淫羊藿甙协同诱生IL—2,3,6作用的研究

采用依赖细胞株法，分别检测了淫羊藿甙协同诱生ＩＬ－２、ＩＬ－３及ＩＬ－６的作用。结果表明：淫羊藿甙可协同ＰＨＡ诱导扁桃体单个核细胞产生ＩＬ－２、３、６，呈剂量依赖关系；动力学观察表明：ＩＬ－２、ＩＬ－６的最大分泌时相为４８ｈ，ＩＬ－３的最大分泌时相为７２ｈ。提示，淫羊藿甙是一种有效的生物反应调节剂。     

淫羊藿甙逆转转化生长因子β2对LAK,CD3AK细胞的免疫抑 …

目的 探讨淫羊藿甙逆转转化生长因子β２（Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ β２ＴＧＦβ２）对ＬＡＫ、ＣＤ３ＡＫ细胞的免疫抑制作用及其机制。方法 采用ＭＴＴ法,ＲＴ－ＰＣＲ和流式细胞术。结果 淫羊藿降转受ＴＧＦβ２抑制的ＬＡＫ和ＣＤ３ＡＫ细胞的杀伤活性,并能部分恢复受ＴＧＦβ２抑制的ＬＡＫ细胞表面ＩＬ－２Ｒα表达和ＣＤ３ＡＫ细胞内穿孔素ｍＲＮＡ水平,以及ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性。     

淫羊藿苷调节酸性微环境减轻绝经后老年骨质疏松性疼痛

背景：前期研究已证明，淫羊藿苷在促进骨形成和抑制骨吸收方面具有重要作用，但其对骨质疏松介导的骨痛产生的影响尚未见报道。目的：探讨淫羊藿苷减轻绝经后老年性骨质疏松性骨痛的可能机制。方法：(1)动物实验：将200只C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组、模型组、模型+淫羊藿苷组，模型+碳酸酐酶Ⅱ抑制剂组。除假手术组外，其余各组摘除小鼠卵巢建立绝经后骨质疏松模型。模型+淫羊藿苷组在造模后第2天灌胃淫羊藿苷，每2周进行1次疼痛行为学实验并取材，持续20周。microCT检测股骨骨量、苏木精-伊红染色及TRAP染色检测破骨细胞活性、免疫荧光染色检测神经元形态及相关离子通道表达。(2)细胞实验：提取小鼠骨髓来源的破骨细胞前体细胞，在体外使用RANKL/M-CSF体系诱导分化为破骨细胞并添加不同浓度淫羊藿苷(1,10μmol/L)干预。采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞分化，采用鬼笔环肽染色检测破骨细胞肌动蛋白环，采用骨板吸收实验检测破骨细胞噬骨功能，采用pH计检测体系pH值，采用Western Blot检测破骨细胞分化相关蛋白表达。此外，提取小鼠背根神经节来源神经细胞并用淫羊藿苷处理，采用C...     

淫羊藿对小鼠MPS吞噬功能和红细胞免疫粘附功能的影响及相关性研究

目的 :探讨柔毛淫羊藿对MPS吞噬功能和红细胞免疫粘附功能的影响及在清除体内CIC过程中这 2种功能的相关性。方法 :采用炭粒廓清试验法、红细胞酵母菌混合花环法、PEG沉淀法进行免疫指标检测。结果 :发现柔毛淫羊藿可显著提高羟基脲所致免疫功能低下小鼠炭粒廓清指数 (P <0 0 5 ) ,升高RBC C3bR花环率 (P <0 0 1) ,降低RBC IC花环率 (P <0 0 1) ,降低血清CIC含量 (P <0 0 1) ,相关分析表明 ,各组小鼠炭粒廓清指数与RBC C3bR花环率呈正相关 (r =0 71～ 0 78) ,与RBC IC花环率呈负相关 (r =- 0 72～ - 0 80 )。结论 :柔毛淫羊藿可显著促进免疫功能低下小鼠MPS的吞噬能力和红细胞免疫粘附功能 ,降低体内CIC ,而正常的MPS吞噬功能是红细胞发挥有效免疫粘附IC作用的重要前提。     

淫羊藿苷对ConA诱导的小鼠肝脏损伤保护机理的研究

目的:利用刀豆蛋白A(ConA)诱导建立小鼠肝炎模型,观察淫羊藿苷对该损伤模型保护作用的细胞免疫学和分子免疫学机制。方法:采用C57BL/6雄性小鼠,随机分为淫羊藿苷+ConA组、生理盐水+ConA组、淫羊藿苷+生理盐水组。小鼠尾静脉注射ConA,建立T细胞介导的免疫性肝脏损伤模型;采用转氨酶试剂盒测定各组小鼠血液中转氨酶含量;组织病理学观察实验小鼠肝脏组织和肝细胞坏死变化;采用ELISA试剂盒测定血清中炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α含量;流式细胞术观察注射ConA后肝脏淋巴细胞的活化变化。结果:与ConA对照组相比,淫羊藿苷干预组小鼠血液中ALT和AST水平明显降低,P<0.01;IFN-γ、TNF-α含量明显降低,P<0.05;H&E染色可见淫羊藿苷干预组小鼠肝细胞核完整,未见炎性细胞的浸润,而ConA对照组小鼠肝细胞核固缩,部分核膜破裂,肝组织内有炎症细胞和红细胞浸润;流式细胞技术发现淫羊藿苷可明显延缓由ConA引起的肝脏NKT细胞的活化,减弱T细胞的浸润。结论:淫羊藿苷对ConA诱导的小鼠肝脏损伤有明显的保护作用,其机理可能与淫羊藿苷降低血液中IFN-γ、TNF-α表达及影响肝脏NKT细胞的活化有关。     

淫羊藿苷调节细胞增殖作用的研究进展

淫羊藿苷是传统补益中药淫羊藿的有效活性成分之一,研究发现可影响多种细胞的增殖。淫羊藿苷主要促进骨组织相关细胞增殖,包括成骨细胞、软骨细胞、骨膜细胞、间充质干细胞,淫羊藿苷抑制多种肿瘤细胞增殖,包括骨肉瘤细胞、乳腺癌细胞和卵巢癌细胞等,淫羊藿苷亦可调节其他细胞的增殖,包括神经干细胞、平滑肌细胞等。但淫羊藿苷对细胞增殖促进和抑制的双重调节机制需要进一步研究,方能为其在细胞增殖紊乱相关疾病中的应用提供理论依据。     

IL－2基因转移的瘤苗与IL－1、低剂量环磷酰胺合用后的肿瘤治疗作用及其免疫学机理

经ＩＬ－２基因转移瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺转移结节明显减少、存活期明显延长，与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ合用后，可使荷瘤小鼠的肺转移结节更少，存活期更长，特别是当ＩＬ－２基因转移的瘤苗、ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ三者合用时抗肿瘤转移效果最强。对瘤苗治疗后荷瘤小鼠体内免疫功能的研究表明，小鼠脾脏ＣＴＬ活性、ＮＫ活性、ＩＬ－２导的ＬＡＫ活性均显著增强，脾脏细胞分泌ＩＬ－２和ＴＮＦ水平也显著升高，当与ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ合用时，上述抗肿瘤免疫功能升高得更加明显，可见ＩＬ－２基因转移的瘤苗能通过有效地激活体内抗肿瘤免疫功能而具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤效果更佳，当三者同时合用时抗肿瘤效果最佳。     

淫羊藿对骨的作用研究进展

淫羊藿 (HerbaEpimdii)为小檗科植物 ,又名仙灵脾、三枝九叶草等 ,具有“补肾壮阳 ,益精健骨”之功效。淫羊藿多糖、淫羊藿苷、淫羊藿甙和黄酮类为其主要成份[1 ] 。淫羊藿的作用广泛 ,如对心血管系统、中枢神经系统、血液系统、免疫系统、抗炎、抗骨质疏松、抗衰老、抗肿瘤等均有作用 ,本文就其对骨的作用的研究现状作一综述。一、淫羊藿对成骨细胞增殖与分化的影响成骨细胞是蛋白分泌型细胞 ,能产生Ⅰ型胶原 ,合成分泌骨基质 ,具有高碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,并能吸收和转运钙离子 ,是骨形成和骨再建的重要功能细胞。目前认为 ,ALP活性…     

联合应用IL—2基因疗法和IL—3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免 …

以大剂量化疗后基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型。动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后葆瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＮＦ＿γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

淫羊藿多糖对Mφ吞噬功能和Lc自发细胞毒作用的影响

本文观察了淫羊藿多糖对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和脾脏淋巴细胞自发细胞毒作用的影响。淫羊藿多糖(40mg/kg/d×5d,po)组小鼠巨噬细胞吞噬功能比对照增强约1倍;淋巴细胞自发细胞毒作用增强50％(P<0.01)。结果表明淫羊藿多糖对巨噬细胞和淋巴细胞免疫功能具有增强作用。     

三种中药有效成分复方对阿尔茨海默病转基因小鼠大脑皮质病理学及超微结构的影响

目的:观察淫羊藿、黄芪、葛根有效成分复方对阿尔茨海默病APP/PS1双转基因模型小鼠大脑皮质病理学及超微结构的影响。方法:9月龄雄性APP/PS1双转基小鼠36只,随机等分为模型组、淫羊藿组、黄芪组、葛根组、复方组和deferoxamine组(DFO组,为阳性对照组),9月龄雄性C57小鼠6只作为阴性对照组。淫羊藿组、黄芪组、葛根组、复方组灌胃分别给予120 mg/kg淫羊藿苷、80 mg/kg黄芪甲苷、80 mg/kg葛根素、120 mg/kg淫羊藿苷+80mg/kg黄芪甲苷+80 mg/kg葛根有效成分复方,DFO组肌肉注射给予30 mg/kg DFO,模型组和阴性对照组给予1 ml生理盐水,连续用药30 d。用药结束后,采用尼氏染色、Bielschowsky银染及透射电镜技术观察各组小鼠大脑皮质的病理学变化。结果:尼氏染色显示,淫羊藿组、黄芪组、葛根组小鼠较模型组神经元水肿有所减轻,细胞数量略有增加;复方组和DFO组小鼠皮质神经细胞排列整齐且密集,胞浆中尼氏体丰富,水肿明显改善,细胞数量明显增加。改良Bielschowsky银染显示,模型组小鼠皮质可见大量的老年斑,淫羊藿组、黄芪组和葛根组仍可见一定数量的老年斑,复方组小鼠及DFO组小鼠皮质与模型组、单方组相比老年斑数量减少。透射电镜显示,复方组和DFO组小鼠皮质神经元形态比模型组、淫羊藿组、黄芪组和葛根组整齐,胞浆内可见少量脂褐素。结论:淫羊藿、黄芪、葛根有效成分复方能减少APP/PS1转基因模型小鼠大脑皮质老年斑的沉积,降低神经元的损伤。     

L7212白血病小鼠IL-2活性、IL-2 mRNA表达及复方中药清毒饮对其影响的研究

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠──近交系６１５小鼠ＩＬ－２活性和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血病小鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０５;其脾细胞中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达也明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０１。清毒饮显著提高ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２白血病小鼠脾细胞培养上清中的ＩＬ－２活性,Ｐ＜０．００１,并能显著提高其ｍＲＮＡ表达水平,Ｐ＜０．００１。结论：清毒饮可以作为生物反应调节剂用于白血病的临床治疗。     

仿生组装淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料的体外释药行为

背景:淫羊藿苷性质稳定,可促进成骨细胞的增殖,可作为一种骨诱导活性因子用于骨组织工程的研究。目的:探讨淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料的体外释药行为。方法:将载药量分别为10-7,10-6,10-5mol的淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石材料置于盛有PBS的密闭玻璃离心管中,37℃恒温振荡,分别于1,2,3,10,15,20,30,60,90 d定时收集全部溶液进行超高效液相色谱检测。通过精密度实验、重复性实验、加样回收率实验、稳定性实验考查实验方法的精密度、灵敏度和淫羊藿苷的稳定性,通过标准曲线换算供试品每次释药量,并将其进行累积绘制成释药曲线,采用Logarithmic模型对释药行为进行曲线拟合。结果与结论:实验方法的精密度、准确度与重复性良好;淫羊藿苷性质稳定,可在室温避光的环境下保存至少90 d;在1-2 000 ng质量范围内,淫羊藿苷的色谱峰面积与进样量之间呈良好的线性关系。释药初期(0-3 d),药物从支架材料中突释,约达载药量的25%,而后释药速度迅速下降,至第20天有40%-60%的药物释出,之后以低速持续释放,90 d后仍有部分药物存留于支架材料中。3种载药量淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石材料的释药行为遵循一级方程模型,所有模型均有统计学意义(P=0)。表明仿生组装淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料对淫羊藿苷具有良好的控释效果,其体外释药行为符合一级方程。     

重组痘苗病毒载体介导的IL-2基因局部转染对小鼠黑色素瘤的治疗作用

采用编码人ＩＬ－２基因的重组痘苗病毒载体（ｒＶＶ－ＩＬ－２），以ｉｎｖｉｖｏ模式体内局部转染小鼠黑色素瘤，结果肿瘤生长速度明显减慢，荷瘤小鼠存活期显著延长。体内免疫功能的检测表明，荷瘤小鼠脾细胞的ＮＫ活性及诱导后的ＬＡＫ、ＣＴＬ活性明显高于对照组，表明采用ｒＶＶ－ＩＬ－２载体介导ｉｎｖｉｖｏ的肿瘤基因治疗具有一定的前景。     

淫羊藿多糖对MΦ吞噬功能和Lc自发细胞毒作用的影响

本文观察了淫羊藿多糖对小白鼠腹腔巨吞噬细胞吞噬功能和脾脏淋巴细胞白发细胞毒作用的影响。淫羊藿多糖(40mg/kg/d×5d,PO)组小鼠巨噬细胞吞噬功能比对照增强约1倍(P<0.001);淋巴细胞自发细胞毒作用增强50％(P<0.01)。结果表明淫羊藿多糖对巨噬细胞和淋巴细胞免疫功能具有增强作用。     

不同浓度淫羊藿苷修复骨损伤:争议与探索

背景:作为淫羊藿主要有效成分之一的淫羊藿苷,对于骨损伤后的修复具有重要作用。淫羊藿苷在体内的持续有效浓度对于骨损伤的修复至关重要。目的:综述近年国内外淫羊藿苷对于骨修复的研究进展,探讨淫羊藿苷的药理活性浓度。方法:第一作者应用计算机检索2000年1月至2013年10月PubMed数据(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及CNKI中国期刊全文数据库(http://www.cnki.net/)有关淫羊藿苷对骨组织修复作用,或者与淫羊藿苷治疗骨损伤的相关基础研究文献。英文检索词"icariin,concentration,bone";中文检索词"淫羊藿苷,浓度,骨"。排除重复性研究,共检索到76篇相关文献,44篇文献符合纳入标准。结果与结论:利用淫羊藿苷的有效活性成分联合缓释支架材料,可以诱导骨髓间充质干细胞成骨分化,增强成骨细胞活性,抑制破骨细胞的吸收,从而起到修复骨组织的作用。淫羊藿苷促进细胞分化作用虽已得到肯定,但是否具有促进细胞增殖作用还存在一定的争议。研究发现,淫羊藿苷的药理活性浓度从10-8到10-5 mol/L不等,总体来看,10-8-10-5 mol/L应该是淫羊藿苷发挥其最佳药理活性可能出现的区间,但目前临床试验尚未开展,具体的持续给药浓度还不确定,这些都需要进一步研究探索。     

淫羊藿对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

背景:中药淫羊藿一直以来被用于骨质疏松的治疗和骨缺损的修复。目的:探讨淫羊藿对骨髓间充质干细胞成骨性分化的影响。方法:应用数据库文献检索的方法获取淫羊藿对骨髓间充质干细胞成骨性分化影响研究的文献,对符合研究标准的文献进行深入的分析。通过检测淫羊藿诱导骨髓间充质干细胞成骨性分化过程中碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥蛋白、转化生长因子β、骨形态发生蛋白、骨钙素、骨涎蛋白等,了解淫羊藿对骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化的机制。结果与结论:淫羊藿对骨髓间充质干细胞的影响呈剂量依赖性,在诱导培养的早期淫羊藿苷可以提高细胞的磷酸酶活性,在诱导培养的晚期增加细胞钙化结节数,促进骨钙素分泌量,显著提高转化生长因子β1、骨形成蛋白2、胰岛样生长因子1、骨桥蛋白和骨涎蛋白等的表达水平。淫羊藿对骨髓间充质干细胞的增殖和成骨性分化有促进作用,可作为一种良好的骨诱导活性因子。     

重组痘苗病毒载体介导的IL—2基因局部转染对小鼠黑色素瘤的治…

采用编码人ＩＬ－２基因的重组痘苗病毒载体（ｒＶＶ－ＩＬ－２），以ｉｎｖｉｖｏ模式体内局部转染小鼠色素瘤，结果肿瘤生长速度明显减慢，荷瘤小鼠存活明显著延长，体内免疫功能的检测表明，荷瘤小鼠脾细胞的ＮＫ活性及诱导后的ＬＡＫ，ＣＴＬ活性明显高于对照组，表明采用ｒＶＶ－ＩＬ－２载体介导ｉｎ，ｖｉｖｏ的肿瘤基因治疗具有一定的前景。     

人源化IL—2免疫毒素的构建和鉴定

利用基因工程技术在大肠杆菌表达成功人白细胞介素２（ＩＬ－２）和人血管生成素（Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｎ）的融合蛋白（ＩＬ－２－Ａｎｇ）。活性检测证明，它具有ＩＬ－２免疫毒素的作用，在体外可以杀伤ＩＬ－２依赖性ＣＴＬＬ细胞株和经ＣｏｎＡ活化的小鼠脾脏ＩＬ－２Ｒ阳性细胞。在双相混合淋巴细胞培养试验中，ＩＬ－２－Ａｎｇ可抑制淋巴细胞的增殖。在体内实验中，ＩＬ－２－Ａｎｇ注射小鼠可使其抗原活化的脾细胞数量减少。由于ＩＬ－２和Ａｎｇ均为正常人体成分，ＩＬ－２－Ａｎｇ融合分子作为人源化免疫毒素可望具有更好的应用前景。