稽留流产与相关基因蛋白表达的关系研究

目的比较正常早孕组和稽留流产组两类妊娠女性的胎盘绒毛、蜕膜组织中Bcl-2、Bax基因蛋白表达情况,分析Bcl-2、Bax基因蛋白表达情况及其二者比值与胎盘绒毛、蜕膜组织中细胞凋亡的作用关系,为探索预防稽留流产发生相关的有效干预措施参考。方法搜集整理近年在北京航天总医院就诊的正常早孕和稽留流产女性93例,利用免疫组化学染色方法检测胎膜绒毛、蜕膜组织中Bcl-2、Bax基因蛋白表达情况,并定量分析其统计量、秩和检验以及相关性三类统计结果。结果无论是绒毛还是蜕膜组织,稽留流产组的Bax基因蛋白表达情况都要高于正常早孕组(0.21±0.37和0.1±0,0.5±0.79和0.14±0.18);绒毛组织两组的Bcl-2基因蛋白表达情况相近(2.95±0.31和2.94±0.42),但是稽留流产Bcl-2和Bax的比值要低于正常早孕组(26.92±8.55和29.41±4.2);蜕膜组织,稽留流产组的Bcl-2基因蛋白表达情况以及Bcl-2和Bax的比值均高于正常早孕组(2.48±0.9和1.47±1.02,18.66±13.09和14±10.22)。结论孕妇稽留流产原因与细胞凋亡相关基因高表达有关。     

稽留流产患者绒毛和蜕膜组织中Survivin及Fas蛋白表达意义的研究

目的分析正常早孕妇女和稽留流产患者绒毛及蜕膜组织中survivin和Fas蛋白的表达及意义。方法用免疫组化法检测正常早孕妇女和稽留流产患者绒毛和蜕膜组织中survivin和Fas蛋白的表达。结果 Survivin表达早孕组绒毛显著高于稽留流产组绒毛(P0.05),但早孕组蜕膜与稽留流产组相比无显著性差异(P0.05),早孕绒毛组织Survivin的最大阳性强度显著高于蜕膜组织(P0.05)。Fas蛋白表达稽留流产组蜕膜显著高于绒毛及早孕蜕膜(P0.05)。结论Survivin和Fas蛋白在稽留流产过程中可能发挥重要作用。     

稽留流产绒毛组织中Fas／FasL表达及其意义

目的探讨稽留流产的发生与Fas／FasL表达的相关性。方法采用RT—PCR法检测稽留流产患者与健康早孕人流者绒毛组织中FasL的mRNA表达水平。结果稽留流产组FasL mRNA表达水平为（0．714-0．11）,健康早孕人流组FasL mRNA的表达水平为（1．38±0．41）,P〈0．05。结论FasL表达的降低可能是导致稽留流产的原因之一。     

人早孕母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达

目的：研究正常早孕绒毛及蜕膜组织细胞因子信号转导负调控因子（Suppressors of cytoldne signaling，SOCS）基因和蛋白水平表达，以揭示SOCS在母胎界面生理性调节作用。方法：半定量RT-PCR检测早孕绒毛组织、蜕膜组织及原代培养早孕滋养细胞、蜕膜基质细胞SOCS1、SOCS2、SOCS3 mRNA水平；Western blot检测早孕绒毛组织及蜕膜组织SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达；免疫组化定位SOCS1、SOCS2、SOCS3在早孕绒毛组织、蜕膜组织表达；ELISA检测滋养细胞、蜕膜基质细胞分泌IL-10、IFN-γ。结果：正常母胎界面见SOCS1、SOCS2、SOCS3基因表达，其中SOCS3绒毛／蜕膜阳性率73．7％／71．1％；SOCS2绒毛／蜕膜阳性率50．0％／39．5％，SOCS1最少，绒毛／蜕膜阳性率34．2％／31．6％；SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达与转录水平基本一致；正常母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达主要定位于绒毛滋养细胞和蜕膜间质；体外无血清培养滋养细胞和蜕膜基质细胞SOCS2、SOCS3低表达，SOCS1未见表达，其分泌的IL-10随时间而增高（P〈0．05）。结论：正常早孕母胎界面表达SOCS1、SOCS2、SOCS3，无刺激条件下滋养细胞和蜕膜基质细胞低表达SOCS2、SOCS3，SOCS在正常妊娠Th平衡中具有重要意义。     

孕酮及其受体、IL-8与原因不明自然流产的相关性研究

目的：探讨孕酮（P）及其受体（PR）、IL-8在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达及相关性。方法：ELISA检测30例原因不明自然流产患者（流产组）和30例正常妊娠妇女（对照组）血清P、IL-8水平,免疫组织化学染色法检测两组流产绒毛和蜕膜组织PR、IL-8表达。结果：流产组血清P水平明显低于对照组（P<0.01）,血清IL-8水平明显高于对照组（P<0.01）。两组绒毛组织PR蛋白表达均为阴性;两组蜕膜组织中PR均表达于蜕膜细胞的细胞核,且流产组表达明显低于对照组（P<0.01）。两组绒毛组织中IL-8均表达于绒毛上皮细胞的细胞质,且流产组表达明显高于对照组（P<0.01）;两组蜕膜组织中IL-8均表达于蜕膜细胞的细胞质,且流产组表达高于对照组（P<0.05）。流产组血清P与IL-8呈显著负相关（r=-0.870,P<0.01）,流产组蜕膜组织PR与IL-8呈显著负相关（r=-0.650,P<0.01）。结论：P、PR低表达、IL-8高表达可能与原因不明自然流产发生相关,且P、PR可能通过下调IL-8表达维持正常妊娠。     

卵泡抑素样蛋白1在不明原因稽留流产患者血清、绒毛与蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨不明原因稽留流产患者外周血和绒毛蜕膜组织卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)的表达及其临床意义。方法选取2014年1月-2015年12月我院诊治的不明原因稽留流产患者30例为实验组(n=30),另选取自愿要求终止妊娠的健康早孕妇女30例为对照组(n=30)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组外周血中FSTL1水平,通过先进的荧光定时PCR技术,检测两组绒毛、蜕膜组织中Fstl1 mRNA的表达水平。结果实验组血清FSTL1高于对照组,差异具有统计学意义(t=10.63,P0.001);实验组绒毛蜕膜组织中Fstl1 m RNA的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论不明原因稽留流产患者血清及绒毛蜕膜组织中FSTL1表达水平明显升高,FSTL1可能在稽留流产发生发展中有一定作用。     

米非司酮流产蜕膜组织中白血病抑制因子表达的研究

目的探讨早孕妇女米非司酮药物流产与非药物人工流产的蜕膜组织中白血病抑制因子（LIF）表达的差异,分析米非司酮的致流产作用与LIF维持妊娠作用之间的关系。方法运用免疫组织化学技术检测23例米非司酮流产妇女蜕膜组织LIF蛋白的表达,并与20例非药物人工流产蜕膜组织进行对照。结果LIF蛋白在所有蜕膜标本中均有表达,其表达强度在米非司酮流产蜕膜组织和非药物人工流产蜕膜组织中无明显差异（P〉0.05）。结论米非司酮对早孕蜕膜组织中LIF的表达可能无明显影响。     

子宫内膜、正常早孕和自然流产蜕膜组织中△Np63的表达

目的观察△Np63蛋白在自然流产蜕膜组织中的表达，探讨△Np63在胚泡植入和早期妊娠维持中的作用。方法收集自然流产的蜕膜27例组织（其中胚胎停止发育23例、习惯性流产1例及不全流产3例），正常早孕蜕膜66例，非妊娠期子宫内膜组织57例（其中增生期33例，分泌期24例），用SP免疫组化染色法观察△Np63的表达。结果△Np63广泛表达于腺上皮和间质细胞中。增生期和分泌期子宫内膜中△Np63主要表达在腺上皮，蜕膜组织中△Np63在间质蜕膜细胞中的有较强的表达。流产组△Np63蛋白阳性率为55．6％，明显低于增生期的90．9％、分泌期的87．5％及正常早孕组的86．4％（P〈0．05）。△Np63高表达率在分泌期组及流产组分别为16．7％和11．2％，明显低于增生期的63．6％和正常早孕组的57．6％（P〈0．01）。结论△Np63可能参与子宫内膜的生理周期变化，并与子宫内膜向早孕蜕膜组织转化及维持早孕关系密切。     

FADD、Caspase-3与稽留流产的关系探讨

目的探讨FADD及Caspase-3在稽留流产绒毛滋养细胞中的表达及其关系。方法随机选取早孕稽留流产组35例（实验组）和正常早孕绒毛组30例的绒毛（对照组）检测两组绒毛滋养层细胞FADD和Caspase-3表达。结果FADD和Caspase-3在两组滋养层细胞中均有阳性表达,表达部位均以合体滋养层细胞为主。FADD和Caspase-3在稽留流产组绒毛滋养细胞中表达明显强于对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论Fas凋亡途径可能是滋养层细胞凋亡的主要凋亡途径,FADD、Caspase-3是滋养层细胞凋亡中重要的促凋亡因子,滋养层细胞凋亡的增加可能参与了稽留流产的发生。     

白细胞介素-8蛋白在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的 探讨反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素-8 （IL-8）蛋白水平的表达。 方法 应用免疫组织化学染色和Western blotting 技术,分别对30例反复自然流产患者（流产组）和30例正常妊娠者（对照组）绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析。 结果 免疫组织化学染色结果显示,在绒毛组织中,流产组和对照组IL-8的蛋白表达主要定位于绒毛上皮细胞的细胞质内;在蜕膜组织中,流产组IL-8蛋白表达于蜕膜细胞的胞质内,对照组蜕膜细胞则为阴性,但两组腺上皮细胞均为阳性反应。Western blotting结果显示,在绒毛组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量明显高于对照组（P﹤0.01）;在蜕膜组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量高于对照组（P﹤0.05）。 结论 流产组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达增强与反复自然流产有关,IL-8可能参与反复自然流产的病理过程。     

体外受精-胚胎移植妊娠早期流产相关因素分析

目的探讨体外受精-胚胎移植（IVF-ET／ICSI）妊娠后发生早期流产的可能相关因素。方法将IVF或ICSI获得妊娠的735个周期,按妊娠结局分为早期流产组和继续妊娠组,分析IVF／ICSI妊娠后发生早期流产的可能相关因素。结果早期流产组患者年龄和胚胎移植数明显高于继续妊娠组（P〈0.01）;窦卵泡数、hCG日E2、P值、获卵数均明显低于继续妊娠组（P〈O.01）。Logistic回归分析显示年龄增高及获卵数减少是发生早期自然流产的危险因素。结论IVF／ICSI治疗周期中患者年龄、窦卵泡数、hCG日E2、P值、获卵数、移植胚胎数与早期流产相关,年龄增高及获卵数减少可增加早期自然流产风险。     

白血病抑制因子及其受体在早产胎盘组织及蜕膜组织中的表达及临床意义

目的探讨早产胎盘及蜕膜组织中的白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)的表达。方法应用免疫组织化学方法检测白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)在30例早产(实验组)、30例人工流产(对照组)胎盘和蜕膜组织中的表达。用卡方检验(Chi-Square Test)检测LIF、LIFR在早产和人工流产中的表达是否有差异。结果 LIF、LI-FR在早产胎盘组织中阳性率分别为6.7%和10%,在蜕膜组织中阳性表达率分别为10%和13.3%,结论白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)对晚期妊娠的维持有待进一步研究。     

孕妇血清锌浓度与早期先兆流产关系研究

目的研究孕妇血清锌浓度在孕早期的变化情况,探讨孕妇血清锌浓度与早期先兆流产的关系。方法 2007年6月至2008年6月采用原子光谱吸收法对我院62例早期先兆流产孕妇和66例正常对照孕妇的血清锌浓度进行检测。观察对照组各孕周血锌浓度变化情况,对比对照组和研究组血锌浓度。结果孕妇血清锌浓度在孕早期呈逐渐下降趋势,但其变化不显著(P0.05);研究组孕妇血清锌浓度明显低于对照组(P0.05)。结论孕妇血清锌浓度在正常妊娠维持中起重要作用,血锌浓度低可能会导致早期先兆流产。     

子痫前期患者胎盘组织中尾加压素Ⅱ及一氧化氮的表达及意义

目的研究尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）及一氧化氮在子痫前期患者胎盘组织的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法检测45例子痫前期患者（轻度22例,重度23例）及20例正常晚期妊娠孕妇胎盘组织中UIImRNA的表达情况;同时用硝酸还原酶法检测子痫前期组孕妇与正常组孕妇胎盘组织中NO浓度。结果重度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.85±0.40）明显高于正常妊娠组（0.38±0.30）（P〈0.05）;轻度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.64±0.31）,与正常妊娠组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。轻、重度子痫前期患者胎盘组织NO浓度分别为114.42±6.52 u/mg、79.22±3.31 u/mg,均显著低于正常妊娠组241.36±13.24u/mg（P〈0.05）。结论子痫前期胎盘组织中尾加压素Ⅱ水平升高,NO浓度下降,可能在子痫前期的发病中起一定作用。     

血清绒毛膜促性腺激素及孕酮检测在妊娠早期中的诊断及治疗意义

目的探讨血清孕酮与绒毛膜促性腺激素联合检测在妊娠早期中的诊断及治疗意义。方法分别采用ECL／RIA技术对300例早期妊娠者血清孕酮与绒毛膜促性腺激素进行检测。结果血清P值〉60nmol／L，血β－HCG〉50mIU／ml患者85例，占28．33％，经卧床休息，未用药治疗，均胚胎发育正常；血清P值在30-60nmol／L，血β-HCG10—50／mIU／ml患者155例，占51．67％，经黄体酮与绒毛膜促性腺激素保胎治疗后均胚胎发育正常；血清P值〈30nmol／L，血β-HCG〈10mIU／ml患者45例，占15％，终止妊娠者均可见清除宫内组织物中几乎不见新鲜绒毛并伴有不同程度的陈旧性出血；血清孕酮与β-HCG上升不同步患者15例，占5．0％，均最终难免流产。结论对于妊娠早期者动态观察血清孕酮与β—HCG，对于妊娠结局的预测及指导治疗具有重要的临床价值。     

PPAR—γ和COX-2用于预测重度子痫前期合并胎儿生长受限的研究

目的研究过氧化物酶体增殖物激活型受体-1（peroxisomeproliferatoractivatedreceptor-γ,PPAR-1）和环氧化酶-2（Cyclooxγgenase-2,COX-2）在重度子痫前期及重度子痫前期合并胎儿生长受限（FGR）发病中的作用,以探讨重度子痫前期合并FGR的发病机制,为其早期诊断、早期治疗及病情预测提供新的理论和实验依据。方法收集重度子痫前期合并FGR患者30例（SPF组）,单纯重度子痫前期患者30例（sP组）,随机选取同期住院的正常晚期妊娠孕妇30例（NP组）,采用酶联免疫吸附法（ELISA）方法检测这三组孕妇母血血浆和脐血血浆中COX-2的表达。采用免疫组化技术检测胎盘组织中PPAR—γ蛋白的表达。结果SPF组、sP组、NP组脐血血清COX-2水平分别为（55．30±8．10）,（39．25±7．90）,（10．60±5．50）mg／mL,三组差异显著（P〈0．05）;SPF组、SP组、NP组孕妇血清COX-2水平分别为（35．25±6．58）,（26．13±6．10）,（7．20±5．36）mg／mL,三组亦有显著差异（P〈0．05）;SPF组孕妇血清与脐血血清中COX-2水平呈正相关（r=0．526,P〈0．01）;SPF组、sP组、NP组胎盘组织中PPAR-1的阳性表达率分别为87．5％、53．1％、29．6％,三组差异显著（P〈0．05）。结论1．COX-2的升高在重度子痫前期和重度子痫前期合并FGR的预测中起着重要作用,COX-2明显升高可预测在重度子痫前期的发病基础上出现FGR;2．出现重度子痫前期合并FGR的胎盘组织PPAR-1蛋白呈强阳性表达;3．通过测定孕母血清COX-2水平能预测胎儿血清COX-2水平。     

TNF-α在早期自然流产患者血清及蜕膜中的表达

目的研究早期自然流产者血清,蜕膜中TNF-α的表达,探讨其与自然流产的关系。方法取30例自然流产与20例同期正常早孕要求行人工流产者血清及蜕膜,血清及蜕膜分别采用双抗ELISA法,免疫组化SABC法检测TNF-α表达。结果自然流产患者血清,蜕膜中TNF-α的表达高于正常早妊组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自然流产者血清,蜕膜中TNF-α的表达与自然流产的发生有关。     

妊娠期血清HCG升高与妊娠并发症关系及干预的影响

目的探讨妊娠中、晚期血清绒毛膜促性腺激素（hCG）水平升高与妊娠并发症关系及干预的影响。方法选择516例（23-32周）初检孕妇抽取血清检测hCG水平,观察hCG水平升高组与并发症的关系,另选择同样数量82例hCG升高组予复方丹参、低流量供氧等处理进行早期干预,与无经处理之hCG升高组比较,观察其与并发症的关系。结果血清hCG水平升高组并发症（妊高症、早产、低体重儿、胎儿宫内发育受限等）明显高于血清hCG水平正常组（P〈0.001）;而血清hCG升高组的并发症明显高于hCG升高但进行早期干预组（P〈0.001）。结论血清hCG水平升高与妊娠并发症有明显的关系,而进行早期干预处理的,妊娠并发症的发生率明显减少,降低了围产儿的病率及死亡率。证明了干预处理对并发症有明显的影响,改善了妊娠结局是可行的。