PAK1在非小细胞肺癌的表达及对细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨P21蛋白激活激酶1(P-21 activated kinase 1,PAK1)在非小细胞肺癌的表达,以及下调PAK1基因对细胞增殖和侵袭的影响。方法选取非小细胞肺癌患者97例,实时荧光定量PCR检测非小细胞肺癌和癌旁组织中PAK1基因表达,培养非小细胞肺癌A549细胞株,分为PAK1干扰组、阴性对照组和空白组,实时荧光定量PCR检测细胞中PAK1基因表达,MTT法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测细胞中PAK1、β-catenin、磷酸化β-catenin和MMP-9蛋白表达。结果非小细胞肺癌组织中PAK1 mRNA相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=52. 063,P=0. 000);非小细胞肺癌组织中PAK1 mRNA相对表达量与TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P 0. 05); PAK1干扰组细胞中PAK1 mRNA相对表达量低于阴性对照组和空白组(P 0. 05); PAK1干扰组细胞48h、72h和96h吸光度A值低于阴性对照组和空白组(P 0. 05); PAK1干扰组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白组(P 0. 05); PAK1干扰组PAK1、磷酸化β-catenin和MMP-9蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白组,而β-catenin蛋白相对表达量高于阴性对照组和空白组(P 0. 05)。结论 PAK1在非小细胞肺癌组织中呈高表达,下调PAK1基因表达可抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭,其机制可能与β-catenin信号通路有关。     

谷丙转氨酶2在食管鳞癌组织中表达变化及对癌细胞增殖迁移侵袭能力影响

目的 观察谷丙转氨酶2(GPT2)在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达变化,分析GPT2与患者临床病理特征、预后的关系以及对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以探讨其与ESCC进展的关系。方法 选取80例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织,将其中3例份样本通过转录组测序筛选出差异表达基因GPT2,并在TCGA数据库中进行验证。采用Western blotting及免疫组化法检测ESCC组织中GPT2蛋白,分析癌组织中GPT2表达与患者临床病理特征的关系。采用多因素Cox比例风险分析影响ESCC患者生存的风险因素,Kaplan-Meier法对GPT2高、低表达的ESCC患者进行生存分析。构建p IRES2/GPT2(GPT2过表达)质粒,然后将空载质粒（p IRES2）及p IRES2/GPT2转染至人食管鳞癌细胞系KYSE150、KYSE30（转染的细胞分别命名为p IRES2、p IRES2/GPT2组）,培养48 h后,采用CCK-8及Transwell实验观察ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 转录组测序结果及基于TCGA数据库数据分析结果显示,与癌旁正常组织相比,ESC...     

miR-145-5p通过靶向PAK4促进非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性

目的 研究miR-145-5p通过靶向p21活化激酶(PAK)4对非小细胞肺癌对吉非替尼的敏感性的作用及机制。方法 RT-qPCR检测miR-145-5p mRNA和PAK4 mRNA的表达,利用Lipofectamine2000将miR-NC(miR-NC组)、miR-145-5p mimic(miR-145-5p mimic组)、miR-145-5p inhibitor(miR-145-5p inhibitor组)、pc-PAK4质粒分别或联合转染进入A549/GR细胞,未转染的A549/GR细胞为对照组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞法检测细胞凋亡,双荧光素酶报告检测靶向关系,Western印迹检测PAK4蛋白相对表达水平。在裸鼠左腋下皮下注射转染过的A549/GR细胞,分为空白组、miR-145-5p mimic组、pc-PAK4组、miR-145-5p mimic+pc-PAK4组。每隔一天给每只小鼠口服吉非替尼(100 mg/kg)。第24天颈椎脱位法处死裸鼠,完整取出皮下肿瘤,电子天平称重,RT-PCR检测小RNA和靶基因表达,TUNEL染色检测凋亡。结果 与正...     

LINC01615表达下调对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的 探讨下调LINC01615表达对膀胱癌细胞（T24细胞）增殖、侵袭、迁移的影响。方法 常规培养T24细胞,取对数生长期细胞随机分为si-LINC01615组、si-NC组,分别转染si-LINC01615、si-NC,继续培养48 h。用实时荧光定量PCR法检测细胞中LINC01615表达,用MTT实验检测细胞增殖能力（OD值）,用Transwell实验检测细胞侵袭能力,用划痕实验检测细胞迁移能力（24 h愈合度）。结果 转染后si-LINC01615组、si-NC组T24细胞LINC01615相对表达量分别为0.60±0.03、1.08±0.02,比较差异有统计学意义（P<0.05）,表明转染成功。培养0、24 h,两组细胞活力差异均无统计学意义（P均>0.05）;培养48、72 h,si-LINC01615组细胞活力均低于si-NC组（P均<0.05）。si-NC组侵袭细胞数为（148.30±1.76）个,si-LINC01615组为（74.33±3.18）个,比较差异有统计学意义（P<0.05）。si-NC组24 h愈合度为（98.33±0.88）%...     

丙泊酚对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及机制

目的 探讨丙泊酚对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及机制.方法 将培养至对数生长期的人胃癌细胞株MGC-803随机分为0、2、4、8μg/L丙泊酚组并用相应浓度丙泊酚进行干预,其中0μg/L丙泊酚组为对照组.用MTT法检测细胞增殖能力,用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,用Wes...     

膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化及意义

目的观察膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化,并探讨其临床意义。方法用流式细胞术检测3l例膀胱癌组织中的Bcl-2、PCNA、p53,并与18例正常膀胱黏膜组织作对照。PI染色法和TUNEL法分别检测上述标本的细胞周期及凋亡细胞。结果31例膀胱癌组织中,Bcl-2阳性表达率为58．1％,p53为67．7％,PCNA中强度阳性。正常膀胱黏膜组织Bcl-2阳性表达率为16．7％、p53不表达、PCNA弱阳性,两者相比,P均〈0．01。Bcl-2、PCNA、p53的表达与膀胱癌的临床分级或分期相关。膀胱癌细胞周期分布异常,19例出现DNA异倍体,s期细胞增加,但未发现明显的周期阻滞现象。膀胱癌细胞凋亡增加。结论膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53过度表达,可出现DNA异倍体,均提示预后不良。     

ROR2在中老年宫颈癌中表达和意义及对宫颈癌细胞增殖的影响

目的探讨酪氨酸激酶样单受体(ROR)2基因在中老年宫颈癌中的表达和意义及小干扰(si)RNA沉默ROR2后对宫颈癌细胞增殖的影响。方法选取80例中老年宫颈癌者,Real-time PCR检测癌组织和癌旁组织中ROR2的表达,并分析ROR2的表达与宫颈癌患者绝经后有无激素调节、肿瘤大小、淋巴结转移、国际妇产科联盟(FIGO)分期的相关性。进一步在SiHa细胞中用ROR2的两对siRNA沉默ROR2,通过CCK-8实验检测沉默ROR2后对SiHa细胞增殖的影响,通过Western印迹检测沉默ROR2后对增殖细胞核抗原(PCNA)的影响。结果 ROR2在癌组织中表达明显高于癌旁组织(P0.001);ROR2表达与绝经后有无激素调节、肿瘤大小明显相关(P0.01),与淋巴结转移和FIGO分期无显著相关性(P0.05)。在SiHa细胞中沉默ROR2显著抑制了细胞的增殖(P0.001)和PCNA蛋白的表达(P0.001)。结论 ROR2可能通过调控PCNA表达影响宫颈癌细胞增殖。     

环状RNA0026344靶向miR-21对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制

目的 探讨环状RNA0026344(circ_0026344)靶向微小RNA-21(miR-21)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制.方法 收集25例肝癌患者术中切除的肝癌组织及其癌旁组织(距离肿瘤边缘>3 cm),用qRT-PCR检测组织中circ_0026344、miR-21表达.常规培养HCC9204细胞,将...     

miR-199a-3p在卵巢癌组织中的表达及其对癌细胞增殖转移的影响

目的探讨miR-199a-3p在卵巢癌组织中表达情况及其对癌细胞增殖转移能力的影响机制。方法培养四株卵巢癌细胞系SK-OV-3、OV-90、CAOV3、HO-8910S,采用RT-qPCR法检测四株卵巢癌细胞中miR-199a-3p的表达情况。选择miR-199a-3p表达较低的卵巢癌细胞,分为对照组、NC mimic转染组、miR-199a-3p mimic组。对照组不加任何试剂,miR-199a-3p mimic组、NC mimic转染组分别加入miR-199a-3p mimic和NC mimic转染试剂。采用MTT法、Transwell小室试验检测卵巢癌细胞的增殖及迁移能力。RT-qPCR检测过表达miR-199a-3p后卵巢癌细胞中smad1的表达情况,双荧光素酶试验观察miR-199a-3p对smad1的调控作用。结果 miR-199a-3p在卵巢癌细胞株CaOV3及OV-90中的表达水平低于其他细胞(P均<0. 05)。CaOV3及OV-90细胞过表达miR-199a-3p后,miR-199a-3p mimic组细胞增殖及迁移能力低于NC mimic组(P均<0...     

CXCR2在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制

目的探讨趋化因子受体2(CXCR2)在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制。方法取膀胱癌肿瘤组织,培养成悬浮肿瘤细胞球,用流式细胞仪筛选出CD44+膀胱癌干细胞。采用Western blotting法检测干细胞标志基因Oct4、Sox2蛋白表达,并检测CXCR2蛋白表达。培养膀胱癌干细胞,将其分为sh-CXCR2组和转染对照组,sh-CXCR2组加入慢病毒转染试剂polybrene与CXCR2敲减慢病毒,转染对照组加入慢病毒转染试剂polybrene与对照scramble。转染72 h后,采用MTS法检测两组细胞增殖率,软琼脂克隆实验观察细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室转移实验和Boyden侵袭实验观察细胞转移和侵袭能力,Western blotting法检测两组细胞中凋亡相关蛋白FOXO1A、Bcl-2以及侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9的相对表达量。结果流式细胞仪分选出CD44⁺细胞占全部细胞的2.37%,CD44⁺细胞中Oct4、Sox2、CXCR2蛋白表达水平高于CD44-细胞(P均&...     

miR-139-5p靶向PAK5基因通过Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

背景胃癌(Gastric cancer,GC)是人类消化系统最常见的癌症类型,发生局部或全身转移是导致患者预后差的主要原因.微小RNA(microRNA,miRNA)是胃癌发生发展的重要调控因子.然而,miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和转移的影响及机制尚不清楚.目的探究miR-139-5p靶向p21活化的激酶5(PA...     

RhoGDI2、PAK2在胃癌中的原位表达及与临床病理特征的相关性

目的 检测RhoGDI2、PAK2在胃癌患者中的表达状况,评价其与胃癌临床病理特征的相关性,评估RhoGDI2、PAK2在胃癌侵袭、转移中的临床意义.方法 采用免疫组织化学技术(EliviSionTM二步法)检测103例胃癌标本中RhoGDI2、PAK2的表达.结果 胃癌组织中RhoGDI2和PAK2蛋白表达阳性率分别为72.82％、60.19％;RhoGDI2和PAK2在胃癌中的表达与胃癌分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移个数、有无远处转移和TNM分期密切相关,RhoGDI2和PAK2的表达呈正相关.结论 胃癌组织中RhoGDI2、PAK2的表达与胃癌侵袭、转移病理特征密切相关.RhoGDI2与PAK2可能共同参与调节胃癌的侵袭、转移过程.     

hsa＿circ＿0131457在胰腺癌组织中的表达变化及其过表达对癌细胞生物学行为的影响

目的 观察环状RNA hsa＿circ＿0131457在胰腺癌组织和细胞中的表达变化,探讨hsa＿circ＿0131457过表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。方法 收集胰腺癌组织及配对癌旁正常组织各7例份,对数生长期的胰腺癌细胞PANC-1、SW1990、CFPAC-1和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7,采用实时荧光定量PCR法检测hsa＿circ＿0131457表达。以hsa＿circ＿0131457表达最低的胰腺癌细胞为研究对象,分为过表达组和对照组,分别采用脂质体转染法转染hsa＿circ＿0131457过表达质粒及对照质粒。取转染后的两组细胞,采用CCK-8法检测两组培养0、24、48、72、96 h的OD值,TUNEL染色法检测细胞凋亡率,细胞划痕实验记录细胞迁移距离,Transwell小室实验记录穿膜细胞数,Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白细胞周期素D2(CCND2)和周期素依赖性激酶4(CDK4)蛋白相对表达量。结果 胰腺癌组织和癌旁正常组织hsa＿circ＿0131457相对表达量分别为0.011±0.017、2.084...     

miR-132-3p靶向抑制FOXP2基因表达对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 观察miR-132-3p对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并探讨其作用机制.方法 qRT-PCR检测乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、BT549和BT474及人乳腺上皮细胞HBL-100中miR-132-3p和叉头框蛋白(FOX)P2 mRNA表达,Western印迹检测FOXP2蛋白表达.分别转染m...     

白头翁皂苷A对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和放疗敏感性的影响及机制

目的 探讨白头翁皂苷A(PSA)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和放疗敏感性的影响及机制.方法 体外培养HepG2细胞,取对数生长期的细胞分别用不同浓度(0、10、15、20 mg/L)PSA进行干预24 h,分别将0、20 mg/L的PSA干预的细胞记为对照组、PSA组.用MTT法检测两组细胞增殖能力,Transwell实...