阿奇霉素对支气管肺炎患儿CD8+CD28-抑制性抑制性T细胞的影响

目的探索阿奇霉素对支气管肺炎患儿CD8+CD28-抑制性T细胞的影响。方法收集66例支气管肺炎患儿作为观察对象,以同龄急性上呼吸道感染及健康儿童各66例作为对照,采集外周血运用流式细胞术检测以上3组CD8+CD28-抑制性T细胞及其细胞因子转化生长因子β1（TGF-β1）及白介素10（IL-10）的含量,并检测降钙素原(PCT)及MP免疫球蛋白M（MP-IgM）含量;将支气管肺炎患儿分为A组及B组各33例,分别使用阿奇霉素及红霉素进行治疗,比较两药对上述5项指标的差异,并分析其相关性。结果支气管肺炎患儿CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10显著低于急性上感患儿及健康儿童组（P < 0.05）,而PCT及MP-IgM显著高于另外两组（P < 0.05）。治疗后A组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10均显著高于B组（P < 0.05）,且PCT及MP-IgM显著低于B组（P < 0.05）。相关性分析结果提示CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10三者均与PCT及MP-IgM呈显著负相关性,其中CD8+CD28-T细胞及TGF-β1与MP-IgM的相关性最强。结论CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10降低是MP阳性支气管肺炎患儿的重要免疫学特征,且与感染指标呈显著相关性;阿奇霉素对提高CD8+CD28-T细胞含量及下调感染指标的效果均优于红霉素。      

移植患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞、TGF-β1及IL-10的表达

目的观察肝肾移植患者外周血中调节性T细胞(Treg细胞)的百分比与转化生长因子β1(TGF-β1)及白细胞介素10(IL-10)水平的表达情况及其相关性。方法15例移植患者的外周静脉血,采用流式细胞术检测CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞的百分比,并以20例体检健康者为对照组;用酶联免疫吸附试验法检测移植患者血清中细胞因子TGF-β1、IL-10的水平,分析这2种细胞因子水平与CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比的关系及移植前后TGF-β1、IL-10水平的差异。结果与对照组比较,移植患者移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);肝肾移植后CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比下降为0。肝肾移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比与TGF-β1、IL-10的水平呈正相关(P<0.05)。TGF-β1、IL-10的水平移植后低于移植前,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4^+CD25^+CD127^low Treg的百分比与TGF-β1、IL-10的水平存在一定相关性;移植后CD4^+CD25^+CD127^low Tre细胞百分比下降为0,可能与应用大量免疫抑制剂有关。     

应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4~+ CD25~+调节性T细胞

目的探讨在人重组的粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血单个核细胞中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞可行性及其表型和功能。方法收集本院外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB组)和动员后的外周血采集物(G-PB组)各10例,用免疫磁珠法分选出CD4+CD25?T细胞,并用转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导,分别应用流式细胞术、RT-PCR和细胞增殖、抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较2组之间CD4+CD25+T细胞转化率、抑制功能的差异。结果1)G-PB和PB来源的CD4+CD25?T细胞在抗-CD3 M cAb和TGF-β1作用下CD25+分子表达不同,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);2)TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3;3)PB、G-PB来源的TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞具有免疫抑制功能,cpm值分别为:11 739±352和18 732±437(P<0.05)。结论G-CSF动员的外周血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。     

外周血Th17及CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞失衡与不明原因反复自然流产的相关性研究

目的观察不明原因反复自然流产(URSA)孕妇外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例的变化,探讨Th17/T细胞比例失衡在URSA孕妇发病机制中的作用。方法选择36例URSA孕妇为实验组,健康早孕妇女40例为对照组,应用流式细胞仪检测Th17与CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比例,应用ELISA法检测IL-6、TGFβ-和IL-17的水平。结果 URSA孕妇外周血中,CD3+CD8-IL-17+T细胞占CD3+T淋巴细胞的百分比高于对照组,P<0.05;CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显低于对照组,P<0.05。相关细胞因子测定结果显示,IL-6、IL-17水平在URSA孕妇血清中均明显升高,TGF-β水平在2组间比较,差异无统计学意义。结论外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的比例及相关细胞因子数量的异常可能下调母胎免疫耐受功能,参与URSA的发生。     

紫癜性肾炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义

目的 研究紫癜性肾炎(HSPN)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平及Foxp3的表达,探讨它们在HSPN发病机制中的作用.方法 分别采集40例HSPN患儿及20例健康儿童外周静脉血,通过流式细胞仪分析CD4+CD25+调节性T细胞百分率,ELISA测定血浆IL-10和TGF-β1水平,荧光定量PCR(Real-time PCR)检测T细胞Foxp3mRNA的表达.结果 HSPN患儿外周血CD4+T,CD25+T,CD4+CD25+T/CD4+T均低于对照组(P<0.05);T细胞Foxp3mRNA的表达明显降低,血浆IL-10水平也明显低于对照组(P<0.05),血浆TGF-β1水平较对照组明显升高(P<0.01);CD4+CD25+调节性T细胞百分率随HSPN病理分级加重有降低趋势,二者呈负相关(r＝-0.966,P<0.01).结论 HSPN患儿外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量减少或功能异常,导致免疫抑制效应不足,参与并促进了儿童HSPN的发生发展,其外周血水平与HSPN病理分级有相关性.     

过继妊娠诱导的CD4+CD25+调节性T细胞治疗不明原因复发性流产

目的 观察过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响.方法 以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,磁珠分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞并流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞纯度.将未孕CD4+CD25+Treg细胞和正常妊娠孕14d的CD4+CD25+Treg分别转输至流产模型孕4d(着床期)的雌性CBA/J孕鼠,于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率并测定宿主外周血和母胎界面组织体外培养上清液中Th1Th2/Th3型细胞因子(IFN-γ/TGF-βI/IL-10)水平.结果 与对照组比较,过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+Treg细胞的宿丰孕鼠的胚胎吸收率(11.32%)显著下降;外周血TGF-β 1/IFN-γ中位数(438)和IL-10/IFN-γ中位数(14)显著增加;母胎界而上TGF-β 1中位数(5899.02pg/mL)和IL-10中位数(158.85pg/mL)显著增加,IFN-γ中位数(18.46 pg/mL)显著下降.结论 孕早期过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+Treg细胞疗法能诱导宿主母胎免疫耐受并调节细胞因子表达,有利于妊娠维持的Th2、Th3应答偏移.     

卵巢癌患者外周血调节性T细胞与TGF-β、IL-10检测及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者手术前后及化疗前后外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)比例,与TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量变化的意义。方法收集30例卵巢癌患者手术前后及化疗后的外周静脉血。采用流式细胞术检测外周血Treg比例;用ELISA法检测血清中细胞因子TGF-β1、TGF-β2、IL-10的含量,并以同期30例健康体检者为对照组。结果与健康对照组比较,卵巢癌患者CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率、CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率及TGF-β1、IL-10含量明显增高、TGF-β2明显降低,差异有统计学意义(P0.01),手术后及化疗后外周血CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率分别为[(1.610±0.465)%],[(1.182±0.195)%],[(1.033±0.210)%];CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率分别为[(2.305±0.77)%],[(1.573±0.45)%],[(0.986±0.37)%];细胞因子TGF-β1含量分别为(425.1±239.8)pg/ml,(287.5±239.8)pg/ml,(196.7±192.5)pg/ml;TGF-β2含量分别为(47.76±25.36)pg/ml,(32.22±17.81)pg/ml,(19.59±13.15)pg/ml;IL-10含量分别为(42.13±61.22)pg/ml,(17.34±11.21)pg/ml,(9.67±4.05)pg/ml,手术后及化疗后卵巢癌患者CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率、CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率及TGF-β1、TGF-β2、IL-10的含量较术前明显减低(P0.01)。结论卵巢癌患者手术后及化疗后外周血CD4~+CD25~+CD127LOW占CD4~+T淋巴细胞的比率、CD4~+CD25~+Foxp3~+占CD4~+T淋巴细胞比率及血清中细胞因子TGF-β1、TGF-β2、IL-10水平明显降低,动态监测它们的水平变化可作为评估卵巢癌患者免疫功能的可靠指标,对其辅助诊断及疗效观察的评价具有重要临床意义。     

免疫性血小板减少症患者CD19~+B细胞的表达及血清Breg在患者发病中的参与作用

目的:研究免疫性血小板减少症(ITP)患者CD19~+B细胞的表达,分析血清Breg在ITP患者中的变化和影响。方法:选取2015年8月至2018年8月期间本院血液科收治的初次诊断为ITP患者68例(ITP组),选取同时段到我院体检中心的30例健康人(对照组),采用流式细胞术测定2组外周血淋巴细胞亚群CD19~+的表达率和外周血Breg细胞表达水平,对比治疗前、后ITP组与对照组之间的差别;采取RT-PCR检测各组IL-10mRNA、TGF-β1 mRNA水平,分析ITP患者外周血Breg细胞比值与IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA表达的相关性。结果:治疗前,ITP组CD19~+表达率显著高于对照组,两组间差异具有统计学意义。ITP组血清Breg细胞表达水平较对照组血清Breg细胞表达水平低;初诊ITP组IL-10 mRNA水平较对照组明显减低,治疗后其IL-10 mRNA水平较治疗前显著升高,差异具有统计学意义。此外,初诊ITP组TGF-β1 mRNA水平较对照组明显升高,治疗后其TGF-β1 mRNA水平较治疗前有所降低;外周血Breg细胞比值与IL-10 mRNA表达呈正相关(r=0.968,P 0.05),但外周血Breg细胞比值与TGF-β1 mRNA表达无相关性(r=0.502,P0.05)。结论:ITP患者CD19~+细胞表达增强,临床中Breg细胞参与ITP发生发展,Breg细胞表达异常与ITP的发病有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞和白介素10在反复自然流产中的作用探索

目的 对CD4+D25+调节性T细胞和IL-10在反复自然流产的作用进行初步探索.方法 选择早孕妇女34例为对照组,反复自然流产患者34例为实验组,应用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞和ELISA法检测IL-10,同时对实验组患者进行淋巴细胞直接免疫治疗,观察CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10变化.结果 CD4+CD25+调节性T细胞实验组(10.55&#177;2.65)%、对照组(12.71&#177;3.58)%、免疫后(12.44&#177;3.02)%;IL-10实验组(150.45&#177;45.80)pg/l、对照组(358.6&#177;82.86)pg/l、免疫后(171.23&#177;31.73)pg/l.组间比较,除免疫治疗后CD4+CD25调节性T细胞与对照组差异无显著性外(P&gt;0.05),其余各组间差异均具有显著性(P&lt;0.05);CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10水平与反复流产次数差异无显著性.结论 CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10参与了母胎免疫调节,检测CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10水平有助于反复自然流产患者的免疫学诊断与治疗.     

Th9、Th17、CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的变化

目的探讨慢性淋巴细胞白血病患者外周血中Th9、Thl7和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞及相关细胞因子的表达水平及意义。方法采用流式细胞仪检测36例CLL患者和45例健康对照组外周血Th9、Th17和Treg细胞的表达率,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外周血中细胞因子IL-9、IL-17、TGF-β的表达水平。结果 1)CLL组患者外周血Th9、Th17细胞比例及细胞因子IL-9、IL-17浓度均明显高于健康对照组[(1.29±0.35)%vs(0.74±0.23)%,P0.05;(2.15±0.46)%vs(1.08±0.37)%,P0.05;(24.25±7.05)%vs(16.35±5.42)%,P0.05;(11.47±3.99)%vs(7.36±2.85%),P0.05]。CD4~+CD25~+FoxP3~+细胞比例及细胞因子TGF-β浓度明显低于对照组[(4.76±0.89)%vs(7.26±1.95)%,P0.05;(3.82±1.39)%vs(6.82±2.01)%,P0.05]。2)相关性分析:患者Th9、Th17细胞比例及IL-9、IL-17浓度与淋巴细胞计数负相关(γ_s=-0.374,P=0.034;γ_s=-0.382,P=0.032;γ_s=-0.445,P=0.011;γ_s=-0.413,P=0.024);患者Treg细胞比例及TGF-β浓度与淋巴细胞计数正相关(γ_s=0.416,P=0.023;γ_s=0.403,P=0.028)。结论慢性淋巴细胞白血病患者Th9、Th17与CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞比例失衡,血清IL-9、IL-17和TGF-β水平变化,这些原因可能参与慢性淋巴细胞白血病的免疫发病过程。     

CD4+CD25+和CD8+调节性T细胞的作用机制

调节性T细胞（Treg）主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对CD4^＋和CD8^＋效应性T淋巴细胞的增殖起抑制作用,因此在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在的应用价值.本文重点介绍CD4^＋CD25^＋Treg和CD8^＋Treg的作用机制,并简述调节性T细胞研究面临的挑战与展望.     

Regulatory CD4+CD25+ T cells restrict memory CD8+ T cell responses

CD4+ T cell help is important for the generation of CD8+ T cell responses. We used depleting anti-CD4 mAb to analyze the role of CD4+ T cells for memory CD8+ T cell responses after secondary infection of mice with the intracellular bacterium Listeria monocytogenes, or after boost immunization by specific peptide or DNA vaccination. Surprisingly, anti-CD4 mAb treatment during secondary CD8+ T cell responses markedly enlarged the population size of antigen-specific CD8+ T cells. After boost immunization with peptide or DNA, this effect was particularly profound, and antigen-specific CD8+ T cell populations were enlarged at least 10-fold. In terms of cytokine production and cytotoxicity, the enlarged CD8+ T cell population consisted of functional effector T cells. In depletion and transfer experiments, the suppressive function could be ascribed to CD4+CD25+ T cells. Our results demonstrate that CD4+ T cells control the CD8+ T cell response in two directions. Initially, they promote the generation of a CD8+ T cell responses and later they restrain the strength of the CD8+ T cell memory response. Down-modulation of CD8+ T cell responses during infection could prevent harmful consequences after eradication of the pathogen.     

哮喘患儿CD8+CD28+、CD8+CD28-T淋巴细胞检测及其临床意义

目的通过对哮喘患儿CD4、CD8和CD28的联合检测,探讨哮喘患儿淋巴细胞免疫功能状态及其临床意义.方法采用流式细胞术检测哮喘患儿外周血的总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD8+)、细胞毒T细胞(CD8+CD28+)、抑制T细胞(CD8+CD28-).结果哮喘患儿组与对照组比较;CD3+、CD4+、CD8+CD28-细胞均低于对照组(P＜0.01,P＜0.05),CD8+CD28+细胞增高(P＜0.05),CD4+/CD8+比值、CD8+与对照组比较均无显著性差异(P＞0.05).结论哮喘患儿存在T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,而CD8+CD28+、CD8+CD28-T细胞失衡可能是导致机体免疫功能紊乱的主要因素.     

CD4+CD25+ T cells regulate virus-specific primary and memory CD8+ T cell responses

Naturally occurring CD4+CD25+ regulatory T cells appear important to prevent activation of autoreactive T cells. This article demonstrates that the magnitude of a CD8+ T cell-mediated immune response to an acute viral infection is also subject to control by CD4+CD25+ T regulatory cells (Treg). Accordingly, if natural Treg were depleted with specific anti-CD25 antibody before infection with HSV, the resultant CD8+ T cell response to the immunodominant peptide SSIEFARL was significantly enhanced. This was shown by several in vitro measures of CD8+ T cell reactivity and by assays that directly determine CD8+ T cell function, such as proliferation and cytotoxicity in vivo. The enhanced responsiveness in CD25-depleted animals was between three- and fourfold with the effect evident both in the acute and memory phases of the immune response. Surprisingly, HSV infection resulted in enhanced Treg function with such cells able to suppress CD8+ T cell responses to both viral and unrelated antigens. Our results are discussed both in term of how viral infection might temporarily diminish immunity to other infectious agents and their application to vaccines. Thus, controlling suppressor effects at the time of vaccination could result in more effective immunity.     

CD4+CD25+调节性T细胞的研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其功能紊乱或数目下降是导致自身免疫性疾病的重要原因之一。近年来,研究发现Foxp3在调控CD4^＋CD25^＋Treg细胞的发育和功能上起着重要作用。本文就CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制机制、Foxp3在其发育和功能上的作用、IL-2和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）等对其产生、维持及活化的作用等方面作一综述。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与自身免疫病

目的:CD4 CD25 调节性T细胞是一群具有免疫调节或免疫抑制功能的细胞。越来越多的实验证明,CD4 CD25 调节性T细胞在维持外周免疫耐受中起重要作用,这种T细胞的数量减少或功能缺失可导致自身免疫性疾病的发生。本文就CD4 CD25 调节性T细胞及其在自身免疫性疾病中作用的研究进展做一综述。资料来源:应用计算机检索CNKI、Medline、EMCC数据库和手工检索2006-2007年的相关文献。检索词为"CD4 CD25 T调节性细胞,自身免疫病,免疫耐受,CD4 CD25 regulatory T cell,Treg,autoimmune disease,immune tolerance"。资料选择:检索范围包括临床研究(不限研究对象的年龄、性别、种族)和基础研究,不限体内和体外研究。资料提炼:共收集到相关文献675篇,选择其中33篇英文文献进行重点阅读和分析。资料综合:CD4 CD25 调节性T细胞具有免疫抑制功能,在机体的免疫调节中发挥重要作用。与其免疫调节功能相关的杀伤性T细胞淋巴细胞相关抗原4、CD45RO、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体、淋巴细胞的无能相关基因等细胞表面分子和白细胞介素2、白细胞介素10、白细胞介素4、转化生长因子β等细胞因子的研究不断深入。此外,CD4 CD25 调节性T细胞功能的发挥还与FOXP3的表达密切相关。CD4 CD25 调节性T细胞数量的减少、抑制功能的受损和(或)细胞表面分子表达的缺陷可能导致1型糖尿病、多发性硬化和炎症性肠病等多种自身免疫病的发生。结论:CD4 CD25 调节性T细胞主要通过细胞接触依赖机制和抑制性细胞因子依赖机制发挥免疫抑制效应。其数量的减少、功能的受损和(或)表面分子表达的缺陷与自身免疫病的发生发展密切相关。     

Radiotherapy-exposed CD8+ and CD4+ neoantigens enhance tumor control

Neoantigens generated by somatic nonsynonymous mutations are key targets of tumor-specific T cells, but only a small number of mutations predicted to be immunogenic are presented by MHC molecules on cancer cells. Vaccination studies in mice and patients have shown that the majority of neoepitopes that elicit T cell responses fail to induce significant antitumor activity, for incompletely understood reasons. We report that radiotherapy upregulates the expression of genes containing immunogenic mutations in a poorly immunogenic mouse model of triple-negative breast cancer. Vaccination with neoepitopes encoded by these genes elicited CD8⁺ and CD4⁺ T cells that, whereas ineffective in preventing tumor growth, improved the therapeutic efficacy of radiotherapy. Mechanistically, neoantigen-specific CD8⁺ T cells preferentially killed irradiated tumor cells. Neoantigen-specific CD4⁺ T cells were required for the therapeutic efficacy of vaccination and acted by producing Th1 cytokines, killing irradiated tumor cells, and promoting epitope spread. Such a cytotoxic activity relied on the ability of radiation to upregulate class II MHC molecules as well as the death receptors FAS/CD95 and DR5 on the surface of tumor cells. These results provide proof-of-principle evidence that radiotherapy works in concert with neoantigen vaccination to improve tumor control.