消化酶、固定剂对石蜡包埋肝组织DPC和FN—PAP法染色的影响

本文作者对不同固定剂和消化酶对石蜡包埋肝组织desmin阳性细胞(DPC)和纤维联接蛋白(FN)PAP法染色的影响进行了比较研究。所试固定剂中,除Carnoy液外,其它皆需酶消化。对FN染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、0.2％胃蛋白酶消化2 h为宜。DPC染色以缓冲福尔马林或4％多聚甲醛固定、胃蛋白酶与胰蛋白酶双重消化各45 min最为理想。结果提示石蜡包埋组织PAP法染色显示细胞内外抗原时应注意选择适宜的固定剂和消化酶。     

固定剂和固定时间对保存肺神经内分泌细胞降钙素抗原性的实验研究

研究Ｂｏｕｉｎ液、１０％福尔马林和４％多聚甲醛与０．２５％戊二醛混合固定液（简称混合固定剂）及不同固定时间对降钙素（ＣＴ）免疫组化显示成年大鼠肺神经内分泌细胞（ＰＮＥＣ）的影响。计量分析发现Ｂｏｕｉｎ液保存ＣＴ抗原性的效果最好，但受固定时间影响较大，以固定４ｈ效果最好。混合固定剂保存ＣＴ抗原性的效果最差。１０％福尔马林效果亦不好     

固定剂和固定时间对保存肺神经内分泌细胞降钙素抗原性的实…

研究Ｂｏｕｉｎ液、１０％福尔马林和４％多聚甲醛与０．２５％戊二醛混合固定液（简称混合固定剂）及不同固定时间对降钙素（ＣＴ）免疫组化显示成年大鼠肺神经内分泌细胞（ＰＮＥＣ）的影响。计算分析发现Ｂｏｕｉｎ液保存ＣＴ抗原性的效果最好，但受固定时间影响较大，以固定４ｈ效果最好。混合固定剂保存ＣＴ抗原性的效果最差。１０％福尔马林效果亦不好。     

两种染色方法对脑垂体三种嗜色细胞显示效果的比较

目的：为了更清晰地显示脑垂体三种嗜色细胞，筛选出优秀的染色方法。方法：取成年雌狗脑垂体,Zenker液固定，分别用苏木精一伊红和Mallory氏两种染色方法相比较。结果：用苏木精一伊红染色法；不易区分三种嗜色细胞。而采用的Mallory氏染色方法。能够较清楚地区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论：Mallory氏染色法能够较清楚地显示脑垂体三种嗜色细胞结构。为实验教学提供了优良的切片标本。     

潘氏细胞标本的探讨

用含酸或不含酸固定液固定不同时间禁食或摄食的小鼠回肠,并以不同的方法染色,光镜观察表明禁食或摄食对潘氏细胞的颗粒形态无明显影响;含酸固定液使颗粒溶解,不含酸固定液则能较好地保存颗粒:细胞的颗粒易被酸性染料着色.     

不同固定剂对免疫组织化学染色效果的影响

目的:比较不同固定剂对免疫组织化学染色的影响。方法:取大鼠胃窦组织,分别采用4 %多聚甲醛、10%甲醛和Bouin液固定,用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测大鼠胃窦黏膜内生长抑素(SS)和胃泌素(Gas)的表达。结果:用Bouin液固定的组织经免疫组织化学染色显示的阳性细胞数比用其他2种固定剂所显示的阳性细胞数多(P<0 .0 5 ) ,而3种固定剂显示的SS和Gas的阳性细胞平均灰度值差别无显著性(P>0 .0 5 )。结论:Bouin液比4%多聚甲醛、10 %甲醛能较好保存大鼠胃窦黏膜内SS和Gas的抗原性。     

培养的周围神经组织特殊三色染色法

目的；以特殊三角染色法显示培养的周围神经组织中轴索及雪旺氏细胞等结构。方法：大鼠背根神经体外培养后，用苏木素精，固绿ＦＣＦ，变色素２Ｒ及磷钨酸等配制三色染色液染色。结果：神经轴索呈蓝绿色，雪旺氏细胞核为红色或紫红色，胞质为浅灰色。结论：特殊的三色染色法能区别显示培养的周转神经组织中轴索及雪旺氏细胞。     

组织切片PT和HE、PAS、PASH、PAST染色方法比较

目的:比较组织切片HE、PAS及PT染色方法及镜下特点.方法:取大鼠肝脏,Camoy氏固定液固定,对肝组织HE、PAS及PT染色,光学显微镜下观察染色效果.结果:PT染色法能清晰显示肝组织的细胞及细胞核轮廓,效果优于HE、PAS法.结论:PT染色方法简单,成本低,细胞及细胞核轮廓更能清楚显示.     

在宫颈液基细胞学中检测念珠菌的染色方法比较

目的比较在宫颈液基细胞学（TCT）中检测阴道念珠菌的三种病理学染色方法。方法采用巴氏染色、PAS染色、六胺银染色对本院21例念珠菌性阴道炎的宫颈液基薄层细胞片进行染色对比。结果上述三种方法均可显示宫颈液基薄层细胞片中的念珠菌,其中巴氏染色中念珠菌呈现隐约的嗜伊红色到灰棕色,较难辨别;PAS染色法显示的念珠菌呈紫红色;六胺银染色显示的念珠菌呈黑褐色,在镜下极易辨认。结论六胺银法是显示宫颈液基薄层细胞片中阴道念珠菌的最佳方法。     

PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡的影响因素

目的 利用ＰＩ染色流式细胞仪检测细胞凋亡时影响亚二倍体峰位置的因素。方法 用地塞米松诱导ＳＤ大鼠胸腺淋巴细胞凋亡，采用不同的固定剂、固定温度和时间、在悬浮缓冲液洗涤细胞时悬浮不同的时间，然后进行ＰＩ染色流式细胞仪分析。结果４种不同的固定剂中，只有７０％乙醇固定的胸腺淋巴细胞出现亚二倍体峰，而其它３种固定方法无亚二倍体峰出现；乙醇固定的温度以及细胞在悬浮缓中液悬浮的时间对亚二倍体峰的位置有明显的影响     

糖原固定的改良法

糖原固定剂有几种。一般采用Carhoy氏液进行固定,也有采取无水酒精固定。根据我们实验证明此两种固定剂固定的组织有一定的缺点,如糖原颗粒分布出现极化现象,影响切片的观察;同时经过这种固定剂固定的组织不易切片。根据以上存在的问题,我们在实验中进行了探索,对固定液进行了改良。方法: 1、取2毫米大小的组织块放入95％酒精30毫升,在4℃冰箱中放一小时。 2、然后在上液中加入3毫升甲醛,1.5毫升冰醋酸再固定一小时。 3、无水酒精①、②两次共30—40分钟脱水。     

细胞与生物材料共培养的样品扫描电镜制备法

目的通过不同的样品制备法,在扫描电镜下观察制样方法对细胞形态的影响,筛选细胞与生物材料共培养的样品制备法。方法对样品分组采用戊二醛单固定和戊二醛、锇酸双重固定,使用间接移液法和直接移液法对样品进行脱水、置换。结果镜下显示采用戊二醛、锇酸双重固定,使用直接移液法制备的样品细胞无塌陷皱折、表面结构丰富清晰,图像反差好。结论对细胞与生物材料共培养的样品采用双重固定、直接移液法进行样品制备效果理想。     

组织固定对于免疫细胞化学显示蜡切片淋巴结中细胞内免疫球蛋白的作用

本文研究了不同固定液对于未标记抗体酶(PAP)技术显示石蜡包埋大鼠淋巴结切片中细胞内免疫球蛋白(IgG)和组织形态的作用。Bouin氏液对于IgG抗原性的保存为最好,染色界线清晰,组织形态保持完整。     

不同固定液及固定时间对小鼠肝组织结构的影响

目的: 研究小鼠肝组织的最佳固定液及切片制作方法.方法:健康雄性成年昆明鼠,腹腔麻醉下取小鼠的肝脏中叶,分别入10%福尔马林、4%多聚甲醛、Bouin液及AAF液固定,固定时间为12、24及48 h.常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,HE染色,观察比较不同固定液、不同固定时间下小鼠肝组织的光镜结构.结果: 10%福尔马林、4%多聚甲醛固定的肝组织小叶结构完整、清晰,肝细胞界限清楚,着色好,以固定24 h最为理想, 随固定时间延长,细胞出现过度收缩,细胞间隙有轻度增大,胞浆减少且部分细胞出现小空泡.Bouin液及AAF液固定的肝组织各时间点的肝细胞结构均不够完整,界限不清,胞浆中出现空泡,自溶现象明显.结论:肝组织固定剂首选10%福尔马林及4%多聚甲醛,固定时间以24h效果最佳.     

显示高尔基氏器的若干种新固定剂的试验

高尔基氏器(Golgi apparatus)是细胞质内经常存在的网状、颗粒状、杆状或块状的结构。这种结构首先是意大利细胞学家高尔基(Golgi)于1898年用银盐法处理神经细胞而发现的。显示高尔基氏器的方法通常均采用固定染色法,有时亦利用活体细胞进行观察。用活体染色法显示(如中性红和苏丹Ⅲ染色法等),可以作为辅助的方法。高尔基氏器的显示方法,普通可借镀银法和锇酸法在细胞质内显出。银染方法中有Cajal氏硝酸铀法,Da Fano氏硝酸钴银染法,Aoyama氏氯化镉福尔马林法,朱洪文的硝酸锶、硝酸镍、硝酸钡     

兔心中心纤维体和主动脉壁的组织化学研究

研究目的通过对兔心中心纤维体和主动脉壁的代谢酶观察,探讨该两种组织的代谢途径。研究背景中心纤维体和主动脉壁的组织学和亚微结构观察已有报道,但是,用组织化学方法探讨其代谢途径的文献尚不多见。研究方法利用40只杂种成兔,击头致死后3～5分钟取出心脏。恒冷箱切片。用Joo氏法显示胆碱脂酶,Diengdoh氏法显示单胺氧化酶,用Preston氏法显示乳酸脱氢酶,用Godlewski氏法显示磷酸化酶。结果中心纤维体和主动脉壁中层的细胞乳酸脱氨酶、磷酸化酶和单胺氧化酶呈强阳性反应,胆碱脂酶为弱阳性或阴性。结论中心纤维体和主动脉壁代谢较低,以无氧代谢为主,具有较强的抗缺氧能力。     

小鼠慢性免疫性肝损伤模型建立与筛选

目的建立与筛选小鼠慢性免疫性肝损伤模型。方法选用 BALB/c 小鼠、C_(57)黑小鼠,使用半乳糖胺联用福氏全佐剂、福氏不全佐剂、卡介苗等,进行模型建立与结果观察。结果用 C_(57)小鼠以半乳糖胺联用福氏全剂组肝损伤模型成型率最佳。结论以 C_(57)黑小鼠使用半乳糖胺辅以福氏全剂可以形成小鼠慢性免疫性肝损伤模型。     

小鼠慢性免疫性肝损伤模型建立与筛选

目的建立与筛选小鼠慢性免疫性肝损伤模型。方法选用BALB／c小鼠、C57黑小鼠，使用半乳糖胺联用福氏全佐剂、福氏不全佐剂、卡介苗等，进行模型建立与结果观察。结果用C57小鼠以半乳糖胺联用福氏全剂组肝损伤模型成型率最佳。结论以C57黑小鼠使用半乳糖胺辅以福氏全剂可以形成小鼠慢性免疫性肝损伤模型。     

酶组织化学双重染色技术

酶组织化学的双重染色技术是指在同一切片上进行两种酶反应,从而在同一组织内显示两种酶的定位及活性。其意义在于更清晰地显示不同组织结构,在疾病情况下可同时显示不同细胞器或不同酶活性的损伤。本实验用大鼠及人的不同器官或组织的未固定及不同固定液固定后的恒冷切片作双重酶反应,为国内开展有关技术提供参考资料。     

Bouin氏液二次固定时间对家兔肝脏纤维化Masson三色染色的影响

目的:探讨Bouin氏液二次固定时间对Masson三色染色效果的影响,进一步寻找Bouin氏液二次固定的最佳条件。方法:取5例肝纤维化模型家兔肝脏组织(10%中性福尔马林固定)的蜡块,切片、脱蜡后,用Bouin氏液二次固定,固定时间分别为0 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、过夜。进行Masson三色染色并用光镜和统计软件分析比较染色结果。结果:未经二次固定的切片与所有经过二次固定的切片染色评分比较,差异均有统计学意义(P0.05);二次固定过夜的染色效果最好,其与二次固定4 h染色评分比较,差异无统计意义(P0.05)。结论:Bouin氏液二次固定的肝纤维化切片的Masson三色染色效果优于仅经福尔马林固定的切片;二次固定4 h或过夜切片的染色效果最佳。