p38 MAPK在阿尔茨海默病患者中的表达及作用机制

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在阿尔茨海默病(AD)患者中的表达及作用机制。方法收集82例AD患者及20例健康志愿者外周血,采用Western印迹检测p38 MAPK表达及激活情况;将PC12细胞随机分为正常组、模型组、SB203580组、模型组及SB203580组采用20μmol/L的β淀粉样蛋白(Aβ25~35)构建PC12细胞损伤模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI流式双染法检测细胞凋亡,紫外分光光度法检测细胞中天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3活性,Western印迹检测B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p53、酶切Caspase 3蛋白表达。结果 p38MAPK在AD患者及健康志愿者外周血淋巴细胞中的表达量差异无统计学意义(P>0.05);而pp38 MAPK在AD患者外周血淋巴细胞中的表达量显著高于健康志愿者(P<0.01)。与正常组比较,模型组细胞活力降低,细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、Caspase3活性均显著提高,Bax、p53、酶切Caspase3表达量上调,Bcl-2表达量下调(均P<0.01)。与模型组比较,SB203580组细胞活力上升,细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、Caspase 3活性均显著降低,Bax、p53、酶切Caspase 3表达量上调,Bcl-2表达量下调(均P<0.01)。结论pp38 MAPK在AD患者外周血中高表达,pp38 MAPK抑制剂SB203580能通过调控细胞凋亡相关蛋白表达抵抗Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡。     

川芎嗪抗β淀粉样蛋白25～35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡作用的机制

目的探讨川芎嗪是否作用PI3K/Akt通路抗β淀粉样蛋白(Aβ)25~35诱导的细胞凋亡。方法 Aβ25~35作用SH-SY5Y细胞建立AD细胞模型,MTT法检测细胞的生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹检测p-Akt、Akt、Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达。结果川芎嗪能够抑制Aβ25~35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡和促进其存活;川芎嗪可抑制Aβ25~35引起的p-Akt/Akt、Bcl-2表达降低和Bax、caspase-3的表达增加。PI3K/Akt通路抑制剂LY294002能够抑制川芎嗪对Aβ25~35诱导的细胞凋亡的保护作用,抑制川芎嗪诱导的p-Akt/Akt、Bcl-2表达上调及Bax、caspase-3表达下调。结论川芎嗪拮抗Aβ25~35诱导的细胞凋亡与作用PI3K/Akt通路,调节Bcl-2、Bax、caspase-3的表达有关。     

microRNA-15a在阿尔茨海默病中的作用及机制

目的探讨microRNA(miR)-15a在阿尔茨海默病(AD)中的作用及机制。方法 Realtime PCR法检测miR-15a在AD组及正常健康(对照组)血液中的表达。将PC12细胞随机分为正常对照组、模型组[20μmol/L淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))],阴性对照组(miR-15a NC+20μmol/L Aβ_(25-35))及促进组(miR-15a mimics+20μmol/L Aβ_(25-35))。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,紫外分光光度法检测天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、Caspase9活性,Western印迹检测B淋巴细胞瘤(Bcl)-2及c-myc蛋白表达。结果与对照组比较,AD组miR-15a表达量显著下调;与正常对照组比较,模型组及阴性对照组中细胞活力降低,细胞凋亡率、Caspase3及Caspase9活性提高,Bcl-2及c-myc表达量下调(均P0.01);与模型组及阴性对照组比较,促进组细胞活力提高,细胞凋亡率、Caspase3及Caspase9活性降低,Bcl-2及c-myc表达量上调(均P0.01)。结论 miR-15a在AD患者中低表达,上调miR-15a表达能抵抗Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡。     

黄芩茎叶总黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对大鼠海马注射淀粉样蛋白Aβ25~35所致神经元Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、SSTF 50 mg/kg、100 mg/kg组,每组10只。模型组、SSTF组大鼠于灌胃第8天双侧海马注射Aβ10μg,对照组大鼠海马注射生理盐水,大鼠于灌胃20 d后处死。采用TUNEL法观察大鼠海马神经元凋亡;免疫组化、Western印迹检测海马组织中Bax、Bcl-2的表达,采用光密度值(IOD)表示实验结果。结果模型组大鼠海马细胞凋亡IOD较对照组明显升高(P0.01),50、100 mg/kg给药组IOD较模型组明显降低(P0.01);免疫组化及Western印迹结果显示模型组Bax表达较对照组明显升高(P0.01),SSTF 50、100 mg/kg组Bax表达较模型组明显降低(P0.01);模型组Bcl-2较对照组明显降低(P0.01),SSTF 50、100 mg/kg组Bcl-2表达较模型组明显升高(P0.01)。结论大鼠海马注射Aβ25~35可引起海马神经元凋亡,其机制可能与Aβ上调凋亡基因Bax表达、降低抗凋亡基因Bcl-2表达有关。SSTF可减轻Aβ引起的神经元凋亡,其机制可能与其调控Bax、Bcl-2表达有关。     

黄连解毒汤含药血清对Aβ诱导的海马神经元凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路的影响

目的 探究黄连解毒汤含药血清对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元凋亡及葡萄糖调节蛋白(GRP)78/蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT-增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)通路的影响。方法 将海马神经元细胞随机分为对照组、Aβ组和黄连解毒汤低、中、高剂量组(2.7、5.4、8.1 g/kg),对照组加入空白血清培养，Aβ组加入Aβ_25～35(40μmol/L)和空白血清培养，给药组先加入Aβ_25～35再加入含药血清进行培养。噻唑蓝(MTT)法检测海马神经元细胞活性，TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡，Western印迹检测抗凋亡基因B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、促凋亡基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3及GRP78、PERK和CHOP表达水平。结果 与对照组相比，Aβ组细胞活性明显降低，细胞凋亡指数明显升高，Bcl-2/Bax水平显著降低，cleaved-/pro-Caspase-3水平显著升高，GRP78、PERK和CHOP蛋白表达显著升高(均P<0.05);与Aβ组比较...     

β淀粉样蛋白_(25～35)对PC12细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨β淀粉样蛋白(Aβ)_(25~35)对PC12细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法采用不同浓度的Aβ_(25~35)与PC12细胞共孵育48 h后,用MTT法检测细胞生长活性,Hoechst33258核染色检测细胞凋亡,通过免疫细胞化学检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达。结果MTT检测显示Aβ_(25~35)抑制PC12细胞生长活性呈浓度依赖性,抑制作用随Aβ_(25~35)浓度的增大而加强;Hoechst33258染色显示Aβ_(25~35)与PC12细胞凋亡呈浓度依赖性关系;免疫细胞化学检测结果显示Bcl-2蛋白表达量随Aβ_(25~35)浓度的增大呈下降趋势,Bax、Caspase-3蛋白表达量随Aβ_(25~35)浓度的增大呈上升趋势。结论 Aβ_(25~35)可剂量依赖性诱导PC12细胞凋亡,使抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax,Caspase-3表达上调。     

N-乙酰-5-羟色胺对大鼠肝缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的:探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对肝缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤后细胞凋亡的作用.方法:♂成年未经产SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组、I/R组和I/R+NAS组.采用夹闭至肝中叶和左叶肝蒂的分支的方法制作肝I/R模型,冰冻切片,HE染色检测肝细胞形态;RT-PCR和免疫组织化学染色观察激活型Caspase3、Bcl-2和Bax的表达;TUNEL法检测细胞凋亡并计算肝细胞凋亡指数(apoptosis index,AI).结果:(1)HE染色显示,I/R组肝细胞出现明显的水样变性和局灶性坏死,NAS可减轻I/R损伤所引起的肝组织结构的破坏;(2)与Sham组相比,I/R损伤后AI、激活型Caspase3、B c l-2和B a x的表达升高,B c l-2/B a x降低(P0.01),N A S干预可使A I降低(P0.01),Caspase3和Bax的表达降低,Bcl-2的表达及Bcl-2/Bax显著升高(P0.01).结论:NAS可通过提高Bcl-2、降低Bax的表达,抑制Caspase3的激活,减轻肝I/R损伤所致的肝细胞凋亡.     

神经节苷脂对过氧化氢诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨神经节苷脂对过氧化氢(H_2O_2)诱导PC12细胞凋亡的影响。方法将200μmol/L H_2O_2诱导的PC12细胞分为模型组,神经节苷脂低、中、高浓度组(12.5、25.0、50.0μmol/L),同时设立空白对照为正常组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Annexin V/PI流式双染检测细胞凋亡,探针法检测活性氧簇(ROS)荧光强度,比色法检测天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、Caspase9活性,Western印迹法检测核因子(NF)-κB信号通路激活情况及B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果与正常组比较,模型组细胞活力降低,细胞凋亡率、ROS荧光强度及Caspase3、9活性提高,Bax、p-NF-κB p65及p-IκBα表达量上调,Bcl-2表达量下调,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,神经节苷脂低、中、高浓度组细胞活力提高,细胞凋亡率、ROS荧光强度及Caspase3、9活性降低,Bax、p-NF-κB p65及p-IκBα表达量下调,神经节苷脂中、高浓度组Bcl-2表达量上调,差异均有统计学意义(均P0.01)。结论神经节苷脂通过抑制NF-κB信号通路进而抵抗H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡。     

老年大鼠股骨颈骨折术后认知功能及Aβ1～40、Bax、Bcl-2的改变

目的 探讨老年大鼠股骨颈骨折术后空间学习记忆能力、血清Aβ1 ～40及海马内抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax表达的变化.方法 SD老年大鼠35只随机分为三组:空白组(K组,n=7)、对照组(D组,n=14)、手术组(S组,n=14).D、S组根据处理时间不同各分2个亚组,D1、D3、S1、S3组(每组7只).Moms水迷宫测试大鼠的学习记忆能力,ELISA法检测血清Aβ1 ～40浓度,RT-PCR检测海马内Bcl-2和Bax mRNA的表达.结果 学习记忆能力测试表明:S组逃逸潜伏期显著延长(P＜0.05),穿过原平台的次数明显减少(P＜0.05);S组血清Aβ1～40浓度明显升高,与K组、D组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05);S组Bax mRNA的表达比K组和D组都显著升高(P＜0.01),Bcl-2 mRNA的表达比K组显著降低(P＜0.01,P＜0.05),Bcl-2/Bax值比K组和D组都显著降低(P＜0.01,P＜0.05).结论 老年大鼠股骨颈骨折术后可暂时影响大鼠的空间学习记忆能力,可能与血清Aβ1 ～40浓度升高以及海马内Bcl-2/Bax比例降低有关.     

小干扰RNA沉默IKK/NF-κB信号通路对HSC-T6细胞凋亡的影响

目的研究小干扰RNA(siRNA)沉默IKK/NF-κB信号通路对于肝星状细胞株HSC-T6凋亡的影响。方法根据Gen Bank数据库IKKβ的c DNA序列,设计构建合成IKKβsiRNA,采用阳性脂质体转染,设立空白对照组、阴性对照组及siRNA实验组,采用TUNEL法和流式细胞仪Annexin-V/PI双染法测定IKKβsiRNA转染后24 h、48 h和72 h细胞凋亡率,同时采用Western blotting检测NF-κB P65、Bcl-2、Bax和Caspase3的蛋白表达情况。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组24 h、48 h和72 h HSC-T6细胞凋亡率均显著增加(P0.05),且具有时间依赖性;实验组的NF-κB P65及Bcl-2蛋白的表达均明显升高,而Caspase3和Bax则显著增加,与空白对照和阴性对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论 SiRNA沉默IKK/NF-κB信号通路能够下调NF-κB P65的表达,同时提高Bax和Caspase3的表达,促进HSC-T6凋亡,这种肝星状细胞凋亡诱导效应具有潜在的逆转肝纤维化的治疗作用。     

川陈皮素抑制Aβ25~35诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激与凋亡作用

目的探讨川陈皮素对β淀粉样蛋白(Aβ)25~35诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法SH-SY5Y细胞培养至对数生长期,分为正常对照组、Aβ_25~35损伤组及川陈皮素25、50、100μmol/L组,培养24 h后检测细胞存活率、氧化应激水平、凋亡率、凋亡相关基因及磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化-雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白表达等指标。结果与Aβ_25~35损伤组比较,川陈皮素各浓度处理组SH-SY5Y细胞的存活率显著增加(P<0.05),而乳酸脱氢酶(LDH)活性显著降低(P<0.05);与Aβ_25~35损伤组比较,川陈皮素各浓度处理组SH-SY5Y细胞谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性显著增加(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);给予不同浓度川陈皮素处理后,与Aβ_25~35损伤组比较,SH-SY5Y细胞凋亡率、Bax mRNA表达显著降低(P<0.05),而Bcl-2 mRNA、Bcl-2/Bax值、p-Akt及p-mTOR蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论川陈皮素可以通过调控Akt/mTOR通路抑制Aβ_25~35诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激及凋亡,进而对Aβ_25~35诱导的SH-SY5Y细胞损伤产生保护作用。     

aFGF对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的 探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞凋亡的保护作用.方法 采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst 332582-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法 检测PC12细胞Bax和Bcl-2基因mRNA的表达,Western印迹检测PC12细胞Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 不同剂量(10、20、30 mg/L)aFGF预处理PC12细胞1 h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高PC12细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的PC12细胞核固缩、凝聚和碎裂,降低Bax基因mRNA表达及蛋白表达,增加bcl-2基因mRNA表达及蛋白表达.结论 aFGF可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因Bax和上调抗凋亡基因Bcl-2表达有关.     

芬太尼与5-氟尿嘧啶联合诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及其机制

目的研究芬太尼与5-氟尿嘧啶(FU)联合应用对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响及内、外源性途径的调控机制。方法作用48 h后通过流式细胞技术(FCM)检测Annexin V-EGFP/PI染色的细胞凋亡情况,通过免疫细胞化学检测Bcl-2、Bax、Fas表达情况。结果单独应用芬太尼时1μmol/L与10μmol/L浓度组凋亡率均增加(P0.05,P0.01),Bcl-2表达减弱(P0.05,P0.01)、Bax表达增强(P0.01)、Fas表达增强(P0.01);单独应用500μmol/L 5-FU后凋亡率亦明显增加(P0.01),Bcl-2表达减弱(P0.01)、Bax、Fas表达增强(P0.01);联合应用芬太尼与5-FU,协同作用在3组均显现(P0.05,P0.01)。结论芬太尼、5-FU在一定浓度范围内单独或联合应用可促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡,并使Bcl-2表达下调,Bax、Fas表达上调。联合应用两类药物可能在内源性、外源性途径调控细胞凋亡上显示协同效应。     

琐琐葡萄多糖对β淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨琐琐葡萄多糖(VTP)对β淀粉样蛋白(Aβ25~35)诱导PC12细胞凋亡的影响及作用机制。方法 Aβ25~35诱导PC12细胞建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,VTP(20、40、80 mg/L)作用于细胞模型,CCK-8法检测各组细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达。结果 VTP可提高PC12细胞活性,降低细胞凋亡率,增强Bcl-2 mRNA表达,抑制Bax mRNA表达。结论VTP对Aβ25~35诱导的PC12细胞凋亡具有明显的保护作用,其机制可能是通过增强Bcl-2 mRNA表达、降低Bax mRNA表达,抑制细胞凋亡。     

华蟾毒精抑制人肝癌细胞株增殖、促凋亡作用及机制探讨

目的:观察华蟾毒精对人肝癌细胞株增殖抑制及促凋亡作用,并探讨其机制。方法:选取人肝癌细胞HepG2进行培养,取对数生长期HepG2细胞分为实验组1(浓度为25μmol/L华蟾毒精处理)、实验组2(浓度为50μmol/L华蟾毒精处理)、实验组3(浓度为100μmol/L华蟾毒精处理)和对照组(加等体积的生理盐水),培养24h、48h后采用MTT法和流式细胞术检测对照组和实验组肝癌细胞HepG2增殖抑制率和凋亡率。培养48h后荧光定量PCR检测AKT、mTOR、Caspase3、Bax和Bcl-2 m RNA表达量,免疫印迹法检测Caspase3、Bax和Bcl-2蛋白表达量。结果:培养24h、48h,实验组1、实验组2和实验组3细胞增殖抑制率均显著高于对照组(P0.05),且实验组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05);培养24h、48h实验组1、实验组2和实验组3细胞凋亡率均显著高于对照组(P0.05),实验组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05);培养48h,实验组1、实验组2和实验组3细胞AKT、mTOR、Bcl-2 m RNA表达量与对照组相比均显著降低(P0.05),Bax和Caspase-3 m RNA表达量均显著增加(P0.05),且实验组Caspase3、Bax和Bcl-2蛋白表达与m RNA表达结果趋势一致。结论:华蟾毒精能够抑制肝癌细胞HepG2增殖,并促进其凋亡,作用机制可能与通过下调Bcl-2蛋白和上调Bax、Caspase-3蛋白的表达,调控AKT/mTOR信号通路有关。     

旋覆花素对阿尔茨海默病模型大鼠脑海马组织Bax,Bcl-2表达的影响

目的 观察旋覆花素对Aβ25 ～35海马内注射所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马Bax,Bcl-2表达的影响.方法 30只SD大鼠随机分为对照组、模型组及旋覆花素给药组,Aβ25 ～35海马内注射制备AD大鼠模型,给药组给予旋覆花素26mg·kg-1 ·d-1、模型组给予等量溶剂,分两次灌胃,共21 d.免疫组化及Western印迹测定大鼠海马Bax,Bcl-2表达.结果 模型组海马Bax表达升高,给药组Bax表达下降(P＜0.05).对照组大鼠脑海马组织Bc1-2表达量与模型组及旋覆花素给药组大鼠脑海马组织表达量无明显差别(P＞0.05).结论 旋覆花素主要通过抑制促凋亡基因Bax的表达,从而抑制Aβ诱导的AD模型大鼠脑海马的神经细胞凋亡,而对凋亡抑制基因Bcl-2表达影响不大.     

shRNA干扰卷曲蛋白-7基因对HepG2肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨抑制卷曲蛋白-7(FZD-7)受体基因对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法实验分3组:空白组(Blank)、阴性对照组(sh NC)、FZD-7干扰组(sh FZD-7)。用sh NC、sh FZD-7转染Hep G2细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力,流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡率的变化,Western blotting检测FZD-7、β-连环蛋白(β-catenin)、Pro-caspase-3、cleaved caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、c IAP-1、c IAP-2、Bcl-2、Bcl-x L、Bax、Bad、β-肌动蛋白(β-actin)的表达。结果转染后96 h,sh FZD-7组Hep G2细胞吸光度值(0.97±0.10)较Blank组(1.49±0.06)和sh NC组(1.42±0.05)明显下降(P0.01);流式细胞仪检测细胞凋亡率显示sh FZD-7组(43.90±2.61)%较Blank组(14.12±1.39)%和sh NC组(16.82±1.26)%明显升高(P0.01);灰度分析显示sh FZD-7组cleaved caspase-3蛋白表达量较Blank组和sh NC组明显升高(P0.01);sh FZD-7组β-catenin、XIAP、c IAP-1、c IAP-2、Bcl-2、Bcl-x L蛋白表达量较Blank组和sh NC组明显降低(P0.01);sh FZD-7组Bcl-2或Bcl-x L与Bax蛋白表达量比值(Bcl-2/Bax或Bcl-x L/Bax)与Blank组和sh NC组比较明显降低(P0.05)。结论抑制FZD-7受体基因,可抑制Hep G2肝癌细胞株增殖活性并促进细胞凋亡。这一过程可能与下调凋亡抑制蛋白(IAPs),导致caspase-3的活化增加有关;凋亡相关蛋白Bcl-2家族在此过程中也扮演了重要角色。     

万拉法辛对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤及Bcl-2表达下降作用的研究

目的 研究抗抑郁药万拉法辛对β淀粉样蛋白片段(Aβ25-35)诱发 PC12细胞损伤的作用.方法 将培养的PC12细胞分为三组:正常对照组、Aβ损伤组和药物保护组.Aβ损伤组用Aβ25-35处理细胞,药物保护组在用Aβ25-35处理前2 h加入万拉法辛.采用细胞形态学方法、LDH法、MTT法、免疫组化法及Western印迹法观察万拉法辛的保护作用.结果 药物保护组与Aβ损伤组相比细胞数显著增多,受损变圆的细胞数较少;LDH释放量较少(P＜0.01);OD490值显著升高(P＜0.01).Aβ损伤组中Bcl-2的表达比正常对照组低,药物保护组Bcl-2的表达比Aβ25-35损伤组升高;药物保护组、Aβ损伤组与对照组相比细胞内Bax蛋白表达均无明显变化.结论 万拉法辛对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤有保护作用,其机制可能和万拉法辛升高Bcl-2蛋白水平有关.     

艾塞那肽抑制高糖诱导内皮细胞凋亡的作用机制

在正常糖浓度(5.5 mmol/L)和高糖(33 mmol/L)培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别加入不同浓度的艾塞那肽并干预不同时间后,噻唑蓝(MTF)法检测细胞活力,应用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率,Western印迹法检测蛋白激酶B(Akt)磷酸化、Bcl-2和Bax蛋白表达水平.结果显示,HUVECs经高糖培养48和72 h后,细胞活力明显下降(P＜0.01).经1、10和100 nmol/L艾塞那肽干预48 h后,细胞活力明显增加,并呈浓度依赖性(P＜0.01).与正常糖浓度组比较,高糖组细胞凋亡率升高,Akt磷酸化和Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.01).艾塞那肽干预后,细胞凋亡率下降,Akt磷酸化和Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达下降,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.01),而艾塞那肽的作用可被磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002所对抗(P＜0.01).提示艾塞那肽可通过PI3 k/Akt信号通路调节Bcl-2/Bax蛋白表达来抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡,起到保护内皮细胞的作用.     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用

目的观察丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用。方法雄性SD大鼠36随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组。链脲佐菌素(STZ,25 mg/kg,连续3 d)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型;待模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4 g.kg-1.d-1)35 d。免疫组织化学染色观察胰岛β细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.01);与模型大鼠相比,丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显升高(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛β细胞Bcl-2蛋白的表达、下调胰岛β细胞Bax蛋白的表达,抑制2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡,对糖尿病时胰岛细胞损伤具有一定的保护作用。