脂质刺激的Kupffer细胞对肝星状细胞增殖的影响

目的 探讨甘油三酯和极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及其刺激的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞对大鼠肝星状细胞（ＨＳＣ）增殖的影响。方法 用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ和Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞,制备甘油三酯和ＶＬＤＬ刺激的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞培养的上清液（ＫＤＣＭ）,并以ＭＴＴ法观察甘油三酯和ＶＬＤＬ及ＫＣＣＭ对ＨＳＣ增殖效应。结果 甘油三酯和ＶＬＤＬ浓度分别在１２．５ｍｇ／Ｌ和２     

肝星状细胞与肝纤维化

近年来已获公认,肝星状细胞是肝纤维化时细胞外基质（ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ, ＥＣＭ）过多产生和沉积的主要细胞来源。 １８７６年德国 ｖｏｎ Ｋｕｐｆｆｅｒ首次描述星状细胞（ Ｓｔｅｒｎｚｅｌｌｅｎ）,后来的文献中又称之为 Ｉｔｏ细胞、脂细胞、贮脂细胞、窦周细胞等等。１９９６年Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ发表了９８位著名国际肝病学家的建议,认为仍以肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌ, ＨＳＣ）命名为宜,此建议已日益被采纳应用。近年关于星状细胞的研究日多,本文只涉及几个问题：细…     

加强对肝星状细胞的研究

18 76年Ｋｕｐｆｆｅｒ提出肝脏中存在具吞噬能力的星状细胞 (ｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ) ,后来Ｉｔｏ经过电镜观察发现星状细胞与库普弗细胞是不同的细胞群体。直到 1971年才由Ｗａｋｅ证实Ｉｔｏ所描述的星状细胞就是最初Ｋｕｐｆｆｅｒ提出的星状细胞 ,而Ｋｕｐｆｆｅｒ发现的“吞噬”现象实际上是由混杂的库普弗细胞引起的。至此 ,肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ)才被明确为肝脏的一类细胞群体。ＨＳＣ约占肝脏非实质细胞总数的33%或肝脏细胞总数的 13% ,它位于肝窦内皮下的Ｄｉｓｓｅ间隙内 ,其最明显的特…     

胰岛素对肝星状细胞的影响:细胞形态及细胞动力学观察

胰岛素作为一种多功能的激素类蛋白 ,在体内不仅调节着糖、脂肪和蛋白质代谢 ,还促进某些细胞的分裂和增殖[1] 。肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ,ＨＳＣｓ)被视为肝纤维化发生的中心环节。研究ＨＳＣｓ激活和增殖的因素 ,将有助于阐明肝纤维化的发病机制。我们旨在了解胰岛素对ＨＳＣｓ的生长、增殖作用 ,为探讨肝纤维化的发病机制提供依据。　　一、材料和方法1.ＨＳＣｓ的分离、培养及鉴定 :改良Ｆｒｉｅｄｍａｎ等[2 ] 分离ＨＳＣｓ的方法 ,采用Ⅳ型胶原酶和链酶蛋白酶循环消化分离ＨＳＣｓ,结蛋白 (Ｄｅｓｍｉｎ…     

花生四烯酸和亚油酸对肝星状细胞增殖的影响

目的探讨花生四烯酸和亚油酸对大鼠肝星状细胞（ＨＳＣ）增殖的影响．方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,并以ＭＴＴ比色法观察花生四烯酸和亚油酸对ＨＳＣ增殖效应．结果花生四烯酸和亚油酸可影响ＨＳＣ的增殖．花生四烯酸２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ有增殖作用（Ｐ＜００１）,而５０,１００ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖有抑制作用（Ｐ＜００１）,倒置显微镜观察可见ＨＳＣ增殖非常缓慢,ＨＳＣ细胞轮廓非常明显,胞质粗糙,内有颗粒沉积,１２５,６２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖无影响．亚油酸６２５,１２５,２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖无明显影响（Ｐ＞００５）,但随着浓度增大,５０,１００ｍｇ／Ｌ则促进ＨＳＣ增殖（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）．结论花生四烯酸和亚油酸在一定浓度下可促进肝星状细胞增殖,高浓度对ＨＳＣ有毒性作用,其可能通过脂质过氧化作用而与脂肪肝肝纤维化的发生有关     

甘油三酯和极低密度脂蛋白对肝星状细胞增殖的影响

目的探讨甘油三酯（ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）和极低密度脂蛋白（ｖｅｒｙｌｏｗ－ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｉｏｎ，ＶＬＤＬ）对大鼠肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌａｔｅｃｅｌ，ＨＳＣ）增殖的影响。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流，Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ，并以ＭＴＴ比色法观察ＴＧ和ＶＬＤＬ对ＨＳＣ增殖效应。结果ＴＧ和ＶＬＤＬ可影响ＨＳＣ的增殖，ＴＧ和ＶＬＤＬ浓度分别在１２５ｍｇ／Ｌ和（２５～１００）ｍｇ／Ｌ时对ＨＳＣ增殖有促进作用（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）。结论体外细胞培养表明，ＴＧ和ＶＬＤＬ可促进ＨＳＣ增殖，其与脂肪肝肝纤维化的发生可能有关。     

氧化应激在肝星状细胞活化中的作用

肝纤维化是肝脏对各种慢性损伤的一种修复应答反应，其病理中心环节是肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ　ｃｅｌｌ，ＨＳＣ）由静止状态转变为活化状态，成为肝纤维化形成的细胞学基础。ＨＳＣ的活化具体表现在：（１）细胞体积增大，伸出伪足，含维生素Ａ的脂滴减少，表型向肌成纤维细胞样细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ—ｌｉｋｅ ｃｅｌｌ）转化。（２）细胞获得增殖能力。（３）纤维化能力增强，大量生成细胞外基质。（４）表达平滑肌细胞骨架蛋白如α－平滑Ｌ动蛋白。许多因素如炎性因子、细胞外基质的改变、生长因子以…     

马兜铃酸I诱导人肾小管上皮细胞转分化的作用及机制

目的：探讨马兜铃酸Ｉ（Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｓ ａｃｉｄ Ｉ,ＡＡＩ）在人类肾小管上皮细胞（ＨＫＣ）转分化中的可能作用,了解ＡＡＩ引起肾小管间质损害的机制。方法：将体外培养ＨＫＣ细胞分为无血清对照组（Ｃ组）和ＡＡＩ实验组两组,波形蛋白和α－平滑肌肌动蛋白（α－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｃｔｉｎ,α－ＳＭＡ）表达的变化;应用流式细胞技术检测表达α－ＳＭＡ阳性（＋）的ＨＫＣ细胞百分率;采用免疫酶标     

肝星状细胞凋亡与肝纤维化

近十年来对肝纤维化形成的机理研究取得了令人鼓舞的进展。越来越多的临床及实验证据表明,肝纤维化是可以逆转的［１］,这一观点逐渐被广泛接受。肝星状细胞（ｈｏｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ）的激活是肝纤维化形成的中心环节［２］,ＨＳＣ在肝纤维化逆转过程中的作用也成为研究热点之一。Ｂｕｒｔ［３］认为,肝纤维化逆转时ＨＳＣ的减少是由于激活状态的ＨＳＣ转化为静止状态。但最新的研究表明,肝纤维化恢复期,激活状态的ＨＳＣ减少主要通过凋亡机制,而不是表型的转化［４］。几位学者分别对ＨＳＣ凋亡的机制进行…     

肝星状细胞表达的受体及其生物学意义

肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ　ｓｔｅｌｌａｔｅ　ｃｅｌｌ,ＨＳＣ）被认为是介导肝纤维化发生的关键细胞,其激活后不仅参与肝损伤的调控,对细胞因子网络平衡,肝脏微生态重建等也具有决定性作用,显然,其生物学功能的复杂性由其表达受体的复杂性所决定。 一、增殖调控受体 血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）受体：静止期ＨＳＣ并不表达ＰＤＧＦ受体。激活的ＨＳＣ表达ＰＤＧＦ受体,并对ＨＳＣ具有强有力的丝裂原活性,在参与肝组织慢性炎症过程中的多肽生长因子中,双链ＰＤＧＦ是ＨＳＣ最强的有丝分裂原,是诱导ＨＳＣ激活及增殖最强的细…     

扶正化瘀方对大鼠CCl4损伤肝Kupffer细胞功能的影响

目的：探讨扶正化瘀方对大鼠急性ＣＣｌ４损伤肝Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞功能的影响。方法：体外分离培养大鼠急性ＣＣｌ４损伤肝Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞,制备扶正化瘀方药物血清对其进行干预,观察药物对其ＰＤＧＦ和ＴＧＦβ活性以及对Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞线粒体呼吸功能的影响。结果：药物组ＰＤＧＦ和ＴＧＦβ活性均显著降低（Ｐ〈０．０５）;药物组闰体呼吸功能明显降低（Ｐ〈０．０５）。结论：扶正化瘀方对大鼠急性ＣＣｌ４损伤肝Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞活化有抑制作用,可能抑制肝星状细胞旁分泌激活,是该方抗肝纤维化的作用机理之一。     

单个核细胞趋化蛋白—1和马兜铃酸Ⅰ在诱导人类肾小管 …

目的 探讨单个核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）和马兜铃酸Ⅰ（ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉｃ ａｃｉｄⅠ,ＡＡⅠ）及其两者的协同作用,对人类肾小管上皮细胞（ＨＫＣ）转分化的影响。方法 应用间接免疫荧光法测定ＨＫＣ细胞皮形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ）、α－平滑肌肌动蛋白（α－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｃｔｉｎ,α－ＳＭＡ）及角蛋白（ｃｙｔｏｃｒｅａｔｉｎ）的表达;应用流式细胞技术测定表达α－ＳＭＡ＾（＋）Ｈ     

基质金属蛋白酶—2在肝纤维化时的表达

基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）特异性地分解细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）,对胶原的沉积和组织结构的改建具有重要作用。肝星形细胞（ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ,又称ｆａｔｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌｌ,ｌｉｐｏｃｙｔｅ）不仅是肝纤维化时合成ＥＣＭ的主要来源［１］,而且能表达和分泌基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）［２］,直接参与ＥＣＭ的代谢。本文分别测定了正常与ＣＣｌ４诱导的肝纤维化大鼠肝组织和ＨＳＣ的ＭＭＰ…     

肝星状细胞与凋亡

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ)在肝纤维化形成过程中起关键作用。近年来研究发现 ,活化的ＨＳＣ主要通过凋亡方式减少 ,且有多种途径影响其凋亡[1 11] 。一、自发凋亡Ｓａｉｌｅ等[7] 报道 ,培养的ＨＳＣ在 2ｄ时不发生凋亡 ;4ｄ时凋亡率为 8%± 5 % ;7ｄ后则为 18%± 8%。而胆道结扎术后 2 1ｄ ,ＨＳＣ的自发凋亡率为 1%～ 3% [2 ] 。体内研究表明 ,肝组织急性损伤阶段 ,ＨＳＣ出现激活、增殖而无凋亡迹象 ;恢复阶段ＨＳＣ的凋亡与组织中ＨＳＣ总量的减少相平行[7,10 ] 。由此显示 ,自发凋亡可能是机体清除…     

肝纤维化过程中肝星状细胞的研究进展

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ ;以前称为贮脂细胞、Ｉｔｏ细胞等 )位于肝窦Ｄｉｓｓｅ间隙内 ,在肝损伤过程中被激活经表型转化而成为肌成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｅｒ,ＭＦＢ) ,产生大量细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ )促进肝纤维化的形成 ,是肝纤维化形成的中心环节。一、ＨＳＣ的活化(一 )ＨＳＣ活化的启动与持续ＨＳＣ的活化是由静止的ＨＳＣ向ＭＦＢ转化的过程。涉及到细胞—细胞间、间质—细胞间相互作用。有学者提出了三步级联活化模式 ,把ＨＳＣ活化分…     

CD3AK细胞联合IL—2脂质体抗鼠肝转移瘤的实验研究

目的 观察ＩＬ－２脂质体对ＣＤ３ＡＫ体内抗肿瘤的增强作用。方法：利用Ｇ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞与抗ＣＤ３单克隆抗体和白细胞介素－－－２（ＩＬ－２）共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｅｃｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ）；从脾内注射Ｂ１６黑色素瘤细胞制备鼠肝转移瘤模型：用ＰＣ和ＣＨ合成ＩＬ－２复合脂质体；ＣＤ３ＡＫ细胞联合ＩＬ－２脂质体用于体内抗Ｂ１６黑色素瘤肝转移。结果：共同培养     

肝星状细胞与肝纤维化的研究进展

一、ＨＳＣ的增殖活化及凋亡 当肝脏受到物理、化学及生物因素的刺激时,ＨＳＣ增殖并激活,转变为“肌成纤维细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ, ＭＦＢ）”,表达ａ－平滑肌动蛋白（ａ－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ, ａ—ＳＭＡ）、合成ＥＣＭ等。Ｇｒｅｓｓ一ｆｉｅｒ等［１］根据已有的研究结果,提出了ＨＳＣ激活的“三步级联反应”模式。（１）炎症前期阶段,肝细胞受损后释放丝裂原,旁分泌作用于ＨＳＣ从而引起ＨＳＣ增殖,且肝细胞丧失接触抑制。（２）炎症阶段,活化的ｋｕｐｆｆｅｒ细胞、巨噬细胞及血小板释放细胞因…     

Smads信息分子与肝星状细胞的活化

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ ,ＨＳＣ)激活、转化为肌成纤维细胞 (ｍｙｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ)是肝纤维化形成的关键。转化生长因子 β1(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ 1)是这一病理过程的必需的生物调节因子。ＴＧＦ β1激活ＨＳＣ的信息传导经过丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶受体及其下游效应信息分子 ,即Ｓｍａｄｓ蛋白家族 ,启动胶原基因表达[1] 。由于ＴＧＦ β1与ＨＳＣ、Ｓｍａｄｓ信息分子和肝纤维化的密切关系 ,有关Ｓｍａｄｓ信息分子家族对ＴＧＦ β1信息转导的调控和影响…     

四氯化碳肝纤维化大鼠储脂细胞表皮生长因子受体的变化

目的：研究四氯化碳（ＣＣｌ_４）所致实验性肝纤维化大鼠肝脏储脂细胞（ＦＳＣ）表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的变化,探讨ＥＧＦ－Ｒ在ＦＳＣ激活中的作用。方法：~（１２５）Ｉ标记ＥＧＦ,放射配体结合分析测定正常和ＣＣｌ４肝纤维化大鼠肝脏原代ＦＳＣ的ＥＧＦ－Ｒ　结果：ＣＣｌ４肝纤维化大鼠肝脏ＦＳＣ数量（６．７１× １０~±５．３２ × １０~７）较正常大鼠（２．６３×１０~７±１．０４×１０~７）显著增多（Ｐ＜０．０５）;正常与 ＣＣｌ_４肝纤维化大鼠ＦＳＣ的ＥＧＦ－Ｒ最大结合位点数（ＲＴ）、解离常数（ｋＤ）分别为：２．２２ ×１０~３ｓｉｔｅｓ／ｃｅｌｌ,４．０９ × １０~(－１０）Ｍ和９．２７× １０~３ｓｉｔｅｓ／ｃｅｌｌ,３．２６× １０~(－１０）Ｍ。肝纤维化时ＥＧＦ－Ｒ明显增高（Ｐ＜０．０５）。结论：ＣＣｌ_４引起肝纤维化时ＦＳＣ增殖,同时ＥＧＦ－Ｒ的表达增加。     

肝脏细胞胶原合成及其I型胶原mRNA的稳定性

目的：为了明确贮脂细胞（ＦａｔＳｔｏｒｉｎｇＣｅｌｌ，ＦＳＣ）和肝细胞（Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ，ＨＣ）在肝纤维化胶原合成中的作用。方法：本文在分离培养大鼠ＦＳＣ和ＨＣ的基础上，用＾３Ｈ－Ｐｒｏｌｉｎｅ掺入结合胶原酶消化法和定量斑点杂交法，分析了体外培养的ＦＳＣ和ＨＣ胶原和非胶原蛋白的合成以及Ｉ型前胶原ｍＲＮＡ的稳定性。结果：发现ＦＳＣ合成胶原蛋白的能力较ＨＣ强，而非胶原蛋白则与此相反ＦＳＣ中Ｉ型前胶