氮源和碳源对冬凌草愈伤组织生长及迷迭香酸的积累的影响

目的 研究碳源、氮源对冬凌草愈伤组织生长及其内迷迭香酸积累的影响.方法 改变培养基中蔗糖浓度和碳源种类,考察不同碳源及其浓度对愈伤组织生长和迷迭香酸积累的影响.在总氮源不变的情况下改变NO3-/NH4+的比例,考察不同NO3-/NH4+比例对愈伤组织生长和迷迭香酸积累的影响.结果 蔗糖是冬凌草愈伤组织培养中的最佳的碳源,其浓度为3%时,有利于冬凌草愈伤组织的生长和迷迭香酸的积累;NO3-/NH4+比例为1∶1时,愈伤增值倍数最高;NO3-/NH4+比例2∶1时,迷迭香酸的积累量最大.结论 实验确定了冬凌草愈伤组织培养的最佳碳源种类、浓度及氮源比例,表明不同碳源、氮源对冬凌草愈伤组织生长和次生代谢物合成有显著影响.     

不同生长年限川白芷光合生理特性研究

该研究以不同生长年限的秋播川白芷为材料,探究一年生和二生年川白芷叶片最适光合响应曲线拟合模型以及两者的光合生理特性差异。试验结果表明,不同生长年限川白芷叶片最适光响应曲线拟合模型均为直角双曲线修正模型,其一年生植株叶片光饱和点为1 600μmol·m-2·s-1,二年生植株叶片光饱和点为1 700μmol·m-2·s-1;光补偿点分别为17. 98,52. 23μmol·m-2·s-1,符合典型阳生植物特征。不同生长年限川白芷叶片净光合速率、蒸腾速率、气孔导度日变化曲线均为单峰型,二年生川白芷叶片净光合速率和蒸腾速率日均值显著高于一年生川白芷,而气孔导度日均值无显著差异。不同生长年限川白芷叶片净光合速率都与气孔导度呈极显著正相关。一年生和二年生川白芷净光合速率与胞间CO2浓度分别呈极显著和显著负相关。一年生川白芷的蒸腾速率与有效光合辐射强度和空气温度呈显著正相关,与胞间CO2浓度呈极显著负相关;二年生白芷的蒸腾速率与有效光合辐射强度呈极显著正相关,而与胞间CO2浓度呈显著负相关。综上,二年生川白芷叶片光合效率高于一年生川白芷,但利用弱光能力不及一年生者,更适合种植于阳光充足地方。     

不同附加物对甘草愈伤组织培养中黄酮类化合物形成的影响

 目的研究了酵母提取物、水解酪蛋白、真菌诱导子、茉莉酸及稀土元素等对甘草愈伤组织中甘草黄酮类化合物合成的影响。方法在培养基中添加各种附加物,研究其对甘草黄酮类化合物合成的影响。结果 0.1％的酵母提取物可使培养物中黄酮类化合物的含量提高76.8％,甘草查尔酮含量比对照提高7.5倍。水解酪蛋白在0.05％时,培养物中黄酮类化合物含量达最大值,为对照的1．7倍,其中甘草查尔酮的含量在0.1％时最高,为对照的3．2倍。50 mL培养基中加入真菌诱导子2 mL,甘草培养物中黄酮类化合物的含量为149．58μg·g^-1,比对照(85.26μg·g^-1)增加75％。10.0μmol·L^-1茉莉酸使黄酮类化合物的含量比对照提高了41％。低浓度的稀土元素Eu³⁺对黄酮类化合物的生物合成具有明显的促进作用,培养基中添加0.1 mg·L^-1的稀土元素Eu³⁺最有利于黄酮类化合物的积累。此时,黄酮类化合物的含量为对照的2.7倍,其中甘草素的含量是对照的4倍。结论在甘草愈伤组织培养过程中,添加酵母提取物、水解酪蛋白、真菌诱导子、茉莉酸及稀土元素等是提高黄酮类化合物的有效手段之一。     

外翻肠囊法研究白芷有效组分对配伍"对药"有效成分肠吸收的影响

目的: 考察白芷有效组分香豆素和挥发油分别对配伍"对药"葛根中葛根素、黄芩中黄芩苷、川芎中阿魏酸及甘草中甘草酸、甘草苷肠吸收的影响,探讨白芷对配伍"对药"有效成分肠吸收的影响规律。方法: 采用大鼠外翻肠囊吸收模型,分别考察白芷有效组分配伍各对药(葛根、黄芩、川芎、甘草)前后,葛根中葛根素、黄芩中黄芩苷、川芎中阿魏酸及甘草中甘草酸、甘草苷在不同肠段的吸收情况。结果: 白芷有效组分能显著促进葛根中葛根素(提高1.70倍)、黄芩中黄芩苷(提高4.74倍)的肠吸收作用;白芷有效组分对川芎中阿魏酸肠吸收无显著影响;白芷有效组分对甘草中甘草苷、甘草酸具有显著的肠吸收抑制作用。结论: 白芷-葛根,白芷-黄芩药对配伍应用产生协同治疗作用,不仅表现为不同活性成分作用于机体的不同靶点,还表现为白芷活性成分促进其配伍"对药"活性成分肠道转运。白芷-川芎、白芷-甘草配伍机制可能与白芷对甘草中活性成分肠吸收的影响无关。     

3种乳化体系乳膏中黄芩苷、苦参碱、甘草次酸和大黄素的体外经皮渗透的影响研究

研究烷基糖苷、司盘-吐温和A6/25 3种乳化体系对乳膏中黄芩苷、苦参碱、甘草次酸和大黄素的体外经皮渗透的影响。以改良的Franz扩散池和离体小鼠皮进行体外渗透实验,采用HPLC同时测定3种不同乳化体系乳膏中4种中药单体的累积透过量与皮肤滞留量,并考察不同中药成分在相同乳化体系乳膏及不同乳化体系乳膏对相同中药成分的累积透过量、皮肤滞留量及透皮吸收速率的影响。结果表明,不同中药成分在相同乳化体系的累积透过量及透皮吸收速率大小为苦参碱黄芩苷甘草次酸大黄素。不同乳化体系乳膏对相同中药成分的累积透过量及透皮吸收速率的影响除甘草次酸和大黄素无显著性差异外,司盘-吐温乳化体系的累积透过量及透皮吸收速率较大。各中药成分在3种乳化体系中累积透过量及透皮吸收速率规律具有一致性。而不同乳化体系对相同中药成分的累积透过量、皮肤滞留量及透皮吸收速率的影响并无一致性规律。     

氮素不同形态配比对夏枯草苗期生长 及光合特性的影响

目的:探讨不同氮素形态对夏枯草生长及光合特性的影响,为夏枯草氮肥的合理施用提供一定依据.方法:采用水培法,测定在等氮水平(15mmol·L-1)不同铵硝比处理下,夏枯草叶面积、生物量、叶绿素含量及光合相关参数.结果:随着铵硝比的下降,夏枯草叶面积先增加后下降,全铵营养(NH+4-N:N0-3-N为100:0)下最小,当NH+4-N:NO-3-N为25:75时最大;随硝态氮比例的提高,夏枯草全株鲜重不断增加,在全硝处理时达到最大,是全铵处理的5.11倍;而全株干重则以NH+4-N:NO-3-N为25:75的最大,且与全硝处理无显著差异.铵硝比为50:50时叶片中总叶绿素、类胡萝卜素含量最高.铵硝比为25:75时,夏枯草净光合速率(Pn)最大,全铵处理下最低.结论:在总氮水平为15mmol·L-1下,适量增加硝态氮比例,有利于促进夏枯草苗期生长、提高干物质积累和净光合速率.     

离子液体双水相萃取分离芦丁的研究

建立了由亲水性离子液体四氟硼酸1-丁基-3-甲基咪唑([BMIm]BF1)和(NH1)2SO4形成的双水相体系萃取分离芦丁的新方法.分别研究了盐的浓度、离子液体浓度、芦丁加入量和溶液pH值对芦丁萃取率的影响.结果表明,(NH4)2SO4加入量在1.5g,离子液体加入量在1.5～2.0mI,,芦丁加入量在1.0～1.5mL,溶液酸度在pH4～6范围,离子液体双水相体系对芦丁有较高的萃取率(E%＞90%).     

不同生长年限滇龙胆中阴离子含量变化

目的:建立滇龙胆中阴离子含量的快速测定方法,同时为滇龙胆合理施肥和规范化栽培提供依据。方法:采用超声辅助提取-离子色谱(UAE-IC)法快速、准确测定了滇龙胆不同年限、不同部位中F-、Cl-、NO2-、NO3-、PO43-5种离子。结果:所测定的滇龙胆样品中除NO2-未检测出外,其余离子含量NO3->PO34->F->Cl-;NO3-、PO34-、F-、Cl-4种离子在1.5年时含量最高,2年生含量最低,2～3年生呈上升趋势。NO 3-和Cl-离子含量随根、茎、叶、花4个部位呈先增加后下降的趋势;PO43-和F-在四个部位中呈先下降后增加的趋势。各离子加标回收率为96.47%～117.23%。结论:该方法操作简便、准确性好、结果可靠,测定滇龙胆中无机阴离子含量获得满意结果。     

甘肃一、二年生红芪与黄芪黄酮类成分指纹图谱分析

目的:建立甘肃不同产地一、二年生红芪和黄芪中黄酮类成分的指纹图谱,为科学评价甘肃红芪和黄芪的内在质量提供参考。并阐明红芪和黄芪能否替代使用的依据。方法:应用HPLC,测定甘肃一年生、二年生各28批红芪和28批黄芪黄酮类成分指纹图谱。色谱条件:Agilent ZROBAX-C18色谱柱,流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长254 nm,柱温35℃。结果:甘肃各产地一、二年生28批红芪有19个共有峰,28批黄芪有14个共有峰,一年生28批红芪和28批黄芪有9个共有峰,二年生28批红芪和28批黄芪有8个共有峰。甘肃各产地一年生红芪平均相似度为0.976,二年生红芪平均相似度为0.888;甘肃各产地一年生黄芪平均相似度为0.986,二年生黄芪平均相似度为0.911,一年生红芪和黄芪相似度为0.534,二年生红芪和黄芪相似度位0.490。结论:该方法重复性好,建立的指纹图谱为甘肃红芪和黄芪的质量控制及评价提供依据。随着药材生长年限的增加,甘肃红芪相似度降低,黄芪相似度降低,红芪和黄芪相似度降低。从红芪和黄芪黄酮类成分指纹图谱相似度来看,二者一年生和二年生的相似度均很低,差异较大,不适合替代使用。     

甘肃红芪中黄芪甲苷存在的判定以及一年生、二年生红芪、黄芪皂苷和总黄酮含量对比

目的:判定甘肃红芪是否含有黄芪甲苷;测定甘肃不同产地二年生红芪和黄芪总黄酮总皂苷含量,对比分析一年生、二年生红芪和黄芪总黄酮总皂苷含量。方法:以黄芪甲苷为对照品,采用HPLC-MS联用法检测红芪和黄芪中黄芪甲苷的含量;以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为对照品,检测波长为260 nm,采用紫外分光光度法测定红芪和黄芪中总黄酮的含量;以黄芪甲苷为对照品,采用香草醛-高氯酸显色法,检测波长为540 nm,可见分光光度法测总皂苷的含量。结果:测定样品中,甘肃红芪中黄芪甲苷的质量分数为0.055 5μg·g-1,黄芪中黄芪甲苷的质量分数为37.9μg·g-1;二年生红芪总黄酮质量分数,陇西等地为0.449%,宕昌为0.370%,武都为0.394%,全省平均为0.402%;黄芪总黄酮质量分数,陇西等地为0.374%,宕昌为0.542%,武都为0.424%,全省平均为0.452%;二年生红芪总皂苷质量分数,陇西等地为3.68%,宕昌为3.89%,武都为4.24%,全省平均为3.95%,黄芪总皂苷质量分数,陇西等地为4.63%,宕昌为5.11%,武都为4.80%,全省平均为4.86%。结论:甘肃红芪中含有黄芪甲苷,红芪含有的黄芪甲苷仅为黄芪的1/682;甘肃不同产地一年生、二年生红芪总黄酮、总皂苷含量均低于黄芪。二年生红芪和黄芪中总黄酮、总皂苷含量均高于一年生。一年生、二年生红芪中总黄酮、总皂苷含量均为武都优于宕昌,一年生、二年生黄芪总黄酮、总皂苷含量均为宕昌优于武都。红芪为武都地区二年生质量最优,黄芪为宕昌地区二年生质量最优。黄芪甲苷、总皂苷、总黄酮含量差异明显,二者不适合替代使用。     

培养基中碳源和氮源对甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物合成的影响

目的：研究碳源和氮源对甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物形成的影响。方法：在培养基中添加不同质量分数的蔗糖和果糖以及不同比例的NH⁺₄和NO^-₃,进行甘草愈伤组织的诱导和培养,并用HPLC检测愈伤组织中黄酮类化合物的含量。结果：2种碳源中,甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物合成均以果糖为碳源时高。在用2%果糖作为碳源时,培养物中5种黄酮类化合物的含量总和是3%蔗糖作为碳源的2倍。果糖作为碳源,在2%～6%时,随着质量分数的增加,培养物中5种黄酮类化合物的含量总和呈下降趋势,但其中甘草查尔酮的含量却增加5倍以上。硝态氮有利于甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的积累。当NH⁺₄/NO^-₃浓度比例为1/2时,甘草愈伤组织中5种黄酮类化合物含量的总和达最大值,为151.47 μg·g^-1。铵态氮抑制甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的形成。结论：果糖作为碳源最有利于甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物的生物合成。硝态氮有利于甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的积累。     

氮素供给对甘草根系呼吸动态及生物量积累的影响研究

探究不同氮素供给对甘草根系呼吸及生物量积累的影响规律,揭示通过影响根系呼吸来调控甘草生物量积累的途径。在6月至10月,每7 d对控制环境条件下的甘草播种苗施用氮(N)浓度为0,0.5,1,2,4,8 mmol·L-1的全营养液,每月月底测定甘草不同级别根系呼吸速率及生物量,分析甘草根系生物量与呼吸速率的相关性。研究结果表明,氮素显著影响甘草根系呼吸速率和根系生物量积累,通过相对抑制生长呼吸速率以提高生物量而使两者呈负相关,并在8 mmol·L-1氮浓度处理时有最佳的抑制甘草根呼吸而提高根系生物量的效果。     

甘草最佳软化方法探讨

目的：为保证甘草饮片的质量提供理论依据。方法：采用正交试验的方法对甘草作系统研究,结果：甘草软化的最佳浸泡温度60℃,时间为1h加水量为4倍,结论：A城草浸泡的温度、时间、加水量对饮片的质量有影响。     

加味芍药甘草汤与羌活胜汤治疗颈椎病的疗效观察

目的：观察加味芍药甘草汤治疗颈型颈椎病的临床疗效。方法：颈型颈椎病患者122例，随机分成治疗组和对照组，分别给与加味芍药甘草汤和羌活胜湿汤治疗，并观察对比两组疗效。结果：治疗组总有效率95．16％；对照组总有效率71．67％，两者经统计学处理，有显著差异。结论：加味芍药甘草汤内服治疗颈型颈椎病疗效优于羌活胜湿汤内服。     

高效液相色谱法测定甘草植物体内脱落酸含量的研究

目的：建立甘草植物抗旱信号传导物质脱落酸的含量测定方法,为揭示甘草抗旱性与有效成分积累相关机制奠定理论依据。方法：甘草须根中的脱落酸用80%的甲醇抽提,抽提液经过盐酸酸化、乙酸乙酯萃取最终得到供试品溶液,应用Waters-C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,进行二元梯度洗脱;流速：0.6mL.min-1,紫外检测波长为260nm,柱温：25℃。结果：脱落酸在0.0336～0.672μg线性关系良好（r=0.9999）,甘草样品平均回收率90.35%,RSD为1.70%,甘草须根中的ABA含量为0.077～0.188mg.g-1。结论：该法灵敏度高、专一性强、重复性好,为进一步开展甘草抗旱性与有效成分积累相关机制的研究提供依据。     

甘草种子与种苗质量分级标准研究

目的:研究甘草种子、种苗质量分级标准,为甘草药材规范化生产奠定基础。方法:以全国主产区所流通的甘草种子、种苗为样本,通过收集种子的发芽率、净度、含水量、千粒质量,种苗的根长、芦头直径和百株质量等指标信息,采用K-均值聚类分析法、标准差法、平均值法并结合生产实践对甘草种子、种苗进行分级,并开展田间栽培比较试验,对等级划分的合理性进行验证。结果:甘草种子质量等级划分为3个等级,各级甘草种子的千粒质量不低于8 g,含水量不低于10%,一级种子:发芽率≥90%,净度≥90%;二级种子:90%>发芽率≥85%,90%>净度≥85%;三级种子:85%>发芽率≥80%,85%>净度≥80%。甘草种苗质量等级划分为3个等级,一级种苗:根长≥45 cm,芦头直径≥0.8 cm,1.3 kg≤百株质量<0.8 kg;二级种苗:45 cm>根长≥35 cm,0.8 cm>芦头直径≥0.6 cm,0.8 kg≤百株质量<0.4 kg;三级种苗:35 cm>根长≥25 cm,0.6 cm>芦头直径≥0.4 cm,0.4 kg≤百株质量≤0.2 kg。结论:经验证,甘草种子、种苗质量等级划分合理,便于生产实践应用。     

乌拉尔甘草EST资源的SSR信息分析

目的:为了在乌拉尔甘草中开发功能性EST-SSR分子标记,分析乌拉尔甘草EST-SSRs特征。方法:从NCBI公共数据库中下载乌拉尔甘草EST序列,运用DNAstar软件中的Seqman Pro程序,对下载序列进行拼接和聚类,去除冗余序列,利用SSRIT软件筛选重复序列长度≥20 bp的二、三、四、五核苷酸4种类型的SSR,统计分析乌拉尔甘草EST-SSR的特征。结果:从NCBI公共数据库中下载50666条乌拉尔甘草EST序列,剔除冗余序列,得到全长为9.28×106bp的无冗余EST序列11100条。在这些序列中搜索出752条EST序列含有963个SSR,占无冗余EST序列的8.68%,平均每9.64 kb EST出现1个SSR位点。二核苷酸重复基元SSR出现频率最高(43.41%),其次是三核苷酸(41.95%),AG/TC、GA/CT和CTT/GAA是二、三核苷酸中的优势重复基元。乌拉尔甘草EST-SSR以4～10次重复为主,基序长度主要集中于20～30bp。结论:乌拉尔甘草EST-SSR的出现频率高,重复类型丰富,理论上表明这些EST-SSR具有较高的可用性。本文通过对乌拉尔甘草EST资源的SSR信息的研究,为分子水平和生物信息学角度上开发乌拉尔甘草的SSR功能性标记提供了候选序列。     

甘草浸膏吸湿性的研究

目的:对甘草浸膏的吸湿性进行研究,筛选出最优的辅料配方,并测得最佳处方的临界相对湿度,为工业化生产提供合理的相对湿度环境。方法:采用在25℃,不同的相对湿度下选用多种辅料,比较其吸湿性。结果:甘草浸膏粉与乳糖、微晶纤维素配伍(1∶0.5∶0.5)为最合适处方,并测其临界相对湿度为60%。结论:利用以上结果可以解决工业生产中药浸膏易吸湿结块等问题。     

甘草种子处理方法

应用增温复浸法和碾米法处理甘草种子,使甘草种子由自然出苗率不足20％提高到85-90％。这二种方法操作简便,易被药农接受,适宜于大面积种植甘草时进行种子处理。