磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和磷脂酰肌醇蛋白多糖-5在人肝癌组织中的表达及意义

目的分析磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和磷脂酰肌醇蛋白多糖-5(GPC-5)在肝细胞癌(HCC)组织中及癌旁正常肝组织中的表达规律,探讨其在HCC发生发展过程中的意义。方法以自身配对法收集30例HCC患者经手术切除后的癌灶及癌旁正常肝组织,以HE染色观察肝组织的临床病理学特征,免疫组织化学法检测GPC-3和GPC-5的表达及分布。结果 (1)癌细胞排列呈球团状和条索状,向周围肝组织浸润,部分区域有出血、坏死,并伴有肝细胞增生灶、增生结节及非典型增生结节。(2)在原发性肝癌组织中可见GPC-3阳性表达,其阳性率为70%,高于癌旁正常组织(10%)(P<0.01)。GPC-5在原发性肝癌组织中阳性表达,其阳性率为86.7%,高于癌旁正常组织(7%)(P<0.01)。结论在HCC组织中,GPC-3与GPC-5同时高表达,提示GPC-3和GPC-5均在HCC进展过程中发挥了重要的作用。     

磷脂酰肌醇蛋白3与原发性肝癌关系研究进展

磷脂酰肌醇蛋白3（Glypican 3,GPC3）为膜性硫酸乙酰肝素多糖蛋白,在胎儿肝脏表达丰富,在成人肝脏不表达,于肝癌发生时常常再激活。血清中可溶性GPC3可作为生物标志物用于肝癌诊断和预后评估。 GPC3还有望作为肝癌靶向治疗的新靶点。本文重点就GPC3在分子信号通路、免疫组化、基因水平及生态疫苗方面的最新进展进行综述。     

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在肝细胞肝癌的表达及其与术后复发的相关性

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（GPC-3）mRNA在肝细胞癌（HCC）癌组织及癌旁组织的表达及其与术后复发的相关性。方法用逆转录聚合酶链反应测定60例HCC癌组织及癌旁组织中GPC-3 mRNA的表达。PCR产物经凝胶电泳,比较HCC组织及癌旁组织中GPC-3与-βactin条带的灰度值之比,半定量分析GPC-3 mRNA的表达水平,分析术后3年不易复发HCC患者的癌组织GPC-3 mRNA的表达水平。结果 GPC-3 mRNA在HCC癌组织中高度表达,阳性率为68.3%,癌旁组织中低表达或未见表达,术后3年内未复发的HCC患者癌组织中GPC-3 mRNA呈现低表达水平,GPC-3 mRNA表达与肿瘤大小、肿瘤数目、有无包膜、门静脉癌栓、HBsAg及AFP水平无明显相关。结论 GPC-3 mRNA在HCC癌组织中的表达明显高于癌旁组织,可能是HCC的一种新的潜在的肿瘤特异标志物;癌组织中GPC-3mRNA低表达的HCC患者不易复发,可能是判断HCC进展和评价预后的一个潜在重要指标。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测2011年6月～2015年3月期间的54例HCC组织、46例癌旁组织、22例肝硬化组织、12例正常肝组织中的GPC3表达情况,分析GPC3表达与临床和病理因素的相关性。结果 正常肝组织中不表达GPC3蛋白,肝癌组织GPC3评分(7.39±3.64)和阳性率(81.48%)均显著高于癌旁组织(1.15±0.99,13.04%)、肝硬化组织(0.32±0.56,4.54%),差异有统计学意义(P<0.05); 随着肝癌临床分期的增高,GPC3评分逐步升高,Ⅲ/Ⅳ期(10.05±3.59)与Ⅰ期(4.31±3.41)、Ⅱ期(7.14±3.63)比较,差异有统计学意义(P<0.05),GPC3阳性率也升高(Ⅰ期69.23%,Ⅱ期81.81%,Ⅲ/Ⅳ期89.47%),但差异无统计学意义(P>0.05); 肝癌组织GPC3阳性率与性别、年龄、血清HBsAg、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、肿瘤直径、转移情况、临床分期无关(P>0.05),与是否并发肝硬化相关(P<0.05),GPC3高表达率与血清AFP、肿瘤直径、是否并发肝硬化、转移情况、临床分期均相关(P<0.05)。结论 GPC3在HCC的诊断方面具有重要的临床意义,其表达水平与HCC的病情进展相关。     

食管鳞癌组织中磷脂酰肌醇3-激酶和血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和血管内皮生长因子(VEGF)在食管鳞癌组织(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其与食管鳞癌细胞发生、发展与转移的关系以及两者之间的相关性。方法应用免疫组织化学链菌素亲生物素-过氧化酶连接法(SP)法检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌组织中PI3K和VEGF的表达情况。结果食管癌组织中PI3K和VEGF的阳性表达率与正常食管黏膜组织相比差异均有统计学意义,分别为71.3%(67/94)vs 4.2%(1/24)、61.7%(58/94)vs 0(均P<0.01);在淋巴结转移阳性组两者的表达显著高于淋巴结转移阴性组,分别为92.0%(46/50)vs 47.7%(21/44)、76.0%(38/50)vs 45.4%(20/44)(均P<0.01)。VEGF的表达与肿瘤组织类型、浸润深度等因素有关(P<0.01);PI3K与VEGF表达有关联性(C=0.311,P<0.05)。结论 PI3K、VEGF表达与食管癌发生发展及侵袭转移有关,可作为评价食管鳞癌生物学行为的指标。     

探讨磷脂酰肌醇蛋白3与高尔基体糖蛋白73在肝细胞癌中的早期诊断价值

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白3(GPC3)与高尔基体糖蛋白73(GP73)在肝细胞癌中的早期诊断价值。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定91例肝细胞肝癌患者血清中GPC3与GP73水平,并用化学发光法同时测定其血清中甲胎蛋白(AFP)水平,以56例肝炎后肝硬化者及50例体检健康者作为对照组,分析三项指标在各组中的表达水平并做出受试者工作曲线(ROC曲线)选取最佳截断值评价其在肝细胞肝癌中的诊断效能。结果 GPC3、GP73及AFP在肝细胞肝癌患者血清中水平分别为(4.715±2.781)、(28.591±18.584)、(1 051.203±655.833)ng/mL。与肝硬化组及对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。得到的ROC曲线表明GPC3的曲线下面积最大为0.852,GP73次之为0.830,APF最小为0.77。通过ROC曲线对三项指标选取最佳诊断截断值,GPC3的截断值为1.41ng/mL,GP73的截断值为18.2ng/mL,AFP的截断值为13.8ng/mL,根据所得截断值得出GPC3、GP73、AFP单独及三者联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和检验符合率,结果以三者联合检测最高,分别为81.32%(74/96)、89.28%(50/56)、92.5%(74/80)、74.63%(50/67)、84.35%(124/147)。结论GPC3与GP73对肝细胞肝癌的诊断较AFP好,在肝癌的早期诊断中将AFP、GPC3与GP73联合检测的价值更高。     

糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的表达在肺癌诊断中的意义

目的:探讨肺癌患者糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(CPI-PLD)的活性变化,为肺癌患者预后判断提供依据.方法:利用具有糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的胎盘碱性磷酸酶(PLAP)做底物,通过TX-114分相,定量检测外周血单个核细胞和血浆中GPI-PLD活性,并采用荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中GPI-PLDmRNA水平,分析其表达量与肺癌之间的关系.结果:肺癌患者外周血单个核细胞和血浆中GPI-PLD酶活性分别为(24.15±2.33)%和(29.71±1.32)%,明显低于正常人(P＜0.001),且肺癌患者单个核细胞GPI-PLD活性仅为其血浆中酶活性水平的81.29%,两者之间差异有显著性(P＜0.05);肺癌患者外周血单个核细胞中GPI-PLD mRNA表达平均值为0.44±0.11,明显低于正常人(P＜0.001).结论:GPI-PLD在肺癌患者中的活性及表达明显降低,有可能作为肺癌预后判断的指标之一.     

磷脂酰肌醇-3激酶信号途径在红细胞生成过程中的作用

红细胞生成素（Epo）是调节红细胞生成的重要细胞因子。磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）信号途径是Epo通过结合红细胞生成素受体（EpoR）介导的胞内信号途径之一，在调节红系造血祖细胞生存、增殖和分化等过程中起重要作用。本文介绍了EpoR介导PI3K激活的途径以及所需要的其他蛋白质分子，PI3K在激活后的下游信号分子及其在调节红细胞生成方面的作用。     

磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化蛋白激酶B在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)在人膀胱尿路上皮癌组织中的表达特征及临床意义。方法 2005年6月-2010年7月,采用免疫组织化学法检测40例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常膀胱组织PI3K与p-Akt的表达,并对结果进行统计学分析。结果 PI3K和p-Akt在正常膀胱黏膜组织阳性表达率均低于膀胱尿路上皮癌组织中,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一标本中PI3K和p-Akt的表达不具有相关性(r=0.051,P=0.747)。结论 PI3K、p-Akt在膀胱尿路上皮癌中高表达,两者在膀胱尿路上皮癌中共同促其发展,但其在膀胱尿路上皮癌的预后和进展中的作用尚不明确。     

运动对胰岛素抵抗大鼠血清视黄醇结合蛋白4及骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的研究运动对胰岛素抵抗（IR）大鼠血清视黄醇结合蛋白4（RBP4）及骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）表达的影响。 方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、IR组及运动组,后2组大鼠均给予高糖高脂饲料喂养8周,经证实IR造模成功后,IR组及运动组大鼠继续给予高糖高脂饲料喂养6周,运动组同时进行为期6周的游泳训练。于实验进行14周末时检测各组大鼠体重（BW）,然后处死大鼠取血检测血糖（FPG）、血清胰岛素（FINS）、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,选用ELISA技术检测血清RBP4水平,采用免疫组化法检测大鼠骨骼肌中PI3K表达;另外提取各组大鼠肠系膜、附睾、反折腹膜脂肪等组织称重,计算内脏脂肪重量与体重的比值。 结果（1）运动组大鼠血清RBP4、TC、TG、FPG水平均显著低于IR组;IR组大鼠内脏脂肪重量、内脏脂肪重量/体重比值、血清RBP4、FINS、LDL、HOMA-IR均高于其它两组(P<0.01);血清HDL水平均低于其它两组(P<0.01)。（2）运动组大鼠骨骼肌PI3K表达强度明显高于IR组(P<0.01)。（3）通过相关性分析发现,IR大鼠血清RBP4与FINS、内脏脂肪重量/体重比值、LDL、HOMA-IR具有正相关性;与HDL、骨骼肌PI3K水平具有负相关性。 结论运动能下调IR大鼠血清RBP4水平及增强骨骼肌PI3K表达,对改善机体胰岛素敏感性具有重要意义。     

肺鳞癌及腺癌中NGAL表达的免疫组化研究

目的：探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）在肺鳞癌及腺癌组织及远癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组织化学方法检测 NGAL在35例肺鳞癌、30例肺腺癌组织及相应42例癌旁肺组织中的表达,分析其与病变类型的关系及其在癌组织的表达率与临床病理特征的联系。结果 NGAL在肺腺癌组织中的阳性表达率明显高于肺鳞癌组织;而二类癌组织中的阳性表达率又明显高于相应的癌旁组织,淋巴结转移组高于无淋巴结转移组。阳性表达与患者年龄、性别、吸烟情况、病理类型、分化程度无关（P＆gt;0.05）。结论 NGAL在肺鳞癌及腺癌肿瘤组织内的高表达,且与肿瘤类型有关,有可能成为预测肺鳞癌及腺癌发生发展的肿瘤标志物。     

磷脂酰肌醇-3-激酶信号途径和儿童急性淋巴细胞白血病

磷脂酰肌醇-3-激酶以其广泛的分布,参与并产生酯类第二信使,激活细胞内酶联级反应,调节细胞增殖、分化和凋亡而成为研究细胞信号转导机制的热点.本文重点介绍磷脂酰肌醇-3-激酶结构与功能,该途径激活后抗凋亡作用以及其参与儿童急性淋巴细胞白血病发病的可能机制.     

磷脂酰肌醇3激酶通过mDial参与调控凝血酶诱导的血小板聚集

目的 探讨mDial(mammalian diaphanous 1)在人血小板中的表达和血小板聚集过程中的作用以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)对该过程的调控作用.方法 采用血小板聚集仪检测PI3K抑制剂和抗mDial抗体导入后对人血小板聚集率的影响;Western blot法检测mDial在血小板静止及活化过程中的表达及其与肌动蛋白细胞骨架的关系.结果 mDial在血小板静止、凝血酶诱导的铺展或聚集血小板内表达水平没有明显差异;凝血酶诱导血小板聚集过程中,mDial从Triton-X100可溶性(胞质)部分向Triton-X100不可溶性(细胞骨架)部分转位;抗mDial抗体导入血小板后能够抑制凝血酶诱导的血小板聚集;PI3K抑制剂渥曼青霉素及Ly294002能够抑制血小板聚集,抑制mDial从Triton-X100可溶性部分向Triton-X100不可溶性部分的转位.结论 PI3K通过mDial参与调控凝血酶诱导的血小板聚集过程中肌动蛋白细胞骨架的重构.     

磷脂酰乙醇胺结合蛋白过表达CHO细胞的建立及对细胞周期的影响

目的建立过表达磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP）的CHO细胞,并研究PEBP过表达对CHO细胞周期的影响。方法将PEBP克隆于潮霉素B抗性的表达质粒,转染CHO细胞,潮霉素B压力下筛选细胞单克隆,流式细胞法检测细胞周期。结果建立了与内源性表达量相当的,可稳定过表达外源性PEBP的CH0细胞,与对照细胞克隆比较,过表达PEBP的CHO细胞周期无显著变化。结论PEBP过表达没有导致CH0细胞周期的改变。     

体外神经干细胞培养过程中蛋白激酶磷脂酰肌醇-3激酶/AKT信号途径的作用

目的:探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3kinase,PI3K)/AKT信号途径在体外培养神经干细胞存活、分化中的作用。方法:实验于2001-11/2004-04在重庆医科大学神经病学研究所完成。分为对照组、PI3K特异性抑制剂wortmannin组和LY294002组;采用间接免疫荧光法检测nestin,NF-200和GFAP的表达;TUNEL评价细胞凋亡率;WesternBlot法检测磷酸化的AKT,caspase-9和bad的表达。结果:随着wortmannin和LY294002浓度增大,神经干细胞的形态变化逐渐明显,而且细胞凋亡率也逐渐增加。低浓度时(wortmannin浓度为5nmol/L,LY294002浓度为2μmol/L),神经干细胞凋亡率与对照组无显著性意义(P>0.05);高浓度时(wortmannin浓度为50,100nmol/L,LY294002浓度为50,100μmol/L),神经干细胞凋亡率与对照组、低浓度组有非常显著性意义(P<0.01)。WesternBlot结果提示,随着PI3K特异性抑制剂浓度增大,磷酸化AKT的表达逐渐减弱。当高浓度wort-mannin(20nmol/L)和LY294002(10μmol/L)抑制了AKT磷酸化后,磷酸化的caspase-9,Bad表达减弱。此外,将wortmannin组和LY294002组存活的细胞接种后,分化后细胞的NF-200,GFAP表达无显著性意义。结论:神经干细胞存活依赖于PI3K/AKT途径的活化,其机制可能是PI3K/AKT活化后,促进了Bad和caspase-9等蛋     

磷脂酰肌醇3—激酶在结直肠癌肝转移原发灶及转移灶中的表达及临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PIK3CA）与结直肠癌肝转移的相关性及临床意义。方法 收集2020—2022年内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院经外科手术切除且病理类型为腺癌的结直肠癌肝转移患者30例,不伴有肝转移结直肠癌患者30例,通过免疫组织化学染色法检测PIK3CA蛋白在结直肠癌患者原发病灶、结直肠癌肝转移患者原发灶及肝转移灶组织中的表达情况,同时分析PIK3CA蛋白表达与结直肠癌肝转移患者临床病理特征之间的关系。结果 (1)试验组与对照组患者性别、年龄、原发肿瘤位置、大体类型差异无显著性（P>0.05）,两组患者在PIK3CA蛋白表达水平、T分期和N分期方面的差异有显著性（P<0.05）;(2)结直肠癌原发灶和肝转移灶中PIK3CA的表达差异无显著性（P>0.05）;结直肠癌原发灶与肝转移灶PIK3CA高表达结果一致性较好（κ=0.842,P<0.001）;(3)结直肠癌伴肝转移患者PIK3CA蛋白的表达水平与T分期（P<0.05）、病理大体类型（P<0.01）、肿瘤细胞分化程度（...     

磷脂酰肌醇-3激酶在间充质干细胞成肌分化中的表达及肌损伤修复中的作用

目的：以5-氮杂胞苷(5-azacytidine，5-Aza-CR)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)成肌分化，探讨生肌调控因子Myf5的表达情况及磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinases，P13K)在此分化全过程中的作用。方法：分离、纯化及扩增MSCs，以5-Aza诱导其成肌分化，RT-PCR测定Myf5的表达，免疫组化检测α-sarcomeric表达；Western-blot检测LY294002抑制前后磷酸化Akt蛋白水平的变化。结果：LY294002作用后，Myf5表达延迟至诱导后12h；诱导后10d，部分MSCs表达α-sarcomeric；磷酸化Akt在5-Aza诱导后蛋白水平逐渐增强，LY294002抑制明显下降。 结论：MSCs成肌分化过程中，PI3K是重要的正向信号转导通路。     

体外神经干细胞培养过程中蛋白激酶磷脂酰肌醇-3激酶／AKT信号途径的作用

目的：探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase，P13K)／AKT信号途径在体外培养神经干细胞存活、分化中的作用。方法：实验于2001-11／2004-04在重庆医科大学神经病学研究所完成。分为对照组、P13K特异性抑制剂wortmannin组和LY294002组；采用间接免疫荧光法检测nestin，NF-200和GFAP的表达；TUNEL评价细胞凋亡率；Western Blot法检测磷酸化的AKT，caspase-9和bad的表达。结果：随着wortmannin和LY294002浓度增大，神经干细胞的形态变化逐渐明显，而且细胞凋亡率也逐渐增加。低浓度时(wortmannin浓度为5nmol／L，LY294002浓度为2μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组无显著性意义(P&;gt;0．05)；高浓度时(wonmannin浓度为50，100nmol／L，LY294002浓度为50，100μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组、低浓度组有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。Western Blot结果提示，随着PI3K特异性抑制剂浓度增大，磷酸化AKT的表达逐渐减弱。当高浓度woftmannin(20nmol／L)和LY294002(10μmol／L)抑制了AKT磷酸化后，磷酸化的caspase-9，Bad表达减弱。此外，将wortmannin组和LY294002组存活的细胞接种后，分化后细胞的NF-200，GFAP表达无显著性意义。结论：神经干细胞存活依赖于PI3K／AKT途径的活化，其机制可能是PI3K／AKT活化后，促进了Bad和caspase-9等蛋白的磷酸化，抑制了细胞凋亡事件的发生。但是PI3K／AKT途径可能在神经干细胞的分化中的作用甚微。     

c-myc在食管鳞癌、肺鳞癌、胃腺癌组织中的表达及对比分析

目的 研究原发于食管鳞状上皮的食管鳞癌和由肺纤毛柱状上皮化生的肺鳞癌中c-myc的表达是否存在差异,同时比较食管鳞癌、肺鳞癌和胃腺癌组织中c-myc表达的差异,初步分析不同组织来源的癌细胞中c-myc表达差异.方法 采用链霉素抗生物素-过氧化物酶(SP)法进行免疫组化染色,检测c-myc在食管鳞癌、肺鳞癌和胃腺癌组织中的表达.结果 c-myc在食管鳞癌组织中的阳性表达率为67.4%,在肺鳞癌组织中阳性表达率为73.3%,均明显高于在胃腺癌组织中阳性表达率(42.9%),差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 食管鳞癌和肺鳞癌虽然组织来源不同,但有共同的组织学基础,表达有其共性.c-myc在鳞癌组织中的阳性表达率高于腺癌,这种差异可能与组织特异性表迭有关.     

磷脂酰肌醇-3激酶上的一段多肽对Jurkat细胞的周期阻滞作用

视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）通过与转录因子E2F的结合调控细胞的增殖.磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）是生长因子调节通路中的基本成分,也参与细胞的增殖和分化。近年来的研究表明P13K可通过AKT途径调控细胞周期，Xia等发现，P13K的调节亚基p55γN端有1个含24个氨基酸的多肽（N24^p55γ），可直接与Rb蛋白结合，参与调控Rb蛋白对细胞周期的调节作用，其过表达可与内源性的p55γ竞争性地和pRb结合，阻断pRb-E2F介导的信号传导通路，从而抑制肿瘤细胞的增殖。