凋亡相关基因bcl-2和bax在妇科肿瘤中的研究进展

bcl-2和bax基因是研究较多的两种凋亡相关基因.近年发现,各种妇科肿瘤组织中均有bcl-2、bax基因蛋白表达,且两者在肿瘤的发生、发展中起重要作用,并可作为妇科肿瘤的有效的预后指标,但其作用机制尚待进一步深入研究,以期为妇科肿瘤提供一种合理有效的基因治疗手段.     

细胞核增殖相关抗原ki67和bcl-2、bax与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理及预后的关系

目的研究细胞核增殖相关抗原ki67和凋亡抑制基因bcl-2 、促凋亡基因bax与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理及预后的关系.方法采用免疫组化SP法检测85例卵巢上皮性肿瘤中ki67、bcl-2、bax表达情况.结果①ki67指数在恶性卵巢上皮性肿瘤中显著高于良性及交界性肿瘤;与恶性卵巢上皮性肿瘤组织学分级呈正相关,与预后呈负相关.②bax表达水平在卵巢恶性肿瘤组中高于良性组,与恶性卵巢上皮性肿瘤组织学分级呈负相关,与预后呈正相关;bcl-2表达水平在恶性组中高于良性组及交界组;高分化组中bcl-2∶bax≤1的患者所占比例高于中、低分化组,bcl-2∶bax≤1患者预后较好.③恶性卵巢上皮性肿瘤中ki67指数与bax表达负相关,与bcl-2表达及bcl-2∶bax比值正相关;低增殖高凋亡易感组预后好于高增殖低凋亡易感组.④临床分期和bax表达水平是影响恶性卵巢上皮性肿瘤患者预后的主要因素.结论ki67可作为评价卵巢肿瘤生物学行为及预后的指标,bcl-2、bax相互作用,对恶性卵巢上皮性肿瘤的发生、发展及预后中起一定作用,高增殖低凋亡易感性促使肿瘤恶性发展,bax为恶性卵巢上皮性肿瘤患者的保护因素.     

抗细胞凋零基因bcl-2和bax与卵巢上皮性肿瘤的关系

目的:研究抗凋零基因bcl-2和bax与卵巢上皮性肿瘤发生及预后的关系。方法:通过免疫组化方法,用抗bcl-2及抗bax抗体检测卵巢上皮肿瘤76份(良性27份、交界性24份、恶性25份)中bcl-2和bax的表达产物,并以正常卵巢12份做对照。结果:正常卵巢组织12份中bcl-2和bax阳性检出率为0,在良性、交界性及恶性肿瘤组织中bcl-2和bax的阳性检出率分别为7.4%(2/27)、16.7%(4/24)、36.0%(9/25),22.2%(6/27)、45.8%(11/24)、56.0%(14/25),良性与恶性肿瘤之间差异有显著性(P<0.05),而且bax的表达率比bcl-2高(P<0.05),bax在恶性肿瘤组Ⅰ级与Ⅲ级间差异有显著性(P<0.05)。结论:抗细胞凋零基因bcl-2和bax过度表达可能与卵巢上皮性肿瘤发生有关,推测bax不仅参与细胞凋零的调控,而且可能与肿瘤分化及预后有关。     

Bax、Bcl-2ASODN联合转染增强宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的实验研究

目的:研究凋亡抑制基因bcl-2反义寡核苷酸(ASODN)和促凋亡基因bax联合转染对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响,进而探求其放射增敏作用。方法:用逆转录病毒颗粒感染HeLa细胞,获得HeLa-bax细胞后,将bcl-2ASODN转染HeLa及HeLa-bax细胞,36h后放射治疗,通过MTT法、细胞形态学及流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡,半定量RT-PCR测bcl-2及bax基因的表达。结果:(1)HeLa细胞经bcl-2ASODN及bax联合转染并放疗后,光镜观察有明显凋亡趋势;(2)MTT法及流式细胞仪检测其凋亡率明显高于单基因转染+放疗组(P<0.05);(3)RT-PCR结果显示,bax基因表达显著增强,而bcl-2基因表达较各对照组明显减弱。结论:凋亡抑制基因bcl-2ASODN和促凋亡基因bax联合转染诱导HeLa细胞凋亡效果明显优于单基因转染,可有效提高HeLa细胞的放射敏感性。     

官腔脱落细胞中p53、ki-67、bcl-2、bax基因的表达及意义

目的 采用实时荧光定量PCR法检测p53、ki-67、bcl-2、bax基因在子宫内膜癌及正常人官腔脱落细胞中的表达变化水平,探讨官腔脱落细胞中p53、ki-67、bcl-2、bax基因的表达变化在子宫内膜癌早期诊断中的意义.方法 收集健康志愿者及子宫内膜癌患者官腔脱落细胞样本共90例;提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测目的基因的表达变化水平;所有实验数据采用SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 荧光定量PCR结果显示,p53基因在正常人官腔脱落细胞中未检测到表达,随着恶性程度升高,表达量显著升高(P＜0.01),ki-67的表达在正常人中表达量最低,随着恶性程度升高,表达量逐渐升高(P＜0.05),bcl-2基因的表达逐渐降低(P＜0.05),bax/bcl-2值随着恶性程度增高而降低.结论 p53、ki-67、bcl-2、bax基因的表达量在子宫内膜癌发生发展过程中呈一定的变化趋势,提示p53、ki-67、bcl-2、bax基因可作为子宫内膜癌早期诊断的分子标志物.     

凋亡调节基因在Ⅲ、Ⅳ期子宫内膜异位症中的表达

目的 :检测凋亡调节基因 bcl- 2、bax和 c- myc在 、 子宫内膜异位症异位内膜中的表达 ,以探讨凋亡调节基因在子宫内膜异位症发病中的作用。方法 :2 0例子宫内膜异位症患者 ,按 r AFS分期 : 期 8例 , 期 12例。用免疫组化法检测上述患者异位内膜中 bcl- 2、bax和 c- m yc的表达。结果 :bcl- 2、bax和 c- myc主要定位于子宫内膜异位症的腺上皮中 ,其中 bcl- 2的总体阳性率为 5 5 % ,bax的阳性率为 75 % ,c- myc阳性率为 5 5 % ,且 bcl- 2的表达与 c- myc表达正相关(P<0 .0 1) ,而与 bax的表达负相关 (P<0 .0 5 ) ,相关性有统计学意义。按疾病分期比较三者的表达情况 ,bcl- 2在 期中表达高于 期者 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;按月经周期比较三者表达情况 ,则差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :子宫内膜异位症患者异位内膜存在一定程度凋亡 , 期较 期细胞更易凋亡 ,而与月经周期无关 ,bcl- 2和 bax起主要调节作用 ,c- myc可能与 bcl- 2协同作用     

超分割放疗对宫颈癌组织中细胞增殖凋亡相关基因mRNA表达的影响

目的探讨超分割放疗对宫颈癌组织中增殖核抗原(PCNA)、细胞凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的影响。方法用RT-PCR法检测超分割组23例,常规分割组10例宫颈癌组织在放疗前、后及放疗中PCNA、bcl-2和bax基因表达的情况、动态变化和差异。结果放疗2周后较放疗前超分割组bax基因的表达明显增强(P0.05),常规分割组则差异无统计学意义(P0.05)。PCNA、bcl-2基因的表达变化差异无统计学意义(P0.05)。结论超分割放疗比常规分割放疗更好的上调bax基因的表达,增强诱导肿瘤细胞凋亡。     

功能失调性子宫出血和细胞凋亡,bcl-2及bax基因表达的关系

目的研究功能失调性子宫出血与细胞凋亡及其相关基因表达产物的关系。方法应用TUNEL技术检测30例正常月经周期的增生期子宫内膜，28例简单增生，2例复杂增生子宫内膜标本的凋亡指数（AI）。应用免疫组化方法检测bcl-2及bax基因在子宫内膜的表达。结果简单增生和复杂增生子宫内膜AI比正常增生期AI高（P＜0．05）；bcl-2基因在正常增生期表达比在简单增生和复杂增生表达略高，差异无显著性（P＞0．05）；bax基因在简单增生和复杂增生表达比在正常增生期表达高（P＜0．05）。结论功能失调性子宫出血的发病与细胞凋亡有关，且与bcl-2，bax表达相关。     

阿司匹林对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的:探讨阿司匹林对卵巢癌细胞凋亡的影响以及对凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的作用。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法分析阿司匹林对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用,用流式细胞术分析方法定量检测细胞凋亡及细胞周期的变化。用RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的表达。结果:阿司匹林对SK-OV3细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈量效和时效的关系;1、5、10mmol/L3个浓度的阿司匹林处理细胞48h后,细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,而且G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例升高,细胞被阻滞在G2/M期,细胞周期也发生明显改变;阿司匹林可抑制卵巢癌细胞的bcl-2mRNA表达,而上调bax mRNA的表达。结论:阿司匹林能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡。此作用可能与阿司匹林抑制细胞bcl-2mRNA的表达和上调bax mRNA表达有关。     

凋亡调节基因bcl-2/bax与卵巢早衰的关系

细胞凋亡在生物有机体的正常生理调节和病理过程中都有十分重要作用。近来研究表明,卵巢早衰的发病机制是由于卵母细胞过快耗竭所致,卵母细胞的活化及持续生长发育依赖于其周围的颗粒细胞的营养及旁分泌作用。bcl-2/bax参与卵巢颗粒细胞的凋亡过程,细胞是走向生存还是死亡取决于bc1-2/bax的比值,间接影响卵母细胞的凋亡,bcl-2/bax在卵巢早衰的发生和发展中起重要作用。     

细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax在多囊卵巢综合征患者子宫内膜中的表达

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜中细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax的表达及其在PCOS患者子宫内膜病变中的意义。方法应用免疫组织化学SP方法,测定18例PCOS患者子宫内膜和27例月经周期正常、因输卵管不通或男性不育就诊的对照者子宫内膜（10例增殖期、17例分泌期）bcl-2和bax蛋白的表达。结果PCOS患者子宫内膜bcl-2表达较对照者增殖期和分泌期高（P＜0．05和P＜0．01）,但bax表达相似（p＞0．05）。结论PCOS患者子宫内膜bcl-2蛋白表达增高,与bax形成更多的异源二聚体,从而抑制PCOS子宫内膜凋亡,对其子宫内膜的异常增生改变起一定作用。     

胎鼠心肌细胞凋亡调控基因bcl-2和bax的表达及意义

目的:探讨孕鼠肝内胆汁淤积症时胎鼠心肌细胞凋亡及调控基因bcl-2和bax的表达及意义.方法:应用雌孕激素建立妊娠期肝内胆汁淤积症大鼠模型,光镜观察胎鼠心脏的病理改变.采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法检测妊娠第21天时胎鼠心肌细胞凋亡及调控基因bcl-2和bax的表达.结果:①肝内胆汁淤积症组(胆淤组)胎鼠心脏光镜下见心肌组织中心肌细胞空泡变性、水肿.②胆淤组胎鼠心肌细胞凋亡指数为39.79%4±2.3421%,对照组为19.29%±2.4624%,两组比较,差异有非常显著性,P＜0.01.③胆淤组胎鼠心肌细胞bcl-2基因的表达明显低于对照组,差异有非常显著性,P＜0.01;胆淤组和对照组胎鼠心肌细胞bax基因的表达比较,差异无显著性,P＞0.05.结论:孕鼠肝内胆汁淤积症时出现胎鼠心肌细胞凋亡,bcl-2基因表达下调可能参与调控胎鼠心肌细胞凋亡.     

细胞周期专职调控基因INK4a-ARF与妇科肿瘤

INK4a-ARF基因是新近发现的抑癌基因，包含两个重叠基因：INK4a和ARF，编码产物p16INK4a和p14ARF蛋白，分别对cyclinD-CDK4-pRb-E2F和MDM2-p53通路具有关键性调控功能，且在大部分恶性肿瘤中缺失表达，其功能失活的机制主要包括该基因的缺失、突变和甲基化。但在妇科肿瘤如宫颈癌及外阴癌中p16INK4a和p14ARF蛋白过表达，提示INK4a-ARF基因在妇科肿瘤发生发展中所起的作用可能与其在其他肿瘤中所起的作用不同，将成为妇科肿瘤检测与预后判断的标志性基因之一。就INK4a-ARF基因与妇科肿瘤关系的研究进展综述。     

bcl-2在子宫颈浸润癌及原位癌中的表达

bcl-2基因最初在有染色体移位的B淋巴细胞中检测到:后发现在正常组织,显示凋亡更新的长寿干细胞中,减数分裂后细胞及一些肿瘤中也有表达。其抑制细胞凋亡,在细胞发育、分化、形态发生中有重要生理作用。为评价bcl-2对子宫颈癌治疗及预后的作用,采用免疫组化法对bcl-2在子宫颈癌中的     

细胞凋亡与卵巢癌化疗耐药的相关性研究

卵巢癌死亡率居妇科肿瘤之首，其中肿瘤化疗耐药是主要原因之一。近年研究证实细胞凋亡功能失调亦是化疗耐药发生的关键因素。许多基因和调控因子如p53、bcl-2、TRAIL、IAP家族均参与化疗药物诱导的细胞凋亡过程，表现出与卵巢癌化疗耐药相关。现就其相关性以及通过调控肿瘤细胞凋亡逆转耐药方面的实验研究、临床研究及进展综述。     

卵泡发育中相关基因的调控

卵泡发育是一个受内分泌、旁分泌及基因调节的复杂的生理过程。基因通过表达产物反馈调节卵泡发育,但它们各自对卵泡发育的调节作用有所不同。FOXL2基因能促进卵泡的生长、发育及抗凋亡,AMH基因、GDF-9基因、INH基因与卵泡早期的生长和发育有关。原癌基因c-myc促进卵泡发育和黄体形成,c-mos基因在卵母细胞减数分裂中呈现特异作用,而bcl-2和bax分别参与了卵巢颗粒细胞的增殖和凋亡的调节。由于各基因调控的相互协调,才使卵泡得以正常生长、发育和成熟。     

宫颈癌中细胞凋亡指数与放射治疗临床效果关系的研究

目的:研究宫颈癌中细胞凋亡指数与放射治疗（放疗）临床效果的关系。方法:对35例宫颈癌患者分别于放疗前和放疗1周后[用肿瘤剂量（DT）900-1000cGy],取标本,采用原位DNA末端终止法和免疫组化法（IHCA）分别检测细胞凋亡指数（AI）和凋亡相关基因bcl-2/bax。结果:放疗前和放疗第1周后AI分别为1.21％±0.78％、29.8％±8.4％,差异有高度显著性（P<0.01）;AI与bcl-2/bax的表达及与患者的临床疗效密切相关,RT前基础细胞凋亡指数（BAI）≥1.21％的临床疗效明显高于BAI<1.21％者（P<0.01）。结论:AI和患者的临床疗效具有相关性,检测BAI可预测患者对RT的敏感性。     

凋亡抑制基因survivin在卵巢上皮性癌组织中的表达及其与bcl-2、bax蛋白表达的关系

目的　探讨凋亡抑制基因survivin在卵巢上皮性癌中的表达 ,及其与bcl 2、bax蛋白表达的相关性。方法　应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 35例卵巢上皮性癌组织中survivin基因的表达 ;应用免疫组织化学链霉亲和素 生物素 过氧化物酶复合物 (SABC)方法 ,检测bcl 2及bax蛋白的表达 ,并与卵巢上皮性交界性肿瘤、良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织各 10例进行对照。结果　卵巢上皮性癌、交界性肿瘤组织中 ,survivin基因的表达率分别为 83%及 80 % ,显著高于良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织的表达率 2 0 %及 0 % (P均 <0 .0 5 )。survivin基因表达与卵巢上皮性癌的临床分期、病理学类型、组织学分级及淋巴结转移无相关性 (P均 >0 .0 5 )。survivin基因表达与bcl 2蛋白表达呈正相关 (P <0 0 1) ,而与bax蛋白表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论　survivin基因可通过抑制癌细胞凋亡 ,对卵巢上皮性癌的发生和发展起作用 ;survivin基因可能与凋亡相关基因bcl 2、bax ,在卵巢上皮性癌的发展中分别起协同和拮抗作用。     

三苯氧胺联合米非司酮药物流产对早孕绒毛细胞凋亡及调控基因的影响

目的:探讨三苯氧胺联合米非司酮对早孕绒毛细胞凋亡及凋亡调控基因bcl-2和bax表达的影响。方法:将妊娠49d内的早孕妇女50例随机分成两组,试验组和对照组分别给予三苯氧胺120mg或安慰剂联合米非司酮150mg配伍米索前列醇600μg的药物流产方案,收集两组服用米索前列醇后6h内自然排出的绒毛组织,应用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测绒毛组织的细胞凋亡指数,免疫组化方法检测绒毛组织中bcl-2、bax的表达,并用Imageproplus4.10版本的专业图像分析软件测定bcl-2、bax蛋白表达积分光密度值。结果:①绒毛细胞凋亡主要发生于细胞滋养细胞和合体滋养细胞,且试验组指数明显高于对照组(14.40%±7.05%vs9.06%±5.04%,P<0.01;9.89%±3.95%vs5.85%±2.15%,P<0.01)。②Bcl-2蛋白表达于合体滋养细胞浆中,试验组其表达积分光密度值低于对照组(328.24±194.20vs682.41±237.41,P<0.01);Bax蛋白主要表达于细胞滋养细胞和合体滋养细胞胞浆中,且试验组的表达积分光密度值均高于对照组(1036.18±369.47vs658.78±200.76,P<0.01;1554.28±554.20vs988.18±301.14,P<0.01)。结论:三苯氧胺配伍米非司酮较单独使用米非司酮促进绒毛滋养细胞凋亡更强,这一作用与bcl-2蛋白表达下降、bax蛋白表达上升有关。     

黄体功能不全患者月经期子宫内膜细胞凋亡的研究

目的：探讨黄体功能不全（luteal phase defect LPD)患者月经期子宫内膜细胞的凋亡及意义。方法：应用免疫组织化学S－P方法,测定35例黄体功能不全患者和19例对照组月经期子宫内膜bcl-2和bax蛋白的表达,同时应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）测定二组月经期子宫内膜的细胞凋亡。结果：LPD组患者子宫内膜bcl-2表达较对照组高（P＜0．01）,而bax表达较对照组（P＜0．05）,凋亡指数（apoptotic index AI）对照组高于LPD组（P＜0．01）,且随着bcl-2的表达强度增加而减少（Ｐ＜０．０１）,而随着bax的表达强度增加而增加（P＜0．01）,结论：LPD组患者月经期子宫内膜 bcl-2表达增高bax表达降低,从而抑制LPD患者子宫内膜细胞凋亡,对其子宫内膜的异常变改变起一定作用。