胃癌及癌前病变组织中的端粒长度分析

为观察胃癌及癌前病变组织中的端粒状态及其与该类肿瘤发生发展的关系，以琼脂糖ＤＮＡ直接杂交技术检测１６例早期胃癌、５２例进展期胃癌、２６例胃粘膜肠化及６７例异型增生组织中端粒限制性片段（ＴＲＦ）的长度。发现胃癌及癌前病变组织中的平均ＴＲＦ长度均比相应正常胃组织缩短。其中胃癌有１５例ＴＲＦ缩短，６例ＴＲＦ延长，癌前病变中有２２例ＴＲＦ缩短，１２例ＴＲＦ延长。且ＴＲＦ的这种变化与胃癌的阶段及癌前病变的程度相一致。结果表明，端粒长度改变可能是反映胃粘膜细胞癌变及胃癌进展的一个重要生物学标志     

胃癌及癌前癌病变组织中的端粒长度分析

为观察胃癌及癌前病变组织中的端粒状态及其与该类肿瘤发生发展的关系，以琼脂糖ＤＮＡ直接杂交技术检测１６例早期胃癌、５２例进展期胃癌、２６例胃粘膜肠化及６７例异型增生组织中端粒限制性片段（ＴＲＦ）的长度。发现胃癌及癌前病变组织中的平均ＴＲＦ长度均比相应肝组织缩短。其中胃癌有１５例ＴＲＦ缩短，６例ＴＲＦ延长，癌前病变中有２２例ＴＲＦ缩短，１２例ＴＲＦ延长。且ＴＲＦ的这种变化与胃癌的阶段及癌前病变的程度相     

胃粘膜活检标本端粒酶活性的检测

为探讨端粒酶活化在胃癌发生发展中的作用，本文采用ＴＲＡＰ法对７２例胃镜胃粘膜活检标本端粒酶活性进行检测，结果发现，胃癌端粒酶阳性率为８５．０％（１７／２０），萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃腺瘤性息肉端粒酶阳性率分别为２８．６％（１０／３５）、１６．７（１／６）、３３．３％（１／３）及１００％（２／２）。胃癌组织端粒酶阳性率与肿瘤部位、大体类型及组织学分类无明显相关。以上结果提示，胃粘膜活检标本端粒酶活性的检测对阐明胃癌的发生发展过程，胃粘膜癌变的预测及胃癌的早期诊断可能具有重要意义。     

胃癌组织ras基因群点突变及其一患者预后的关系(英文)

目的研究ｒａｓ基因点突变与胃癌患者预后的关系．方法应用多聚酶链延伸反应—限制性片段长度多态性分析法（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）对８８例福尔马林固定，石蜡包埋胃癌组织ＣＨａｒａｓ第１２位、６１位，Ｋｒａｓ第１２位、１３位和Ｎｒａｓ第１２位密码子的点突变进行检测．结果ｒａｓ基因群总突率为１８２％（１６／８８），点突变的与肿瘤浆膜浸润、淋巴结转移、临床病理分期及术后的生存期密切相关．结论检测胃癌组织ｒａｓ基因群点突变有助于判断胃癌患者的预后．     

改进TRAP-PCR检测端粒酶活性对早期胃癌的诊断

目的探索端粒酶活性早期诊断恶性实体瘤的新方法．方法通过胃癌组织的分离和肿瘤细胞系的培养，用改良ＴＲＡＰＰＣＲ方法，来检测其端粒酶的活性．结果胃癌组织及肿瘤细胞系的端粒酶总表达率９３％（２５／２７），其中细胞系ＭＫＮ２８，ＭＫＮ４５，ＨＨＣＬ，ＳＧＣ７９０１及Ｔｃａ８１１３均为阳性表达；胃癌远隔的正常粘膜标本表达率为０％（０／２０）；其中有２００个肿瘤细胞存在便可测得其端粒酶的活性．结论胃癌组织及肿瘤细胞系的端粒酶表达，具有很强的肿瘤特异性和较高的表达率；改进ＴＲＡＰＰＣＲ方法具有提高恶性实体瘤早期诊断的潜在价值     

胃癌和癌旁组织中Fas抗原表达与细胞凋亡的关系

目的研究胃癌及癌旁组织中Ｆａｓ抗原表达与细胞凋亡的关系，探讨Ｆａｓ抗原及细胞凋亡在胃癌发病中的作用．方法采用免疫组织化学及脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术对胃癌组织５０例及癌旁组织３３例中Ｆａｓ抗原表达状态及凋亡细胞进行原位观察和比较．结果胃癌组织Ｆａｓ抗原表达率为４６０％，显著低于癌旁组织的７５８％（χ２＝７２２，Ｐ＜００１）．胃癌组织凋亡细胞指数为５８％，显著低于癌旁组织的１６８％（ｔ＝８６３，Ｐ＜００１）；Ｆａｓ抗原表达阳性的胃癌和癌旁组织凋亡细胞指数显著高于Ｆａｓ抗原阴性组（ｔ＝５１６和ｔ＝３７１，Ｐ＜００１）．结论Ｆａｓ抗原对胃癌及癌旁组织中的细胞凋亡具有促进性调控作用，细胞凋亡调控异常在胃癌发病中可能起重要作用．     

脂质体介导的反义寡核苷酸抑制人胃癌细胞端粒酶活性

目的：探讨特异性反义寡脱氧核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ,ＡＳＯＤＮ）对人胃癌细胞端粒酶活性的影响。方法应用脂质体包裹与端粒酶ＲＮＡ模板区互补的ＡＳＯＤＮ,处理人胃癌细胞系ＦＧＣ８５。用端粒重复扩增分析（ｔｅｌｏｍｅｒｅ ｒｅｐｅａｔ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ,ＴＲＡＰ）－ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ检测法观察端粒酶活性的变化,结果经脂质体包裹ＡＳＯ     

上皮生长因子家族在老年人肠型胃癌发生中的变化

目的　探讨上皮生长因子（ＥＧＦ）家族在老年人胃癌发生中的作用。　方法　采用免疫组化ＬＳＡＢ法观察ＥＧＦ、转化生长因子－α（ＴＧＦ－α）、上皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在老年人肠型胃癌发生不同阶段的表达情况。　结果　ＥＧＦ在正常组织无表达,在胃癌表达最高（７０．８％ ）。ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ在不典型增生组织的表达（分别为７２．２％ 及８３．３％ ）最高;ＴＧＦ－α／ＥＧＦ＋ ＥＧＦＲ共同表达亦以不典型增生组织为最高。ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ在癌周正常组织的表达（分别为５５．６％ 及６１．１％ ）明显高于非癌正常组织（Ｐ＜ ０．０１）;且ＥＧＦ与胃癌的淋巴结转移、浆膜外侵呈正相关（Ｐ＜ ０．０５）。ＥＧＦ家族阳性胃癌粘膜的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数明显高于阴性组（Ｐ＜ ０．０１）,共同表达ＴＧＦ－α／ＥＧＦ＋ＥＧＦＲ胃粘膜的ＰＣＮＡ标记指数也明显高于单独表达ＥＧＦ、ＴＧＦ－α或ＥＧＦＲ组（Ｐ＜ ０．０５）。　结论　ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ与胃癌发生的早期事件关系密切,二者共同表达是癌前病变有意义的标志。ＥＧＦ与进展期癌有关,是判断预后的指标     

原发肝细胞癌N—ras基因突变,APC和DCC基因杂合缺失研究

目的 了解Ｎ－ｒａｓ基因突变。ＡＰＣ和ＤＣＣ基因杂合性缺失在原发性肝癌发生发展中的作用，方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态观察（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）分析技术，对３０例外科手术切除原发肝细胞癌组织中癌基因Ｎ－ｒａｓ第１２位密码子突变，抑癌基因ＡＰＣ和ＤＣＣ杂合缺失（ＬＯＨ）进行研究。结果 原发肝癌中Ｎ－ｒａｓ第１２位密码子的突变率为１６．７％（５／３０），ＡＰＣ和ＤＣＣ基因ＬＯＨ率分别为３６．     

人肝癌组织中γ-谷氨酰转移酶异常表达及其基因甲基化程度的研究

目的探讨γ谷氨酰转移酶（ＧＧＴ）基因在人类肝癌发生过程中的表达及改变机制。方法以病理组织学、生物化学和分子生物学方法,将自身配对的肝癌、癌旁组织和远癌组织中总ＲＮＡ纯化,对ＧＧＴ的表达与改变进行了分析;并设计两套引物,以逆转录巢式ＰＣＲ法扩增ＧＧＴ５′非编码区（ＮＣ）基因和限制性内切酶消化分析了不同肝癌组织中ＧＧＴ基因的甲基化程度。结果在病理组织学证实的２４例肝癌、癌旁和远癌组织中：①从肝癌灶至远癌的不同组织中,总ＲＮＡ浓度呈逐步升高趋势,三种不同组织间的差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）;②癌组织中总ＧＧＴ比活性（Ｕ／ｇ）较癌周和远癌组织明显升高（Ｐ＜０．０５）;③以自行设计建立的逆转录巢式ＰＣＲ法,成功地扩增ＧＧＴ的５′ＮＣ基因片段,特异性强且区带清晰,ＰＣＲ产物经酶切分析证明,ＧＧＴ基因５′ＮＣＭ３位点（ＣＣＧＧ）,其内位Ｃ在癌灶、癌周和远癌组织中的低甲基化频率分别为７０．８３％,５８．３３％和５４．１７％,非常明显地高于同组中已甲基化程度。结论肝癌组织中ＧＧＴ基因甲基化程度较低,且与肝癌ＧＧＴ的异常表达关系密切,对肝细胞癌变可能起促进作用。     

Alterations of telomerase activity and terminal restriction fragment in gastric cancer and its premalignant lesions

AIMS: In order to explore the role of alterations of telomerase activity and terminal restriction fragment (TRF) length in the development and progression of gastric cancer. METHODS: Telomerase activity was detected in 176 specimens of gastric mucosa obtained through an operation or endoscopical biopsy by using the telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay. Meanwhile, the mean length of TRF was measured with the use of a Southern blot in part of those samples. RESULTS: Telomerase activity was detected in 14 of 57 (24.6%) chronic atrophy gastritis patients, six of 18 (33.3%) intestinal metaplasia patients, three of eight (37.5%) dysplasia patients and 60 of 65 (92.3%) gastric cancer patients, respectively. Normal gastric mucosa revealed no telomerase activity. No association was found between telomerase activity and any clinicopathological parameters. The mean TRF length was decreased gradually with age in normal mucosa and in gastric cancer tissue. Regression analysis demonstrated that the reduction rate in these tissues was 41 +/- 12 base pairs/year. Among 35 gastric cancers, TRF length was shown to be shorter in 20 cases (57.1%), similar in 12 cases (34.3%) and elongated in three cases (7.6%), compared to the corresponding adjacent tissues. The mean TRF length tended to decrease as the mucosa underwent chronic atrophy gastritis, intestinal metaplasia, dysplasia and into gastric cancer. The mean TRF length in gastric cancer was not statistically correlated with clinicopathological parameters and telomerase activity. CONCLUSIONS: Our results suggest that telomerase is expressed during the early stage of gastric carcinogenesis, and that the clinical significance of TRF length appears to be limited in gastric cancer.     

幽门螺杆菌感染和端粒酶活性以及c-myc、p16基因的表达在胃黏膜癌变中的相关性研究

幽门螺杆菌(H.pylori)是胃癌的主要致病因子,H.pylori、端粒酶和肿瘤相关基因的关系在胃黏膜癌变发生过程中研究很少。目的:观察H.pylori感染和端粒酶活性以及c-myc、p16基因在胃癌中的关系。方法:通过胃镜活检和外科手术获取171例胃组织标本,快速尿素酶试验和H.pylori培养确定有无H.pylori感染;酶联免疫法检测H.pylori感染患者的血清CagA-IgG水平;聚合酶链反应.酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)法检测端粒酶活性;免疫组化法检测c-myc、p16基因的表达。结果:胃癌(GC)组端粒酶表达率显著高于其他各组(P<0.01);慢性萎缩性胃炎(CAG)伴中、重度肠化(IM)组端粒酶和c-myc表达率显著高于CAG伴轻度IM组(P<0.05);而慢性浅表性胃炎(CSG)和CAG伴轻度IM组p16表达率显著高于CAG伴中、重度IM、异型增生(Dys)和GC组(P<0.05)。在CAG伴轻、中、重度IM组中,H.pylori阳性组端粒酶活性比阴性组高:无论有无H.pylori感染,胃癌组端粒酶活性都非常高。在CAG伴中、重度IM、Dys和GC组中,H.pylori阳性亚组c-myc表达显著高于阴性亚组(P<0.01),而在ECAG伴中、重度IM和Dys组中,H.pylori阳性亚组p16基因表达显著低于阴性亚组(P<0.01)。结论:H pylori感染很可能主要通过c-myc基因的激活和p16基因的失活以及其他基因的变化来诱导CAG伴中、重度     

hTERT、P53在胃癌及癌前病变中的表达及相关性研究

目的探讨端粒酶逆转录酶（hTERT）基因、p53蛋白在胃癌（GC）及癌前病变中的表达及相关性。方法采用免疫组化和原位杂交方法分别检测130例GC及癌前病变组织标本中p53和hTERT mRNA的表达。结果p53蛋白在慢性表浅性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、非典型增生（DYS）、GC中的表达率分别为5％、25％、50％、62．5％,其中GC与CSG、CAG比较有统计学差异：hTERT mRNA在CSG、CAG、DYS及GC中的表达率分别是0、10％、30％、78．75％,GC与CSG、CAG、DYS比较有统计学差异。p53阳性的GC组织中hTERT表达均为阳性,p53阴性的GC组织中hTERT阳性表达率为66．7％。结论hTERT是一个比p53更好的恶性肿瘤标记物;p53基因突变可导致端粒酶活化,但端粒酶激活可能不完全依赖于p53基因的调控。     

原位逆转录PCR检测胃癌及癌前组织中端粒酶RNA及其临床意义

目的　研究胃癌及癌前病变胃粘膜端粒酶RNA的检测及其临床意义。方法　选取经病理组织学证实的胃粘膜活检标本 15 0例 ,包括慢性浅表性胃炎 3 2例、肠上皮化生 3 6例、不典型增生 3 4例、胃癌 48例 ,采用原位逆转录PCR、端粒重复序列扩增 (TRAP)法检测上述胃粘膜端粒酶RNA与端粒酶活性。结果　原位逆转录PCR技术检测胃粘膜活检标本端粒酶RNA阳性率为 5 5 .3 % (83 / 15 0 ) ,显著高于TRAP法检测端粒酶活性阳性率 (4 0 .0 % ,60 / 15 0 ) ,P <0 .0 5。端粒酶RNA在胃癌及癌前病变 (包括肠上皮化生与异型增生 )中检出率显著高于浅表性胃炎 (P <0 .0 5 ) ,胃癌中端粒酶RNA检出率亦显著高于肠上皮化生及不典型增生 (P <0 .0 5 ) ,但后两者比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。端粒酶RNA主要分布于胃粘膜癌细胞及癌前病变上皮细胞的胞核内。结论　端粒酶RNA与胃癌的发生密切相关。原位逆转录PCR技术检测胃粘膜端粒酶RNA对胃粘膜癌变的早期诊断和预测有重要价值 ,而且可能是较端粒酶活性更灵敏的生物学指标     

胃癌患者术后端粒长度变化与预后观察

目的分析原发性胃癌组织中的端粒长度变化与患者术后预后的关系.方法以琼脂糖DNA杂交检测58例手术切除的原发性胃癌与邻近胃组织中端粒限制性内切酶片段(TRF)的长度,并观察术后患者的临床状况及生存期.结果发现原发性胃癌组织中的平均TRF长度均比相应邻近胃组织缩短.其中原发性胃癌有14例TRF缩短,5例TRF延长;且在胃癌中TRF的这种异常状态与肿瘤的大小、转移、临床病理分期及患者的生存率相一致.结论 TRF长度不仅参与了胃癌的发生与发展,而且也为胃癌的诊断及预后判断提供了一种新的手段.     

Expression of ornithine decarboxylase in precancerous and cancerous gastric lesions

AIM: To investigate the expression of ornithine decarboxylase (ODC) in precancerous and cancerous gastric lesions. METHODS: We studied the expression of ODC in gastric mucosa from patients with chronic superficial gastritis (CSG,n = 32),chronic atrophic gastritis CAG,n = 43; 15 with and 28 without intestinal metaplasia (IM),gastric dysplasia (DYS,n = 11) and gastric cancer (GC,n = 48) tissues using immunohistochemical staining. All 134 biopsy specimens of gastric mucosa were collected by gastroscopy. METHODS: The positive rate of ODC expression was 34.4%,42.9%,73.3%,81.8% and 91.7% in cases with CSG,CAG without IM,CAG with IM,DYS and GC,respectively (P < 0.01),The positive rate of ODC expression increased in the order of CSG < CAG (without IM) < CAG (with IM) < DYS and finally,GC. In addition,ODC positive immunostaining rate was lower in well-differentiated GC than in poorly-differentiated GC (P < 0.05). CONCLUSION: The expression of ODC is positively correlated with the degree of malignity of gastric mucosa and development of gastric lesions. This finding indicates that ODC may be used as a good biomarker in the screening and diagnosis of precancerous lesions.