miR-195-5p表达上调抑制肺癌细胞系A549的迁移和侵袭

目的探讨miR-195-5p对肺癌细胞系A549细胞迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测肺癌组织及肺癌细胞系中miR-195-5p的表达;通过脂质体介导将miR-195-5p模拟物作用于A549细胞,用Transwell法检测细胞迁移和侵袭; Western blot检测细胞内上皮间质转化标志物及ZEB1的表达。结果相对于癌旁组织及人正常肺上皮细胞,miR-195-5p在肺癌组织及肺癌细胞系中低表达(P0. 001);过表达miR-195-5p可显著抑制A549细胞的迁移和侵袭(P0. 001),伴随E-cadherin蛋白表达的上调,N-cadherin和vimentin蛋白表达的下调(P0. 01);过表达miR-195-5p可抑制A549细胞ZEB1的表达(P0. 001)。结论 miR-195-5p可能通过下调ZEB1的表达,抑制肺癌细胞迁移和侵袭。     

miR-17-5p通过靶向调控PTEN表达抑制乳腺癌的增殖、侵袭及迁移

目的 探讨miR-17-5p在乳腺癌中的表达和对乳腺癌细胞的调控作用及其作用机制。方法 采用RT-qPCR和Western blot方法检测乳腺癌组织和细胞中miR-17-5p和PTEN的表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测凋亡,Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和转移。Western blot检测PTEN蛋白表达变化;采用荧光素酶活性检测miR-17-5p与PTEN的相互作用。结果 与对照组相比,乳腺癌组织和细胞中miR-17-5p表达升高,同时PTEN水平降低。体外实验发现,miR-17-5p的敲减能够抑制乳腺癌细胞增殖和转移。荧光素酶报告基因实验发现PTEN是miR-17-5p的靶点。miR-17-5p下调促进乳腺癌细胞PTEN蛋白的表达。结论 miR-17-5p与乳腺癌患者预后相关,同时miR-17-5p下调能显著抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭转移。     

miR-146b-5p靶向ZNRF2影响IL-17a诱导乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:研究miR-146b-5p对IL-17a诱导的乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在分子机制.方法:免疫组织化学法检测20例乳腺癌组织和对应癌旁组织中IL-17a表达,qRT-PCR法检测组织中miR-146b-5p表达,Western blot检测组织中ZNRF2蛋白表达.Pearson相关性检验分析乳腺癌组...     

miR-129-5p靶向调控VCP抑制骨肉瘤细胞体外迁徙侵袭

目的 探讨miR-129-5p是否靶向调控VCP基因抑制骨肉瘤细胞迁徙侵袭.方法 构建miR-129-5p过表达及低表达的慢病毒载体,转染骨肉瘤细胞U2-OS;采用实时荧光定量PCR检测上调及下调miR-129-5p的U2-OS细胞中miR-129-5p的表达量;采用RT-PCR和Western blot技术检测VCP mRNA和蛋白表达;采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁徙、侵袭情况.结果 实时荧光定量PCR结果显示U2-OS细胞中miR-129-5p表达被明显上调或下调;RT-PCR和Western blot检测结果显示:miR-129-5p上调U2-OS细胞组中VCP mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照细胞组(阴性慢病毒转染);miR-129-5p下调U2-OS细胞组中VCP mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照细胞组;miR-129-5p上调U2-OS细胞迁徙和侵袭力显著低于阴性对照细胞,miR-129-5p下调的U2-OS细胞迁徙和侵袭力显著高于阴性对照细胞.结论 miR-129-5p靶向调控VCP的表达而抑制骨肉瘤细胞迁徙和侵袭能力.     

miR-141-3p通过靶向PDCD1抑制人胃癌细胞系AGS的迁移与侵袭

目的 探讨miR-141-3p对胃癌(GC)细胞迁移与侵袭的影响,并揭示其潜在的分子机制.方法 用RT-qPCR分别检测临床组织样本、正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和胃癌细胞系AGS中miR-141-3p的表达.在AGS细胞中转染miR-141-3p mimic后,用Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭;荧光素...     

microRNA-670-5p靶向调控PDCD4促进鼻咽癌细胞的迁移和侵袭

目的 探究microRNA-670-5p(miR-670-5p)影响鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞迁移和侵袭能力的分子机制.方法 应用qRT-PCR检测人NPC细胞系(6-10B,CNE2,HNE1,5-8F)与人正常鼻咽细胞系(NP69)中miR-670-5p和PDCD4 mR...     

miR-205-5p抑制体外胃癌细胞系增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-205-5p靶向RAS致癌家族基因2B(RAP2B)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 RT-qPCR和Western blot检测胃癌细胞AGS、MGC803、MKN-28、SGC-7901和正常胃黏膜细胞GES-1中miR-205-5p和RAS致癌家族基因2B的表达。分别构建过表达miR-205-5p和抑制RAP2B表达的AGS细胞株,采用MTT法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力;Western blot检测RAP2B、cyclin D1、MMP-2、MMP-9、GSK-3β和β-catenin蛋白的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-205-5p对RAP2B的靶向作用。结果与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中miR-205-5p的表达显著降低,RAP2B的表达显著升高(P0.05)。过表达miR-205-5p或抑制RAP2B表达均可显著抑制AGS细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(P0.05)。miR-205-5p可负性调控RAP2B的表达。结论 miR-205-5p通过靶向RAP2B抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

miR-383-5p靶向ZEB2抑制食管癌细胞侵袭及间质转化北大核心CSCD

目的:探讨miR-383-5p靶向调节ZEB2对食管癌细胞增殖、侵袭及间质转化的影响。方法:RT-PCR验证miR-383-5p过表达效率;荧光素酶报告基因实验验证ZEB2和miR-383-5p的靶向关系;Western blot检测ZEB2蛋白、内皮生长因子(VEGF)、上皮-间质转化相关蛋白(E-cad、N-Cad)表达;CCK8法检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭。结果:初步确定miR-383-5p可靶向作用于ZEB2的3’UTR,且可在转录后水平负调控ZEB2表达。与ZEB2组相比,miR-383-5p/ZEB2联合转染组Eca-109细胞增殖率、侵袭细胞数及相关蛋白表达均明显降低,E-cad表达减少、N-cad表达增多,明显抑制肿瘤上皮细胞间质转化。结论:miR-383-5p可靶向下调ZEB2,进而抑制食管癌细胞Eca-109增殖、侵袭及上皮-间质转化,缓解食管癌发生发展。     

miR-361-5p对脑胶质瘤迁移和侵袭的影响

目的 探讨miR-361-5p对脑胶质瘤迁移和侵袭的影响。方法 应用miR-361-5p mimics转染人脑胶质瘤U251细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力;采用Transwell实验检测U251细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的蛋白表达。结果 与对照组和NC组相比,mimics组U251细胞的增殖能力显著降低（P<0.01）,mimics组迁移和侵袭的细胞个数明显减少（P<0.05）;与对照组和NC组相比,mimics组MMP-2、MMP-9以及VEGF表达明显减少（P<0.05）。结论miR-361-5p能抑制胶质瘤U251细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并且降低MMP-2、MMP-9以及VEGF蛋白表达,从而能够控制胶质瘤的生长和转移。     

miR-3619-5p靶向PFKFB3抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

为研究miR-3619-5p和6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,采用qRT-PCR检测35例结肠癌组织和癌旁组织中miR-3619-5p和PFKFB3 ...     

miR-195-5p通过靶向STAT3调控免疫抑制基因PD-L1参与卵巢癌增殖和侵袭的机制研究

目的探究微小RNA(microRNA,miR)-195-5p通过靶向STAT3调控免疫抑制基因程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)参与卵巢癌增殖和侵袭的机制。方法通过双荧光素酶报告基因检测方法验证miR-195-5p靶向STAT3。将卵巢癌细胞系SKOV-3分为4组:对照组、mimic组、mimic+STAT3组和STAT3组。通过质粒转染技术过表达miR-195-5p和STAT3。qPCR和Western blot检测RNA或蛋白的表达水平。分别通过CCK-8法、Transwell实验检测各组的细胞活力、侵袭能力。通过荷瘤裸鼠实验在体内验证过表达miR-195-5p对肿瘤生长、STAT3和PD-L1的影响。结果 miR-195-5p直接靶向STAT3。过表达miR-195-5p抑制STAT3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05),过表达STAT3显著逆转miR-195-5p对STAT3的抑制作用(P<0.05)。Mimic组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于对照组(P<0.05),STAT3组的细胞活力...     

miR-194-5p通过FOXP2影响骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的研究

目的 探讨高表达miR-194-5p对骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的影响及机制。方法 实时荧光定量PCR方法检测骨肉瘤SAOS-2细胞与人成骨hFOB1.19细胞中miR-194-5p的表达水平,应用瞬时转染将miR-194-5p模拟物转染至骨肉瘤SAOS-2细胞,实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-194-5p、FOXP2 mRNA的相对表达水平,Western blot检测各组细胞中FOXP2蛋白表达,Targetscan7.2和双荧光素酶实验分析FOXP2与miR-194-5p的靶向关系,采用CCK8法检测各组细胞的增殖能力,transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 miR-194-5p在骨肉瘤SAOS-2细胞中的表达低于人成骨hFOB1.19细胞（P<0.05）;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞中FOXP2mRNA和蛋白表达下降;Targetscan7.2网站分析及双荧光素酶实验证实FOXP2为miR-194-5p的靶基因;过表达miR-194-5p使SAOS-2细胞增殖、侵袭能力下降。结论 过表达miR-194-5p可以抑制骨肉瘤SAOS-2细胞...     

ELMO1在胃癌细胞侵袭和迁移中的作用

目的:探讨吞噬和细胞运动蛋白1(ELMO1)的表达在胃癌细胞侵袭和迁移中的作用和功能。方法:用Western blot和实时荧光定量PCR实验检测5种胃癌细胞和1种人正常胃黏膜上皮细胞ELMO1的蛋白和mRNA表达水平,并筛选出ELMO1表达量高的胃癌细胞株;用细胞转染实验沉默胃癌细胞株的ELMO1;用细胞划痕实验以及Trenswell小室迁移和侵袭实验检测抑制该基因的表达对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:胃癌细胞中ELMO1的表达量明显高于人正常胃黏膜上皮细胞(P0.01),其中SGC7901细胞的ELMO1表达量最高;在SGC7901细胞中ELMO1-siRNA可显著沉默ELMO1的表达(P0.05);沉默ELMO1可显著降低胃癌细胞侵袭和转移的能力(P0.01)。结论:ELMO1在胃癌细胞中高表达,并可促进胃癌细胞的侵袭和迁移。     

miR-433-3p靶向HP1BP3抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力

目的：探究微小RNA-433-3p(miR-433-3p)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及miR-433-3p靶向异染色质蛋白1结合蛋白3(HP1BP3)对胃癌细胞的调控作用。方法：将人胃癌细胞系HGC-27和AGS分为阴性对照（NC）mimic组、miR-433-3p mimic组、NC siRNA (si-NC)组和HP1BP3 siRNA (si-HP1BP3)组,分别转染NC mimic、miR-433-3p mimic、si-NC和si-HP1BP3。RT-qPCR检测miR-433-3p在HGC-27和AGS细胞中的表达;CCK-8法和细胞集落形成实验检测细胞增殖;划痕愈合实验检测细胞迁移;Traswell实验检测细胞侵袭;Western blot检测HP1BP3蛋白表达。结果：与NC mimic组相比,miR-433-3p mimic组HGC-27和AGS细胞中miR-433-3p表达升高。过表达miR-433-3p抑制HGC-27和AGS细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制HP1BP3蛋白表达;敲减HP1BP3抑制HGC-27和AGS细胞的增殖和迁移。结论：miR-433...     

lncRNA SNHG17 靶向 miR-525-5p 对人绒毛膜滋养层细胞增殖、 迁移和侵袭的影响

目的 探讨 lncRNA SNHG17 对人绒毛膜滋养层细胞生长及转移的影响及其可能作用机制。 方法 qRT-PCR 检测正常胎盘组织、 子痫前期胎盘组织中 lncRNA SNHG17 和 miR-525-5p 表达。 体外培养人绒 毛膜滋养层细胞 HTR-8 / SVneo, 分别转染 si-SNHG17、 anti-miR-525-5p 及其阴性对照; 采用平板克隆形成实 验、 划痕实验与 Transwell 实验分别检测细胞增殖、 迁移及侵袭能力; 双荧光素酶报告实验检测 miR-525-5p 与 SNHG17 的靶向关系。 结果 与正常胎盘组织比较, 子痫前期胎盘组织中 lncRNA SNHG17 表达升高, miR-525-5p 表达降低 (P< 0. 05)。 转染 si-SNHG17 后细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多, 划痕愈合率升高 (P< 0. 05)。 lncRNA SNHG17 靶向调控 miR-525-5p; 共转染 si-SNHG17 和 anti-miR-525-5p 后细胞克隆形成数 和侵袭细胞数减少, 划痕愈合率降低 (P< 0. 05)。 结论 沉默 lncRNA SNHG17 可通过促进 miR-525-5p 表 达而促进人绒毛膜滋养层细胞增殖、 迁移及侵袭。     

miR-195抑制舌鳞癌细胞系CAL27增殖、迁移和侵袭

目的研究miR-195对舌鳞癌CAL27细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法用RT-qPCR检测舌鳞癌组织及癌旁正常组织中miR-195 mRNA的表达; CAL27细胞的分组及处理:miR-195组(转染miR-195 mimics)、miR-con组(转染miR-NC)、si-con组(转染si-con)、si-激酶12抑制剂SUZ12组(转染si-SUZ12)、miR-195+Ctrl组(miR-195 mimics和pc DNA 3. 1共转染)、miR-195+SUZ12组(miR-195 mimics和pc DNA 3. 1-SUZ12共转染); MTT法检测细胞增殖; Transwell检测细胞迁移和侵袭; Western blot检测细胞SUZ12蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测细胞荧光活性。结果舌鳞癌组织中miR-195 mRNA表达与癌旁正常组织及与健康口腔角质细胞NHOK相比显著降低(P0. 05);过表达miR-195及敲减SUZ12均可显著抑制CAL27细胞增殖、迁移及侵袭(P0. 05);过表达SUZ12可逆转miR-195对CAL27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制。结论 miR-195可抑制CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向SUZ12有关。