黄芪多糖诱导的树突状细胞疫苗对S180荷瘤小鼠Th1/Th2类细胞因子的影响

目的探讨黄芪多糖诱导成熟的树突状细胞(DC)肿瘤疫苗对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及作用机制。方法体外培养小鼠骨髓来源的DC,加入黄芪多糖诱导成熟,以S180肿瘤抗原致敏获得DC肿瘤疫苗。建立S180荷瘤小鼠模型,分为模型组、环磷酰胺组、黄芪多糖组、细胞因子组,在荷瘤第5天和第10天分别给予相应治疗。荷瘤第12天摘取肿瘤组织、胸腺、脾脏称质量,计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ水平。结果黄芪多糖组、细胞因子组的抑瘤率高于环磷酰胺组(64.25%、64.10%vs35.11%),胸腺指数高于环磷酰胺组(1.69±0.26、1.74±0.38 vs 1.45±0.22),脾脏指数高于环磷酰胺组(5.44±0.76、5.31±0.81 vs 3.54±0.52),IL-4水平(ng/L)低于环磷酰胺组(15.66±2.57、14.72±4.84 vs 23.95±6.07),IFN-γ水平(ng/L)高于环磷酰胺组(16.54±3.71、17.20±2.03 vs 10.37±2.19),差异均有统计学意义。结论黄芪多糖诱导的DC疫苗可有效发挥抑瘤作用,其机制可能与提高荷瘤小鼠胸腺指数与脾脏指数,调节细胞因子表达,促进Th1/Th2失衡向Th1细胞占优势的细胞免疫偏移,增强机体的抗肿瘤免疫功能有关。     

半枝莲多糖对小鼠S_(180)肉瘤及免疫功能的影响

目的研究半枝莲多糖体内抗肿瘤作用和免疫增强作用。方法采用动物移植性肿瘤实验观察半枝莲多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长和免疫器官—胸腺、脾的影响,ELISA法检测对荷瘤小鼠外周血血清中白细胞介素-2和干扰素-γ含量的影响,激光共聚焦检测对荷瘤小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度的影响。结果半枝莲多糖对S180肉瘤生长的抑制率以中剂量为佳;各剂量组均对脾脏指数有显著性差异,但大剂量注射(200mg.kg-1),对胸腺有抑制作用;能够提高S180荷瘤小鼠外周血血清中白细胞介素-2及干扰素-γ的含量,并以中剂量最为显著,且使脾淋巴细胞中钙离子浓度升高。结论半枝莲多糖在小鼠体内具有抑制S180肉瘤的作用,并能增进荷瘤小鼠免疫力。     

猴头菌多糖对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及对血清细胞因子水平的影响

目的 探讨猴头菌多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及其可能机制.方法 选取小鼠60只,留取10只作为正常对照组,其余小鼠均接种S180荷瘤造模,造模成功后,小鼠随机分为猴头菌多糖高剂量组、中剂量组、低剂量组,环磷酰胺组和模型对照组5组.猴头菌多糖不同剂量组分别给予猴头菌多糖200 mg/（kg · d）、100 mg/（kg · d）、50 mg/（kg · d）,连续给药10 d;环磷酰胺组给予环磷酰胺40 mg/（kg · d）,连续给药3 d;模型对照组每天给予生理盐水0.1 mL/10 g.10 d后对各组小鼠眼球取血,分离血清,酶联免疫吸附法（ELISA）测定IFN-γ和IL-2,分离瘤体,称重并计算抑瘤率.结果 环磷酰胺组和猴头菌多糖高、中、低剂量组给药后均对S180荷瘤具有一定抑制作用,抑瘤率分别为68.52%、32.10%、43.21%、18.52%,中剂量组瘤重显著小于高、低剂量组（P〈0.05）,大于环磷酰胺组（P〈0.05）.模型对照组小鼠IFN-γ和IL-2分别为（17.35±6.21）、（11.22±2.57）,明显低于正常对照组的（25.28±5.44）、（16.01±3.21）（P〈0.05）,猴头菌多糖中剂量组IFN-γ和IL-2水平[（40.42±11.33）、（16.43±3.86）]明显高于模型对照组（P〈0.05）,但低于环磷酰胺组[（59.42±15.44）、（51.31±9.53）]（P〈0.05）.结论 猴头菌多糖具有抗肿瘤作用,可提高血清IFN-γ和IL-2水平,可能通过免疫调节作用发挥抗肿瘤作用.     

猴头多糖对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的明确猴头多糖对荷瘤小鼠S180肉瘤的抑制作用。方法建立荷瘤小鼠S180肉瘤模型进行研究,猴头多糖给药10d后称重处死,摘取瘤体、脾脏和胸腺,计算抑瘤率和脾脏、胸腺指数。结果①猴头多糖高、中、低三个剂量组的抑瘤率为29.35%、41.50%、19.55%,对照模型组,多糖高、中剂量组与低剂量组的差异分别为(P<0.01)和(P<0.05);②猴头多糖高、中剂量组的脾脏指数对照模型组及环磷酰胺组均有显著性差异(P<0.05),多糖高剂量组的胸腺指数与模型组和环磷酰胺组差异分别为显著(P<0.05)和极显著(P<0.01),多糖中剂量组胸腺指数显著高于环磷酰胺组(P<0.05)。结论①猴头多糖对S180生长具有抑制作用;②猴头多糖高、中剂量组能在免疫器官层次增强机体免疫能力,起到间接抗肿瘤作用。     

栀子油对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及胸腺、脾指数的影响

目的探讨栀子油对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及胸腺、脾指数的影响。方法采用体外培养S180肉瘤细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型,24h后随机分5组。每日称体质量后,按0.02mL/g灌胃给药1次,给药14d后称体质量,处死,取瘤块、胸腺、脾脏称湿重,计算抑瘤率、胸腺、脾指数。结果与对照组比较,各给药组小鼠脾指数显著升高(P<0.05),除环磷酰胺组胸腺指数显著下降外,其余无显著差异;栀子油大剂量组抑瘤率为34.31%。结论栀子油可显著提高小鼠脾指数,有一定抑瘤作用。     

酵母多糖对免疫功能的影响

目的从酵母菌中提取其多糖成分,探讨酵母多糖对小鼠免疫功能的影响,为酵母多糖的临床应用提供实验依据。方法取小鼠脾脏淋巴细胞,置于96孔细胞培养板中,加入酵母多糖为酵母多糖组和细胞培养液为空白对照组,测定小鼠脾细胞的增殖活性;取细胞上清液,测定细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ);用流式细胞术(FCM)检测细胞表型,观察酵母多糖对细胞免疫和体液免疫作用。结果实验组细胞增殖活性显著高于对照组(P<0.01);实验组IL-2,IFN-γ的浓度与酵母多糖在一定浓度范围内成剂量依赖关系;酵母多糖即能刺激B淋巴细胞,也能刺激T细增殖。结论酵母多糖可提高小鼠免疫功能,它不仅能提高体液免疫功能,而且能提高细胞免疫功能。     

黑灵芝多糖对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的研究黑灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法用不同浓度的黑灵芝多糖作用于正常的和LPS活化的腹腔巨噬细胞;测定巨噬细胞代谢MTT活力;Griess法测定NO的产生;ELISA法检测巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-1β的分泌水平。结果黑灵芝多糖对细胞代谢MTT活力有增强作用;在20～160mg·L-1范围内,多糖呈剂量依赖性地促进正常的巨噬细胞分泌NO、TNF-α、IL-1β,增强免疫;而巨噬细胞经LPS激活后,与LPS组比较,多糖不同程度地抑制NO、TNF-α、IL-1β的过量分泌。结论黑灵芝多糖能有效地增强小鼠腹腔巨噬细胞的免疫,可改善LPS对小鼠腹腔巨噬细胞的诱导作用。     

黄芪多糖对免疫功能影响的体外实验研究

目的探讨黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响,为黄芪多糖的临床应用提供理论依据。方法取小鼠脾细胞,置于96孔细胞培养板中,设黄芪多糖组和空白对照组,WST-1法测细胞的增殖活性;ELISA测细胞因子IL-2、IFN-γ;流式细胞术（FCM）检测细胞表型。结果黄芪多糖组细胞增殖活性显著高于空白对照组（P〈0.01）;黄芪多糖组IL-2、IFN-γ的浓度随黄芪多糖浓度的增加而增多,在一定浓度范围内呈剂量依赖关系;黄芪多糖既能刺激B淋巴细胞增殖,也能刺激T淋巴细增殖。结论黄芪多糖可增强免疫功能,它不仅能提高体液免疫功能,而且能提高细胞免疫功能。     

灵芝多糖对小鼠免疫功能的调节作用

目的 探讨灵芝多糖对小鼠免疫功能的调节作用.方法 200只小鼠随机均分为灵芝多糖0.13、0.25,0.75g·kg-1·d-1三个剂量组和对照组.给药30 d后,测定各组小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性.结果 三个剂量灵芝多糖组小鼠体重、免疫器官指数、淋巴细胞增殖能力、耳肿胀度及溶血空斑数与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).灵芝多糖0.75 g·kg1·d-1组血清半数溶血值和吞噬指数高于对照组(P＜0.05);灵芝多糖0.25、0.75 g·kg1·d-1组小鼠NK细胞活性高于对照组(P＜0.05).结论 灵芝多糖在0.75 g·kg-1·d-1剂量下有增强小鼠免疫功能的作用.     

灰树花多糖抗荷瘤小鼠S180肉瘤的实验研究

目的研究灰树花多糖(GFP)抗实验性肉瘤作用的效果及其对肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)的影响,探讨其作用机制。方法将瘤细胞悬液接种于小鼠右前肢腋皮下制备荷瘤小鼠动物模型,分为GFP高、中、低剂量组和环磷酰胺(Cy)组、生理盐水组。以高、中、低剂量GFP溶液和环磷酰胺分别灌胃10d,检测小鼠肿瘤的抑制率,小鼠血清中TNF-α、IL-2的水平变化。结果3种剂量的GFP、环磷酰胺对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为34.37%、42.67%、47.92%和41.5%,GFP组荷瘤小鼠血清内TNF-α、IL-2含量明显高于Cy组和生理盐水组(P<0.05)。结论GFP具有抗肿瘤作用,TNF-α、IL-2的释放可能是其抗肿瘤作用的机制之一。     

灵芝多糖粗提物对雌二醇诱导小鼠胸腺萎缩的改善作用研究

目的:研究灵芝多糖粗提物对雌二醇诱导小鼠胸腺萎缩的改善作用。方法:将60只雌性ICR小鼠随机分为正常对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和灵芝多糖粗提物高、低剂量组(400、100 mg/kg,以生药量计),每组15只。除正常对照组外,其余各组小鼠均隔天腹腔注射雌二醇(0.1 mg/只,共6次)建立胸腺萎缩模型。造模结束后次日,小鼠灌胃给药,每天1次,连续给药14d。末次给药24 h后,测定小鼠脏器(胸腺、脾)指数以及血浆中丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性,采用苏木精-伊红染色法观察小鼠胸腺、脾组织的病理学变化,采用原位末端标记法检测小鼠胸腺细胞凋亡情况,并采用流式细胞术检测其外周血中T细胞亚群分类。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠胸腺指数和外周血中CD3⁺CD4⁺T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺T比值均显著降低(P<0.01),脾指数、血浆中MDA含量、胸腺细胞凋亡水平以及外周血中CD3⁺CD8⁺T细胞比例均显著升高(P&l...     

灵芝孢子粉与子实体中三萜类化合物、多糖及重金属元素的含量比较

目的:比较灵芝孢子粉与子实体中三萜类化合物、多糖及重金属元素的含量差异。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法分析灵芝孢子粉和子实体样品中的三萜类化合物,用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术对上述样品中5种重金属元素的含量进行测定,用蒽酮-硫酸法测定其中多糖的含量。结果:灵芝孢子粉和子实体中三萜类化合物的HPLC特征图谱差异明显;灵芝孢子粉中多糖的含量高于子实体中的含量;而重金属元素的含量二者没有显著差异。结论:本试验结果可为灵芝孢子粉与子实体药理作用的差异提供理论依据。     

灵芝多糖对肿瘤细胞与内皮细胞相互作用的影响

目的:研究灵芝多糖对肿瘤细胞与内皮细胞相互作用的影响。方法:应用免疫荧光法配合使用显微镜将内皮细胞区分出来后,通过MTT法观察灵芝多糖在内皮细胞增殖分化过程中的作用,并使用相同的方法观察肿瘤细胞的增殖分化过程与灵芝多糖的关系,同时观察灵芝多糖是否干扰2种细胞间产生的黏附作用及迁移反应。结果:内皮细胞的增殖分化过程与灵芝多糖不存在明显联系,肿瘤细胞的增殖分化过程与灵芝多糖也不存在明显联系,即无明显的细胞毒性反应。但灵芝多糖可阻碍2种细胞间产生的黏附作用和迁移反应,减少肿瘤细胞的迁移百分比。结论:灵芝多糖具有抗肿瘤功效,其作用机制为阻碍肿瘤细胞的黏附作用和迁移反应。     

姜黄素对S180肉瘤小鼠的抗肿瘤作用及对血清IL-2和IL-12水平影响的研究

目的研究姜黄素(curcumin)对S180肉瘤小鼠的作用及机制。方法建立S180肉瘤小鼠模型,给予姜黄素治疗后,观察其抗肿瘤作用及其对小鼠血清IL-2和IL-12水平的影响。结果姜黄素对S180肉瘤有显著抑制作用,可提高肉瘤小鼠的脾脏指数及胸腺指数;能显著提高血清IL-2和IL-12水平。结论姜黄素对S180肉瘤有显著抑制作用,其作用机制可能与升高机体细胞因子,调节小鼠免疫功能有关。     

灵芝菌丝体多糖对K562细胞的抑制作用及免疫调节作用研究

目的研究灵芝菌丝体多糖（ganoderma lucidum mycelia polysaccharides,GLMP）对K562白血病细胞及小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响。方法 MTT法检测不同浓度GLMP对K562白血病细胞增殖及对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的作用;血细胞计数方法绘制生长曲线。结果不同浓度的GLMP处理K562细胞48h后,50mg/L及以上浓度抑制率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,而且随浓度的增加抑制率增加。作用48h的IC50为270.2mg/L。生长曲线也表明随时间的延长和浓度的增加,细胞增殖能力下降。GLMP作用小鼠体外脾淋巴细胞48h后,在多糖浓度为50、100mg/L和25、50、100mg/L时能显著刺激静止性和激活型细胞的增殖。结论 GLMP可以抑制K562白血病细胞增殖而且具有免疫调节能力。     

灵芝菌-玄七通痹胶囊药渣双向发酵工艺的研究

目的：优化灵芝菌?玄七通痹胶囊药渣双向发酵工艺,初步探讨其主要活性组分的物质差异。方法以多糖、灵芝酸和皂苷作为检测指标,考察药渣浓度、固液比、药渣粒径等因素对灵芝菌发酵玄七通痹胶囊药渣的影响,并利用高效液相色谱（ HPLC）技术分析添加药渣发酵后主要活性组分的物质差异。结果以多糖为目标产物,最佳的药渣添加量25％,固液比1∶1．5,药渣粒径60目过筛,发酵时间25 d;以灵芝酸为目标产物,最佳的药渣添加量40％,固液比1∶1．8,药渣粒径60目过筛,发酵时间30 d。并且添加药渣发酵后,在多糖组分和灵芝酸组分中都产生了新的物质。结论本研究不仅将为解决中药渣直接排向环境造成的污染等问题提供参考,而且还为实现中药渣再利用、新药及功能饲料添加剂的开发提供依据。     

Effects of Ganoderma lucidum polysaccharides on proliferation and cytotoxicity of cytokine-induced killer cells

AIM: To study the effects (and the mechanisms thereof) of Ganoderma lucidum polysaccharides (Gl-PS) on the proliferation and the anti-tumor activity of cytokine-induced killer (CIK) cells, and to make use of CIK cells as a means to investigate the interactions between Gl-PS and cytokines. METHODS: CIK cells were prepared by using the standard protocol as a positive control. Experimental groups also underwent the standard protocol, except that Gl-PS (400 mg/L or 100 mg/L) was added and the dose of anti-CD3 and interleukin-2 they received was reduced by 50% and 75%, respectively. For negative controls, Gl-PS in the experimental protocol was replaced with soluble starch or methylcellulose (400 mg/L or 100 mg/L). CIK cell proliferation, cytotoxicity, and phenotype were determined by using the Trypan blue exclusion method, MTT assay, and flow cytometry. RESULTS: By synergizing cytokines, Gl-PS (400 mg/L or 100 mg/L) could decrease the amount of cytokine in lymphokine activated killer (LAK) cells and CIK cells culture, but had no significant effect on the proliferation, cytotoxicity, or phenotype of LAK cells, or CIK cells induced by cytokines at higher doses alone, in which CIK cells expanded about 80-fold and the main effectors, CD3+NK1.1+ cells, expanded by more than 15%. The cytotoxicity of CIK cells in experimental groups was 79.3%+/-4.7%, 76.9%+/-6.8% versus the positive control 80.7%+/-6.8% against P815 (P>0.05) and 88.9%+/-5.5%, 84.7%+/-7.9% versus the positive control 89.8%+/-4.5% against YAC-1 (P>0.05). The activity of Gl-PS could mostly be blocked by anti-CR3. CONCLUSION: Gl-PS was shown to be a promising biological response modifier and immune potentiator. The effect of Gl-PS on CIK cells is possibly mediated primarily through complement receptor type 3.     

灵芝多糖体外对小鼠脾细胞IL-2,IL-3 mRNA表达的影响

目的观察灵芝多糖体外对小鼠脾细胞ＩＬ－２、ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达水平是否有影响。方法逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍＲＮＡ表达，凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果在原代小鼠脾细胞培养开始时加入不同浓度的灵芝多糖ＧＬＢ７（５，１０，２０，４０ｍｇ·Ｌ－１），培养１２ｈ及２１ｈ后观察ＧＬＢ７与ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平之间的量效关系。发现在一定范围内，随着ＧＬＢ７浓度的升高，ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平也相应提高，对ＩＬ－２ｍＲＮＡ的提高率分别为１０．４％，２１．９％，３７．８％，４６．６％；对ＩＬ－３ｍＲＮＡ的提高率分别为１５．４％，３５．２％，５２．４％，７４．５％。１９９８－０４－０８收稿，１９９８－０７－２６修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９４００１６５作者简介：王庆彪，男，２６岁，硕士；雷林生，男，３８岁，医学博士，副教授培养１２ｈ和３０ｈ的上清液中ＩＬ－２样活性及ＩＬ－３样活性处理组与对照组相比亦有明显升高，且有一定的浓度依赖关系。结论灵芝多糖的免疫增强作用与其在转录水平上促进ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达有关     

灵芝对高血压伴高血脂和脑血栓后遗症患者血液流变学的观察

灵芝片110mg,qid，服药2周，对高血压伴高血脂、脑血栓后遗症和冠心病等高血粘度病人33例进行血液流变学观察。结果表明，灵芝片有改善血液流变性、降低血粘度作用，因而对心脏血管疾病有减少血栓形成的效果。此外，多数病人服用灵芝后有降压、镇静、催眠和改善头痛、眼花等症状的作用。