结直肠癌患者外周血及其癌组织中CD19~+IL-10~+ B细胞及其亚群含量的差异及意义

目的探讨CD19~+IL-10~+ B细胞及其亚群在结直肠癌患者外周血及其癌组织中的表达差异及临床意义。方法纳入在西南医科大学附属医院2017年11月至2018年11月期间确诊为结直肠癌并行手术患者共38例,用流式细胞术检测结直肠癌患者外周血、癌组织及其相应癌旁组织中CD19~+IL-10~+ B细胞及其3种亚群CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~(hi) B细胞、CD19~+IL-10~+CD24~(int)CD38~(int) B细胞及CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~– B细胞占CD19~+ B细胞的百分比;另外纳入同时间段在西南医科大学附属医院健康体检者共37例,仅抽取外周血同法分离细胞。比较CD19~+IL-10~+ B细胞及其亚群含量在结直肠癌和健康对照者外周血中以及在结直肠癌患者癌组织及其相应癌旁组织中的表达差异,并分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果①结直肠癌患者外周血中CD19~+IL-10~+ B细胞和CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~(hi) B细胞含量明显高于健康对照组(分别为:t=9.09,P0.01;t=9.36,P0.01),CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~– B细胞含量明显低于健康对照组(t=6.15,P0.01),而CD19~+IL-10~+CD24~(int)CD38~(int) B细胞含量在2组间比较差异无统计学意义(t=1.78,P=0.08)。②CD19~+IL-10~+ B细胞和CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~(hi) B细胞含量在结直肠癌患者的癌组织中明显高于在其相应的癌旁组织中(分别为:t=11.67,P0.01;t=19.64,P0.01),而CD19~+IL-10~+CD24~(int)CD38~(int) B细胞和CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~– B细胞含量在二者间比较差异无统计学意义(分别为:t=1.72,P=0.09;t=1.57,P=0.12)。③CD19~+IL-10~+ B细胞及其亚群CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~(hi) B细胞含量在Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌患者外周血中明显高于Ⅰ+Ⅱ期者(t=5.39,P0.01;t=3.13,P0.01),而其他均未发现差异有统计学意义(P0.05)。结论 CD19~+IL-10~+ B细胞在结直肠癌患者的外周血和癌组织以及中晚期结直肠癌患者的外周血中均明显增高,且其以CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~(hi) B细胞亚群升高为主,结果提示,CD19~+IL-10~+ B细胞及其亚群CD19~+IL-10~+CD24~(hi)CD38~(hi) B细胞可能与结直肠癌的发生及进展有关。     

胃癌患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与TGF-β1检测的意义

目的:探讨胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Tergs)以及血清TGF-β1水平的变化及意义。方法:检测并比较42例胃癌患者(胃癌组)与24例健康体检者(对照组)外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs与血清TGF-β1水平,分析两者水平与胃癌患者临床病理因素的关系。结果:胃癌组CD4+CD25+Foxp3+Tergs和TGF-β1水平均明显高于对照组(均P<0.05)。胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs水平与TNM分期、淋巴结转移有关(均P<0.05),而血清TGF-β1的表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(均P<0.05);胃癌组患者外周血内CD4+CD25+Foxp3+Tergs的表达水平与血清内TGF-β1的表达水平呈明显正相关(r=0.801,P<0.05)。结论:胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs水平及血清TGF-β1水平升高,检测两者水平有助于患者病情与预后的判断。     

CD8+T细胞在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 观察胃癌组织中浸润性淋巴细胞CD8+T的表达及临床作用.方法 应用免疫组织化学染色检测102例胃癌患者手术标本中浸润淋巴细胞CD8+T的表达.结果 在胃癌、胃炎及胃息肉组织中均可见浸润淋巴细胞CD8+T的表达,但胃癌组浸润淋巴细胞CD8+T的表达[(29.53±14.71)个/HPF]明显高于慢性胃炎组[(19.54±8.10)个/HPF]和胃息肉组[(14.26±6.83)个/HPF],差异有统计学意义(P＜0.05).CD8+T细胞的表达与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、复发、病理分级和TNM分期无明显相关(P＞0.05);但与组织学类型和浸润深度有关,其中分化型胃癌患者CD8+T细胞的表达[(33.9±18.4)个/HPF]高于低分化型患者的表达[(27.6±12.0)个/HPF],差异有统计学意义(t=2.04,P＜0.05);未侵入肌层组的CD8+T细胞表达[(38.8±13.8)个/HPF]明显高于侵入肌层组[(27.7±14.1)个/HPF],差异有统计学意义(t=2.45,P＜0.05).与CD8+T细胞低表达组比较,CD8+T细胞高表达组胃癌患者中位生存时间延长5个月,但差异无统计学意义(χ2=1.0274,P＞0.05).多因素COX模型分析显示,与浸润淋巴细胞CD8+T低表达组比较,高表达组有降低胃癌死亡风险的趋势(RR=0.82,95%CI=0.41～1.65).结论 浸润性淋巴细胞CD8+T的表达与胃癌的预后有关.

Abstract：

Objective To study the expression and clinical significance of infiltrating lymphocytes CD8 + T in gastric carcinoma tissues.Methods The expression of infiltrating lymphocytes CD8 + T in 102surgically resected specimens of gastric cancer tissues was detected by using immunohistochemistry.Results CD8+ T cells were expressed both in gastric carcinoma,gastritis and gastric polyp tissues,but the number of CD8 + T cells in gastric carcinoma tissues [(29.53 ± 14.71 )/high powered field (HPF)]wassignificantly greater than in gastritis tissues [( 19.54 ±8.10)/HPF]and polyp tissues [( 14.26 ±6.83)/HPF](P ＜0.05).No correlation was found between CD8 + T lymphocyte count and gender,age,tumor location,tumor size,lymph node metastasis,tumor relapse,pathological grade or TNM stage ( P ＞ 0.05 ).However,there was a statistically significant correlation between the number of CD8 + T cells and the histological type,invasive depth.The CD8 + T cell count was obviously higher in the differentiated group [(33.9 ± 18.4)/HPF]than in the undifferentiated group [(27.6 ± 12.0)/HPF]( t = 2.04,P＜0.05 ).And the number of CD8 + T cells was greater in the non-invasive group [(38.8 ± 13.8)/HPF]than in the invasive group [(27.7 ± 14.1 )/HPF]( t = 2.45,P＜0.05 ).The median survival time of gastric cancer patients with high expression of CD8 + T cells was 5 months longer than in those with low expression,but there was no significant difference.Multi-factor COX model analysis demonstrated that the risk of death in gastric cancer patients was lower in the CD8 + T cells high expression group than in the low expression group ( RR = 0.82,95%,CI = 0.41-1.65 ).Conclusion Detection of infiltrating lymphocytes CD8 + T expression in gastric carcinoma tissues will be beneficial to the judgment of the prognosis.     

肝癌患者CD8+CD28-Foxp3+调节性T细胞的变化及意义

目的:探讨肝癌患者外周血和癌组织中CD8~+CD28~-Foxp3~+调节性T细胞(CD8~+CD28-Foxp3~+Tregs)的改变及意义。方法:采用流式细胞仪检测72例肝癌患者和22例健康对照人群外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+T细与CD8~+T细胞比值(CD8~+CD28-Foxp3~+Tregs/CD8~+T),分析CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T与肝癌患者临床病理因素的关系;分别用免疫组化和Western blot检测肝癌患者癌组织及癌旁组织中Foxp3阳性细胞与Foxp3蛋白表达水平。结果:与健康对照人群比较,肝癌患者外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T明显升高(P0.05);外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T与患者TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(均P0.05);肝癌组织中平均Foxp3阳性细胞数与Foxp3蛋白表达量均明显高于癌旁组织(均P0.05);外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T,肝癌组织Foxp3阳性细胞数与Foxp3蛋白表达量在高、中、低分化的肝癌中均呈依次升高趋势,但差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs在肝癌患者外周血及癌组织中增多,可能与肿瘤免疫抑制作用有关,其检测对肝癌患者病情有一定评估价值。     

CD4^+CD25^high调节T细胞在膀胱癌微环境中的检测及临床意义

目的分析CD4^+CD25^highTreg细胞在膀胱癌及正常膀胱组织中的分布及其意义。方法通过免疫组织化学法,分析80例膀胱癌患者及50例正常膀胱组织中CD4^+CD25^highTreg细胞的分布差异情况,并探讨其与临床病理特征之间的相关性。结果相较于正常的膀胱组织,膀胱癌组织中CD4^+CD25^high Treg细胞所占百分比[(34.79±1.05)%]高于对照组[(7.86±0.82)%],差异具有显著统计学意义。CD4^+CD25^high Treg细胞含量与肿瘤的病理分级呈正相关,差异具有统计学意义(P=0.02),CD4^+CD25^highTreg细胞在膀胱肿瘤微环境中的分布情况与性别、年龄、淋巴转移之间无统计学差异(P>0.05)。结论 CD4^+CD25^highTreg细胞在膀胱癌组织中的含量显著增加,且与膀胱肿瘤的病理分级呈相关性,其揭示CD4^+CD25^high Treg细胞含量的增加可能与疾病的发生与进展有关。     

胃癌患者CD4+CD29+T细胞表达及其临床意义

【摘要】〓目的〓探讨CD4⁺CD29⁺辅助性T细胞在胃癌患者中的表达及其临床意义。方法 收集Ⅰ~Ⅳ期胃癌患者共64例、慢性胃炎患者及健康对照组各60例作为观察对象。采用流式细胞术检测外周血CD4⁺CD29⁺T细胞及其细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)水平;采用ELISA法检测三组的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及癌胚抗原(CEA)的含量;分析以上六者的相关性。结果〓胃癌患者CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4水平显著高于慢性胃炎及健康对照组(P<0.05),而IFN-γ明显低于另外两组(P<0.05),但慢性胃炎与健康对照组上述三项指标无统计学差异。Ⅰ~Ⅳ期胃癌患者CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4呈递增趋势,而IFN-γ呈递减趋势,均表现为Ⅲ与Ⅰ期之间、Ⅳ与Ⅲ期之间均存在显著差异(P<0.05)。胃癌患者ICAM-1、TGF-β1及CEA显著高于慢性胃炎及健康对照组(P<0.05),但慢性胃炎与健康对照组上述三项指标无统计学差异。相关性分析显示CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4两者与ICAM-1、TGF-β1及CEA三者当中任意一者均呈正相关性,而IFN-γ与ICAM-1、TGF-β1及CEA三者当中任意一者均呈负相关性(P<0.05)。结论〓CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4表达增加、IFN-γ表达减少是胃癌患者的一个重要免疫学特征,在早晚期胃癌呈显著差异性表达,且三者与胃癌的血管表达相关因子密切相关。     

CD44~+/CD24~(-/low)及ALDH1+与早期乳腺癌预后相关性比较

目的比较CD44~+/CD24~(-/low)及ALDH1+与早期乳腺癌预后的相关性。方法回顾性选取我科2007年4月至2008年2月因早期乳腺癌行手术患者510例,收集其术后石蜡包埋肿瘤标本,用免疫组化检测其CD44、CD24及ALDH1的表达情况,比较CD44~+/CD24~(-/low)组及ALDH1+组同总生存的相关性。结果 CD44~+/CD24~(-/low)的比例为22.9%,ALDH1+的比例为11.1%。在多因素Cox比例风险模型控制混杂变量后,CD44~+/CD24~(-/low)组总生存同非CD44~+/CD24~(-/low)组无显著性差异(HR=1.335,95%CI:0.812-2.193,P=0.254);ALDH1+组总生存低于ALDH1-组(HR=1.736,95%CI:0.385-0.864,P=0.008)。结论 ALDH1+可作为早期乳腺癌预后不良的标志物,而CD44~+/CD24~(-/low)表型不能作为早期乳腺癌预后不良的标志物。     

胃癌浸润性树突状细胞CD83和S100的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤组织浸润树突状细胞（tumor infiltrating dendriticcells,TIDCs）在胃癌组织的表达及临床意义.方法采用免疫组化、原位杂交及流式细胞术分别检测45例胃癌组织的TIDCs的S100,CD83及CD83 mRNA表达,并分析它们与临床病理特点的关系.结果免疫组化显示胃癌组织（42/45）中有S100＋DCs不均一表达,CD83表达于癌旁及正常黏膜.原位杂交显示CD83mRNA有少量（7/45）表达.流式细胞术可检测到较低水平CD83表达（4%）.S100和CD83 mRNA表达数量与患者年龄、性别、肿瘤部位、浸润深度、病理分期及淋巴结转移情况无显著相关性.免疫组化检测CD83表达与TNM呈负相关（r=-0.924,P＜0.01）;流式细胞术检测CD83与TNM分期及淋巴结转移呈负相关（r=-0.879,P＜0.01;r=-0.7 82,P＜0.05）.结论胃癌TIDCs以未成熟状态为主,S1 00表达提示其数量,CD83表达提示其功能,且与胃癌TNM分期及淋巴结转移有关,是更好的临床观测指标.     

胃癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义

目的研究胃腺癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色方法检测99例胃癌患者手术切除的原发灶及正常胃黏膜组织中CD133蛋白的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 29例(29.29%)患者肿瘤组织中CD133蛋白表达阳性,正常胃黏膜组织中均为阴性(P=0.000)。肿瘤直径>5 cm者CD133蛋白表达阳性率显著高于≤5 cm者(P=0.041);CD133蛋白表达与TNM分期有关(P=0.044);有淋巴结转移(P=0.017)、淋巴管浸润(P=0.000)和血管浸润(P=0.000)者,CD133蛋白表达显著增高。logistic回归分析显示:肿瘤浸润深度(P=0.011)、淋巴结转移(P=0.043)和TNM分期(P=0.049)分别是CD133蛋白表达阳性的独立危险因素。CD133蛋白表达阳性患者的术后生存时间短于表达阴性患者(P=0.046)。Cox比例风险回归模型分析显示,有淋巴结转移(P=0.042)、TNM分期(P=0.046)及CD133蛋白表达阳性(P=0.046)分别是胃癌患者预后的独立危险因素。结论胃癌组织中CD133蛋白的表达与胃癌的发展、转移及预后密切相关。     

不同分期前列腺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的相关性

目的 :观察不同分期前列腺癌患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系。方法:采用流式细胞术检测62例前列腺癌患者(患者组,临床TNM分期Ⅰ期5例、Ⅱ期16例、Ⅲ期21例、Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率;并检测其空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用ELISA法测定外周血胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗的相关性,并与42例健康体检者进行对照。结果:与健康对照组相比,前列腺癌患者HOMAIR明显升高(6.68±1.66 vs 3.68±1.42),IGF-1水平明显下降[(96.39±21.21)ng/ml vs(164.56±30.58)ng/ml],PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率[(13.88±0.96)%vs(5.33±0.65)%]及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值[(3.55±0.29)×107vs(1.99±0.78)×107]明显升高(P0.05,P0.01)。患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数﹑HOMA-IR均随TNM分期逐渐加重而增加,IGF-1逐渐下降;相关性分析表明:CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与HOMA-IR呈明显正相关(r分别为0.689、0.722,P0.01),与IGF-1呈明显负相关(r分别为-0.896、-0.747,P0.01)。结论:前列腺癌患者存在不同程度的胰岛素抵抗,且随着疾病程度的加重,外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例及胰岛素抵抗逐渐加重;CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与其形成和发展。     

外周血CD3^+T淋巴细胞对习惯性流产患者不良妊娠的预测价值

目的探讨习惯性流产(RPL)患者再次妊娠早孕期外周血CD3+T细胞水平与妊娠结局的关系。方法选择2017年12月至2018年10月就诊于我院妇产科的RPL再次妊娠早孕期患者60例为研究对象,选择同期本院常规产检的无既往自然流产史正常早孕妇女50例为对照;收集临床资料,采用流式细胞仪检测两组外周血CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T细胞水平。根据随访的妊娠结局分为RPL成功分娩组(24例)、RPL再次流产组(36例)和正常成功分娩组(48例),比较各组外周血CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T细胞水平的差异,分析影响RPL再次流产的危险因素。结果 RPL再次流产组、RPL成功分娩组孕次显著高于正常成功分娩组(P<0.001);RPL再次流产组外周血CD3^+和CD3^+CD4^+T细胞比值显著高于RPL成功分娩组和正常成功分娩组(P<0.05);RPL成功分娩组外周血CD3^+T细胞比值显著高于正常成功分娩组(P<0.05);3组CD3^+CD8^+T细胞比值相比较,差异无统计学意义(P>0.05);单因素和多因素Logistic回归分析显示,CD3^+、CD3^+CD4^+T细胞是影响RPL患者再次流产的独立危险因素(P<0.05);CD3^+T细胞临界值为79.02%时,预测RPL患者再次流产的曲线下面积(AUC)为0.836[95%CI(0.717,0.919)],特异性为91.7%,敏感性为63.9%。结论 RPL患者再次妊娠在早孕期检测外周血CD3^+T细胞将有助于预测患者妊娠结局。     

胃癌患者围手术期CD4+CD25+调节性 T细胞的变化及其意义

目的:探讨胃癌患者围手术期CD4+CD25+调节性 T细胞的变化及其意义。方法:应用流式细胞仪检测52例胃癌患者（胃癌组）术前、术后7 d，术后1个月CD4+CD25+T细胞水平，并以24名健康者作为对照（对照组）。结果:胃癌组外周血CD4+CD25+ T细胞较对照组明显升高;胃癌组经根治或姑息术切除肿瘤1个月后，外周血CD4+CD25+ T细胞水平较术前及术后1周明显下降，而术后1周与术前比较无统计学差异。结论:胃癌组患者外周血CD4+CD25+ T细胞水平明显升高可能是机体免疫功能受抑制的重要机制。该指标可能成为胃癌免疫状态临床监测的指标。     

CD44与CD133蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的研究肿瘤干细胞标志物CD44及CD133蛋白的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组化方法检测100例胃癌组织中CD44和CD133蛋白的表达情况,并对CD133及CD44表达与胃癌患者的临床病理资料和生存率进行统计分析。结果CD133和CD44蛋白均主要表达在细胞膜,少量在细胞浆中表达。两者的表达均与患者的年龄和性别无关（P〉0．05）,但与肿瘤的大小、组织学分化程度、血管浸润、淋巴管浸润、淋巴结转移以及pTMN分期有关,肿瘤直径越大（CD44P=0．015;CD133P=0．002）、组织学分化程度越差（CD44P=0．008;CD133P=0．019）、有血管浸润（CD44P=0．043;CD133P=0．023）、有淋巴管浸润（CD44P=0．020;CD133P=0．044）、有淋巴结转移（CD44P=0．002：CD133P=0．004）、肿瘤浸润越深（CD44P=0．006;CD133P=0．021）以及pTNM分期越高（CD44P=0．034;CD133P=0．001）,其CD44和CD133蛋白的表达阳性率越高。CD44＋CD133＋双阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤的组织学分化程度以及血管浸润均无关（P〉0．05）,但与肿瘤大小、淋巴管浸润、肿瘤T分期、N分期以及pTNM分期有关,其中,肿瘤直径越大（P=0．010）、有淋巴管浸润（P=0．003）、有淋巴结转移（P=0．045）、肿瘤浸润越深（P=0．041）以及pTNM分期越高（P=0．049）,其CD44＋CD133＋双阳性表达率越高。单因素生存分析结果显示,淋巴结转移（P〈0．001）、TNM分期（P=0．013）、CD44蛋白阳性表达（P=0．005）、CD133蛋白阳性表达（P=0．002）以及CD44＋CD133＋双阳性表达（P〈0．001）和患者的3年生存率均有关。Spearman等级相关分析结果表明,CD44蛋白的表达与CD133蛋白的表达呈正相关（r=0．207,P=0．039）。logistic回归分析提示CD44＋CD133＋蛋白双阳性表达是淋巴结转移（P=0．038）的独立危险因素。Cox风险回归多因素生存分析显示,淋巴结转移（P=0．006）以及CD44和CD133蛋白的共表达（P=0．003）是影响胃癌患者术后生存的独立预后因素。结论CD44和CD133可作为胃癌干细胞的肿瘤标志物;CD44与CD133蛋白的共表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素,与患者预后密切相关,其表达水平越高,预后越差。     

结肠癌患者外周血 CD4+ CD25+调节性 T细胞检测的临床意义

目的 探讨结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞检测的临床意义。方法采用流式细胞技术对51例结肠癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD4及CD25进行了检测。结果（1）结肠癌组CD4^＋CD25^＋细胞明显高于正常对照组（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋细胞则显著低于正常对照组（P〈0．05）；（2）结肠癌组手术后患者CD4^＋CD25^＋、CD4^-CD25^＋细胞与手术前相比显著下降（P〈0．05）；（3）结肠癌组淋巴结转移患者CD4^＋CD25^＋细胞明显高于未转移组（P〈0．001）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数可以反映肿瘤患者免疫系统存在抑制状态，且可能与肿瘤的免疫耐受有关，并可反映肿瘤淋巴结转移状况。     

乳腺浸润性导管癌微环境中的CD4~+ T细胞比例、CD8~+ T细胞比例及p53基因的表达

目的探索乳腺浸润性导管癌微环境中的CD4~+ T细胞比例、CD8~+ T细胞比例及p53基因突变情况,并探讨它们与乳腺浸润性导管癌预后的相关性。方法回顾性收集解放军第371中心医院于2010–2012年期间行手术切除的85例乳腺浸润性导管癌标本,采用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织中的CD4~+ T细胞比例、CD8~+ T细胞比例、CD4~+/CD8~+ T细胞比值以及p53基因的突变情况。比较不同前哨淋巴结转移情况及不同p53基因突变情况患者肿瘤组织中上述指标的差异,并探索上述指标对乳腺浸润性导管癌患者预后的影响。结果 (1)CD4~+ T细胞比例、CD8~+ T细胞比例及CD4~+/CD8~+ T细胞比值与前哨淋巴结转移的关系:在肿瘤簇中,与前哨淋巴结转移组患者比较,前哨淋巴结未转移组患者的CD4~+ T细胞比例及CD4~+/CD8~+ T细胞比值的差异均无统计学意义(P0.05),但前哨淋巴结未转移组患者的CD8~+ T细胞比例较低(P0.05);在肿瘤间质中,与前哨淋巴结转移组患者比较,前哨淋巴结未转移组患者的CD4~+ T细胞比例和CD8~+ T细胞比例均较低(P0.05),CD4~+/CD8~+ T细胞比值较高(P0.05)。(2)CD4~+ T细胞比例、CD8~+ T细胞比例及CD4~+/CD8~+ T细胞比值与p53基因突变的关系:不管是在肿瘤簇中还是在间质内,与p53基因突变组患者比较,p53基因未突变组患者的CD4~+ T细胞比例及CD8~+ T细胞比例均较低(P0.05),而CD4~+/CD8~+ T细胞比值均较高(P0.05)。(3)CD8~+ T细胞浸润程度和p53基因表达与预后的关系:CD8~+ T细胞高浸润者的预后较低浸润者差(P0.05),p53基因突变者的预后较未突变者差(P0.05)。结论 CD4~+ T细胞比例、CD8~+ T细胞比例及CD4~+/CD8~+ T细胞比值与前哨淋巴结转移及p53基因突变有相关性,且CD8~+ T细胞比例与p53基因突变及乳腺浸润性导管癌的预后有关。     

CD133、CXCR4共表达与胆囊癌转移特性的相关性研究

目的探讨CD133、CXCR4共表达与胆囊癌转移特性之间的关系。方法培养胆囊癌GBC~-SD细胞,并经免疫磁珠分选法分选得到CXCR4~+和CXCR4~-亚群胆囊癌GBC~-SD细胞,分为CD133~-CXCR4~-、CD133~-CXCR4~+、CD133~+CXCR4~-及CD133~+CXCR4~+四组,以Transwell法检测四组胆囊癌GBC~-SD细胞侵袭能力。Western~-blot法检测CD133~+CXCR4~+组与CD133~+CXCR4~-组细胞上皮间质转化相关因子表达。Western blot法检测21例胆囊癌原发灶组织标本中CD133与CXCR4蛋白表达与淋巴结转移、肝脏侵犯、胆管侵犯及TNM分期之间的关系。结果 CD133~+CXCR4~+组平均穿膜细胞数为(32.49±9.45),显著高于CD133~+CXCR4~-组的(16.17±8.55),差异具有统计学意义(P=0.02)。CD133~+CXCR4~+组N~-cadherin蛋白灰度值为(0.8321±0.1259),显著高于CD133~+CXCR4~-组的(0.4572±0.0775),差异有统计学意义(P=0.004)。CD133~+CXCR4~+组E~-cadherin蛋白灰度值为(0.4712±0.0736),显著低于CD133~+CXCR4~-组的(0.8439±0.1339),差异有统计学意义(P=0.006)。CD133~+CXCR4~+组Snail蛋白相对灰度值为(0.9455±0.1228),显著高于CD133~+CXCR4~-组的(0.3219±0.0934),差异有统计学意义(P=0.003)。胆囊癌标本淋巴结转移组、肝脏侵犯组、胆管侵犯组CXCR4蛋白表达值显著高于对应阴性组(P=0.013,P=0.024,P=0.037),Ⅰ/Ⅱ分期组显著低于Ⅲ/Ⅳ组,差异有统计学意义(P=0.016)。淋巴结转移组CD133蛋白表达显著高于对应阴性组,差异有统计学意义(P=0.009),Ⅰ/Ⅱ分期组显著低于Ⅲ/Ⅳ组,差异有统计学意义(P=0.018)。肝脏侵犯组、胆管侵犯组与相应对照组CD133蛋白相对表达差异无统计学意义(P=0.443,P=0.371)。CD133蛋白与CXCR4蛋白表达存在明显正相关(r=0.693,P0.01)。结论 CD133、CXCR4共表达预示胆囊癌具有较强的转移特性。     

胃癌患者手术前后CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的 研究胃癌患者手术前、后调节性T细胞(Treg)及FoxP3表达的变化.方法 采用流式细胞术检测20例胃癌患者术前及其中15例接受了手术者术后1周(简称术后)以及15例因胃部不适接受胃镜检查的自愿者(正常对照组)外周血中Treg数量的变化,用RT-PCR法检测Treg的特异性分子标志物FoxP3的转录水平,同时用免疫组织化学法检测胃癌组织中FoxP3蛋白的表达情况.结果 胃癌患者术前外周血中CD4+T细胞中的CD4+ CD25+比例明显高于正常对照组[(19.39±5.58)%比(9.91±3.23)%,P＜0.01],而术后CD4+ CD25+比例较术前明显下降[(13.50±5.93)%比(19.39±5.58)%,P＜0.05].胃癌患者术前外周血中FoxP3转录水平明显高于正常对照组(0.86±0.03比0.64±0.02,P＜0.01),而术后较术前明显下降(0.73±0.04比0.86±0.03,P＜0.05),提示FoxP3转录水平与Treg变化一致.胃癌患者外周血中CD4+T细胞在单个核细胞中的比例与正常对照组相比明显下降(P＜0.01),而手术前、后变化不明显.20例胃癌患者中13例胃癌癌细胞的细胞浆中有不同程度的FoxP3蛋白表达(强阳性2例,中阳性6例,弱阳性5例),7例胃癌患者的胃癌细胞中不表达.结论 Treg可能通过免疫抑制作用在胃癌的发生、发展中发挥作用,肿瘤组织本身可能是引起Treg变化的重要始动因素.     

CD4+、CD8+和NK在结直肠癌中的表达及其与淋巴结微转移的关系

目的 检测不同Dukes分期结直肠癌患者淋巴结细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达及外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与NK细胞活性表达,探讨两者间关系.方法 采用常规苏木素.伊红(HE)染色病理切片检测21例结直肠癌患者281枚淋巴结转移癌灶及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者淋巴结CK20 mRNA表达;采用流式细胞仪检测患者外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK细胞活性表达.结果 HE染色法检出有淋巴结转移者为16枚(6%,16/281),RT-PCR法检出有淋巴结转移者140枚(50%,140/281);按有淋巴结微转移重新Dukes分期后,手术前,A、B期患者血CD4+、CD4+/CD8+高于c期(P<0.05);A期患者血CD8+低于C期(P<0.05);B期患者血NK细胞活性高于C期(P<0.05).新Dukes分期与血CD4+呈负相关(r=-0.497,P<0.01);与CD4+/CD8+呈负相关(r=-0.714,P<0.01);与CD8+呈正相关(r=0.945,P<0.01).结论 RT-PCR方法对淋巴结微转移的检出率明显优于HE染色切片法,结直肠癌淋巴结微转移的发生与患者免疫功能明显低下密切相关.     

CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)调节性B细胞在复发性流产合并抗磷脂综合征患者中的表达及意义

目的探讨调节性B细胞(Breg)在复发性流产(RM)合并抗磷脂综合征(APS)中的作用。方法应用流式细胞术检测11例对照女性、18例复发性流产合并抗磷脂综合征患者(APS/RM)和37例无抗磷脂综合征的复发性流产患者(Non-APS/RM)外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例及表达IFN-γ或TNF-α的辅助性T细胞(Th)的比例。结果与对照组相比较,CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例在APS/RM组[(3.42±1.31)%vs.(7.16±1.28)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(4.79±1.10)%vs.(7.16±1.28)%,P0.01]显著降低,外周血表达IFN-γ的Th细胞比例在APS/RM组[(29.20±8.01)%vs.(20.60±2.63)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(25.00±6.06)%vs.(20.60±2.63)%,P0.01]中均显著增高,表达TNF-α的Th细胞比例在APS/RM组[(46.30±7.36)%vs.(29.70±3.94)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(39.70±9.35)%vs.(29.70±3.94)%,P0.01]中亦显著增高。与Non-APS/RM组相比,外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例在APS/RM组显著降低(P0.01),而表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加(P0.05)。相关性分析结果显示,在对照组中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例与表达IFN-γ(r2=0.38,P0.05)或TNF-α(r2=0.49,P0.05)的Th细胞比例呈显著负相关性,而在APS/RM组和Non-APS/RM组中无显著相关性(P0.05)。结论 APS/RM患者存在明显免疫失衡,即表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加,可能与CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

树突细胞共培养的细胞因子诱导杀伤细胞联合化疗治疗进展期胃癌的Meta分析

目的系统评价中国地区树突细胞(DC)共培养的细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)(DC-CIK/CIK)联合化疗对进展期胃癌的安全性及疗效。方法计算机检索CNKI、万方、重庆维普、CBMDisc、PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library、Clinical Trials数据库,搜集国内外公开发表的有关DC-CIK/CIK联合化疗(试验组)对比单纯化疗(对照组)治疗进展期胃癌的相关RCT报道,检索时限均为建库至2017年1月。经2名研究人员独立地进行筛选文献、提取数据并对纳入文献进行质量评价后,用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果共21项RCT 1 764例胃癌患者纳入研究。Meta分析结果显示,相比于对照组,试验组可明显提高进展期胃癌患者1年生存率(P=0.003)、总有效率(P0.000 01)、疾病控制率(P0.000 01)以及功能状况(P=0.01),并减少不良反应的发生率;其次,可显著提高反映免疫功能的淋巴细胞亚群(CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+、CD3~+CD56~+,P0.05)和NK细胞(P=0.02)水平。结论 DC-CIK/CIK联合化疗治疗进展期胃癌患者近期疗效显著且安全性高,能提高患者的远期生存率、免疫功能水平和功能状况。