髓鞘碱性蛋白微基因修饰雪旺细胞移植对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白-43表达的影响

目的　研究pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞 (Schwanncell,SC)对大鼠脊髓损伤 (spi nalcordinjury,SCI)后神经生长相关蛋白 - 4 3 (growthassociatedprotein - 4 3 ,GAP - 4 3 )表达的影响。　方法　采用 12 0只大鼠脊髓半横切损伤模型 ,随机分为三组 :pSVPoMcat微基因修饰SC移植组 (A组 )、单纯SC移植组 (B组 )、损伤对照组 (C组 )。应用免疫组织化学方法动态观察SCI后GAP - 4 3的表达 ,同时采用联合行为记分 (CBS)观察大鼠神经功能恢复情况。　结果　SCI损伤后 1周 ,A、B、C三组间GAP - 4 3表达差异无显著性意义 ;SCI后 2 ,4 ,8周 ,三组间表达顺序为A >B >C ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;其间A组在 2周时达到最高峰 ,此后逐渐下降 ,12周时A、B、C三组间差异无显著性意义。A组大鼠神经功能恢复最好。　结论　pSVPoMcat微基因修饰SC移植有促进SCI后GAP - 4 3表达和大鼠神经功能恢复的作用     

pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞移植对脊髓损伤的修复作用

为观察pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞（SC）移植对脊髓损伤的修复作用，采用切割法制备脊髓半模断损伤模型（T8平面）。实验动物随机植入pSVPoMcat微基因修饰的SC（A组）、SC组（B组）和损伤对照组（C组），每组40只。术后应用联合行为记分（CBS）和皮层体感诱发电位（CSEP）动态观察大鼠功能恢复情况，应用原位杂交和免疫细胞化学方法观察胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。术后3月行MRI观察，并用免疫组化对神经轴突进行神经中丝（NF）染色。结果显示，A组能抑制大学损伤后的GFAP表达；MRI发现，A组大鼠脊髓损伤（SCI）区脊髓信号已基本恢复正常，B组未恢复正常，而C组SCI有软化灶形成。与NF染色发现一致。A、B两组潜伏时波幅呈恢复的趋势，与A组接近正常，与CBS结果一致。提示，pSVPoMcat微基因修饰SC移植能抑制SCI后GFAP的表达，促进神经轴突的生长并对神经功能恢复有明显的促进作用。     

急性脊髓损伤患者血清髓鞘碱性蛋白测定及临床意义

急性脊髓损伤患者血清髓鞘碱性蛋白测定及临床意义宋跃明李箭毛庆人类髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）是中枢神经系统所特有的蛋白质．近年来大量研究表明，当中枢神经系统遭受损伤或患某种急性疾病时，血脑屏障受到破坏或通透性发生改变，使患者血清中ＭＢＰ的含量明显增高［１］...     

移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞在鼠脊髓内长期存活及其基因表达

目的：观察人Po-5,flanking介导的21．5ku髓鞘碱性蛋白（myelin basic protiein,MBP)微基因（暂命名为pSVPoMcat)修饰雪旺细胞（SC）在鼠脊髓内存活及其基因表达。方法：120只大鼠分为3组,A组为pSVPoMcat微基因修饰SC移植组;B组为高纯化SC移植组;C组为脊髓损伤（SCI）＿对照组,伤后各组分别于2,4,8,12周（每组每次10只）,取移植区脊髓切片,进行S－100蛋白,MBP免疫细胞化学染色及地高辛(DIG)标记的hMBPF2 cDNA探针的原位杂交（ISH）测定。结果：伤后2,4,8,12周,A组S－100,MBP染色细胞和ISH细胞差异无统计学意义（P＜0．05）,其中ISH阳性细胞可见髓鞘形成,B组的S－100染色细胞逐步递减,差异有非常显著性意义（P＜0．01）,未发现MBP染色细胞以及ISH细胞,C组未发现任何阳性细胞,结论：pSVPoMcat微基因修饰SC在鼠损伤脊髓内能长期存活并表达外源基因,且有助于受伤脊髓的髓鞘形成。     

胚胎脊髓移植对大鼠损伤脊髓胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 研究大鼠脊髓损伤后胚胎脊髓（ＦＳＣ）移植是否能够影响胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）的表达和伤后大鼠后肢功能的恢复情况。方法 将６０只大鼠分为脊髓半脊髓半切洞损伤＿胚胎脊髓移植组（Ａ组）和单纯脊髓半切洞损伤组（Ｂ组）。伤后１,３,,７,１４,２８天,应用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况,应用原位杂我和免疫细胞化学方法观察ＧＦＡＰ的表达,并采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果 大鼠脊髓     

雪旺细胞移植治疗晚期脊髓损伤的康复护理

脊柱骨折往往伴有严重的脊髓损伤,随着人类社会的进步,快速交通工具的发展,脊髓损伤发生率逐年上升。脊髓损伤是一种起病急、致残率较高的创伤性疾病,脊柱骨折伴脊髓损伤行椎体固定术后,常因不能正确进行早期康复训练,残存的肢体功能得不到开发,导致截瘫患者永远与轮椅相伴。2001年8月-2011年1月,我科开展雪旺细胞（SC）移植治疗晚期脊髓损伤配合康复训练。SC移植后2-8W时随访,按美国脊髓损伤学会（ASIA）脊髓损伤神经功能分类国际标准评价,78例患者的脊髓功能均有部分恢复,现报告如下。1资料与方法     

少突胶质前体细胞移植治疗对大鼠脊髓损伤轴突髓鞘化的影响

目的 探讨少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)移植治疗对大鼠脊髓损伤轴突髓鞘化的影响.方法 采用Allen法制作大鼠T10脊髓损伤模型,亚急性期OPCs移植治疗.通过HE染色、免疫组化染色、髓鞘染色及透射电镜观察等方法,研究OPCs移植治疗对大鼠脊髓损伤轴突髓鞘化的影响.结果 移植术后8周时大鼠损伤脊髓内检测到移植细胞分布,HE染色显示OPCs移植组大鼠脊髓组织结构较对照组改善,勒克司坚牢蓝(LFB)髓鞘染色表明OPCs移植组大鼠脊髓内髓鞘含量(7 802.42±1 085.58)明显高于对照组(5 055.98±916.74)(P＜0.01),OPCs移植组大鼠脊髓组织内髓鞘碱性蛋白(MBP)表达水平(8 544.44±812.78)较对照组(5 243.83±808.27)显著增高(P＜0.01),透射电镜示OPCs移植组大鼠脊髓组织髓鞘化超微结构改善也较对照组明显.结论 OPCs移植治疗有助于改善大鼠脊髓损伤轴突髓鞘化情况.     

不同功率半导体激光照射与大鼠脊髓生长相关蛋白表达的关系

目的 研究不同功率半导体激光照射损伤的大鼠从骨神经后脊髓中生长相关蛋白（GAP－43）的表达与激光功率和照射时间的关系。方法 172只雄性SD大鼠制成从骨神经损伤模型,随机分为1个对照组和3个激光照射组,每组42只。分别以功率为5、10和15mW、波长810nm的半导体激光照射激光组大鼠神经损伤部位,第天1次,连续照射10天。照射后1、3、7、14、28、42和56天取恨鼠脊髓用于免疫组化方法观察脊髓内GAP－43表达的变化。结果 半导体激光照射后第7天内各激光照射组和对照组无明显差异。第14天和第28天时15mW激光照射组脊髓内GAP－43表达高于对照组。第56天时激光照射组较对照射组脊髓内GAP－43表达稍低,5mW和10mW激光照射组与对照组比较无明显差异。结论 15mW半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中GAP－43表达的变化,对神经再生过程有一定的影响,5mW和10mW半导体激光照射对损伤神经的鼠中GAP－43表达作用不明显。     

少突胶质前体细胞移植治疗对大鼠脊髓损伤轴突髓鞘化的影响

Objective To investigate the effects of transplantation of oligodendrocyte precursor cells (OPCs) on axonal myelination after spinal cord injury in a rat model. Methods A rat model of spinal cord injury at the tenth thoracic vertebral level (T10) was produced by Allen weight-drop impact method. OPCs implantation was performed at the subacute stage of spinal cord injury. Effects of OPCs transplantation on axonal myelination after spinal cord injury were evaluated by HE staining, immunohistochemistry, myelin staining and transmission electron microscopy. Results The implanted cells were still observed in lesioned segments of spinal cord eight weeks after transplantation. The results of HE staining clearly showed better structure of spinal cord in OPCs-transplanted group than that of control group.Myelin staining also demonstrated that the amount of myelin in white matter of lesioned cord in the OPCs-transplanted group (7 802.42 ± 1085.58) was higher than that of the control group (5 055.98 ± 916.74)(P ＜0.01 ). Expression of myelin basic protein (MBP) was significantly increased in the OPCs-trans-planted group (8 544.44 ±812.78) as compared with that of the control group (5 243.83 ±808.27)(P＜0.01). Moreover, transmission electron microscopy further confirmed the improvement of micro-structure of myelination in OPCs-treated rats. Conclusion OPCs transplantation can improve axonal myelination in rat with spinal cord injury.     

移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞对脊髓损伤早期作用的实验研究

目的 探讨移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞(SC)对损伤早期脊髓组织的作用。方法 切割击造成脊髓半横断损伤(T8平面)模型。术后将实骚动物分为pSVPoMeat微基因修饰SC组(A组)，SC移植组(B组)，损伤对照组(C组)和正常对照组(D)。术后8h，取脊髓伤段标本，用地高辛(DIG)标记的C-fos探针行原位杂交，并分别用干湿法，原子吸收光谱法测量水、钙含量和比色法测量丙二醛(MDA)含量。结果1．脊髓损伤(SCI)后，伤段脊髓组织C-fos基因在各试验中表达顺序为，C＞B＞A＞D，P＜0．05。2．损伤脊髓段组织钙旮量，MDA含量明显增多，组织水肿严重，在各实验组中，水、钙受MDA含量为C＞B＞A＞D，结论移植pSVPoMcat擞基因修饰SC对损伤脊髓早期有明显的保护作用，其保护作用与押音；C-fos基因表达，稳定钙离子水平受降低MDA含量有关。     

大鼠脊髓损伤后碱性成纤维细胞生长因子的变化

大鼠脊髓损伤后碱性成纤维细胞生长因子的变化常楚王星铎吕刚原银栋朱悦笔者利用免疫组织化学染色及图像分析技术，研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）在大鼠脊髓中的分布及其在脊髓损伤后的变化，为进一步...     

胚胎脊髓移植联合应用bFGF对脊髓损伤后神经再生的影响

目的 探讨胚胎脊髓（Fetal spinal cord,FSC）移植联合外源性碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）的应用对脊髓损伤后脊髓神经再生的影响。方法 采用大鼠胸段（T8～T11）脊髓左侧半横切损伤模型。移植供体为同种异体妊娠14天的孕鼠,将实验动物分为3组：A组为损伤——FSC移植组;B组为损伤＋FSC移植＋bFGF组;C组为单纯损伤组。术后1～8周每周行综合行为评分（combined behavioral score,CBS）,评定大鼠功能,并取术后8周损伤区脊髓组织0.5cm作嗜银梁色及NF200免疫组织化学检查,分别标记轴突和胶质细胞,进行定量分析,观察神经纤维再生情况。结果 胚胎脊髓移植和外源性bFGF可以防止成鼠脊髓损伤后神经元的萎缩,图像分析发现其作用A、B组组优于C组,可以较好地恢复神经元形态。CBS评分提示大鼠神经功能的恢复也有同样趋势,治疗组统计学分析与对照组间有显著性差异。免疫组织化学检查,术后8周A、B组神经中丝（neurofilament,NF）着色点较C组密集,且没有明显的胶质增生。结论 脊髓损伤后联合应用胚胎脊髓移植和bFGF可以防止神经元的萎缩,并且对神经纤维再生及功能的恢复有促进作用。     

生长相关蛋白-43与周围神经损伤及再生

生长相关蛋白(ＧＡＰ-43)是一种胞膜磷酸蛋白质,与神经再生关系密切,周围神经损伤后,其含量可增加20～100倍,近年对其研究日渐深入。笔者就周围神经损伤和修复与ＧＡＰ-43的关系综述如下。一、ＧＡＰ-43的生化特征ＶａｎＤｏｎｇｅｎ等将调节磷酸肌醇代谢的突触蛋白质命名为Ｂ-50;Ｎｅｌｓｏｎ等将海马中与持久电位有关的蛋白质命名为Ｆ1;Ｍｅｉｒｉ等将从生长锥分离的主要磷酸化蛋白质称为ＰＰ46;Ｂｅｎｏｗｉｔｚ等[1]分析了上述蛋白质的性质、分布及功能,确认其实际上是同一种蛋白质,分子量为43000～57000,等电点为4.3～4.5。近年来多用…     

碱性成纤维细胞生长因子对脊髓损伤后神经再生的影响

脊髓损伤后功能恢复不良的主要原因为伤后继发性损害不断加重 ,发展成为不可逆损害。如何保护脊髓组织、减少脊髓继发性损害成为当今研究的重点。碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉ ｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ)是近年来引起人们关注的新的神经营养因子 ,在机体的胚胎发育、血管形成、创伤愈合及神经系统生长发育过程中起重要作用[1 ] 。为探讨ｂＦＧＦ对脊髓损伤后神经组织再生的影响 ,笔者通过免疫组织化学方法及特殊染色手段 ,观测ｂＦＧＦ对脊髓损伤后神经再生的影响 ,为临床应用ｂＦＧＦ治疗脊髓损伤提供…     

磁刺激和碱性成纤维细胞生长因了对脊髓损伤后神经再生的影响

脊髓损伤预后不良的主要原因为伤后继发性损害和神经再生困难。碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）是一种能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞增殖的多肽生长因子，对神经具有保护作用。     

细胞外三磷酸腺苷对大鼠脊髓损伤后微管相关蛋白-2表达及运动功能恢复的影响

目的 研究细胞外三磷酸腺苷（ATP）对大鼠脊髓损伤后微管相关蛋白-2（MAP-2）表达运动功能恢复的影响。方法 健康成年Wistar大鼠66只，随机取6只作为正常对照组，余60只制作成脊髓打击伤动物模型，随机分为两组：A组（ATP组）和B组（对照组），每组30只大鼠。伤后1，3，7，14，28d取材，应用免疫组织化学方法观察MAP-2的表达，采用计算机图像分析系统，进行定量分析；并用改良的Tarlov评分观察大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复情况。结果脊髓损伤后14d和28d，A组大鼠MAP-2的表达明显强于B组（P＜0．05）；损伤后14d和28d，A组大鼠改良Tarlov评分明显大于B组（P＜0．05）．结论细胞外ATP能促进大鼠损伤脊髓表达MAP-2，并能促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复。     

肢体创伤后反应性神经体液髓鞘碱性蛋白的表达与释放

采用犬双后肢低、高速投射物致伤模型，探讨了神经体液中髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）的表达与释放。结果发现，伤后脑脊液、血清、脑组织ＭＢＰ含量增高，尤以高速组明显；低速组下丘脑，高速组下丘脑、海马区ＭＢＰ－ｍＲＮＡ表达增强。提示肢体局部严重致伤，虽未直接伤及大脑，但中枢神经系统确不同程度、不同范围的应激受损。     

神经生长因子对脊髓损伤后c-fos mRNA 和c-fos蛋白表达的影响

为进一步研究神经生长因子（ＮＧＦ）保护脊髓损伤组织的作用机制，进行了ｃ－ｆｏｓ基因的原位杂交和免疫组化研究。一、材料与方法实验分组：Ｗｉｓｔａｒ大鼠４５只，雌雄不分，体重２００～２５０ｇ。随机分成３组：正常对照组（鼠数＝５），不损伤脊髓，作为ｃ－ｆｏ...     

高压氧对大鼠脊髓损伤后脊髓组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 探讨高压氧对大鼠脊髓损伤组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)变化的影响及其对减轻脊髓损伤炎性反应的作用.方法 160只成年健康SD大鼠,按数字表法随机平分为脊髓损伤组、脊髓损伤+高压氧组、假手术对照组、假手术对照+高压氧组4组,每组再随机平分为1、3、7、14d4个亚组,每亚组10只.在大鼠脊髓损伤后不同时间点,使用脊髓损伤大鼠功能恢复评分(BBB评分)评价后肢功能恢复情况,采用荧光定量PCR、Western blot、免疫组化法,测定HMGB1、核因子κB(NF-κB)的表达.结果 脊髓损伤后损伤组织HMGB1和NF-κB的mRNA及蛋白表达明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.01);高压氧干预后,脊髓损伤组织HMGB1 mRNA及蛋白表达降低,1d和3d时差异无统学意义(P＞0.05),7d和14 d时差异具有统计学意义(P＜0.05);高压氧干预后,脊髓损伤组织NF-κBmRNA及蛋白表达降低,1d时差异无统计学意义(P＞0.05),3、7、14 d时差异具有统计学意义(P＜0.05);高压氧干预后,7、14 d BBB评分明显改善,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 高压氧可降低HMGB1表达,减轻脊髓损伤继发炎性反应,促进大鼠神经功能的修复.