为1∶543,以A公司生产的含有1∶256以上效价的IVIG批数最多(5批),使该公司生产的IVIG的平均EV71中和抗体效价显著高于其他10家企业(P<0.05)。进一步分析显示,该2个公司分别是通过对献血员的EV71中和效价进行筛选,挑选出高效价血浆和选择人群抗体水平较高地区作为血浆来源地进行投料,而制备出了含有高效价EV71中和抗体的IVIG。结论:本研究显示,生产企业只要对原料血浆进行合理控制,制备出含有高效价EV71中和抗体的...     

基因工程抗体在临床上的应用

用基因工程技术生产抗体，并赋予其许多新的特性，极大地拓展了抗体的功能及其在临床上的应用范围。ＰＣＲ技术为获得抗体基因提供了有效、快捷的实验手段，噬菌体表面表达技术简化了高异质性抗体基因的获得，ＤＮＡ重组技术使体外生产抗体成为可能。低成本、人源化及双特异等诸多特点使基因工程抗体在治疗和诊断上的应用更加广泛。根据最近文献对基因工程抗体及其应用前景进行了综述。