p38MAPK途径在淫羊藿甙促成骨细胞分化中的作用

观察淫羊藿甙对体外培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)蛋白表达的影响,探讨淫羊藿甙防治骨质疏松症的信号转导机制.结果 显示淫羊藿甙可以在5 min内激活p38MAPK途径,并且可以上调Cbfa1蛋白表达和活性升高,加用p38MAPK途径的抑制剂SB203580后可以部分抑制淫羊藿甙对Cbfa1蛋白和活性的上调作用.

Abstract：

This paper was aimed to investigate the effects of icariin on the expression of p38 mitogen activated protein kinase(MAPK)protein in rat osteoblasts cultured in vitro, to elucidate the signal transduction of icariin in preventing and treating osteoporosis. The results showed that p38MAPK could be activated by icariin within 5min, and Cbfal could also be upregulated, and SB203580, an inhibitor of p38MAPK pathway, could partly inhibit Cbfal upregulation by icariin.     

淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外抑制猴免疫缺陷病毒复制作用

目的观察淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素体外对猴免疫缺陷病毒的抑制作用。方法用CCK-8检测不同浓度的淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对CEMx174细胞的毒性;以SIVmac251感染CEMx174细胞为模型,观察细胞病变效应(CPE);实时套式反转录荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内猴免疫缺陷病毒(SIV)核糖核酸(RNA)相对量和上清中病毒载量三个指标,来评估淫羊藿苷与代谢产物脱水淫羊藿素对SIV复制的抑制作用。结果淫羊藿苷和脱水淫羊藿素的最大无毒浓度分别是50μg·mL~(-1),16μg·mL~(-1)。在细胞内,淫羊藿苷(50,25,12.5μg·mL~(-1))和脱水淫羊藿素(16,8,4μg·mL~(-1))组SIV RNA相对量都明显比病毒对照组低(P0.01,P0.05),且具有一定的量效关系。同时在上清中,淫羊藿苷(50,25μg·mL~(-1))和脱水淫羊藿素(16,8,4μg·mL~(-1))组病毒载量明显比病毒对照组低(P0.01,P0.05),也存在一定的量效关系。以上药物浓度与病毒对照组比较均具有统计学差异。结论淫羊藿苷及其代谢产物脱水淫羊藿素均对SIV的复制起到抑制作用,具有深入研究和开发的前景。     

淫羊藿苷提高SIRT6酶活性及抑制小鼠NF-kB炎症信号通路的实验研究

目的观察淫羊藿苷（Icrrin,ICA）对组蛋白去乙酰化酶SIRT6的激活作用及对老年小鼠体内NF-kB（p65）、SIRT6蛋白表达及NF—kB信号通路下游炎症细胞因子表达的影响。方法以体外酶学实验观察ICA对SIRT6的激活作用并绘制不同剂量浓度激活效率曲线。选取24月龄老年组（N=11）、24月龄＋ICA干预组（N=12）和3月龄青年组小鼠（N=10）的心、肝、肌肉组织,用Westernblot检测NF-kB（p65）和SIRT6蛋白表达水平;采用ELISA法柃测小鼠血清中肿瘤坏死网子α（TNF—α）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、白细胞介素-2（IL-2）和白细胞介素-6（IL-6）的含量。结果体外酶学实验显尔ICA随着药物浓度的下降,对SIRT6逐渐呈现激活效应,在10。mol／L浓度时达到最大激活效应为142％。小鼠实验显示ICA干预后,心脏、肝脏与肌肉组织中NF—kB（p65）蛋白表达与老年小鼠比较呈现下调趋势,而SIRT6蛋白表达较老年小鼠则呈现上调趋势;与青年小鼠比较,老年小鼠血清中炎症细胞TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显上调（P〈0．05、P〈0．01）;与老年小鼠比较,ICA干预后小鼠血清中炎症因子TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显下降（P〈0．05、P〈0．01）。结论ICA对SIRT6的酶活性具有显著的激活效应,且在极低的药物浓度下仍对SIRT6有激活作用;ICA能上调老年小鼠组织中SIRT6蛋白表达,抑制NF—kB（p65）蛋白表达及下调下游炎症细胞因子的产生,提示ICA延缓炎性衰老的作用机制及干预新靶点与NF—kB信号通路和组蛋白去乙酰化酶SIRT6密切相关。     

淫羊藿次苷抗疲劳及抗氧化作用

<正>淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物〔1〕。有益精气、坚筋骨、补腰膝、强心力之功效。现代药理实验研究表明,淫羊藿中主要活性物质为黄酮类化合物,具有抗骨质疏松活性、促进造血功能、增加心脑血管血流量、免疫功能、抗衰老、抗肿瘤等多种功效〔2〕。目前,相关研究结果表明,人类的许多疾病与氧化应激有关〔3〕。由自由基介导的氧化损伤在许多疾病的发生和发展过程中起到极其重要的作用。由活性氧(ROS)、活性氮(RNS)引起的蛋白质氧化损伤与衰老、阿尔茨海默病(AD)、帕     

miRNA介导p38MAPK信号通路调控成骨细胞在糖尿病性骨质疏松症中的作用

糖尿病性骨质疏松症(diabetes osteoporosis, DOP)是糖尿病在骨骼系统的慢性并发症,为糖尿病患者致残、致死的主要原因之一,目前临床上对DOP的治疗方法有限,主要以预防及延缓病程发展为主,使得探寻有效治疗的关键靶点成为当前的重中之重。研究发现微小RNA(microRNA,miRNA)是骨重塑的重要调节剂之一,可通过介导不同信号通路参与骨代谢的调节,如高糖诱导下成骨细胞中高表达的p38MAPK信号通路,因此通过探寻miRNA与p38MAPK信号通路的关系可为筛选治疗DOP有效靶点提供新的思路。本文从p38MAPK信号通路对成骨细胞的调控、miRNA对成骨细胞的调控作用、miRNA介导p38MAPK信号通路调控成骨细胞及治疗DOP的策略等进行综述,为临床治疗DOP提供理论依据。     

淫羊藿苷经NF-κB信号通路干预大鼠免疫衰老的作用及机制

目的探讨中药延缓免疫衰老的作用和机制。方法清洁级健康雄性SD大鼠50只,分为4月龄(4 mon)、24月龄(24 mon)、24月龄加PDTC处理(24 mon+PDTC)、24月龄加Ica(icariin,Ica)干预(24 m+Ica)和24月龄加Ica干预再加PDTC处理(24 mon+Ica+PDTC)五组,每组10只。自21月龄满开始,24 mon+Ica组和24 mon+Ica+PDTC组大鼠予Ica灌胃,24 mon组和24 mon+PDTC组给予等量蒸馏水灌胃,均连续3个月。24 mon+PDTC组和24 mon+Ica+PDTC组大鼠在灌胃结束前1 w每2 d腹腔注射PDTC,按200 mg/kg体重分2次注射。处死大鼠分别提取大鼠脾CD4+T淋巴细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,电泳迁移率(EMSA)检测细胞NF-κB的活性,Western印迹法检测细胞P65蛋白表达水平。结果 24 mon组大鼠脾CD4+T淋巴细胞凋亡率明显高于4 mon组和24 mon+PDTC组(P0.05),而24 mon+Ica组细胞凋亡率显著降低(P0.05);与24 mon+PDTC组比较,24 mon+Ica+PDTC组脾CD4+T淋巴细胞凋亡率明显降低(P0.05)。与4 mon组大鼠相比,24 mon组大鼠脾CD4+T淋巴细胞中p65蛋白表达显著下调(P0.01);与24 mon组比较,24 mon+Ica组p65蛋白表达明显上调(P0.01),24 mon+PDTC组则显著下调(P0.05)。与24 mon+PDTC组比较,24 mon+Ica+PDTC组p65蛋白表达明显增强(P0.05)。24 mon组大鼠脾CD4+T淋巴细胞NF-κB的活性明显低于4 mon组(P0.01);与24 mon组比较,24 mon+Ica组NF-κB的活性增强(P0.01),24 mon+PDTC组NF-κB活性则降低(P0.01)。相关分析表明,CD4+T淋巴细胞NF-κB活性与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.75,P0.01)。结论 NF-κB通过抑制淋巴细胞凋亡参与免疫衰老的调控;Ica可能通过提高NF-κB的活性和诱导P65高表达来抑制淋巴细胞过度凋亡从而延缓免疫衰老。     

下调lncRNA MCM3 AP-AS1通过调控miR-205-5 p/NEGR1轴抑制动脉粥样硬化的机制

目的 探讨lncRNA MCM3AP-AS1对氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 用10 mg/L OX-LDL诱导HUVEC细胞48 h,qRT-聚合酶链反应(PCR)检测细胞中MCM3AP-AS1、miR-205-5p和神经生长调节因子(NEGR)...     

miR-31-5p通过靶向抑制胰岛素降解酶发挥促进动脉粥样硬化作用

目的　探讨miR-31-5p是否通过靶向抑制胰岛素降解酶（IDE）发挥促进动脉粥样硬化作用。方法　应用生物信息学和双荧光素酶技术筛选并验证miR-31-5p与IDE　3’UTR靶向结合情况。miR-31-5p　mimic和inhibitor转染THP-1巨噬细胞及THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞;采用miR-31-5p　agomir处理高脂饮食的ApoE^－/－小鼠;Western　blot检测IDE蛋白表达;ELISA检测ApoE^－/－小鼠血浆脂质水平;油红O染色检测小鼠肝脏脂质蓄积及主动脉粥样硬化斑块病变。结果　miR-31-5p靶向结合IDE　3’UTR　并引起转录抑制;miR-31-5p可下调THP-1细胞、小鼠肝脏和主动脉组织中IDE蛋白表达（P<　0.05）,同时引起泡沫细胞和小鼠血清中脂质含量增加（P<　0.05）,小鼠主动脉窦和主动脉树病变面积明显增加（P<0.05）。结论　miR-31-5p可通过靶向抑制IDE发挥促进动脉粥样硬化作用。     

血浆miR-144-5p水平在动脉粥样硬化诊断中的临床意义

目的研究动脉粥样硬化(AS)患者外周血中miR-144-5p的表达水平,并探讨其与AS临床特征的相关性。方法募集156例受试者,其中无症状AS患者84例为AS组,72名健康成人作为对照组。留取外周静脉抗凝血,通过离心法获得血浆。通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测血浆miR-144-5p水平。通过Spearman的相关系数分析评估了miR-144-5p和C反应蛋白(CRP)、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇之间的相关性。通过受试者工作特征(ROC)曲线检测miR-144-5p水平在AS诊断中的价值。结果与对照组相比,AS组血浆中miR-144-5p表达和CRP表达水平显著增高(P0.01)。AS患者血浆miR-144-5p表达与外周血中总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平无明显相关性(P0.05),但与CRP呈正相关(r=0.625,P0.01)。miR-144-5p检测AS的敏感性和特异性分别为78.6%,83.2%。结论 miR-144-5p的水平在AS患者外周血浆中显著升高,与系统炎症反应密切相关,可作为识别AS患者的生物标志物。     

剪切应力-内皮细胞-Caveolin-1信号通路在动脉粥样硬化中的作用

动脉粥样硬化性疾病发病机制复杂且严重危害人类健康.单纯的脂质浸润学说、损伤反应学说、免疫炎症学说等都不能解释一个现象:动脉粥样硬化病变的局部好发性.但一个共同的事实是动脉粥样硬化病变好发的局部都存在血流动力学的异常.血流剪切应力异常是促进动脉粥样硬化病变形成的重要原因.但局部血流动力学变化是如何影响血管壁功能的确切机制尚未阐明,也就是说剪切应力变化与动脉粥样硬化局部好发性的关系并未完全阐明.剪切应力-内皮细胞-Caveolin-1信号通路在动脉粥样硬化形成中有重要作用,本文综述了目前已知血流剪切应力-内皮细胞-Caveolin-1信号通路在动脉粥样硬化中的作用并提出了急需解决的几个问题.     

淫羊藿苷通过雌激素受体和p38MAPK信号诱导MC3T3-E1Subclone14细胞的分化

目的观察淫羊藿苷(ICA)对MC3T3-E1Subclone14前体成骨细胞株活力、分化的影响,以及雌激素受体(ER)信号、p38MAPK信号在分化过程中的作用。方法 WST-8方法检测MC3T3-E1Subclone14细胞活力;pNPP法检测细胞碱性磷酸酶活性(ALP);ELISA检测I型胶原(ColI)和骨钙素(BGP);Western印迹法检测p38MAPK的蛋白磷酸化;并分别用ICI182780阻断ER受体或SB203580阻断p38MAPK信号后检测ICA对细胞ALP、Col I、BGP的影响;Western印迹法检测ICI182780阻断ER受体信号后,ICA对p38MAPK蛋白磷酸化的影响。结果 ICA(10-7、10-6、10-5mol/L)对细胞活力与对照组比较,在统计学上无显著差异(P>0.05);ICA可以浓度依赖性的提高细胞的ALP、Col I和BGP和矿化结节数量(P<0.01,P<0.05);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度的ICA促细胞分化的特性明显下降(P<0.01);ICA可以浓度组依赖性的提高细胞p38MAPK的蛋白磷酸的水平(P<0.01);SB203580阻断p38MAPK信号后,10-5mol/L浓度的ICA促分化的特性下降(P<0.01);ICI182780阻断ER受体信号后,10-5mol/L浓度ICA促p38MAPK磷酸化明显减弱(P<0.01)。结论 ICA可以促进MC3T3-E1Subclone14细胞分化,ER受体信号、p38MAPK信号在促分化过程中起着重要作用,ER受体信号通路在p38MAPK信号通路的上游。     

淫羊藿甙促成骨细胞中Cbfa1表达的信号通路机制

目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一.     

淫羊藿甙促成骨细胞中Cbfa1表达的信号通路机制

目的 观察淫羊藿甙对成骨细胞中核心结合因子α1(cbfa1)蛋白和活性表达的调节,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是否参与此过程.方法 用酶消化法分离24 h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养,经鉴定后用于实验.设立对照组、淫羊藿甙组(10 ng/ml)以及雌二醇组(10-8mol/L),分别用药物干预24 h,抽提核蛋白.利用转录因子活性ELISA法检测成骨细胞cbfa1与DNA结合的活性,Western印迹法检测成骨细胞中cbfa1蛋白的表达.将MAPK信号转导通路抑制剂U0126和SB203580分别与淫羊藿甙或雌二醇共同加入培养液中,培养24 h,同上法检测Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的变化.结果 淫羊藿甙和雌二醇均可以促进成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的提高(P<0.05).加入细胞外信号调节激酶(ERK)途径的抑制剂UO126后,可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).加入p38MAPK途径的抑制剂SB203580后,也可以下调淫羊藿甙和雌二醇对成骨细胞中Cbfa1活性和Cbh1蛋白表达量的上调作用(P<0.05).结论 淫羊藿甙和雌激素均可上调体外培养大鼠成骨细胞转录因子Cbh1的蛋白表达和结合活性.MAPK信号转导通路抑制剂可以部分阻断淫羊藿甙和雌激素对成骨细胞转录因子Cbh1蛋白表达和活性的上调作用,说明MAPK可能是淫羊藿甙发挥抗骨质疏松作用的信号转导通路之一.     

黑芥子苷通过p38/JNK MAPK信号通路对阿霉素心脏毒性的保护作用

目的:探讨黑芥子苷对阿霉素诱导的心脏毒性的作用及机制。方法:10周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、黑芥子苷组、阿霉素组和黑芥子苷+阿霉素组。阿霉素组和黑芥子苷+阿霉素组给予单次腹腔注射阿霉素(15 mg/kg),对照组和黑芥子苷组给予单次腹腔注射生理盐水(15 mg/kg),黑芥子苷组和黑芥子苷+阿霉素组小鼠同时用黑芥子苷5 mg/kg灌胃,每2天1次,共3次。7 d后超声心动图检测心脏功能,Western blot检测心肌中凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达水平。结果:黑芥子苷组与对照组小鼠超声心动图各指标、凋亡相关蛋白表达水平和MAPK相关蛋白表达水平的差异无统计学意义。与对照组相比,阿霉素组小鼠LVEDD、LVESD均明显增大,LVEF和LVFS均明显减小,Bax表达水平、p38和JNK的磷酸化水平明显升高,Bcl-2表达水平明显降低(P均<0.05)。与阿霉素组相比,黑芥子苷+阿霉素组小鼠LVEDD、LVESD均明显减小,LVEF和LVFS均明显增大,Bax表达水平、p38和JNK的磷酸化水平均明显降低,Bcl-2表达水平明显升高(P均<0.05)。结论:黑芥子苷通过p38/JNK MAPK信号通路减少心肌细胞凋亡,减轻阿毒素诱导的心脏毒性。     

p38 MAPK信号通路在心力衰竭中作用机制的研究进展

心肌细胞炎症反应和凋亡机制在心力衰竭发生和发展中具有重要地位。p38 MAPK信号通路在机体的炎症反应、细胞凋亡和生长分化中的重要作用已得到广泛认识。p38 MAPK对心肌肥厚和纤维化的影响心力衰竭发生发展的作用机制尚未完全阐明。本综述主要对p38MAPK信号通路调控及其下游MK2/3分子调控进行综述。     

miR-615-5p在高血压患者血清中表达及其调控Akt/eNOS信号通路的机制

目的 探讨miR-615-5p在高血压患者血清中表达及其潜在的调控机制。方法 100例患有至少10年高血压患者为观察组和100例非高血压患者(骨质疏松18例、前列腺增生10例、慢性肠炎15例、胃食管反流12例、甲状腺结节23例、轻度贫血8例、胃炎胃溃疡14例)为正常组。运用定量实时逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测mRNA表达。HMEC-1细胞用于体外模型,再转染miR-615-5p和simiR-615-5p调控miR-615-5p表达和细胞活性。结果 与正常组比较,miR-615-5p在高血压患者血清中的表达被上调,miR-615-5p与右心室收缩压(RVSP)及[右心室肥厚指数RV/(LV+S)]正相关。上调miR-615-5p抑制血管内皮细胞增殖,增加5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Edu)细胞比例。下调miR-615-5p促进血管内皮细胞增殖,减少Edu细胞比例。上调miR-615-5p激活caspase-3/9活性表达水平,下调miR-615-5p抑制caspase-3/9活性表达水平。蛋白激酶B(Akt)是miR-615-5p调节血管内皮细胞的靶点,上调miR-615...     

淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠肾脏凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA表达的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、5/6肾切除模型组、淫羊藿苷治疗组(20和40 mg/kg)和苯那普利治疗组(n=8).连续灌胃给药12w,收集24 h尿液和血清,测定尿蛋白、血肌酐和尿素氮;新鲜肾脏组织制备单细胞悬液,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡率;荧光定量PCR检测肾组织中Bcl-2和Bax的mRNA表达.结果 与5/6肾切除模型组相比,淫羊藿苷可显著降低24 h尿蛋白量、血肌酐和尿素氮,减少S期细胞百分比,提高G0/M期细胞百分比,降低细胞凋亡率,并抑制Bcl-2和Bax的mRNA表达.结论 淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠肾功能具有保护作用,其机制可能与改变细胞周期分布、影响凋亡相关基因表达有关.     

p38MAPK-eNOS-N0信号通路在人脐静脉内皮细胞凋亡中的保护作用

目的探讨p38MAPK信号通路在胰高血糖素样肽1(GLP-1)拮抗人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法实验分为对照组、糖基化终末产物(AGE)组、GLP-1组、AGE+GLP-1组、AGE+SB203580组、AGE+GLP-1+SB203580组及AGE+GLP-1+L-NAME组,Western blot检测p-p38MAPK/p38MAPK、磷酸化内皮型一氧化氮合酶/内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS/eNOS)蛋白表达情况,NO检测试剂盒(一步法)检测NO含量,DCFH-DA荧光探针检测细胞活性氧(ROS)含量,Annexin V/PI流式检测细胞凋亡率。结果与AGE组相比,GLP-1预处理可诱导p-p38MAPK蛋白表达下降(P=0.000);与对照组比较,GLP-1或p38 MAPK抑制剂(SB203580)预处理后,受AGE抑制的eNOS蛋白表达或诱导的ROS水平分别显著升高(P=0.004)或下降(P=0.000);GLP-1预处理后,因AGE诱导的细胞凋亡率显著降低(P=0.000),而加入L-NAME后,GLP-1的抗凋亡作用显著减弱(P=0.002);GLP-1预处理后,细胞NO含量较单纯AGE组明显升高(P=0.000),而予以L-NAME后,细胞NO含量显著降低(P=0.011)。结论GLP-1可抑制p38 MAPK信号通路的活化,拮抗AGE对血管内皮细胞的氧化损伤;上调eNOS蛋白的表达,拮抗AGE诱导的内皮细胞NO生成障碍及细胞凋亡,从而延缓糖尿病合并动脉粥样硬化的发生发展。     

硫化氢在p38MAPK信号通路对大鼠肝星状细胞凋亡中的作用

目的探讨硫化氢(H2S)在p38MAPK信号通路对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡中的作用及磷酸化P38、Caspase-3蛋白表达的变化。方法实验设对照组(HSC加含10%胎牛血清的DMEM培养液)、二甲基亚砜(DMSO)组(对照组基础上加DMSO,使其终浓度为0.1%)、NaHS组(对照组基础上加NaHS,使其终浓度为50μmol/L)、SB组(DMSO组基础上加SB203580,使其终浓度为75μmol/L)、SB加NaHS(SB+NaHS)组;采用Hoechst荧光染色检测细胞凋亡;Western blotting法检测磷酸化p38MAPK表达及Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,SB组和SB+NaHS组HSC-T6的凋亡率增加(P0.05),NaHS组p38MAPK磷酸化水平及Caspase-3表达均明显增高(P0.01);与NaHS组比较,SB组和SB+NaHS组细胞凋亡率增加明显(P0.01),p38MAPK磷酸化水平表达降低(P0.01);SB+NaHS组较SB组Caspase-3蛋白表达升高(P0.05)。结论 p38MAPK及Caspase-3在H2S刺激的HSC-T6中表达增强,H2S能促使SB203580诱导的HSC-T6细胞凋亡,其作用机制可能与活化p38MAPK的磷酸化途径,进而激活Caspase-3的表达有关。     

SIRT1/FOXO3a/p27信号通路在白藜芦醇抑制肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

目的 探讨白藜芦醇(RES)是否通过影响沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/叉头蛋白O3a(FOXO3a)/p27信号通路抑制肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖,为肺动脉高压新药研发提供一定的理论和实验依据.方法 体外培养大鼠PASMC并随机分为三组,对照组不处理,5-HT刺激组加1μmol/L 5-HT,不同浓...