基于Hedgehog通路探讨补肾活血方对实验性膝骨性关节炎兔退变软骨的保护作用

目的:探究补肾活血方(BSHX)对实验性膝骨性关节炎兔退变软骨的保护作用及其可能的机制。方法:将新西兰兔分为对照(control)组、模型(model)组、BSHX(1.86 g/kg)组、Hedgehog通路激活剂SAG(20 mg/kg)组和BSHX+SAG组,每组6只。测定兔膝关节宽度,处死兔后观察膝关节软骨大体情况,对软骨退变情况进行评定;HE染色和番红O染色观察膝关节软骨组织病理形态学变化;ELISA法检测软骨组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平;免疫组化法检测软骨组织中基质金属蛋白酶13(MMP-13)和II型胶原(Col-II)蛋白表达;Western blot法检测软骨组织中Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达。结果:与control组相比,model组膝关节宽度增大,软骨退变评分、软骨分级和Mankin评分升高,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平升高,MMP-13阳性表达率升高,Col-II阳性表达率降低,Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达升高(P<0.05)。与model组相比,BSHX组膝关节宽度减小,软骨退变评分、软骨分级和Mankin评分降低,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平降低,MMP-13阳性表达降低,Col-II阳性表达升高,Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达降低;SAG组膝关节宽度增大,软骨退变评分、软骨分级和Mankin评分升高,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平升高,MMP-13阳性率表达升高,Col-II阳性表达率降低,Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达升高(P<0.05)。BSHX+SAG组膝关节宽度,软骨退变评分,软骨分级,Mankin评分,软骨组织中TNF-α和IL-1β水平,MMP-13阳性表达率,以及Shh、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达均低于SAG组,Col-II阳性表达率高于SAG组(P<0.05)。结论:补肾活血方对实验性膝骨性关节炎兔退变软骨具有保护作用,其机制可能与抑制Hedgehog通路有关。     

HSYA对骨关节炎大鼠膝关节软骨损伤的修复作用研究

目的探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对骨关节炎(OA)大鼠膝关节及MMP-3、TGF-β1、Notch1的影响。方法将25只大鼠随机分为正常组(假手术)、OA组(模型大鼠)、低HSYA组(模型大鼠尾部注射2.5 mg/kg HSYA)、中HSYA组(模型大鼠尾部注射5.0 mg/kg HSYA)、高HSYA组(模型大鼠尾部注射10.0 mg/kg HSYA)。采用ELISA检测血清指标IL-1β、TNF-α,Pelletier评分评估膝关节软骨损伤情况,HE染色观察组织病理形态并以Mankin评分进行评估,免疫组化检测MMP-3阳性表达,Western blot检测TGF-β1、Notch1蛋白水平。结果OA组血清中IL-1β、TNF-α水平高于其余各组(P<0.05),高HSYA组IL-1β、TNF-α水平低于低HSYA组和中HSYA组(P<0.05)。各组大鼠Pelletier评分组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。OA组软骨和滑膜组织Mankin评分高于其余各组(P<0.05),高HSYA组Mankin评分低于低HSYA组、中HSYA组(P<0.05)。各组大鼠关节组织MMP-3阳性细胞率组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组大鼠关节组织TGF-β1、Notch1蛋白水平组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HSYA能够降低OA大鼠血清炎性因子IL-1β、TNF-α水平,缓解滑膜组织损伤,且存在浓度依赖性,其机制与抑制MMP-3和Notch1表达、提高TGF-β1水平相关。     

紫草素调节NF-κB/ERK信号通路对膝关节骨性关节炎大鼠炎症反应的影响

目的：通过构建膝关节骨性关节炎大鼠模型，探究紫草素对膝关节骨性关节炎大鼠炎症反应、NF-κB/细胞外调节蛋白激酶（ERK）通路的影响，以及NF-κB/ERK信号通路作为紫草素作用新靶点的可能性。方法：选取72只SD雄性大鼠，随机分为假手术组、关节炎组、尼美舒利组、紫草素组、紫草素+ERK激活组、紫草素+NF-κB激活组，每组12只。构建膝关节骨性关节炎大鼠模型，评估各组大鼠关节炎指数，判断模型构建情况；番红固绿、HE染色观察各组大鼠膝关节软骨病理学情况；ELISA检测各组大鼠血清和软骨组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平；Western blot检测软骨组织中NF-κB p65、ERK、p-NF-κB p65、p-ERK蛋白表达量。结果：假手术组大鼠软骨组织无明显突起，番红染色全染；与假手术组相比，关节炎组大鼠软骨出现突起，染色完全失染，关节炎指数、血清和软骨组织中TNF-α、IL-6、IL-1β含量、软骨组织NF-κB p65、ERK蛋白磷酸化程度显著升高（P<0.05）；与关节炎组相比，尼美舒利组、紫草素组大鼠软骨组织逐渐恢复，番红染色增多，关节炎指数、血清和软骨组织中...     

骨碎补醇提物对骨关节炎大鼠滑膜组织中TLR4-NF-κB信号转导的影响

目的 探讨骨碎补醇提物(RDE)对膝关节骨性关节炎的作用及分子机制。方法 将60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、RDE(2 g/kg、4 g/kg、8 g/kg)组，共计5组；在第0天，采用右膝关节前交叉韧带切断术复制大鼠膝关节骨性关节炎(KOA)模型，手术前和术后分别测量大鼠的机械性痛阈值和膝关节直径，每周一次，第14天开始灌胃给药，连续3周，腹主动脉取血，脱颈椎处死，解剖分离大鼠膝关节滑膜组织；采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌水平；采用RT-PCR法检测大鼠膝关节滑膜组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达；采用Western blot法检测大鼠膝关节滑膜组织中TLR4-NF-κB信号相关分子的表达。结果 与术前大鼠比较，术后模型组大鼠的机械性痛阈值显著减少，膝关节直径显著增加，RDE显著增加KOA大鼠的机械性痛阈值和减少膝关节直径。RDE显著抑制KOA大鼠血清和滑膜组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达水平，抑制KOA大鼠膝关节滑膜组织的炎性细胞浸润和滑膜增生，抑制KOA大鼠滑膜组织中TLR4、Myd88、p-IκB、p-p65/...     

牛磺酸对骨关节炎大鼠的治疗作用及可能机制

目的 探讨牛磺酸（Taurine）对骨关节炎大鼠的治疗作用及可能机制。方法 采用碘乙酸单钠（MIA）造成骨关节炎大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为OA组与牛磺酸组（腹腔注射100mg/kg的牛磺酸）,另取正常SD大鼠作为假手术组。测定各组大鼠机械痛阈值和热痛阈值;检测各组大鼠血清中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量;HE染色观测各组大鼠软骨组织损伤情况;ELISA法检测各组大鼠损伤软骨组织中IL-1β、IL-6和TNF-α炎性因子的含量;Western blot法检测各组大鼠软骨组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达。结果 牛磺酸可显著提升骨关节炎大鼠的机械痛阈值和热痛阈值,改善OA组织间隙充血、肿胀、炎性细胞严重浸润等病变现象,降低血清中NO和MDA含量,抑制炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α表达,下调HMGB1蛋白表达。结论 牛磺酸可通过抑制HMGB1蛋白改善骨关节炎大鼠的软骨组织病变程度,降低自由基的生成以及炎性因子的释放。     

千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨YAP/Smad3表达的影响

目的:观察千草方熏洗对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨Yes相关蛋白(YAP)和Smad3表达的影响,研究千草方熏洗对膝骨关节炎大鼠软骨的保护作用及机制。方法:32只SD大鼠随机分成4组:对照组、模型组、中药组和透明质酸(HA)组,模型组、中药组和HA组均采用改良Hulth法构建大鼠KOA模型,中药组大鼠进行千草方熏洗,HA组大鼠予以关节腔内注射HA。处理后,取各组大鼠膝关节软骨组织和血清,软骨组织进行苏木精-伊红(HE)染色和Mankin’s评分,ELISA法检测血清中软骨寡聚基质蛋白(COMP)和Ⅱ型胶原C端肽(CTX-II)的表达量,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,免疫组化检测YAP和高迁移率族蛋白B2(HMGB2)的表达,并采用Western blot检测YAP、Smad3、骨成型蛋白2(BMP2)、Bax和Bcl-2的表达水平。结果:HE染色结果表明,模型组软骨细胞排列紊乱,结构不清晰;与模型组相比,中药组软骨表面更加光滑,结构较清晰,软骨基质着色较均匀。与模型组相比,中药组和HA组的Mankin’s评分显著下降,血清CTX-II含量显著升高,COMP含量显著下降(P0.05),软骨细胞的凋亡率显著下降(P0.05)。免疫组化和Western blot的结果表明,与模型组相比,中药组和HA组YAP、HMGB2、Smad3和Bcl-2的表达量增加,BMP2和Bax的表达量下降(P0.05)。结论:千草方熏洗能够通过YAP/Smad3信号通路缓解KOA。     

血小板裂解液对Wistar大鼠创伤性膝软骨损伤中Runx2、SOX9表达的影响

目的 探讨血小板裂解液(PL)在修复Wistar大鼠创伤性膝软骨损伤中对Runx2、SOX9表达的影响。方法 将30只Wistar大鼠随机分成对照组、生理盐水组和血小板裂解液组,每组10只。HE染色和番红O-固绿染色观察各组大鼠膝关节软骨情况,并进行Mankin评分;免疫组织化学染色检测大鼠膝关节软骨Runx2、SOX9的表达;Western blot检测大鼠膝关节软骨Runx2、SOX9的表达。结果 经过PL注射后,创伤性膝软骨损伤大鼠软骨组织损伤明显减轻,软骨Mankin评分明显降低,膝关节软骨组织Runx2、SOX9阳性表达细胞数明显降低,膝关节软骨组织Runx2、SOX9的蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论 血小板裂解液可促进Wistar大鼠软骨组织结构性恢复,降低软骨损伤后Runx2、SOX9表达水平。     

火针对膝骨关节炎大鼠关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α的影响

目的:探讨火针对膝骨关节炎大鼠关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α的影响。方法:20只健康SD雄性大鼠,剃去后肢髋关节至脚趾毛,踝关节背屈70～90度,伸展膝关节至160～180度,纱布固定,将石膏从腹股沟至脚趾缠绕大鼠后肢,脚趾露出,绷带固定,建立KOA大鼠模型,另外10只不作任何处理作为正常组。六周后模型制作成功。20只模型大鼠随机分为2组,模型组和火针组。火针组选取膝前穴、阿是穴和阳陵泉穴,进行火针治疗,每3 d行一次针,共治疗6次。治疗前后对各组大鼠进行Lequesne MG评分评估,全自动生物化学分析仪测定各组大鼠血清MMP-3、TGF-β1、TNF-α的表达水平,HE染色后观察大鼠膝关节软骨病理形态变化,采用放射免疫分析法检测大鼠软骨组织中MMP-3、TGF-β1、TNF-α含量。结果:(1)与对照组比较,模型组大鼠血清MMP-3、TGF-β1和TNF-α表达水平显著增高,差异有统计学意义(P0. 05)。(2)模型组大鼠膝骨关节软骨表面粗糙,软骨细胞肥大,表层细胞坏死,巢状增生,潮线消失,呈明显退行性病变。(3)与对照组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织中MMP-3、TGF-β1和TNF-α含量均显著升高(P0. 05)。(4)与模型组比较,火针组大鼠血清MMP-3、TGF-β1和TNF-α表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P0. 05)。(5)火针组大鼠膝骨关节软骨表面较光滑,细胞排列规则,表层细胞轻度增生,潮线较完整。(6)与模型组比较,火针组大鼠膝关节软骨组织MMP-3、TGF-β1和TNF-α含量均明显降低,差异有统计学意义(P0. 05)。结论:火针治疗可有效减轻大鼠膝关节软骨损伤,降低血清及膝关节软骨组织中MMP-3、TGF-β1和TNF-α水平,进而发挥抗炎作用,可能是火针治疗膝骨关节炎的一个作用机制。     

脊髓背角星形胶质细胞内PAPR-1/TNF-α通路参与脊神经结扎模型大鼠神经病理性痛的机制研究

目的观察PAPR-1/TNF-α信号通路在脊神经结扎模型大鼠脊髓背角星形胶质细胞内的表达情况,并探究其与神经病理性痛的发生发展关系。方法将大鼠第5腰神经(L5)进行结扎构建慢性神经病理性痛模型,Von-Frey细丝检测各组大鼠的机械性痛阈值,免疫组织化学染色和Western blot技术半定量和定量分析脊髓背角内PAPR-1和TNF-α的表达情况。结果与正常组相比,假手术组大鼠疼痛阈值未见显著改变(P0.05),脊神经结扎后大鼠的术侧后足的疼痛阈值显著降低,差异具有统计学意义(P0.05),且在术后2周内,疼痛阈值均保持在较低水平。免疫荧光组织化学染色结果显示,PAPR-1和TNF-α主要表达于脊髓背角内星形胶质细胞中,Western blot结果进一步显示,造模后大鼠脊髓背角内GFAP、PAPR-1及TNF-α水平显著高于正常组和假手术组(P0.05)。结论 PAPR-1/TNF-α信号通路主要表达于脊髓背角内星形胶质细胞中,且在慢性神经病理性痛的维持阶段保持较高表达水平,可能参与了慢性痛的发生和发展,临床治疗中具有一定的理论参考意义。     

MiR-139-3p通过靶向下调TRPV1缓解大鼠神经病理性疼痛

目的:研究miR-139-3p在大鼠神经病理性疼痛发生发展中的作用及其作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组(sham)、坐骨神经慢性压迫损伤模型组(chronic constriction injury group,CCI)、2 mg/kg miR-139-3p模拟物(mimic)鞘内注射组、4 mg/kg miR-139-3p mimic鞘内注射组。术后的第14 d,Real-time PCR法检测大鼠背根神经节(DRG)中miR-139-3p及TRPV1的表达。于注射前及注射后的第1、3、7、14 d,利用von Frey检测大鼠机械性痛阈及热辐射法检测大鼠热痛阈值。Western Blot法检测DRG中TRPV1的表达;ELISA法检测脊髓L4-L5组织中TNF-α及IL-1β的含量;双荧光素酶报告基因法检测miR-139-3p与TRPV1的靶向关系。结果:(1)与sham组相比较,miR-139-3p在CCI大鼠DRG中的表达显著下降,而TRPV1的表达显著上升(P0.05)。(2)与sham组相比较,CCI组中大鼠机械刺激缩足反射阈值及热刺激缩足反射潜伏期显著下降(P0.05);而与CCI组相比较,鞘内注射miR-139-3p mimic可显著促进大鼠机械刺激缩足反射阈值及热刺激缩足反射潜伏期的上升,抑制TRPV1的表达(P0.05)。(3)与sham组相比较,CCI组大鼠TNF-α及IL-1β含量显著上升(P0.05);而与CCI组相比较,鞘内注射miR-139-3p mimic可显著抑制TNF-α及IL-1β的产生(P0.05)。(4)miR-139-3p mimic转染可显著降低荧光素酶报告基因的荧光强度。结论:miR-139-3p通过靶向下调TRPV1的表达缓解大鼠神经病理性疼痛。     

鞘内注射MRS2395及MRS2211对足烫伤大鼠机械痛及炎症因子表达的影响

目的:观察鞘内注射P2Y_(12)受体拮抗剂MRS2395和/或P2Y_(13)受体拮抗剂MRS2211对足烫伤大鼠机械痛以及脊髓背角炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:在烫伤前1 h、烫伤后第6、12、24和48 h测定给药后机械缩足反应阈值(MWT);烫伤后24 h,取脊髓背角,实时荧光定量PCR检测Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达,ELISA技术检测背角IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果:与假烫伤组相比,大鼠烫伤后6 h即出现MWT明显下降,持续24 h处于较低水平(P0.01),但48 h后MWT回升。与烫伤组相比,单独鞘内注射MRS2395或MRS2211组12 h后MWT升高(P0.05),联合给药组MWT升高更为明显(P0.01)。与假烫伤组相比,烫伤大鼠脊髓背角Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达明显上调(P0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α水平上调(P0.01)。单独鞘内注射MRS2395或MRS2211仅部分抑制烫伤大鼠脊髓背角Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达上调(P0.05)以及部分抑制烫伤大鼠脊髓背角IL-1β、IL-6和TNF-α水平上升(P0.05)。MRS2395和MRS2211联合鞘内注射几乎完全阻断烫伤大鼠脊髓背角Iba-1、IL-6和TNF-αm RNA表达上调(P0.01),仅部分阻断IL-1β表达上调(P0.05),以及几乎完全阻断烫伤引起的脊髓背角IL-6和TNF-α水平上升(P0.01),仅部分阻断IL-1β水平上升(P0.05)。结论:单独鞘内注射MRS2395或MRS2211能够缓解烫伤痛大鼠机械痛敏症状,但联合用药时,镇痛效果更佳,其机制可能与抑制脊髓背角小胶质细胞激活以及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达上调有关。     

复方黑骨藤对佐剂性关节炎大鼠IL-4、IFN-γ及TGF-β1表达的影响

目的:研究复方黑骨藤对佐剂性关节炎大鼠模型血清中IL-4、IFN-γ和TNF-α及关节滑膜组织中TGF-β1的表达水平的影响,以深入探讨复方黑骨藤对类风湿关节炎的治疗作用及其相关机制。方法:构建大鼠弗氏完全佐剂性(AA)关节炎模型,通过ELISA与免疫组化方法分别检测大鼠血液中IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量和大鼠膝关节滑膜组织中TGF-β1的含量。结果:模型组与正常组比较,血清的IFN-γ、TNF-α水平升高,IL-4和滑膜组织中的TGF-β1水平降低(P0.01)。复方黑骨藤组与模型组比较血清中IFN-γ、TNF-α水平显著下降,IL-4、TGF-β1水平上调,与模型组有显著性差异。结论:本实验研究表明复方黑骨藤能显著抑制IFN-γ、TNF-α的表达,增强IL-4、TGF-β1的表达,调整大鼠Th1/Th2细胞及其细胞因子失衡,从而减轻关节滑膜炎症的持续发展和软骨破坏,对实验性类风湿关节炎的滑膜组织中T细胞增生及浸润具有显著的抑制作用。     

大鼠膝关节软骨与不同强度跑台运动的影响*

背景：适量的运动是维持正常关节组织形态结构及生理功能的必要条件,过度运动或制动均可导致关节软骨退变。 目的：观察不同强度跑台运动对大鼠膝关节软骨的影响。 方法：将18只雄性成年Wistar大鼠随机分安静组、低强度运动组、高强度运动组。6周后 ELISA法测定血清基质金属蛋白酶3水平,并行蕃红-O染色、基质金属蛋白酶3与Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及Mankin评分,反转录聚合酶链反应检测软骨基质金属蛋白酶3的mRNA表达。 结果与结论：高强度运动组Mankin评分、血清及软骨中基质金属蛋白酶3表达均显著高于安静组与低强度运动组(P < 0.05),基质糖氨多糖及Ⅱ型胶原含量均显著低于安静组与低强度运动组(P < 0.05);低强度运动组与安静组差异无显著性意义。说明高强度运动可造成大鼠膝关节软骨退行性变,且软骨运动性损伤可能与基质金属蛋白酶3表达增强有关。      

敲除背根神经节Fcgr1减弱类风湿关节炎模型大鼠NF-κB/NLRP 3通路活化

目的探讨外周神经元FcγRⅠ调控类风湿关节炎疼痛的机制。方法利用野生型SD大鼠和条件敲除Fcgr1大鼠建立类风湿关节炎模型。设野生型大鼠对照组(control组)、野生型大鼠类风湿关节炎(RA)组和条件敲除Fcgr1大鼠类风湿关节炎(CKO+RA)组,每组7只。用痛觉行为学检测各组大鼠建模前第3、1 d,建模后第3、5、7、9d机械痛阈值和热痛阈值变化,用荧光原位杂交实验检测条件敲除Fcgr1大鼠背根神经节(DRG)中是否表达Fcgr1m RNA,用免疫荧光实验检测大鼠DRG中p NF-_κB (p65)、NLRP3、IL-1β和IL-18表达和脊髓背角(SDH)胶质细胞活化。结果与control组比较,RA组和(CKO+RA)组大鼠机械和热疼痛阈值均降低,(CKO+RA)组大鼠机械和热疼痛阈值比RA组大鼠明显提高(P0.05);与RA组大鼠相比,(CKO+RA)组大鼠DRG中p NF-_κB (p65)、NLRP3、IL-1β和IL-18表达明显下调(P0.05); SDH中GFAP和Iba1表达降低(P0.05)。结论 DRG神经元FcγRⅠ可能通过NF-_κB/NLRP3通路促进神经元炎性细胞因子IL-1β和IL-18合成释放,引起SDH胶质细胞活化,参与类风湿关节炎疼痛。     

曲古抑菌素A通过抑制脊髓背角内的炎症反应减轻大鼠神经病理性痛

目的:观察曲古抑菌素A (TSA)对脊神经结扎(SNL)大鼠镇痛效果及分子机制。方法:40只健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(sham)、曲古抑菌素A处理组(TSA)、脊神经结扎组(SNL)和SNL+TSA组(SNL+TSA)。采用L5脊神经结扎(SNL)的方法建立神经病理性痛模型,鞘内注射TSA进行干预,通过von Frey丝和热板实验检测大鼠的痛敏,应用免疫荧光染色方法观察大鼠脊髓背角内HDAC1的表达情况;应用Western Blot方法观察大鼠脊髓背角内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)的表达水平;应用real time RT-PCR方法检测大鼠脊髓背角内TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平。结果:SNL模型大鼠术后机械性痛阈值和热痛阈值均显著降低(P 0.05),鞘内给予TSA能够明显缓解大鼠患侧后足机械性痛敏和热痛敏; SNL模型大鼠脊髓背角内HDAC1的表达较对照组明显增加,而鞘内注射TSA可显著抑制其表达; SNL术后脊髓背角内GFAP和Iba-1的表达显著升高(P 0.05),鞘内给予TSA能够明显下调GFAP和Iba-1的表达; SNL术后大鼠脊髓背角内TNF-α、IL-1β和IL-6的表达较对照组明显上调(P 0.05),而鞘内给予TSA能够显著逆转这一趋势。结论:鞘内给予TSA能够通过抑制脊髓HDAC1表达缓解大鼠神经病理性痛。     

电针治疗联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎大鼠JAK-STAT信号通路及VEGF表达的影响

目的探讨电针治疗联合甲氨蝶呤对胶原诱导性(CIA)类风湿关节炎大鼠的治疗作用及其机制。方法采用弗氏佐剂与牛Ⅱ型胶原皮下注射复制CIA大鼠模型,并将60只大鼠随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组、电针组和联合治疗组。在各组大鼠治疗12周后,采用Pelletier评分和Mankin评分对大鼠大体和组织学改变进行评分;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6的水平;RT-PCR检测软骨细胞Ⅱ型胶原m RNA水平,TUNNEL法测定软骨细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot和免疫组化检测软骨中JAk-3、STAT-3、VEGF的表达量。结果模型组Pelletier和Mankin评分、软骨细胞凋亡率、血清中IL-6、TNF-α的水平、软骨中JAk-3、STAT-3、VEGF表达量较对照组均明显增高(P<0.05),软骨细胞Ⅱ型胶原m RNA表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。甲氨蝶呤组、电针组和联合治疗组Pelletier和Mankin评分、软骨细胞凋亡率、血清中IL-6、TNF-α的水平、软骨中JAk-3、STAT-3、VEGF表达量较模型组均明显降低(P<0.05);其中联合治疗组较甲氨蝶呤组和电针组降低更明显(P<0.05);电针组与甲氨蝶呤组比较无统计学差异(P>0.05)。甲氨蝶呤组、电针组和联合治疗组软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达水平较模型组均明显升高(P<0.05);其中联合治疗组较甲氨蝶呤组和电针治疗组升高更明显(P<0.05);电针组与甲氨蝶呤组比较无统计学差异(P>0.05)。结论电针治疗类风湿关节炎疗效明确,联合甲氨蝶呤治疗作用更佳,其作用机制可能与抑制JAK-STAT信号通路和VEGF的表达有关。     

苓桂术甘汤通过TLR4/Myd88通路改善心衰大鼠心功能

目的探讨苓桂术甘汤对心力衰竭大鼠心功能的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、心力衰竭模型组(CHF)、苓桂术甘汤治疗组(LGZG),每组10只;CHF和LGZG组大鼠均采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷型慢性心力衰竭大鼠模型,LGZG组予苓桂竹甘汤制剂治疗,超声心动图观察各组大鼠心脏结构参数,HE染色、Masson染色观察各组大鼠心脏组织病理变化,ELISA方法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10;Western blot和qPCR方法检测各组大鼠心脏组织中TLR4/Myd88信号通路的蛋白表达。结果与Sham组相比,CHF组大鼠心功能显著降低,心室重构明显,病理学可见心肌细胞明显肿胀,排列紊乱,有大量炎性细胞浸润,血清TNF-α和IL-6水平升高,IL-10降低(P0.05)。给予苓桂术甘汤处理后,心功能与心室重构明显改善,心肌细胞损伤减少,血清TNF-α和IL-6水平明显降低,IL-10明显升高(P0.05),下调心脏组织TLR4、Myd88、NF-κB的表达水平(P0.05)。结论苓桂术甘汤抑制心力衰竭大鼠炎症反应,改善心功能,与调控TLR4/Myd88通路相关。     

风湿康治疗大鼠膝骨关节炎的实验研究

目的探讨风湿康治疗大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法膝关节腔注射4%的木瓜蛋白酶建立大鼠OA模型,1周后48只大鼠随机平均分成正常组、模型组、双醋瑞英组及1.35g/kg、2.7g/kg、5.4g/kg的风湿康治疗组共6组,正常组与模型组给与等体积的生理盐水。4周后处死动物,检测各组大鼠血清中IL-1β和TGF-β1的含量,切取大鼠膝关节,行大体和组织学观察,采用免疫组织化学方法检测基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在关节软骨中的表达。结果风湿康治疗组均能降低血清中IL-1β的水平（P〈0.001）,风湿康中剂量和高剂量组能显著升高血清中TGF-β1的水平（P〈0.001）。风湿康低剂量组对关节软骨的保护作用并不明显（P〉0.05）,风湿康中剂量和高剂量组均可显著抑制MMP-13在膝关节软骨中的表达（P〈0.05）,风湿康高剂量组与双醋瑞英组具有相似的疗效（P〉0.05）。结论风湿康可能是通过降低血清中IL-1β、升高TGF-β1的水平、减少MMP-13在膝关节软骨中的表达,从而发挥其对骨关节炎的治疗作用。     

厚朴酚对骨关节炎的抗炎和软骨保护作用

目的探讨厚朴酚的体外抗炎活性和对碘乙酸单钠(MIA)诱导的骨关节炎(OA)的影响。方法脂多糖(LPS)处理的RAW264.7细胞中体外评价厚朴酚的抗炎作用,设立LPS组、厚朴酚不同浓度组(5、10、20μmol/L),以正常培养的细胞作为对照组,Griess试剂测量培养基中NO的累积;Western blot检测细胞iNOS、COX-2蛋白的表达。MIA诱导OA的SD大鼠模型,分为MIA组、厚朴酚不同浓度组(5、10、20 mg/kg),以正常大鼠作为对照组,取大鼠膝关节组织样本进行组织学分析,实时PCR分析大鼠IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-2、MMP-9和COX-2的mRNA表达;ELISA检测培养基上清液中PGE 2、IL-6及各组大鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果厚朴酚抑制LPS处理的RAW264.7细胞中的NO、PGE2和IL-6的产生(P0.05)。此外,厚朴酚抑制MIA诱导OA大鼠模型的IL-1β、TNF-α和IL-6的升高及MMP-2、MMP-9和COX-2的合成(P0.05)。结论厚朴酚在OA大鼠模型中发挥有效的抗炎活性并保护软骨。     

结肠康泰对大鼠结肠炎肠组织内TNF-α、IL-1β、IL-6水平的影响

目的:探讨大鼠实验性结肠炎结肠组织内TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化及中药结肠康泰的影响.方法:将SD大鼠随机分为3组,对照组、模型组、模型+结肠康泰组.采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇复制实验性结肠炎模型,检测各组肉眼和组织病理学记分、肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量.结果:模型+结肠康泰组大鼠结肠肉眼及组织学损伤记分、MPO活性明显低于模型组;模型组结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显高于正常对照组;模型+结肠康泰组TNF-α及IL-6水平明显低于模型组,而IL-1β水平无显著差异.结论:结肠康泰对大鼠实验性结肠炎的治疗作用可能涉及到结肠组织细胞因子TNF-α、IL-6的免疫调节作用.