海人酸癫痫大鼠海马组织的蛋白质组学

目的 研究海人酸颞叶癫痫(TLE)大鼠海马组织差异表达的蛋白质.方法 运用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)和质谱技术对海人酸TLE大鼠海马组织的差异蛋白进行分析鉴定.结果 海人酸TLE大鼠海马组织中共检测出15个差异性表达的蛋白质点,其中9个表达上调,6个表达下调.结论 海人酸TLE大鼠海马组织中存在许多差异表达的蛋白质,可能与癫痫的发病机制有关.     

GABA受体基因转染对癫痫大鼠海马CX32表达的影响

目的 探讨在下丘脑乳头体上核内转染γ-氨基丁酸(GABA)受体基因后对海人酸(KA)致痫大鼠海马区缝隙连接蛋白32(CX32)表达的影响.方法 在右侧杏仁核内注射KA制备癫痫动物模型作对照组,GABA基因转染组则利用仙台病毒(HVJ)-脂质体转染法预先在下丘脑的乳头体上核内转染被脂质体包被的GABA受体基因,48 h后在杏仁核内注射KA,两组大鼠分别进行CX32原位杂交观察.结果 GABA基因转染组大鼠CX32表达在各个时程均有下降.结论 下丘脑内转染GABA受体基因后可以抑制癫痫发作的程度.     

线粒体功能障碍与心力衰竭的关系

线粒体是真核细胞内重要的细胞器,在细胞能量代谢、信号转导以及氧化应激、钙稳态和细胞凋亡调节过程中均发挥着重要的作用。因此,线粒体功能正常在生命活动中至关重要。线粒体功能障碍的机制复杂多样并相互联系、相互影响;越来越多的研究表明,线粒体功能障碍是心力衰竭进展中的关键因素之一。因此,认识和深入研究线粒体功能障碍在心力衰竭发生发展中的作用,为阐明心力衰竭的发病机制及其临床防治拓开了新的思路。     

老年大鼠线粒体能量代谢及其调控的研究

目的 探讨衰老与线粒体能量代谢之间的关系。方法 采用氧电极法、荧光法、HPLC法等测定青年大鼠肝线粒体呼吸功能、线粒体内游离钙、MDA浓度、线粒体氧化酶活性和肝Na^ -K^ -ATP酶活性以及血清FT3、FT4、T、下丘脑NE等含量变化。结果 发现老年鼠肝线粒体呼吸功能较差,ATP生成效率下降,复合物IV活性下降,自由基生成增加,能量消耗亦降低等,呈现衰老表现,并伴有神经内分泌功能衰退。结论 老年鼠线粒体能量代谢衰退与氧自由基损伤、线粒体内钙等微观调控改变以及神经内分泌功能减退有关。     

癫痫大鼠海马线粒体COXⅠ和COXⅣ表达的变化

目的探讨癫痫对大鼠海马线粒体细胞色素氧化酶（COX）的mtDNA和nDNA编码亚基Ⅰ、Ⅳ表达的影响。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、癫痫持续状态（SE）后急性期（3h）、静止期（7d）、慢性期（45d）组和注射匹鲁卡品（PILO）但未出现SE组。免疫组化并荧光实时定量PCR检测海马线粒体COXⅠ、Ⅳ阳性染色及其mRNA的表达。结果COXⅠ阳性细胞数在SE后3h明显增加,7d降到对照组水平,45d显著降低;COXⅣ阳性细胞数SE后3h稍有增加,但较对照组无显著性差异,7和45d时COXⅣ染色变化与对照组相似;注射PILO但未出现SE组COXⅠ、Ⅳ的表达与对照组类似。COXⅠmRNA在SE后3h表达明显升高（P〈0.001）,7d时降到对照水平,45d显著降低（P〈0.001）;COXⅣmRNA在3h时表达较对照组升高,但差异无显著性,7和45d时下降至对照组水平。注射PILO但无SE组与对照组结果类似。结论颞叶癫痫海马COX功能紊乱与痫性发作相关,线粒体编码的基因更易受痫性发作的影响。     

转录因子活化蛋白-2在颞叶癫痫模型小鼠海马的表达变化

目的观察海人酸(KA)致癫痫模型小鼠海马转录因子活化蛋白-2(AP-2)的表达变化。方法雄性C57小鼠32只,随机分为对照组(8只)和模型组(24只),模型组再依据造模后小鼠处死时间分成3 h、8 h、24 h共3组。采用KA侧脑室注射建立癫痫动物模型,建模成功后观察癫痫发作情况,采用RT-PCR检测小鼠造模后各时间点海马AP-2 mRNA转录情况,Western印迹法测定小鼠造模后各时间点AP-2的含量,并与对照组比较。采用免疫组化检测小鼠造模后各时间点AP-2在海马的表达,并且采用免疫荧光观察AP-2在海马组织中与神经元共表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠海马AP-2蛋白含量在癫痫发作后3 h即上升,8 h达高峰,24 h已有降低(P0.05)。基因、蛋白、免疫组化、行为学结果均呈正相关(P0.05)。AP-2在海马神经元中有共表达。结论致痫小鼠脑内存在AP-2上升,可能进一步诱发神经凋亡,成为癫痫发病重要机制之一。     

电针对老年性痴呆模型大鼠海马线粒体酶活性的影响

目的研究电针对老年性痴呆（AD）模型大鼠海码神经元线粒体酶活性的影响，从能量代谢的角度探讨电针治疗AD的部分作用机制。方法以D-半乳糖腹腔注射和Aβ1-40海马注射诱导形成的AD模型大鼠为研究对象，电针“百会”、“涌泉”穴，每日1次，连续20d。以通道式水迷宫测试学习记忆能力的变化，评价电针对AD的治疗效庸；以生化方法检测海马神经元线粒体琥珀酸脱氢酶、Na^＋ -K^＋ -ATP酶、Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶的活性。结果电针能有效改善AD模型大鼠学习记忆能力，提高线粒体琥珀酸脱氢酶、Na^＋ -K^＋ -ATP酶、Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶活性。结论电针可促进ATP的合成与分解利用，调节线粒体功能，改善AD能量代谢障碍。     

帕金森病的线粒体功能障碍与氧化应激

帕金森病(PD)是一种中老年人神经系统变性疾病,其病因和发病机制至今仍未明确,大量研究表明线粒体功能障碍、氧化应激、细胞凋亡、兴奋性氨基酸毒性、炎症反应都参与了帕金森病的发病过程.线粒体功能障碍与氧化应激一直是研究的热点,现主要就帕金森病的线粒体功能障碍与氧化应激做一综述.     

线粒体功能障碍与血管内皮损伤的研究进展

线粒体功能障碍会导致ATP的生成减少,活性氧的产生增加,被认为是血管内皮损伤的触发因素之一。许多因素与线粒体功能障碍有关,如线粒体DNA突变、线粒体融合与分裂失衡、线粒体自噬受损等。本文综述了线粒体的质量控制过程和线粒体功能障碍在血管内皮损伤中的作用机制,以期为动脉粥样硬化的有效防治提供新的思路。     

线粒体功能障碍及炎症与衰老的相关关系

线粒体功能障碍和炎症是衰老及慢性退行性疾病的标志。线粒体功能障碍可能是引发衰老的始动因素,在衰老过程中,线粒体DNA发生不同程度的氧化损伤,导致细胞的能量代谢受损,细胞功能障碍,甚至死亡。同时衰老机体持续存在的低级别炎症反应可通过多种作用损害免疫系统的活化,而炎症代谢产物在调节免疫应答中的作用可为干预年龄相关疾病的病理过程提供依据。     

铁相关的氧化应激和线粒体功能障碍及其在心血管疾病中的作用

铁作为人体必需的微量元素,在很多生理过程中发挥重要作用,铁的异常代谢和蓄积亦与心血管疾病发病密切相关。铁在金属催化的氧化反应中起关键作用,由此产生活性氧（reactive oxygen species, ROS）,引起氧化应激。线粒体作为利用氧和铁的中心场所,易受铁诱导氧化应激的损伤而发生功能障碍,并进一步导致心血管损伤,但机制尚不清楚。本文综述了铁相关氧化应激在心血管疾病中的病理作用,特别是线粒体铁稳态和功能障碍在这些疾病中的潜在作用和机制。     

阿尔茨海默病患者线粒体功能障碍的发生机制研究进展

阿尔茨海默病（AD）是日常生活中常见的神经退行性疾病之一,其致病机制仍不明确。线粒体作为生物能量、钙信号传导和氧化还原稳态等方面发挥至关重要作用的细胞器,其功能出现障碍可导致细胞能量缺乏、细胞内钙失衡和氧化应激,从而进一步加重Aβ和Tau蛋白的影响,导致突触功能障碍、认知障碍甚至记忆丧失。随着对AD发病机制的不断深入研究,氧化应激、线粒体动力学及线粒体自噬被认为与AD的发病过程密切相关。氧化应激引起的线粒体功能障碍会进一步导致Aβ蛋白的聚集和Tau蛋白的过度磷酸化,而Aβ蛋白的聚集和高度磷酸化的Tau蛋白可损害线粒体功能,从而形成恶性循环。GTP相关的动力相关蛋白1(Drp1)表达水平异常可导致线粒体过度分裂甚至碎片化,引起线粒体功能障碍和神经元损伤,最终导致疾病的发生。线粒体自噬功能异常在AD发病中发挥着重要的作用,有多种通路介导的线粒体自噬途径参与了AD的发病,包括Aβ蛋白积聚诱导的线粒体自噬途径、氧化应激诱导的线粒体自噬途径、PINK1-Parkin通路介导的线粒体自噬途径以及受体介导的线粒体自噬途径等,均可引起异常线粒体的堆积导致线粒体功能障碍,进而诱导AD发病。     

以癫痫首发的线粒体脑肌病一例

患者,男性,31岁。1998年5月无明显诱因出现突发的四肢抽搐,历时约数分钟,不伴意识丧失,于外院查头部ＣＴ显示“双侧基底节钙化”。入院时查体:体形消瘦,一般情况尚好,心肺腹无异常。头颅脊柱无畸形,双侧足弓高。神经系统检查:神清语利,理解力、定向力正常,计算力稍差,颅神经检查未见异常。四肢肌力、肌张力正常,四肢腱反射低,病理征未引出。头颅ＣＴ显示双侧基底节钙化。腰穿脑脊液压力、常规、生化均正常。肌电图显示肌原性损害。实验室检查:血尿便常规、肝功能、肾功能、血离子、肌酶及血乳酸均在正常范围。肌肉活检病理结果:散在单个纤维…     

过氧化物酶增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α对线粒体能量代谢的影响

线粒体在能量的产生和利用过程中起着核心作用,其功能紊乱会导致整个机体能量代谢的稳态被打破.而过氧化物酶增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)作为一种转录辅助激活因子在调节线粒体能量代谢的过程中起着至关重要的作用.该文就PGC-1α在线粒体能量代谢中的作用以及通过在转基因动物体内过表达、基因敲除以及裸鼠模型的构建,探讨了PGC-1α对于线粒体能量代谢的影响.     

Mic60介导线粒体功能障碍在CKD发生发展中作用机制的研究进展

线粒体功能障碍与慢性肾脏病(CKD)涉及的氧化应激、细胞凋亡、炎症及纤维化等病理生理过程密切相关。线粒体内膜蛋白Mic60是维持线粒体结构和功能的关键,其表达异常可导致呼吸功能障碍、动力学失调、质量控制障碍等线粒体功能紊乱;其可能通过参与线粒体呼吸功能障碍、线粒体动力学紊乱、线粒体相关凋亡及线粒体自噬在CKD发生发展中起重要作用。     

上皮细胞能量代谢对炎症性肠病线粒体的影响

目的:探究肠上皮细胞炎症发生过程中细胞能量代谢损伤对肠上皮细胞线粒体结构和功能的影响.方法:采用过氧化氢构建肠上皮细胞体外炎症模型,给予0μmol/L和100 μmol/L脱氧胆酸(DCA)干预5d,分别记为模型组和实验组,同时以不做任何处理的人正常结肠上皮细胞NCM460为空白对照组,采用透射电镜观察各组肠上皮细胞线...     

茜草多糖对半乳糖致衰老小鼠心肌线粒体能量代谢影响的研究

目的　研究茜草多糖对半乳糖致衰老小鼠心肌线粒体能量代谢的影响。方法　以D 半乳糖致衰老模型小鼠 ,观察茜草多糖对心肌线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅰ Ⅲ、Ⅱ Ⅲ的活性 ,H ATP酶的活性 ,Mn2 超氧化物歧化酶 (Mn2 SOD)活性以及丙二醛 (MDA)含量的影响。结果　茜草多糖可提高衰老小鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅰ Ⅲ、Ⅱ Ⅲ、H ATP酶及Mn2 SOD的活性 ,并能降低老年组MDA含量。结论　茜草多糖能减轻线粒体过氧化损伤 ,通过抑制线粒体的脂质过氧化和改善呼吸链酶的活性达到延缓衰老的作用。     

山刺玫果对D-半乳糖致衰小鼠心肌线粒体能量代谢的影响

山刺玫为蔷薇科蔷薇属植物,广泛分布于我国东北、华北、内蒙等地,果实具有治疗消化不良等功效.山刺玫果富含黄酮、维生素、有机硒等多种抗氧化营养成分〔1〕.实验表明,山刺玫果具除自由基〔2〕、抗衰老、防治心血管疾病等作用.     

重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对海人酸致痫大鼠癫痫发作及海马苔藓纤维出芽的影响

目的探讨重组腺相关病毒神经肽Y(rAAV2/1-NPY-EGFP)基因转染对癫痫发作和海马苔藓纤维出芽的影响。方法清洁级健康Wistar大鼠30只,体重250～270 g,随机分成NPY实验组(n=12),阳性对照组(n=12)和空白对照组(n=6)。实验组:脑室注射10μl的rAAV2/1-NPY-EGFP,滴度为5×1011μg/ml;阳性对照组在脑室内注射等量的生理盐水。以上两组10 min后分别在海马CA3区注射海人酸(KA);空白对照组依次分别在脑室和CA3区注射等量的生理盐水。并分别于注射后2、4 w观察大鼠的癫痫发作情况,视频脑电(EEG)癫痫波的频率和波幅,Timm染色观察海马CA3区苔藓纤维出芽。结果 NPY实验组大鼠随观察时间的延长,发作程度逐渐减轻,与阳性对照组大鼠相比,于4 w时,脑电图癫痫波放电频率减少(P<0.05),波幅降低(P<0.05)。NPY实验组苔藓纤维出芽分级明显低于对照组。空白对照组没有癫痫发作,CA3区苔藓纤维出芽没有明显变化。结论 rAAV2/1-NPY-EGFP基因转染可以降低海马CA3区苔藓纤维出芽程度,有效抑制癫痫发作,为NPY基因治疗临床难治性癫痫提供了有力试验支持。     

川芎嗪、缬沙坦及曲美他嗪对乳鼠肥大心肌细胞线粒体结构和能量代谢的影响

目的通过大鼠原代心肌细胞培养,探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的病理改变以及川芎嗪、缬沙坦和曲美他嗪对其的药理作用。方法分离和培养大鼠原代心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72h、96h。BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位(ΔΨm)、酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(MAO)活性、分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性和线粒体损伤百分率,高效液相色谱法检测心肌细胞内ATP、ADP、AMP含量,反映心肌细胞线粒体结构和功能的损伤情况。在此基础上给予川芎嗪、缬沙坦和曲美他嗪,观察对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在细胞肥大过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高(P<0.01),线粒体COX活性和线粒体ΔΨm均显著减低(P<0.01),ATP、ADP含量显著减少(P<0.01),AMP含量显著增加(P<0.01)。川芎嗪能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大,改善线粒体外膜损伤,提高线粒体内膜膜电位及COX活性,降低MAO活性(72h时P<0.01,96h时P<0.05),增加ATP、ADP含量、降低AMP含量。缬沙坦能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大,改善线粒体外膜损伤,提高线粒体内膜膜电位(P<0.05)及MAO活性(72h时P<0.01,96h时P<0.05),增加ATP、ADP含量、降低AMP含量(P<0.01)。曲美他嗪能在72h升高线粒体膜电位(P<0.05),增加ATP、ADP含量(P<0.05)。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体结构和功能损害。川芎嗪和缬沙坦在逆转心肌细胞肥大过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用,曲美他嗪无显著逆转心肌细胞重构作用,对能量代谢的改善作用亦有限。