辐射诱导小鼠外周血网织红细胞微核与骨髓嗜多染红细胞微核的剂量-效应关系

目的 观察X射线照射后小鼠外周血网织红细胞微核(MN-RET)和骨髓嗜多染红细胞微核(MN-PCE)的变化,为探索快速、高通量的辐射生物剂量计奠定基础.方法 54只ICR雄性小鼠随机分为3组,每组18只,分别施予X射线全身照射,吸收剂量分别为0、0.5、1、2、4和5 Gy.在照射后24、48和72 h,分别采用流式细胞术(FCM)和人工镜检的方法,观察外周血MN-RET和骨髓MN-PCE的变化.结果 在0.5～5.0 Gy范围内,3个时间点外周血MN-RET和骨髓MN-PCE均随剂量的增加而升高,剂量-效应曲线可拟合成直线回归方程(t=10.26～25.77,P<0.05);外周血MN-RET和骨髓MN-PCE之间明显相关(r=0.986-0.996,P<0.05).结论 FCM检测MN-RET有望成为快速、高通量的辐射生物剂量计或辅助诊断方法.     

60Co γ射线诱发小鼠外周血网织红细胞微核率的研究

目的 通过观察不同剂量⁶⁰Co γ射线照射后小鼠外周血网织红细胞微核率的变化,为使外周血网织红细胞微核成为探索快速高通量的生物剂量计提供科学依据。方法 ⁶⁰Co γ射线照射ICR小鼠,按不同照射剂量分为0、0.5、1、2、4和8 Gy组,眼球取血,流式细胞术(FCM)检测和显微镜观察小鼠外周血网织红细胞微核率的变化。结果 流式细胞术检测网织红细胞微核率随剂量增加逐渐增加,2 Gy达峰值,之后随剂量的增加而减少;显微镜观察的网织红细胞微核率变化趋势与流式细胞术检测结果基本一致。照射剂量在0~2 Gy剂量范围内,小鼠的外周血网织红细胞微核率的剂量-效应关系满足直线模型(R²=0.9063),并且2 Gy照射组与0 Gy组相比差异有统计学意义(t=-2.856,P<0.05)。结论 流式细胞术检测外周血网织红细胞微核率,在一定剂量范围内可成为早期快速、高通量的辐射损伤生物剂量计。     

流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的研究

目的应用流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,建立本实验室快速检测微核率的自动化实验方法。方法将48只雄性BALB/c小鼠随机分为4个照射剂量组,分别给予60Coγ射线一次性全身照射00、.51、和2Gy,于照射后24、48h取骨髓标本,每个剂量和每个时间点均为6只小鼠。采用流式细胞术检测受照小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,以传统显微镜检微核的方法作为对照。结果流式细胞术及显微镜检方法检测的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均呈良好的剂量依赖性及时间依赖性,并且两种方法的检测结果呈显著正相关(r=0.987,P<0.01)。流式细胞仪检测速度为人工阅片的40倍以上,且能够避免人工镜检人员阅片的主观性,检测结果更为客观。结论采用流式细胞仪检测小鼠骨髓红细胞微核较传统的人工显微镜检测,更加简便、易行、快速,检测结果准确、可信、客观,适用于大规模核辐射伤员的高通量快速生物剂量诊断。     

运动疲劳对大鼠骨髓嗜多染红细胞微核的诱发作用

目的:探讨运动疲劳对生物体遗传物质的损伤作用。方法:选取36只SD大鼠随机分为对照组(CG)和运动组(SG)。运动组又按运动后取材时间(h)分为5个亚组(0SG、12SG、24SG、48SG、72SG),每组6只。建立大鼠运动疲劳动物模型,采用微核试验(micro-nucleustest,MNT)检测大鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核率。结果:0SG组、12SG组、24SG组和48SG组大鼠骨髓PCE细胞微核率均较CG组显著增加(P<0.05,P<0.01);运动后24h微核细胞数及微核率急剧增加达最高水平,72h基本恢复至正常水平。结论:运动疲劳可诱发大鼠骨髓PCE细胞微核形成,运动疲劳对大鼠骨髓PCE细胞微核的诱发作用存在一定的时间效应。     

红细胞嘌呤核苷磷酸化酶与网织红细胞的辐射效应

通过比较不同条件下大鼠红细胞螵呤核苷磷酸化酶(PNP)活力和网织红细胞数的变化,探讨红细胞PNP在辐射损伤中的意义.实验用正常大鼠血经离心、去除血浆及白细胞层后:上层和底层血网织红细胞和PNP活力分别为(2.5±0.47)%,45.3±10.5单位;(0.88±0.29)%,18.6±6.5单位.两者呈高度正相关.皮下注射笨肼后,网织红细胞显著增多,红细跑PNP活力亦相应升高,呈高度正相关.大鼠经2、4、6Gyγ射线照射后,红细胞PNP活力降至照前的31.9%～24.8%,网织红细胞数降至0.76%～0.02%,两者最低值均与剂量生高度负相关.恢复时问与剂量呈线性关系.受熙后红细胞PNP活力与网络红细胞计数的变化量正相关.     

X射线全身照射诱导小鼠胸腺Egr-1和Egr-4基因表达水平的实时定量RT-PCR分析

目的 应用实时定量RT-PCR技术检测X射线全身照射诱导小鼠胸腺Egr-1和Egr-4基因的表达变化。方法 小鼠接受X射线全身照射后4和24 h,提取胸腺mRNA,以GAPDH作为内参基因,利用实时定量RT-PCR检测方法,探讨Egr-1和Egr-4基因的相对表达量与不同照射剂量之间的关系。同时计数骨髓嗜多染红细胞微核率作为辐射生物剂量参照。结果 Egr-1和Egr-4基因表达量在0.5～6 Gy全身照射后4和24 h均与照射剂量之间存在显著的相关性(r =0.974,0.987,0.978,0.999, P＜0.01),其剂量效应曲线可拟合成线性平方方程。各剂量点Egr-1和Egr-4基因表达量与骨髓嗜多染红细胞微核率高度相关(r =0.866、0.947、0.983、0.835, P＜0.05)。进一步分析表明,照射后4 h Egr-4基因表达不仅剂量效应关系良好,且增幅最为明显,并与骨髓嗜多染红细胞微核率的剂量效应曲线相平行。结论 实时定量RT-PCR技术检测Egr-4基因的早期表达有可能成为建立大批量、快速辐射生物剂量估算方法的候选者。     

妊娠小鼠及其胎鼠对辐射诱发嗜多染性红细胞微核的敏感性比较

本实验以10MeVX线照射小鼠, 发现胎肝嗜多染性红细胞(PCE)微核率在照射后12小时出现峰值, 母鼠的骨髓是在24小时。而出生第一天的小鼠肝脏咩IPCE教核率至照射后30小时尚未见峰值。结果表明: 胎儿的敏感性高于成年母鼠, 似乎胎龄越小敏感性越高。小鼠在妊娠期间的敏感性也似乎随着孕期的延长而降低。妊娠前与分娩后第一天的敏感性相同。     

氚水诱发小鼠胎肝嗜多染红细胞微核细胞率变化的比较研究

本研究选用10～12周龄NIH小鼠, 妊娠10天对每天以恒定剂量分别接受氘永和⁶⁰Coγ射线照射, 连续照射3天。停照后12小时脱颈椎活杀孕鼠, 制备胎肝涂片, 计数嗜多染红细胞(PCE)微核细胞率。     

稀土对受照射小鼠外周血白细胞数和微核细胞发生率的影响

稀土元素或化合物已广泛用在工业、农业、林业、国防及高科技产业等领域。在生物学、医学等方面的研究也取得了不少有价值的研究成果，如：适量摄入氯化稀土和柠檬酸稀土有助于提高机体免疫力、抗肿瘤作用等。笔者观察了柠檬酸镧和柠檬酸铈对受照射小鼠外周血白细胞数和骨髓嗜多染红细胞微核率的影响。     

放烧复合伤诱导小鼠骨髓红细胞微核率的研究

探讨放烧复合伤条件下，小鼠骨髓嗜多染红细胞ＭＮ率（ｆＭＰＣＥ）用于估算辐射剂量的可能性。方法以ｆＭＰＣＥ为指标，实验分为单纯烧伤组（１０％，２０％），单纯放射组（１，３，５Ｇｙ），放烧复合伤组（１０％＋１，３，５Ｇｙ，２０％＋１，３，５Ｇｙ），研究ｆＭＰＣＥ在２４小时的量效关系。结果单纯烧伤组与空白对照组相比，ｆＭＰＣＥ均无明显增加，放烧复合伤各剂量组明显低于单放组，烧伤面积２０％放烧复合伤组又明显低于１０％放烧复合伤组。结论小鼠放射损伤复合烧伤后其骨髓ｆＭＰＣＥ呈降低趋势，研究还发现烧伤后小鼠骨髓新生红细胞（ＰＣＥ）比例有一定升高，这可能是造成放烧复合伤时ｆＭＰＣＥ降低的原因。     

应用细胞周期阻断法分析初诊白血病患者骨髓及外周血微核率

目的：对初诊白血病患者骨髓及外周血进行微核分析。方法：应用细胞周期阻断法对54例初诊白血病患者骨髓及外周血与30例健康人外周血淋巴细胞进行微核检测。结果：54例初诊白血病患者骨髓及外周血淋巴细胞微核率（MNR）和微核细胞率（MCR）,与30例健康人外周血相比,P〈0.01。同一患者骨髓与外周血淋巴细胞MNR和MCR相比,P〉0.05。急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性髓细胞白血病（AML）与慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓及外周血淋巴细胞MNR和MCR相比,P〈0.05。结论：白血病患者发病初期即存在染色体不稳定现象,不同类型白血病患者微核检测结果间有差异,推测与白血病的发病机制密切相关。     

Total body irradiation in non-Hodgkin lymphoma and its effect on bone marrow and peripheral blood

Patients with non-Hodgkin lymphoma have been treated with total body irradiation (T.B.I.). Very high remission rate is obtained in lymphosarcomas, but response in histiosarcoma is extremely poor. Bone marrow study suggests that marrow depression following T.B.I. is transient and complete recovery occurs provided the bone marrow is not already compromised by previous chemotherapy and radiation therapy. Extreme caution is required when T.B.I. is repeated as this may lead to progressive marrow hypoplasia.     

应用流式细胞仪测定不同来源CD34+细胞基因转移效率的实验研究

目的 :探讨流式细胞仪测定基因转移效率的可行性 ,并比较相同实验条件下脐带血和骨髓CD34 细胞中基因转移效率的差别 ,为基因治疗的临床应用提供方便、有效的靶细胞及基因转移方法。方法 :用细胞因子刺激靶细胞 ,以携带GFP和Neo基因的逆转录病毒载体GCGPXSN实施基因转移 ,流式细胞仪测定基因转移效率。结果 :病毒上清滴度为 1.9× 10 5CFU·ml-1,各实验组实施基因转移 48h后 ,骨髓CD34 细胞中的转移效率分别为 2 .97% ,4.75 % ,7.80 %。脐带血CD34 细胞中的转移效率分别为 12 .70 % ,15 .5 0 % ,17.0 0 %。两者相比P <0 .0 5。各实验组实施基因转移 96h后 ,骨髓CD34 细胞中的转移效率分别为 2 3 .30 % ,5 0 .5 0 % ,35 .90 %。脐带血CD34 细胞中的转移效率分别为 43.5 0 % ,76 .10 % ,6 3.30 %。两者相比P <0 .0 1。结论 :流式细胞仪可方便准确地测定基因转移效率 ,脐血CD34 细胞的基因转移效率高于骨髓CD34 细胞基因转移效率     

阿魏酸对小鼠骨髓造血功能辐射损伤的防护作用

目的 观察阿魏酸对小鼠外周血象和骨髓造血功能辐射损伤的防护作用,初步探讨阿魏酸的抗辐射作用机制。方法 6~8周ICR小鼠96只,随机数表法分为正常对照组、照射模型组、阳性药（408片）治疗组和阿魏酸10、30、90 mg ·kg^-1·d^-1治疗组,每组16只。小鼠初次给药后24 h接受3.5 Gy ⁶⁰Co γ单次全身照射,之后连续7 d给药。其中,每组10只用于观察照射前2 d及照射后3、7、10、15、22 d的外周血象;其余6只用于照射后7 d检测骨髓嗜多染红细胞的微核细胞率、造血祖细胞集落形成能力、以及Thbd和HMGB1蛋白的表达水平。结果 与照射模型组比较,90 mg ·kg^-1 ·d^-1的阿魏酸可有效提高小鼠3.5 Gy照射后3、10、15、22 d的外周血白细胞数（t=2.267、2.399、1.945、2.828,P<0.05）,显著降低骨髓嗜多染红细胞微核细胞率（t=4.013,P<0.05）,明显提高造血祖细胞红细胞集落生成单位（CFU-E）、红细胞爆裂型集落生成单位（BFU-E）和粒-单细胞集落生成单位（CFU-GM）的集落形成能力（t=2.366、2.953、3.115,P<0.05）,并提高骨髓细胞中Thbd和核内HMGB1蛋白表达水平（t=17.75、23.39,P<0.01）。结论 阿魏酸可通过调节Thbd和HMGB1蛋白表达,促进小鼠骨髓造血功能辐射损伤修复,加速外周血象恢复。     

大鼠急性脊髓损伤后外周血T淋巴细胞亚群的改变

目的 探讨大鼠急性脊髓损伤后外周血T淋巴细胞亚群的改变. 方法 健康SD大鼠40只,分为正常对照组、手术对照组、100 g·cm组及200 g·cm组,每组10只.采用改良Allen法建立大鼠脊髓损伤模型.于伤后12 h、36 h、5 d、9 d采集眼部血,采用流式细胞仪检测大鼠脊髓损伤后不同时间外周血T淋巴细胞表型CD4及CD8的表达水平. 结果 大鼠脊髓损伤后外周血T淋巴细胞表达的CD4值降低,伤后36 h降至最低为(30.40±4.76)%(100 g·cm组)及(26.54±9.34)%(200 g·cm组),均低于正常对照组(P＜0.01);而CD8的表达变化不明显;伤后36 h,100 g·cm组CD4/CD8比值为1.81±0.55,200 g·cm组为1.29±0.50,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 大鼠急性脊髓损伤后细胞免疫反应低下,损伤程度越重,CD4值及CD4/CD8比值降低就越明显.CD4/CD8比值可作为早期判断脊髓受损严重程度及预后的一个预测指标.     

Locomotor behavior in mice following exposure to fission-neutron irradiation and trauma

Locomotor activity, body weights, and food and water consumption were monitored in female mice for 35 d following a sublethal wound (W), burn (B), exposure to 3 Gray fission neutron radiation (R), or combination of these injuries: radiation-wound (RW) and radiation-burn (RB). Activity in groups W and RW was depressed immediately after injury, with recovery to control levels after 5 and 14 d, respectively. Mice that received radiation alone showed a biphasic response with decrements in activity on days 0-4 and 9-11. Groups B and RB exhibited depressed activity levels that differed significantly from control levels until day 17. Food intake was reduced for about 6 d in groups R, W, RW, and RB. Body weights decreased for 4 d in groups R, W, RW, and RB, but returned to control levels by the end of the experiment. Animals in group B did not show significant reduction in food intake or body weight. Water consumption was reduced for 5-6 d in groups R and RB and was increased in groups W, RW, and B. The data suggest that behavioral responses to fission-neutron radiation are exacerbated by tissue trauma.     

不明原因复发性自然流产患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞特征分析

目的分析不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的特征。方法选取中国医科大学附属第一医院2011年10月至2015年4月确诊的68例URSA患者作为观察组对象,并选取同期诊治的60例健康早期妊娠妇女(自愿要求人工流产者)作为对照组。应用流式细胞术检测患者外周血T细胞亚群和NK细胞数量,并检测NK细胞活性,应用统计学软件分析检测结果。结果 URSA患者外周血中CD4~+细胞比例为(36.14%±3.56%),CD8~+细胞比例为(31.28%±3.53%),CD16~+56~+细胞比例为(17.62%±3.26%),Th/Ts为(3.08%±0.85%),NK细胞比例为(17.38%±2.47%),NK细胞活性为(21.15%±4.82%),均显著高于对照组患者(P<0.05)。结论 URSA患者外周血中T淋巴细胞亚群和NK细胞数目和活性显著升高,连续监测外周血中T细胞亚群和NK的数量和活性有利于临床诊断URSA,了解URSA病情变化。     

Vulnerability of folate in plasma and bone marrow to total body irradiation in mice

PURPOSE: To examine how folate status in a body is influenced by oxidative stress. MATERIAL AND METHODS: Mice were given total body irradiation (TBI) by X-ray, and changes in the concentration of folate were compared to those in vitamins C and E. RESULTS: In a time-dependent study, folate in plasma and bone marrow decreased from 5 h until 120 h post-TBI at 3 Gy. Folate in plasma and bone marrow decreased in a dose-dependent manner at 24 h. Marked decreases of vitamins C and E were also detected in bone marrow, but not in plasma even at 10 Gy of TBI. The susceptibility of plasma folate by irradiation was confirmed by an in vitro exposure study. Neither vitamins C and E nor folate were decreased in the liver by TBI. CONCLUSION: It is suggested that folate is vulnerable to oxidative stress, and folate may need to be evaluated, particularly for TBI or radiotherapy.