T 细胞受体δ、γ基因在小儿急性白血病中的变化

本文在细胞形态,表面抗原分析的基础上,对20例小儿急性白血症细胞进行TCRδ和γ基因结构的分析。11例属分化早期的白血病中有9例发生TCRδ基因的重排和缺失,其中5例也有TCRγ基因的重排。在5例属非淋巴细胞系的白血病中有3例发生TCRδ基因的重排.3例粒细胞性白血病细胞的TCR基因(δ和γ)均为胚系。有一例细胞表型仅有CD_2表达的白血病细胞,其TCR 基因(δ和γ)也为胚系。结果还显示:TCRδ基因结构发生变化的白血病细胞均有CD_(10)抗原表达。研究提示:TCRδ基因的重排不显示严格的细胞特异性,但是TCR 基因的变化与淋巴细胞系白血病细胞某些表面抗原的表达存在某种联系。     

小儿急性白血病免疫球蛋白基因的变化

本研究分析324例小儿兔性白血病细胞的免疫球蛋白重链基因和 kappa 轻链基因的变化.结果显示:(1)免疫球蛋白基因的变化具有 B 淋巴细胞系特导性.(2)kappa 基因的重排或缺失常见于前一前B 细胞和前 B 细胞性血病.(3)急性未分化性白血病都因具有重链基因重排,提示已定向进入 B 淋巴细胞.(4)部分白血病细胞呈寡克隆性恶性增殖.(5)一例表型当前一前 B 细胞性白血病 kappa 基因重排,重链基因为胚系     

分化早期小儿急性白血病细胞免疫球蛋白和T细胞受体基因结构的变化

从29例免疫分型的小儿急性白血病中选出髓过氧化物酶染色阴性和不与细胞系相关或成熟细胞系相关的单克隆抗体反应的6例白血病细胞,进一步作免疫球蛋白(包括重链和κ轻链)和T细胞受体(包括δ、γ、β)基因结构的分析。所有6例均有IgH基因的重排,提示这些白血病细胞是β细胞来源。两例CD_(10)阴性和白病细胞.κ链基因没有重排,其中一例的TCRδ、γ、β基因也都处于胚系,另一例的TCRβ处于胚系。在CD_(10)阳性白血病细胞中,其中两例κ链基因丢失,TCR基因结构都有不同程度的变化(重排或丢失)。这些结果可能提示在CD_(10)阳性白血病细胞中能产生功能性IgH的重排,并可导致IgL和TCR基因结构的变化。     

应用单克隆抗体对幼稚急性淋巴细胞白血病免疫标志的研究

本研究应用抗人白细胞表面分化抗原单克隆抗体和免疫基因探针,对缺乏表面标志的极幼稚急淋(ALL)细胞进行了胞膜和胞浆相关抗原的检测。通过对63例T-ALL细胞分析表明,膜CD_7(SmCD_7)与胞浆CD_3(cCD_3)配伍可作为幼稚T-ALL诊断的特异标志;53例非T-ALL比较研究证实,SmCD_(19)、cCD_(22)和cCD_(10)可共同用于检测幼稚B细胞系白血病,三种单抗联合应用有助于提高非T-ALL的检出率。     

CSFs与肿瘤

集落刺激因子(CSFs)除对正常造血细胞和白血病细胞有作用外,与白血病和非造血系肿瘤细胞增殖分化亦存在密切关系。瘤细胞表面CSFs 受体分布和数量具有异质性,并成为CSFs 对细胞作用不同的基础。基因水平的研究初步揭示了CSFs 功能基础及机理。     

PCR分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变

目前研究发现约 30 %急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者FLT3基因近膜区发生内部串联重复(ITD)突变 ,称为FLT3/ITD基因突变 ,该突变与ANLL的预后存在密切关系〔1〕。为进一步研究急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变 ,采用PCR技术分析 6 3例ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。材料和方法研究对象 :6 3例经形态学和免疫学确诊ALL患者 ,男 37例 ,女 2 6例 ,中位年龄 2 1岁。免疫分型中B细胞系ALL 4 5例 ,其中前前B细胞ALL 15例 ,前B细胞ALL 18例 ,成熟B细胞ALL 12例 ,T细胞系ALL 14…     

白血病患者及其HLA-A/B/DR全相合同胞中杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因型分布

目的 通过研究白血病患者及其HLA-A/B/DR相同的同胞中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型的分布情况,探讨同胞间KIR基因型与HLA分子之间的关系及KIR在不同种类白血病中的分布.方法 采用序列特异性弓I物聚合酶链反应(PCR-SSP)法进行KIR基因分型,对78例白血病患者及其HLA-A/B/DR相同的83例同胞的KIR基因型进行分析.结果 78例患者中有48.72%与其同胞有相同的KIR基因型,44.87%的患者与其同胞不完全相同.所有KIR基因型频率在患者及同胞之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).除KIR2DS4在慢性粒细胞白血病患者中的频率明显高于急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病外,其余KIR基因型在3组疾病中的频率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 KIR基因和HLA Ⅰ类抗原各自独立遗传,且相对稳定.KIR基因受白血病类型影响较小.     

三例AMELY基因发生改变的急性白血病临床与实验室分析

目的 了解白血病患者Y染色体上牙釉质蛋白基因(amelogenin Y gene,AMELY)改变情况.方法 应用AmpFISTR IdentifilerTM荧光标记复合扩增系统检测115例男性白血病患者的短串联重复序列(short tandem repeat,STR)和牙釉质蛋白(amelogenin,AMEL)基因,判断患者AMELY缺失情况;对AMELY缺失的患者检测其口腔上皮细胞的STR及Amelogenin基因,同时应用荧光原位杂交技术检测AMELY缺失患者骨髓白血病细胞中的Y染色体,确认AMELY缺失是否由Y染色体丢失引起.结果 2例初诊急性白血病患者AMELY发生了改变,1例慢性髓细胞白血病患者急变时AMELY发生了改变.结论 AMELY改变可能与白血病发生、发展有关.     

25例慢性粒细胞白血病患者bcr/abl融合基因结果分析

目的探讨逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)在检测慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl融合基因方面的应用价值。方法对25例慢性粒细胞白血病患儿血标本提取细胞RNA,用RT—PCR方法检测bcr/abl融合基因。结果 25例慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因分析,阳性24例(96%);阴性1例(4%)。结论 RT—PCR检测bcr/abl融合基因敏感性好,稳定性高,对临床治疗和预后判断具有指导意义。     

白血病细胞形态学与表面标记不一致性分析

研究了８７例急性白血病细胞形态学与表面标记的相互关系。结果表明：６３例（７２．４％）具有明确某系细胞特异或相关表面标记，与其形态学特征不一致，免疫标记分析更客观地反映了白血病细胞源性；但仍有２４例（２７．６％）缺乏特征性表面标记，其分型有赖于白血病细胞形态学分析。多态性和异质性导致白血病细胞形态学与表面标记的不一致     

IL-12、IFN-γ在急性移植物抗宿主病发病中作用的临床研究

急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ)是异基因造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＨＳＣＴ)的并发症之一 ,也是移植成功的主要障碍 ,因此 ,研究ａＧＶＨＤ的发病机制是当今移植免疫的热点课题。本文采用双夹心酶联免疫吸附法研究ａｌｌｏ ＨＳＣＴ患者的外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)体外分泌的ＩＬ 12、ＩＦＮ γ浓度 ,以探明ＩＬ 12、ＩＦＮ γ在临床ａＧＶＨＤ发病中的作用。30例异基因移植患者 ,年龄 12～ 5 3岁 (中位年龄为 34岁 ) ,其中慢性粒细胞白血病 19例 ,急性髓细胞白血病 7例 ,急性淋巴细胞白血病 4例。ａＧＶＨＤ的诊断主要依据临床表现 ,…     

T细胞受体与白血病

<正> T、B淋巴细胞是人体特异性免疫反应中,两类主要的效应细胞,B细胞通过其表面的免疫球蛋白(Ig)对抗原的识别,发挥体液免疫作用,而T细胞则通过T细胞受体(TCR)对呈现在细胞表面的外来抗原进行识别,介导细胞免疫反应。本文着重介绍和分析白血病细胞中TCR基因的重排与表达的情况。     

高白细胞性急性白血病临床表现与免疫表型研究

目的分析、比较各型高白细胞性急性白血病患者临床症状和白细胞分化的免疫表型,为该疾病的诊断、预后等提供依据。方法采用流式细胞术,对高白细胞性急性淋巴细胞性白血病(HLALL)和高白细胞性急性骨髓系白血病(HLAML)(共25例)、非高白细胞性急性淋巴细胞性白血病(NHLALL)和非高白细胞性急性髓系白血病(NHLAML)(共85例)的临床表现及免疫表型做比较分析。结果与NHLA比较,HLAL发病呈现急性及髓外发展的临床特征;对白血病细胞表面免疫学标记研究发现CD13和CD33为髓系细胞较特异表型,而HLALL可以同时出现多种免疫表型。结论 HLAL发病呈现急性、髓外发展且预测性差,CD33和CD13在白细胞免疫分型的髓系细胞中为较特异标志。     

FAK基因沉默增强白血病细胞对化疗药物敏感性

目的: 本实验研究黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)基因沉默对白血病细胞化疗药物敏感性的影响。方法: 构建FAK shRNA慢病毒载体,转染至BCR/ABL-BaF3白血病细胞株,通过蛋白质印迹方法检测FAK蛋白表达情况。 体外应用不同浓度的化疗药物伊马替尼处理BCR/ABL-BaF3细胞,予Annexin V标记检测细胞凋亡情况。建立白血病动物模型,联合应用FAK shRNA及伊马替尼进行处理,观察小鼠生存情况,分析白血病细胞在小鼠骨髓及脾脏的分布情况。结果: 成功建立FAK shRNA慢病毒载体,该载体能有效沉默FAK基因表达。体外实验发现5 μmol/L 伊马替尼处理时,空白对照组与FAK基因沉默组中Annexin V阳性细胞百分比分别为(9.76±1.97%和(21.90±3.20%,差异显著(P<0.05);予50 μmol/L 伊马替尼处理时,2组中Annexin V阳性细胞百分比分别为(56.10±6.00)%和(82.10±5.70)％,差异显著(P<0.05)。白血病动物实验中,与空白对照组相比,生存分析结果显示FAK基因沉默组小鼠的生存时间明显延长。白血病细胞输注后第60 d,与空白对照组相比,白血病细胞在FAK基因沉默组小鼠骨髓和脾脏的分布明显减少。结论: FAK基因沉默能明显增强白血病细胞对化疗药物敏感性,提示FAK基因沉默有望成为白血病治疗的新策略。     

髓细胞白血病的分子遗传学监测

肿瘤发生是多种基因异常的共同结果,因而检测基因改变可用于肿瘤监测。约1/3急性髓细胞白血病(AML)可发生N-ras原癌基因点突变。随着简便、灵敏的半固相微测序法的建立,它将用于监测AML早期复发和定量检测残留白血病细胞;此外,髓细胞白血病患者降钙素基因高甲基化可作为判定疾病进展的分子标记,且特别有助于慢性髓细胞白血病(CML)分期。     

白血病干细胞生物学特性的研究

目的通过对白血病原代细胞的体外培养,研究白血病干细胞(LSC)的生物学特性。方法分离18例白血病患者骨髓或外周血中单个核细胞(MNC),在体外进行培养观察,并用流式细胞术方法检测分离的MNC中LSC的数量及和细胞表面标记。结果从白血病患者中分离的MNC在体外培养1周后基本死亡。流式检测分离的MNC中免疫表型是CD34 CD38-CD123 的细胞群约有0.676%(0.03%~2%)。结论白血病干细胞难以在体外培养生长及扩增。外周血及骨髓中分离白血病患者的单个核细胞中,极少部分细胞表达干细胞标志。     

儿童T细胞型急性白血病DNA序列的tal-1基因重排

应用PCR技术检测原始细胞的不同基因标记对白血病最小残余病灶的检出具有重要作用。近年的研究表明,一些T细胞型急性白血病(T-ALL)除了可有染色体易位,免疫球蛋白、T细胞受体基因重排外,还可有     

白血病细胞纤溶活性及机制的研究

目的： 研究白血病细胞纤溶活性及其与尿激酶受体(uPAR)和膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)表达的关系。方法: 用发色底物法测定NB4、SHI-1、K562、Jurkat、Raji细胞与纤溶酶原相互作用后白血病细胞的纤溶活性。用流式细胞术检测NB4、SHI-1、K562、Jurkat、Raji细胞表面uPAR和annexinⅡ的表达。以RT-PCR方法检测uPAR基因和annexinⅡ基因在NB4、SHI-1、K562、Jurkat、Raji细胞系中的表达。结果: SHI-1细胞和NB4细胞的纤溶活性明显高于Raji、K562和Jurkat细胞的纤溶活性。uPAR和annexinⅡ在NB4细胞的表达率分别为(13.15±1.61)%与(95.97±1.19)%，在SHI-1细胞的表达分别为(99.00±0.26)%与(90.35±2.15)%，在K562、Jurkat、Raji细胞的表达均低。NB4细胞annexinⅡ的基因表达较SHI-1细胞高，K562和Jurkat细胞中未检测到annexinⅡ的基因表达。NB4和SHI-1细胞uPAR基因表达高于Jurkat和K562细胞，Raji细胞中未检测到uPAR基因的表达。结论: NB4与SHI-1白血病细胞株存在高纤溶活性，与annexinⅡ和uPAR的表达增高相关，这可能是早幼粒细胞白血病与急性单核细胞白血病患者在临床上易发生出血及并发弥散性血管内凝血的一个重要原因。     

急性淋巴性白血病细胞的免疫学标志

急性淋巴性白血病(ALL)大体上分为三类:(1)白血病细胞表面具有绵羊红细胞受体的T细胞型(T～ALL).(2)细胞表面具有免疫球蛋白的B细胞型(B-ALL).(3)上述两种标志都没有的广义的裸细胞型(Null-ALL).近来用单克隆抗体对白血病进行抗原分析.就抗原的差异同白血病病情、治疗效果和预后的关系进行深入研究.     

不同处理因素对儿童白血病细胞抗凋亡基因表达的影响

目的研究儿童白血病骨髓基质细胞(BMSCs)、VLA-4抗体、化疗药物VP-16、VLA-4抗体联合VP-16对各组白血病细胞抗凋亡基因表达的影响并探讨相关机制。方法收集初治儿童急性白血病骨髓标本,分离单个核细胞,采用RT-PCR方法检测各组白血病细胞抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表达。结果29例儿童急性白血病中,23例有Sur-vivin基因的表达,表达率高达79%;28例有Bcl-2基因的表达。BMSCs组抗凋亡基因Survivin、Bcl-2表达量最多,骨髓基质上清组仅次于BMSCs组,上述两组之间差异无统计学意义,但与白血病细胞单独培养组比,均有显著差异。抗体组、药物组、抗体加药物组Survivin、Bcl-2基因的表达均显著降低,差异均有统计学意义。抗体加药物组的表达量最少,与BMSCs组比,Survivin表达降低了56%左右,而Bcl-2表达量降低了71%。结论VLA-4抗体和VP-16可下调白血病细胞抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表达,两者联合应用,下调幅度更大。