髓样分化蛋白-2及Toll样受体4在星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的 检测不同级别星形细胞瘤中髓样分化蛋白-2(MD2)和Toll样受体4(TLR-4)的表达,并探讨其临床意义.方法 收集2019年1月 ～2020年8月于山东国欣颐养集团新汶中心医院接受手术切除治疗的低级别星形细胞瘤(LGA)患者50例及高级别星形细胞瘤(HGA)患者50例,所有患者的肿瘤组织样本于术中离体后立刻保...     

脂多糖对大鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达及炎性因子分泌的影响

目的 探讨脂多糖刺激大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-2(MD-2)mRNA表达和炎性因子分泌的影响,以及MD-2小干扰RNA(MD-2 siRNA)对脂多糖刺激下NR8383细胞炎性因子分泌的作用.方法 体外培养NR8383细胞,以不同浓度脂多糖(0.01～10 mg/L)刺激2 h,以1 mg/L脂多糖刺激2～24 h.运用脂质体Lipofectamine 2000将MD-2siRNA转染至细胞.半定量RT-PCR方法检测细胞TLR4和MD-2 mRNA的表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的含量.统计学处理采用单因素方差分析、独立样本t检验和Pearson相关分析.结果 对照组NR8383细胞TLR4和MD-2mRNA的相对表达量分别为0.52±0.05和0.44±0.09,0.01 mg/L浓度脂多糖刺激前后表达量无明显改变,0.1 mg/L浓度时表达增加,随脂多糖浓度的升高表达量进一步增加,10 mg/L刺激后相对表达量分别为0.72±0.06和0.65±0.10(F=17.26、6.04,P<0.01);TNF-αIL-6和IL-1β含量具有类似改变趋势,对照组分别为(25.8±3.4)ng/L、(62.4±4.7)ng/L和(31.6±1.7)ng/L;在10 mg/L脂多糖刺激下分别增加至(58.9±5.3)ng/L、(96.5±3.9)ng/L和(55.4±5.4)ng/L(F=29.55、54.47、31.45,P<0.01).在1 mr/L脂多糖刺激下,TLR4和MD-2 mRNA的表达量在2 h后明显增加,6 h达高峰,8 h开始回落,至24 h时仍高于基础值(F=5.28、4.11,P<0.01);TNF-α、IL-6和IL-1β含量具有类似变化(F=10.64、11.23、17.58,P<0.01),其中TNF-α和IL-1β含量在6 h达高峰,持续至8 h,IL-6含量在8 h达高峰,持续至12 h.TLR4和MD-2 mRNA表达呈正相关(r=0.513,P<0.01).MD-2 siRNA对NR8383细胞MD-2基因的干扰效率为67%,在脂多糖刺激下干扰组细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平未见明显升高.结论 高浓度脂多糖可较长时间上调大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383细胞TLR4和MD-2基因的表达,并促进TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌.MD-2 siRNA可抑制脂多糖刺激下NR8383细胞分泌TNF-α、IL-1 β和IL-6.     

慢性乙型肝炎患者肝组织Toll样受体2、3的表达水平及临床意义

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织Toll样受体(TLR)2、3的表达变化与肝脏炎症活动度、肝纤维化程度的相关性及其临床意义。方法收集桂林市第三人民医院肝病科自2013年1月-2016年12月住院且初次诊断为CHB的患者104例,运用1秒钟快速肝穿刺活组织检查方法获取CHB患者的肝组织,分别进行TLR2、TLR3免疫组化染色,10例肝血管瘤者趋于正常的瘤旁肝组织作为对照组。比较两组TLR2、TLR3与肝脏炎症活动度、肝纤维化程度的相关性。等级资料多组间比较采用KruskalWallis H检验,相关性分析采用Spearman相关分析。结果对照组未见明显的TLR2、TLR3阳性表达;TLR2在CHB患者肝组织中表达较弱,TLR2表达强度与肝组织炎症活动度分级、肝纤维化程度分级无相关性(rs值分别为-0.086和-0.112,P值均>0.05);TLR3在CHB患者肝组织中表达较强,TLR3的表达强度与肝组织炎症活动度分级呈显著的正相关性(rs=0.528,P<0.01),亦与肝组织纤维化分级呈显著的正相关性(rs=0.510,P<0.01)。结论 TLR3可能参与了CHB的某些免疫发病机制和肝纤维化的病理过程。     

髓样分化蛋白2对重症急性胰腺炎的影响

脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌（G-）细胞壁的主要成分,它能被Toll样受体4（TLR4）所识别,并且TLR4是LPS跨膜信号转导的主要受体。已有研究表明,TLR4的表达在发生胰腺炎的胰腺中存在上调趋势,且急性坏死性胰腺炎时,肝、肺等组织中TLR4 mRNA的表达明显增强。所以,在SIRS和早期MODS,TLR4受体的激动即可被认为是诱导炎症反应失控的最初因素之一。本文主要就髓样分化蛋白2（MD2）在TLR4信号转导过程中的重要作用,及在其诱导下产生的炎症反应对重症急性胰腺炎（SAP）的影响和临床意义加以阐述。     

缬沙坦对糖尿病大鼠动脉Toll样受体4和髓样分化因子88表达的影响

P<0.01),糖尿病和缬沙坦组间血糖差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病组大鼠血管组织中TLR4和Myd88 mRNA与蛋白的表达明显高于正常对照组(均P<0.01),而缬沙坦组明显低于糖尿病组(均P<0.01).结论 缬沙坦降低糖尿病大鼠动脉血管组织中TLR4和Myd88表达,可能对糖尿病血管早期的炎性改变起防治作用.     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体2和4的变化

目的探讨慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体2 （TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的变化情况及其意义。方法用流式细胞仪检测正常对照、慢性乙型肝炎患者和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞表面TLR2和TLR4的表达,ELISA法检测上述患者血清TNFα的水平。Student-t检验比较3组间TLR2、TLR4和TNFα表达的差异;3组病例TLR2、TLR4的表达水平间及它们与血清TNFα水平间的相关性分析采用线性相关分析。结果正常对照组（30例）、慢性乙型肝炎组（31例）和慢性重型乙型肝炎组（30例）外周血单核细胞TLR2和TLR4的平均免疫荧光强度（MFI）分别为21．5±2．7、39．0±4．1．47．7±21．4和2．3±1．1、3．7±2．3、6．9±4．1;外周血清TNFα（ng／L）水平分别为53．8±38．1、164．3±89．9、359．8±1 40．0,自正常对照组到慢性乙型肝炎组及慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2、TLR4表达强度和外周血清TNFα水平均依次显著升高;经线性相关分析研究发现,外周血单核细胞TLR2、TLR4表达水平和血清TNFα表达水平间均呈现显著的正相关性。结论TLR2和TLR4可能与慢性乙型肝炎及慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

乙型肝炎e抗原对外周血单核细胞Toll样受体2表达的影响

目的 探讨HBeAg对外周血单核细胞表面Toll样受体2(TLR2)表达的影响.方法 对68例慢性乙型肝炎(CHB)患者(其中HBeAg与HBV DNA刚性37例,HBeAg阴性、HBVDNA阳性14例,HBeAg与HBV DNA阴性17例)和16名健康人的外周血肝素抗凝,加入Pam3CSK4在37℃、5%CO2条件下刺激3 h,用特异性TLR2单克隆抗体标记,经流式细胞仪检测CD14+细胞表面TLR2表达的百分率;比较刺激前后各组之间的差异.定量检测HBV DNA和血清HBV标志物,分析TLR2表达水平与HBeAg、HBV DNA的关系.用HBeAg与健康人及HBeAg阴性CHB患者的抗凝血在37℃、5%CO2条件下共培养6 h,用流式细胞仪定量分析HBeAg刺激后CD14+细胞表面TLR2的表达水平. 结果 HBeAg阳性CHB患者外周血CD14+细胞TLR2的表达率为47.57%±21.40%,明显低于健康对照组(76.51%±7.46%)和HBeAg阴性组(HBV DNA阳性组为73.2%±14.2%、HBV DNA阴性组为75.2%±11.3%,P<0.05);TLR2的表达水平在HBeAg阴性的HBV DNA阳性或阴性CHB患者组与健康对照组的差异无统计学意义.HBeAg阳性CHB患者外周血单核细胞经Pam3CSK4刺激后,TLR2的表达率明显升高,大部分患者TLR2的表达水平能够达到健康人或HBeAg阴性患者未经配体刺激的水平.健康人或HBeAg阴性CHB患者的外周血与HBeAg共孵育6 h后,CD14+细胞表面TLR2表达水平较HBeAg刺激前明显下降(P<0.05).结论 HBeAg阳性的CHB患者外周血CD14+细胞TLR2的表达水平明显低于HBeAg阴性患者和健康人,HBeAg能够抑制CD14+细胞TLR2的表达,提示HBeAg能够引起CHB患者外周血单核细胞表面TLR2表达的下调,这可能是HBV持续感染的重要因素之一;CHB患者HBVDNA水平可能不影响单核细胞表面TLR2的表达;Pam3CSK4可以明显提高HBeAg阳性CHB患者单核细胞表面TLR2的表达水平,TLR2配体有可能成为CHB免疫治疗的一个潜在靶位.     

Toll样受体4与2型糖尿病及其并发症

介导先天免疫和炎性反应的Toll样受体(TLR)4参与了炎性反应性疾病的发病.炎性反应在2型糖尿病(T2DM)及其并发症的发生、发展中具有重要作用.TLR4信号通路的激活与胰岛素抵抗(IR)有关,而IR是T2DM及其大血管病变的重要病理生理基础,TLR4信号通路激活后炎性反应因子释放增加,与糖尿病微血管病变及神经病变密切相关.抑制TLR4信号通路的激活可能会防治T2DM及其并发症的发生、发展.     

2型糖尿病及合并大血管病变糖尿病患者C反应蛋白水平观察

目的　观察C反应蛋白 (CRP)在 2型糖尿病 (DM )及DM合并大血管病变时的浓度变化。方法　用ELISA方法测定血清CRP水平。在 2型DM患者 (伴或不伴大血管病变 )、无糖尿病的大血管病变患者、空腹血糖受损 (IFG)者、糖耐量低减 (IGT)者以及正常对照组测定血清CRP水平。结果　IGT者、2型DM以及无糖尿病的大血管病变患者血清CRP水平明显增高 (P <0 .0 5～ <0 .0 0 1) ;2型DM伴有或不伴有大血管病变患者以及无糖尿病的大血管病变患者间血清CRP水平差异无显著性 ;大血管病变患者血清CRP水平较非大血管病变者明显增高 (P <0 .0 5 )。结论　CRP在 2型DM和动脉粥样硬化的发生发展中均具有致病作用 ;就致动脉粥样硬化而言 ,CRP是普通人群 (包括 2型DM )的一般危险因子 ,并非 2型DM的特殊危险因子。     

2型糖尿病肾病患者外周血单个核细胞Toll样受体4的表达及TNF-α水平的研究

目的研究2型糖尿病肾病患者Toll样受体4的表达及血清TNF-α浓度水平,探讨其在糖尿病肾病发病中的作用及其可能的机制。方法将70例2型糖尿病患者（T2DM）根据尿白蛋白排泄率（UAER）分为正常白蛋白尿组（NA组,35例）、微量白蛋白尿组（MA组,23例）和大量白蛋白尿组（CP组,12例）,取20例健康体检者做为对照组,分别运用RT—PCR法、ELISA法测定其外周血单个核细胞Toll样受体4的表达及血清TNF-α浓度。结果NA组、MA组和CP组TLR4MRNA表达水平逐渐增高,MA组、CP组显著高于对照组（P〈0．01）,各组血清TNF-α浓度也逐渐升高,均显著高于对照组（P〈0．01）。TLR-4mRNA表达水平与血清TNF-α水平及UAER呈正相关（P〈0．05,P〈0．01）。结论糖尿病肾病患者外周血单个核细胞TLR4MRNA表达水平上调,血清TNF-α水平也同步升高,TLR4可能通过调节炎症反应介导糖尿病肾病炎症损伤。     

血清骨钙素水平与2型糖尿病周围神经病变的关系

目的 分析2型糖尿病患者血清骨钙素水平与糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的关系.方法 选取2018年7月—2019年12月于内蒙古包钢医院内分泌科就诊的T2DM患者120例,将其分为2型糖尿病无周围神经病变组(NDPN组,n=60)、2型糖尿病合并周围神经病变组...     

大动脉炎患者外周血单个核细胞中Toll样受体和程序性死亡受体1的表达

目的探究大动脉炎的发病机制及活动性是否与Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)及免疫检查点程序性死亡受体1(programmed cell death-1,PD-1)有关,以及二者之间是否存在调控关系。方法纳入大动脉炎患者20例,以10名健康成人作为对照组,采集外周血,分离单个核细胞并提取总RNA,用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中TLRs、PD-1等共20个目的基因的相对含量。结果与健康对照组相比,大动脉炎患者PBMCs中TLR2(P=0.0146)、TLR4(P=0.0439)、IκBα(P=0.0016)、PD-1(P=0.0386)上调,CD40(P<0.0001)、TCR(P=0.0054)下调;活动性大动脉患者PBMCs中p50(P=0.0048)、p65(P=0.0127)、IκBα(P=0.0015)、PD-1(P=0.0251)上调,CD40(P=0.0008)下调;非活动性大动脉患者PBMCs中TLR2(P=0.0133)、IκBα(P=0.0350)上调,CD40(P=0.0010)、CD28(P=0.0023)、TCR(P=0.0015)下调。活动性大动脉炎者PBMCs中的p50(P=0.0381)、CD28(P=0.0023)、TCR(P=0.0074)较非活动组上调。结论TLR2、TLR4活化可能与大动脉炎的发病机制有关,对TLRs和PD-1的调控可能会影响大动脉炎活动性。     

类风湿关节炎患者外周血单核细胞Toll样受体2的表达及意义

目的观察类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞Toll样受体2(TLR2)的表达变化与疾病活动程度和临床指标的关系,探讨RA的发病机制。方法27例活动期RA患者、20例非活动期RA患者及18名正常对照,采用流式细胞术检测外周血单核细胞表面TLR2的表达,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内TLR2 mRNA的表达。结果活动期RA患者外周血单核细胞TLR2的表达水平显著高于缓解期RA患者及正常对照,而缓解期RA患者TLR2与正常对照相比,差异无统计学意义。RA患者外周血单核细胞TLR2的表达与疾病活动评分(DAS)、血清C反应蛋白(CRP)及血沉(ESR)相关,而与类风湿因子(RF)及抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体无明显相关性。结论活动期RA患者外周血单核细胞TLR2表达增高,且TLR2的表达与疾病活动指标密切相关。活动期RA患者存在着固有免疫系统的活化,TLR2的高表达可能促进了外周血单核细胞的活化。     

阿托伐他汀对C反应蛋白诱导的CD14+单核细胞Toll样受体4表达影响的实验研究

目的 观察阿托伐他汀对C反应蛋白(CRP)诱导的外周血CD14+单核细胞Toll样受体4(TLR4)表达,以及TLR4信号传导下游炎症因子肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素-6(IL-6)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨阿托伐他汀的抗炎机制.方法 不同浓度(0、5、25、50、100 μg/ml)和不同作用时间(0、6、12、24、48 h)的C反应蛋白(CRP)刺激正常人外周血CD14+单核细胞.给予CRP 50 μg/ml预先干预CD14+单核细胞2 h后,再用不同浓度的阿托伐他汀(1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 μmol/L)进行干预.应用流式细胞仪检测细胞表面TLR4蛋白的表达,并应用定量PCR方法检测TLR4 mRNA和髓样分化蛋白2(myeloid differentiation protein,MD2)mRNA的表达,ELISA法检测刺激前后细胞上清液TNFα、IL-6和MMP-9的蛋白水平.结果 (1)CRP 0 μg/ml组TLR4蛋白表达量为19.59%,CRP 5 μg/ml组的TLR4蛋白表达为29.33%,差异有统计学意义(P<0.01),并随着CRP浓度的增加,TLR4蛋白表达量逐渐增加.以CRP 0 h组为空白对照,CRP 6 h组的TLR4蛋白表达量为25.75%,差异有统计学意义(P<0.01),并随着时间的增加,TLR4表达量逐渐增加.(2)以CRP 50 μg/ml组为对照组,CRP 50 μg/ml和阿托伐他汀1.0 μmol/L组、2.5 μmol/L组、5.0 μmol/L组、7.5 μmol/L组、10.0 μmol/L组,TLR4蛋白表达分别为(68.17±1.71)%、(52.43±1.38)%、(27.72±4.55)%、(17.46±3.20)%、(9.99±2.81)%.(3)以CRP 50 μg/ml组为标准,CRP 50 μg/ml〖JP〗和阿托伐他汀1.0 μmol/L组、2.5 μmol/L组、5.0 μmol/L组、7.5 μmol/L组、10.0 μmol/L组,TLR4 mRNA分别为对照组的82.72%、67.34%、48.16%、30.88%、13.85%.MD2 mRNA分别为对照组的81.78%、71.04%、47.85%、27.06%、18.30%.随着阿托伐他汀浓度增加,TLR4和MD2的mRNA含量减少.(4)当单核细胞未受CRP和阿托伐他汀刺激时,分泌TNFα、IL-6和MMP-9的基础值分别为(16.3±5.8)pg/ml、(31.1±9.5)pg/ml 和(155.0±47.2)ng/ml.CRP 50 μg/ml组,单核细胞分泌TNFα、IL-6和MMP-9分别为(106.9±7.5)pg/ml、(566.9±10.0)pg/ml和(416.9±37.1)ng/ml,与空白对照组比较,差异均有统计学意义,P均<0.01.而CRP和阿托伐他汀2.5 μmol/L组,单核细胞分泌TNFα、IL-6和MMP-9分别为(81.1±5.4)pg/ml、(433.9±18.1)pg/ml和(310.5±16.3)ng/ml,与CRP 50 μg/ml组比较差异均有统计学意义,P均<0.01.结论 CRP可剂量依赖性和时间依赖性地增加CD14+单核细胞TLR4和MD2的表达,阿托伐他汀通过抑制CRP诱导单核细胞TLR4信号转导途径,降低炎症因子TNFα、IL-6和MMP-9的分泌,是其抗炎作用的机制之一.

Abstract：

Objective To investigate the effects of atorvastatin on C-reactive protein (CRP)induced Toll-Like receptor 4(TLR4)expression on CD14+ monocyte, and the production of proinflammatory cytokines tumor necrosis factor α (TNFα), interleukin-6 (IL-6), matrix metalloproteinases-9 (MMP-9), and to study the anti-inflammatory mechanisms of statins. Methods The monocytes were isolated from blood of healthy volunteers by the Ficoll density gradient and stimulated by CRP with different doses (5, 25, 50, 100 μg/ml)and different exposure time (6, 12, 24, 48 h). Cells were also incubated with atorvastatin of different doses (1.0, 2.5, 5.0, 7.5, 10.0 μmol/L)in the presence of CRP 50 μg/ml. The protein expression of TLR4 was measured by flow cytometry, mRNA expression of TLR4 and of myeloid differentiation protein (MD2)was detected by quantitative PCR. TNFα, IL-6, MMP-9 concentrations in supernatants of cultured medium were measured by ELISA.Results (1)Compared with the un-stimulated control group, enhanced TLR4 protein expression was already detected at a concentration of 5 μg/ml of CRP and increased in a dose-dependent manner (32.22±2.80)%, (49.94±5.58)%, (74.82±3.24)% and (90.82±2.88)% at 5, 25, 50 and 100 μg/ml CRP. (2)TLR4 protein expression on 50 μg/ml CRP stimulated cells also increased in a time-dependent manner (29.80±2.70)%, (47.44±4.41)%, (81.71±2.92)% and (50.57±3.34)% after 6 h, 12 h, 24 h, 48 h.(3)When monocytes were incubated with CRP 50 μg/ml and atorvastatin (1.0, 2.5, 5.0, 7.5, 10.0 μmol/L), protein expression [(68.17±1.71)%, (52.43±1.38)%, (27.72±4.55)%, (17.46±3.20)%, (9.99±2.81)%］and mRNA expression (82.72%, 67.34%, 48.16%, 30.88%, 13.85%)of TLR4 as well as mRNA expression of MD2 (81.78%, 71.04%, 47.85%, 27.06%, 18.30%)were reduced in a dose-dependent manner. (4)Level of TNFα, IL-6 and MMP-9 in supernatants was significantly reduced by atorvastatin (2.5 μmol/L)compared with control group(P<0.01). When monocyte incubated with CRP 50 μg/ml and atorvastatin 10.0 μmol/L, the level of TNFα, IL-6, MMP-9 decreased to (25.8±2.5)pg/ml, (128.2±14.7)pg/ml, (65.2±12.3)ng/ml, respectively.Conclusion CRP increased the protein expression of TLR4 on CD14+ monocyte in a dose-dependent and time-dependent manner. Atorvastatin can inhibit the signal transduction of TLR4 and reduce proinflammatory cytokines release induced by CRP on CD14+ monocyte, and this might be one of the anti-inflammatory mechanisms of atorvastatin.     

Toll样受体4和单核细胞趋化蛋白1与急性冠状动脉综合征的相关性研究

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达及临床意义。方法入选对象包括ACS组患者50例:经临床及冠状动脉造影检查明确诊断[其中急性心肌梗死(AMI)25例,不稳定型心绞痛(UA)25例];稳定型心绞痛(SA)组患者13例;对照组患者30例:同期住院冠状动脉造影阴性且排除了冠心病诊断。采用流式细胞术检测外周血单核细胞上TLR4的表达,用酶联免疫吸附法检测血清中MCP-1的表达。结果 AMI、UA、SA组和对照组外周血单核细胞上TLR4的表达分别为76.56%±6.32%、73.70%±7.67%、63.20%±6.86%和54.20%±9.34%,ACS组显著高于SA组(P<0.05)和对照组(P<0.01),而SA组又高于对照组(P<0.05);AMI、UA、SA组和对照组血清中MCP-1的表达分别为(161.52±40.30)ng/L、(156.63±34.10)ng/L、(141.32±29.26)ng/L和(125.20±20.75)ng/L,ACS组显著高于SA组(P<0.05)和对照组(P<0.01),而SA组又高于对照组(P<0.05)。ACS组外周血单核细胞上TLR4表达与血清MCP-1水平呈正相关(r=0.876,P<0.01)。结论 TLR4介导的免疫炎症机制参与了冠心病的发生、发展,推测TLR4和MCP-1可能与动脉粥样硬化相关。     

慢性持续期支气管哮喘患者外周血中性粒细胞和单核细胞Toll样受体的表达及意义

目的 探讨慢性持续期支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血中性粒细胞和CD14+成熟单核细胞TLR2、TLR4表达的变化及意义.方法 入选慢性持续期哮喘患者30例,健康对照组46名,应用流式细胞仪全血双色免疫荧光直标法检测中性粒细胞和单核细胞TLR2和TLR4的表达情况,结果以细胞的TLR相对平均荧光强度(rmfi)和TLR相对阳性细胞百分率(rpcp)表示.结果 哮喘组患者中性粒细胞TLR2表达的rmfi(1.48±0.19)和rpcp(M=1.34％,Q1 - Q3为0.65％～2.91％)均明显低于健康对照组[分别为1.99±0.53和14.13％(Q1 - Q3为2.61％～27.51％),P值均＜0.001];TLR4表达的rmfi(1.77±0.21)明显低于对照组(1.95±0.26),(P＜0.01),rpcp(8.16±5.03)％与对照组(9.58±6.40)％比较,差异无统计学意义(P＞0.05).哮喘组CD14+单核细胞中TLR2 rpcp(90.92±8.42)％和TLR4 rpcp(11.92±10.34)％明显高于健康对照组[分别为(78.52±18.79)％和(5.78±3.98)％,P值均＜0.01];TLR2 rmfi( 9.91±2.14)及TLR4 rmfi(2.60±0.74)与对照组[分别为(9.73±2.71)和(2.77±0.58)]差异无统计学意义(P值均＞0.05).结论 慢性持续期哮喘患者外周血中性粒细胞TLR2和TLR4的表达较健康人群明显下调,CD14+单核细胞TLR2及TLR4阳性细胞率显著高于健康人群,中性粒细胞和单核细胞TLRs表达的变化在哮喘病程中可能发挥不同的免疫作用.     

慢性持续期支气管哮喘患者外周血中性粒细胞和单核细胞Toll样受体的表达及意义

目的探讨慢性持续期支气管哮喘（简称哮喘）患者外周血中性粒细胞和CD14＋成熟单核细胞TLR2、TLR4表达的变化及意义。方法入选慢性持续期哮喘患者30例,健康对照组46名,应用流式细胞仪全血双色免疫荧光直标法检测中性粒细胞和单核细胞TLR2和TLR4的表达情况,结果以细胞的TLR相对平均荧光强度（rmfi）和TLR相对阳性细胞百分率（rpcp）表示。结果哮喘组患者中性粒细胞TLR2表达的rmfi（1.48±0.19）和rpcp（M=1.34%,Q1-Q3为0.65%～2.91%）均明显低于健康对照组[分别为1.99±0.53和14.13%（Q1-Q3为2.61%～27.51%）,P值均〈0.001];TLR4表达的rmfi（1.77±0.21）明显低于对照组（1.95±0.26）,（P〈0.01）,rpcp（8.16±5.03）%与对照组（9.58±6.40）%比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。哮喘组CD14＋单核细胞中TLR2 rpcp（90.92±8.42）%和TLR4 rpcp（11.92±10.34）%明显高于健康对照组[分别为（78.52±18.79）%和（5.78±3.98）%,P值均〈0.01];TLR2 rmfi（9.91±2.14）及TLR4 rmfi（2.60±0.74）与对照组[分别为（9.73±2.71）和（2.77±0.58）]差异无统计学意义（P值均〉0.05）。结论慢性持续期哮喘患者外周血中性粒细胞TLR2和TLR4的表达较健康人群明显下调,CD14＋单核细胞TLR2及TLR4阳性细胞率显著高于健康人群,中性粒细胞和单核细胞TLRs表达的变化在哮喘病程中可能发挥不同的免疫作用。     

C-反应蛋白与老年糖尿病周围神经病变的关系

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清C反应蛋白(CRP)与周围神经病变的发生是否相关.方法 选择在本院住院治疗的135例T2DM患者,均予肌电图检测左右胫神经的H反射潜伏期数值,将H反射>35 ms者归入有周围神经病变组(A组),H反射<35 ms者归入无神经病变组(B组).检测并比较两组的血清CRP水平、血糖水平及其他临床生化参数.结果 A组CRP和HbA1c水平均明显高于B组(P<0.05);两组FPG和PPG水平比较无显著性差异(P>0.05);CRP与H反射呈正相关(r=0.42,P<0.05);HbA1c与H反射亦呈正相关(r=0.68,P<0.05).结论 长期高血糖状态是T2DM周围神经病变的最主要原因,而CRP在T2DM周围神经病变的发生发展中同样具有重要作用.     

锌指蛋白A20抑制Toll样受体4介导的人单核细胞炎症反应的实验研究

目的:观察锌指蛋白A20过度表达对人单核细胞膜Toll样受体(TLR4),下游促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素(IL)-12,以及抗炎因子IL-10表达的影响,探讨锌指蛋白A20对单核细胞炎症反应的抑制作用及可能的调节机制。方法:Ficoll细胞分离液分离人外周血单核细胞,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、A20转染组与LPS+A20转染组。荧光显微镜检测GFP报告基因,免疫组织化学检测A20蛋白的表达,RT-PCR检测A20及TLR4的mRNA表达,流式细胞检测技术检测TLR4的蛋白表达,ELISA方法检测上清液TNF-α、IL-12及IL-10表达水平。结果:LPS刺激后,单核细胞TLR4和内源性A20的mRNA和蛋白、TNF-α、IL-12和IL-10表达较对照组均明显升高(均P<0.01);TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10均明显高于对照组(均P<0.01);转染A20基因的单核细胞,在无LPS刺激的条件下,上述指标与对照组相比均差异无统计学意义;转染A20基因的单核细胞在LPS刺激后,TLR4mRNA和蛋白、TNF-α、IL-12的表达以及TNF-α/IL-10和IL-12/IL-10均显著低于LPS组,而IL-10的表达明显高于对照组和LPS组(均P<0.01)。结论:TLR4激活介导单核细胞的炎症反应,且正反馈调节其自身受体TLR4和内源性A20的表达;A20参与单核细胞TLR4激活所介导的炎症反应,其表达增加与TLR4表达的增加有关;单纯提高A20表达对未被激活的单核细胞TLR4及其信号通路影响不大;A20过表达可抑制TLR4激活所介导的单核细胞的炎症反应。