肌肽对糖尿病大鼠海马中氧化应激及NF-κB信号通路的影响

目的　探讨肌肽（Carnosine, CAR）对糖尿病大鼠认知功能及大鼠海马中氧化应激和NF-κB信号通路的影响。 方法　50只雄性SD大鼠,除外对照组（n=8）均给予高糖高脂饲料,腹腔注射STZ建立Ⅱ型糖尿病模型,随机分为糖尿病模型组和不同剂量的肌肽组（100、300和900 mg/kg）。给药56 d后,Morris水迷宫进行行为学测试;HE染色观察海马病理变化;应用试剂盒法检测海马中的超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;高效液相色谱法（HPLC）检测海马中谷胱甘肽（GSH）、肌肽的含量;Western Blot检测胞浆中TNF-α、IL-1β,胞核中NF-κB p65的表达。 结果　与糖尿病组相比,肌肽组可以明显改善糖尿病大鼠的学习记忆能力和海马神经细胞形态,提高糖尿病大鼠海马中SOD活性及GSH、肌肽的含量,降低MDA的含量,同时肌肽可以明显降低糖尿病大鼠海马胞核中NF-κB蛋白向核内转移,并下调下游炎症因子TNF-α、IL-1β蛋白的表达。 结论　肌肽改善糖尿病大鼠的认知功能障碍,其机制可能是通过抑制氧化应激反应,并减少NF-κB向核内转移、下调TNF-α、IL-1β的表达有关。     

SUMO化修饰对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响

目的 探讨小泛素相关修饰物(SUMO)修饰对高糖诱导的肾系膜细胞IκB/NF-κB信号的影响.方法 体外培养正常大鼠肾小球系膜细胞,设对照组、不同浓度高糖干预组和渗透压对照组,用免疫共沉淀检测SUMO1,SUM02/3蛋白与IκBα蛋白的相互作用;免疫印迹检测IκBα、NF-κB P65蛋白表达.结果 高糖特异性地减弱肾系膜细胞SUMO2/3与IκBα蛋白间的相互作用(P＜0.05);高糖呈浓度-时间依赖性促进IκBα泛素化降解(P＜0.05),同时上调NF-κB P65表达(P＜0.05).结论 高糖特异性减弱IκBα的SUMO化修饰,可能介导了肾系膜细胞、NF-κB信号的激活,参与了糖尿病肾病的发病.     

NF-κB在不同时期糖尿病大鼠肝中的表达

目的研究NF-κB在糖尿病大鼠肝中的表达。方法取不同时期糖尿病大鼠的肝组织,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察。结果NF-κB在糖尿病肝脏组织中表达增高,且随着病程的延长而增加。结论NF-κB在糖尿病的发生发展及其并发症中起了一定作用。     

石榴皮多酚对妊娠糖尿病大鼠炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨石榴皮多酚(PPPs)对妊娠糖尿病(GDM)大鼠肾脏炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立GDM大鼠模型,将大鼠分为对照组(Control组)、GDM组、PPPs组(300 mg/kg PPPs)、脂多糖(LPS)组(0.1 mg/kg LPS)、PPPs+LPS组(300 mg/kg PPPs+0.1 mg/kg LPS),给药2周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)及血脂、肾功能指标;称取胎鼠体质量及胎盘质量;检测肾脏组织炎症因子水平;H-E染色观察肾脏病理变化;Westernblot检测肾脏组织TLR4、p-NF-κBp65、p-IκB-α蛋白表达。结果 GDM组大鼠FBG、血脂指标(TC、TG、LDL)、肾功能指标(UA、BUN、Cr)、肾脏组织炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平与肾组织TLR4、p-NF-κB p65、p-IκB-α蛋白表达水平较Control组显著升高(P<0.05),肾脏组织发生病理损伤,胎鼠体质量及胎盘质量亦显著高于Control组(P<0.05);PPPs可显著降低GDM大...     

二苯甲酰甲烷通过抑制NF-κB/NLRP3炎症小体对糖尿病肾病大鼠肾损伤的影响

目的 探究二苯甲酰甲烷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的改善作用及可能机制。方法 SPF级雄性SD大鼠30只,随机分为对照组（Control组）、糖尿病肾病组（DN组）、二苯甲酰甲烷组（Dibenzoyl组）,每组10只。测量大鼠空腹血糖;全自动生化分析仪检测大鼠血清Scr和BUN水平及24h尿微量白蛋白含量;HE染色观察肾组织病理形态变化;Western blot检测肾组织NF-κB、NLRP3、cleaved caspase-1和IL-1β表达。结果 二苯甲酰甲烷降低糖尿病肾病大鼠空腹血糖、血清Scr和BUN水平及24h尿微量白蛋白含量,改善肾组织病理损伤,降低肾组织NF-κB、 NLRP3、 cleavedcaspase-1和IL-1β蛋白表达。结论二苯甲酰甲烷可通过抑制NF-κB/NLRP3信号通路改善糖尿病肾病大鼠肾损伤。     

NF-κB/REL激活的信号机制

NF-κB/REL蛋白是进化学上高度保守的一种免疫反应介质。多种不同的刺激信号都可激活核转录因子参与细胞的生长、分化、发育、凋亡、粘附及炎症反应。激活NF-κB的信号机制十分复杂。不同的刺激信号,不同的细胞种类,以及细胞不同的状态所涉及的NF-κB激活的具体信号通路有可能不同。随着一些IκB家族成员激酶的鉴定及其相关敲剔基因模型的建立,人们对NFκB激活的信号机制有了更深入、全面的认识。     

柚皮苷调控心肌核因子NF-κB炎症信号通路对糖尿病心肌病大鼠防治作用

目的:探讨柚皮苷调控心肌核因子NF-κB炎症信号通路对糖尿病心肌病大鼠防治作用。方法:高糖高脂喂养和一次性腹腔注射低剂量STZ建立糖尿病心肌病大鼠模型,分为模型对照组和柚皮苷高、中、低剂量治疗组,另设正常对照组。免疫组织化学法测定心肌组织NF-κB蛋白的表达,放射免疫分析法分别检测外周血TNF-α、IL-6、IL-1β含量,透射电镜观察心肌组织超微结构。结果:与正常对照组比较,糖尿病心肌病大鼠心肌组织核因子NF-κB蛋白以及外周血TNF-α、IL-6、IL-1β表达明显增加(均P<0.05),糖脂代谢紊乱,心肌超微结构损伤明显,而在高、中剂量柚皮苷治疗组则明显受到不同程度改善,并呈剂量依赖性。结论:柚皮苷呈剂量依赖性对糖尿病心肌病具有明显的防治作用,其可能机制是有效地改善心肌糖脂代谢,下调了转录因子NF-κB的表达,继而抑制了NF-κB通路的激活。     

NF-κB信号通路在骨及相关疾病中的作用的研究进展

NF-κB是一类核转录因子,可与其靶基因启动子区的DNA序列结合,而启动基因转录的功能。它们广泛参与胚胎发育、细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应、炎症反应、病毒感染等过程。目前研究已经证实NF-κB信号通路在骨的发育和形成中具有重要的调控作用,NF-κB信号通路的阻断可导致骨发育异常或相关疾病的发生。NF-κB通过调控成骨细胞、破骨细胞、骨细胞和软骨细胞的增殖、分化和凋亡等生物学过程,调控骨的发育和重塑,并在骨相关疾病的发生中发挥重要的调控作用。     

miR-203靶向调节PEG3/NF-κB信号通路对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响

目的：探究微小RNA-203(miR-203)对父本表达基因3(PEG3)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的靶向调控作用及其对糖尿病肾病（DN）大鼠肾纤维化的影响。方法：建立大鼠DN模型,高糖培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）模拟体外DN模型,qRT-PCR检测miR-203表达水平,Western blot检测PEG3、NF-κB蛋白表达。双荧光素酶报告基因技术检测miR-203与PEG3的靶向关系。构建miR-203模拟物（miR-203 mimic）及阴性对照（mimic NC）,PEG3高表达重组载体（pcDNAPEG3）及阴性对照（pcDNA-NC）,分别注射及转染至DN大鼠及DN模型细胞中,设置为：对照组、模型组、miR-203 mimic组、mimic NC组、miR-203 mimic+pcDNA-PEG3组、miR-203 mimic+pcDNA-NC组。检测大鼠24 h尿蛋白、血糖、血清肌酸酐（SCr）和尿素氮（BUN）,电镜及Masson染色检测肾组织病变及纤维化变化;ELISA检测细胞中IL-6、IL-1β、Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）、TGF-...     

瑞芬太尼对糖尿病动脉粥样硬化大鼠心脏功能和TLR4/NF-κB通路的影响

目的通过对研究不同剂量的瑞芬太尼(remifentanil,Rem)作用与大鼠,观察大鼠心脏功能和TLR4/NF-κB通路的变化,探讨Rem成为糖尿病患者心血管疾病手术麻醉药物的可行性。方法通过高脂饲料和链脲佐菌素构建糖尿病动脉粥样硬化大鼠模型,治疗组大鼠分别接受速率分别为0.4、0.8、1.6(μg·kg-1·min-1)的Rem尾静脉泵注5 min,对照组和模型组泵注等剂量的生理盐水,各组大鼠平衡20 min后,对比分析各组大鼠心脏功能;使用HE染色进行心肌组织病理学分析,使用蛋白质印记分析心肌组织中Bax和Bcl-2的表达;使用ELISA分析各组大鼠血清IL-6、IL-1β、iNOS、TNF-α水平;使用全自动生化分析仪分析血清中TC、TG、HDL及LDL含量;使用蛋白质印记分析肺组织中TLR4、p65、p-p65蛋白表达水平。结果瑞芬太尼治疗组大鼠的MAP指数、HR指数、LVSP指数、血清中HDL水平显著升高,血清中TG、TC、LDL、IL-6、IL-1β、iNOS、TNF-α水平明显降低(P<0.05);Western blot显示心肌组织中Bcl-2的表达水平明显升高...     

NF-κB在糖尿病大鼠肾脏和血液单个核细胞中的表达

探讨NF κB在糖尿病肾病 (DN)发病机制中的作用。应用电泳迁移率实验和超迁移率实验检测了 12周STZ—糖尿病大鼠血液单个核细胞和肾组织提取物中NF κB的表达及组成NF κB的亚单位。发现糖尿病大鼠肾组织和血液单个核细胞NF κB的表达显著高于正常对照组 (P均 <0 0 5 ) ,进一步利用超迁移率实验证实血液单个核细胞NF κB由P50 和P6 5抗体组成 ,而肾组织NF κB仅P6 5抗体参与 ;丙丁酚干预后可下调肾和血液单个核细胞NF κB的表达 ,但与糖尿病组比较 ,差异仍有显著性 (P均 <0 0 5 )。提示糖尿病时存在NF κB的激活与持续高表达 ,NF κB可能通过调节参与DN发病机制中重要因子的表达 ,在DN发生过程中起关键作用 ;丙丁酚可以抑制DN时NF κB的表达。     

苦荞黄酮提取物通过抑制NF-κB信号通路减轻蛛网膜下腔出血模型大鼠神经炎症和氧化应激

目的：探索苦荞黄酮提取物减轻蛛网膜下腔出血（SAH）模型大鼠神经炎症和氧化应激的作用机制。方法：将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、苦荞黄酮提取物低、中、高剂量组,每组10只。Longa分级评估神经功能缺损;干湿重法测定脑含水量;伊文思蓝染料外渗实验检测大脑血脑屏障通透性;ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平和脑组织中上述炎症因子及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平;Western blot检测大鼠脑皮质中细胞外调节蛋白激酶/核转录因子κB(ERK/NF-κB)信号通路蛋白表达。结果：与模型组相比,尼莫地平组和苦荞黄酮提取物中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、伊文思蓝渗出量、血清及脑组织TNF-α、IL-6和IL-1β水平、脑组织MDA水平及MMP-9、p-ERK/ERK和p-NF-κB P65/NF-κB P65蛋白量明显下降,脑组织中SOD和GSH-Px水平明显上升（P<0.05）。结论：苦荞黄酮提取物通过抑制ERK/NF-κB信号通路蛋白表达,减缓大鼠神经炎症和氧化应激反应,发挥对SAH...     

抗氧化剂α-硫辛酸对2型糖尿病大鼠动脉组织NF-κB表达的影响

目的： 观察α-硫辛酸对2型糖尿病大鼠氧化应激状态和动脉组织核转录因子κB（NF-κB）表达的影响。方法: 采用免疫组化方法观察高脂喂养12周正常Wistar大鼠、2型糖尿病Goto-Kakisaki（GK）鼠和硫辛酸治疗GK鼠（隔天1次腹腔注射α-硫辛酸35 mg/kg BW）的主动脉组织NF-κB和iNOS的表达，并测定血清MDA、SOD、GSH水平。结果: 12周GK鼠血清MDA水平明显高于，SOD和GSH水平明显低于对照组，主动脉内皮NF-κB和iNOS表达明显增强，而硫辛酸治疗后血清MDA水平明显低于糖尿病组，SOD和GSH水平明显高于糖尿病组，同时主动脉组织NF-κB和iNOS表达与正常对照组相似。结论: 2型糖尿病存在着明显的氧化应激状态，α-硫辛酸通过清除氧自由基而抑制动脉组织NF-κB的表达。     

miR-122低表达对糖尿病肾病足细胞损伤和IKK/NF-κB信号通路的抑制作用研究

目的:探究微小RNA-122(miR-122)低表达对糖尿病肾病(DN)足细胞炎性因子水平、增殖、凋亡、迁移和IκB激酶(IKK)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:体外培养人肾小球足细胞HGPC,取对数生长期细胞,分为正常糖组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D-葡萄糖)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC片段至细胞,后加入30mmol/L D-葡萄糖)、miR-122 inhibitor组(转染miR-122 inhibitor片段至细胞,后加入30mmol/L D-葡萄糖),每组设置3个重复。24h后,实时荧光定量PCR(qPCR)测定各组细胞中miR-122表达水平,酶联免疫法(ELISA)测定细胞上清液中白介素(IL)-6、IL-1β及IL-10水平,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法、Hoechst 33258染色法及划痕法分别测定细胞活力、增殖率、凋亡率及迁移率,蛋白免疫印迹法(WB)测定细胞中IKKα、IκBα、磷酸化(p-)IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB ...     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑IGF-1、NF-κB表达及神经细胞凋亡的影响

目的： 观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠脑胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法： 用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型，用药组以灵芝孢子粉灌胃，记录癫痫发作的潜伏期及持续时间，采用免疫组织化学和TUNEL法分别检测脑IGF-1、NF-κB/P65的免疫反应性和神经细胞凋亡情况。结果： 大鼠海马和皮质区每高倍视野（×400）下平均凋亡细胞数模型组（18.80±2.13、16.87±2.00）明显多于对照组（0.97±0.52、0.58±0.25），IGF-1、 NF-κB/P65蛋白表达模型组明显高于对照组（均P<0.01）；在造模第17、21、25 d时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.01），海马和皮质区凋亡细胞数用药组（12.30±2.46、10.48±1.33）明显少于模型组，NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组，而IGF-1的免疫反应性用药组明显强于模型组。结论： IGF-1、NF-κB 及神经细胞凋亡均可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白的表达，增强IGF-1的免疫反应性，可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制，从而对神经细胞起保护作用的机制之一。     

抑制miR-200c表达对糖尿病肾病大鼠肾组织的保护作用及机制研究

目的　探讨抑制miR-200c表达对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）SD大鼠肾的保护作用及机制。 方法　采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射诱导建立SD大鼠DN模型,将造模成功的30只DN大鼠随机分为模型组和观察组,每组15只,同时取15只正常健康的SD大鼠作为对照组,造模成功后每7 d给予观察组大鼠尾静脉注射antagomir-200c（30 mg/kg）,模型组和对照组给予尾静脉注射等量的生理盐水。8周后,检测大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和24 h尿蛋白定量水平,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测肾组织中miR-200c的表达,HE染色观察肾组织病理学变化,活性氧簇（ROS）和丙二醛（MDA）试剂盒检测肾组织中ROS和MDA水平,Western blot检测肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、纤连蛋白（fibronectin）的水平。 结果　与对照组比较,模型组大鼠肾组织miR-200c表达、血清中BUN、Cr水平、24 h尿蛋白定量、肾间质损伤评分、ROS、MDA水平及TGF-β1、fibronectin蛋白表达均升高（P<0.05）。与模型组比较,观察组大鼠以上指标均降低（P<0.05）。 结论　miR-200c在STZ诱导的DN大鼠肾组织中表达升高,抑制miR-200c能够对DN大鼠的肾起到一定保护作用,可能与降低肾组织的氧化应激水平和对TGF-β1信号通路的抑制有关。     

双歧杆菌对大鼠腹腔巨噬细胞NF-κB和IκB的影响

目的：探讨双歧杆菌对大鼠腹腔巨噬细胞核转录因子 NF-κB和IκB调控。 方法： 收集大鼠腹腔巨噬细胞，实验分为正常对照组、双歧杆菌刺激组，以不同浓度的双歧杆菌106、107、108和109cells/L刺激细胞60 min,或以108cells/L的浓度刺激细胞不同时间(15、30、60、120和180 min)，分别收集细胞以提取总蛋白及核蛋白。用凝胶电泳迁移分析法（EMSA）测定NF-κB的结合活性；用Western印迹分析巨噬细胞胞浆内相应的IκBα蛋白表达。 结果： 双歧杆菌处理后，巨噬细胞 NF-κB向核内转移，结合活性明显增加，相应的IκBα表达降低。 结论： 双歧杆菌可以通过激活腹腔巨噬细胞核转录因子 NF-κB来发挥调作控用。     

排毒保肾丸对糖尿病肾病大鼠炎症小体NLRP3表达及NF-κB信号通路的影响北大核心CSCD

目的:探究排毒保肾丸对糖尿病肾病(DKD)大鼠炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:48只大鼠随机分为4组:对照组、模型组、排毒保肾丸组、阳性对照组(氯沙坦组)。模型组、排毒保肾丸组和氯沙坦组建立DKD大鼠模型,饲以高脂高糖饲料并腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)。排毒保肾丸组、氯沙坦组分别灌胃排毒保肾丸、氯沙坦,对照组、模型组灌胃给予等量生理盐水,连续8周。8周后测定尿蛋白、血肌酸酐、血尿素氮含量,处死大鼠并留取肾脏组织。ELISA检测血清IL-6、IL-1β及TNF-α含量;HE染色观察肾脏组织形态学改变;Masson染色观察肾脏组织纤维化改变;免疫组化染色及Western blot检测NLRP3、NF-κB p65、天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠肾脏组织损伤严重,尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量、炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、NLRP3、NF-κB p65、Caspase-1蛋白表达显著增加(均P<0.05);与模型组相比,排毒保肾丸组和氯沙坦组肾脏组织损伤减轻,尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量、炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、NLRP3、NF-κB p65、Caspase-1蛋白表达显著减少(均P<0.05)。结论:排毒保肾丸能够有效改善DKD损伤,抑制机体炎症反应,可能通过抑制炎症小体NLRP3表达和NF-κB信号通路发挥保护作用。     

SUMO4基因多态性与NF-κB、糖尿病及冠心病的关系

糖尿病( diabetes mellitus,DM)和冠心病(coronary artery disease,CAD)均为多基因介导、基因和环境相互作用的慢性复杂疾病.核因子κB(nuclear factor kappa B,NF- κB)是一类转录因子家族,在细胞内信号传导系统中起关键作用,参与包括DM和CAD在内的多种炎症性疾病的发生发展.研究证实小泛素样修饰蛋白4( small ubiquitin- like modi - fier 4,SUMO4)使NF- κB的抑制剂IκBα免于降解,负性调节NF- κB的转录活性,另外游离的NF- κB能够与SUMO4基因启动子结合并激活SUMO4基因的转录.而SUMO4基因多态性导致NF-κB活性显著增加,并与DM和CAD的易感性相关.此文主要就SUMO4基因多态性对NF-κB转录活性的影响及其在DM和CAD遗传易感性的关联研究进展作一概述.