后巩膜加固术作用机制的实验研究

目的探讨后巩膜加固术的作用机制.方法24只家兔分为4组,以人巩膜为材料行插片法后巩膜加固术,分别于术后2,4,12和24周取标本,行肉眼观察及光镜、透射电镜检查.结果植片与宿主巩膜融合为一,"新巩膜"的厚度和硬度明显增加,抵抗力增强;局部血液循环改善.结论后巩膜加固术能加强薄弱的后部巩膜,改善眼球后部的血液供应,从而达到治疗病理性近视眼的目的.     

后巩膜加固术治疗高度近视疗效观察

目的：探讨后巩膜加固术对于防治高度近视进一步发展的效果。方法采用自体阔筋膜作为加固材料,对高度近视36例（64眼）,行后巩膜加固术。结果：术后均随访2年以上,视力提高8眼（12.5%）,眼轴稳定56眼（87.5%）。结论：自体阔筋膜行后巩膜加固术防治高度近视进一步发展行之有效。     

下颌骨牵张后bFGF与IGF—I在新骨组织中的定位表达

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)与胰岛素样生长因子（IGF-I）在下颌牵张成骨过程中的表达及意义。方法 对12只成年山羊行双下颌骨牵张成骨术，在牵张结束后的第1、2和4周分别处死4只动物，取牵张区新骨组织用免疫组化检测bFGF和IGF-I的表达，另选2只同龄山羊作为正常对照。结果 下颌骨牵张后bFGF与IGF-I均呈高水平表达，bFGF定位于间充质或成纤维样细胞、成骨细胞以及新骨基质，而IGF-I则主要定位于成骨细胞。结论 bFGF与IGF-I可能在下颌骨牵张后的新骨生成中起着重要的调控作用。     

原发性视网膜色素变性后巩膜加固术

后巩膜加固术是指应用生物或非生物加固材料，对眼球后巩膜进行加固的手术，可以应用其治疗原发性视网膜色素变性。主要是通过机械性加固巩膜和加固材料紧压眼球后巩膜，使屈光度略有降低，可使视力有不同程度的提高。在明确解剖关系的基础上可采用X型、Y型、单条带及四直肌间后巩膜加固术式，对病理性近视有治疗效果，但手术处理不当可发生损伤涡静脉、巩膜穿破等并发症。     

胎儿脐带在后巩膜加固术中的临床应用

目的:观察胎儿脐带在后巩膜加固术中的应用效果。方法:选取54例(108只眼)高度近视患者作为观察对象,采用随机数字表法将其分为对照组和研究组各27例。对照组给予LASEK术,研究组给予胎儿脐带后巩膜加固术联合LASEK术,对比两组裸眼视力(UCVA)、最佳矫正视力(BCVA)、视网膜动脉前期的充盈时间、安全性指数、有效性指数,记录两组暗光下5 mm瞳孔直径下波前像差,包括垂直彗差(C7)、水平彗差(C8)和球差(C12)。结果:术后1、3个月,研究组UCVA、BCVA、C7、C8、C12水平均明显高于对照组(P<0.05);术后12个月研究组有效性指数和安全性指数均明显大于对照组(P<0.05),视网膜动脉前期的充盈时间明显短于对照组(P<0.05)。结论:胎儿脐带后巩膜加固术治疗高度近视的效果显著,患者可获得理想的视觉质量,是临床矫治高度近视的较佳方法。     

儿童病理性近视后巩膜加固术临床观察

目的:测量儿童后巩膜加固术前及术后眼轴及视力,评估后巩膜加固术对儿童病理性近视的疗效.方法:随访门诊高度近视儿童,应用异体巩膜做后巩膜加固术的加固材料,将其中的13例(25只眼)行后巩膜加固术,术前术后均行散瞳检影验光进行屈光度检查,IOL-Master测量眼轴,分别观察术前术后屈光度的增长速度以及眼轴的增长情况.结果:后巩膜加固术前随访8～43个月,平均23.56±11.79个月,屈光度平均每年增长-1.33±1.08D,术后随访6～30个月,平均17.08±9.22个月,屈光度平均每年增长-0.36±1.19D.术前术后屈光度增长有显著统计学意义(P=0.007＜0.01).结论:后巩膜加固术对阻止儿童病理性近视的发展有确切的疗效,且安全.     

凋亡相关基因Bcl-2和细胞因子bFGF在豚鼠透镜诱导近视眼中的研究

目的：探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（B-cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2）和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）在透镜诱导豚鼠近视眼后极部巩膜细胞中的表达,以及二者对巩膜细胞凋亡的影响。方法：选健康4周龄豚鼠45只,随机分成3组,Ⅰ组（右眼配戴-20D）、Ⅱ组（右眼配戴-10D） Ⅲ组（不作任何干预）。实验前后用睫状肌麻痹下验光、A超动态观察豚鼠眼屈光度和眼轴长度,并取后极部巩膜组织,用电镜、终末脱氧核糖核苷酸转移酶介导原位缺口末端标记法（TUNEL）和流式细胞术检测巩膜的凋亡细胞, 应用免疫组织化学染色和蛋白印迹（Western-blot）法检测bFGF和bcl-2蛋白。结果:实验后诱导眼形成近视,且伴有眼轴延长。并在诱导眼巩膜细胞中检测到凋亡细胞,凋亡率高于对照组（P＜0.05),透镜诱导的豚鼠近视眼后极部巩膜组织中bFGF和bcl-2的含量降低（P＜0.05)。结论: bFGF与bcl-2在透镜诱导豚鼠近视眼后极部巩膜细胞中表达阳性,并可通过抑制细胞凋亡参与透镜诱导豚鼠近视的形成。     

后巩膜加固术治疗高度近视18例临床观察

目的 观察后巩膜加固术治疗高度近视的疗效。方法 应用异体巩膜或异体地１８例（３２眼）高度近视患者行后巩加固术。结果 术后随访１月－２２月，术后视力提高１－２行１２眼，提高３行以上５眼，总共提高１７眼，无变化１４眼（４３．７５），下降１眼（３．１２５％）；术后眼轴稳定２９眼（９０．６２５％），结论后巩膜加固术对高度近视有治疗作用。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β在近视家族胎儿巩膜的表达

目的：通过检测相同胎龄父母近视程度不同的胎儿后极部巩膜碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)的表达水平,探讨bFGF和TGF-β在人类近视遗传和近视形成过程中是否发挥作用。方法：对16例14周以下引产的胎儿,按父母无近视和父母近视＞-4.00D分为对照组和实验组,每组8例,免疫组化和RT-PCR方法检测后极部巩膜bFGF和TGF-β的表达,确定两组是否存在差异。结果：两组bFGF和TGF-β在巩膜中均有表达,实验组BFGF的表达较对照组高,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05),实验组TGF-β的表达较对照组低,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：近视家族胎儿在巩膜发育阶段就有bFGF和TGF-β的某些改变,bFGF和TGF-β在人类近视的形成和遗传中可能发挥一定作用,是近视多基因遗传因素中的相关因素之一。     

RT-PCR检测bFGF对脊髓损伤后bcl-2、bax基因的表达

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对脊髓损伤后bcl-2和bax基因表达的影响。方法 利用Allen WD法以25gcf致伤SD大鼠脊髓制作损伤模型，经蛛网膜下腔导管于术后即刻、0．5，1，2，3，4，6，12，24，48h导管注入bFGF 20μL（含bFGF 200 U）；对照组相同时间点注入等量生理盐水作对照。术后2，6，12，24，48h取损伤脊髓组织，通过逆转录PCR（RT-PCR）检测bcl-2、bax基因的表达。结果 脊髓损伤后应用bFGF显著促进bcl-2基因的表达，抑制bax基因表达，数据差异有显著性。结论 bFGF通过促进bcl-2基因的表达、抑制bax基因的表达抑制脊髓损伤后神经细胞的凋亡，从而保护脊髓组织，这可能是bFGF对脊髓损伤具有保护作用的机制之一。     

不同切口白内障超声乳化摘除术对泪膜的影响

目的：观察巩膜隧道切口和透明角膜切口对白内障超声乳化摘除术患者术后泪膜的影响。方法临床纳入63例患者共70眼行白内障超声乳化吸除联合人工晶体植入术的非干眼患者,根据切口不同分为巩膜隧道切口组（32例,35眼）与透明角膜切口组（31例,35眼）,两组患者均进行折叠人工晶状体植入。术后第1、7、14、30、90天观察两组患者泪液分泌试验（SIt）、泪膜破裂时间（BUT）以及自觉干眼感觉等。结果术后第1天及第7天,两组患者自觉干眼症状明显,巩膜隧道切口组干眼症状评分[（2.55±0.96）、（1.49±0.62）分]明显高于透明角膜切口组[（1.18±0.72）、（0.98±0.71）分],差异有统计学意义（P〈0.05）;SIt试验显示,术后第1天,巩膜隧道切口组与透明角膜切口组患者SIt分别为（19.55±2.47）、（17.62±2.51）mm,均较术前显著升高,巩膜隧道切口组长于透明角膜切口组,差异有统计学意义（P〈0.05）;BUT试验显示,术后第1、7、14天,两组BUT均较术前显著缩短,巩膜隧道切口组[（4.07±0.63）、（4.62±0.86）、（6.37±0.67）s]长于透明角膜切口组[（3.42±0.67）、（4.06±0.90）、（5.88±0.77）s],差异有统计学意义（P〈0.05）。结论术后早期,进行透明角膜切口白内障超声乳化摘除术的患者,对泪膜的影响较小,但临床干眼症状要重于进行巩膜隧道切口的患者。术后晚期,两种切口进行白内障超声乳化摘除术对泪膜无明显影响。     

小梁切除术中三种巩膜瓣处理方法的对比研究

目的观察小梁切除术中三种巩膜瓣处理方法的临床疗效。方法选择34例（48眼）中、晚期原芡性开角型青光眼患者,按巩膜瓣处理方法随机分为A组普通切削式巩膜瓣、B组隧道式巩膜瓣、C组普通巩嗅瓣＋丝裂霉素C（MMC）,术式均采用常规小梁切除术。术后随访观察视力、眼压、滤泡、前房、并发症等。结果A组手术成功9眼,B组手术成功14眼,C组手术成功15眼,3组比较差异有显著性。结论采用巩膜隧遵刀制作巩膜瓣的青光眼小粱切除术,具有操作简单,降压效果好,恢复快,并发症少等优点,效果较为理想。     

诱导人脐血神经干细胞向神经细胞分化的研究

目的:体外诱导人脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)中的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经细胞分化的研究。方法:体外培养中用表皮生长因子(epithelium growth factor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导人脐血NSCs向神经细胞的分化。结果:在EGF和bFGF作用下,实验组Nestin阳性细胞数量显著增多;在EGF和bFGF作用下,Nestin的mRNA表达PCR条带变量两组间有显著性差异。结论:细胞因子EGF和bFGF在体外能促进脐血MNCs中NSCs的分化,联合应用较单独应用具有更强的促进脐血MNCs向神经样细胞分化作用。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗浅Ⅱ度烧伤的多中心Ⅳ期双盲、阳性药物、随机对照试验

目的比较重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-a FGF）与碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）治疗浅Ⅱ度烧伤的临床疗效差异。方法入选6个研究医院254例门诊浅Ⅱ度烧伤患者。治疗组给予银离子敷料联合a FGF（清创时清洗治疗,清创后给予喷雾治疗）。对照组给予银离子敷料联合b FGF（给药方法同a FGF）。记录创面愈合时间及愈合后的色素沉着情况。结果rh-a FGF治疗后完全愈合时间为（7.1±1.5）d,b FGF治疗后愈合时间为（9.2±1.8）d,两组随访过程中感染发生率分别为1.5%,9.2%,两组比较具有统计学差异（P〉0.05）。但两组色素沉着评分分别为（2.2±1.6）分,（3.0±1.4）分,不具有统计学差异（P〈0.05）。结论 a FGF可促进浅Ⅱ度烧伤愈合,预防感染,疗效优于b FGF,安全性相似。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growthfactor,bFGF)对牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响.方法用特制的脊柱撑开器放置在大鼠脊髓T12～L3椎体横突上纵向牵张,同时皮层体感诱发电位监测,建立大鼠牵张性脊髓损伤模型.用免疫组织化学染色法观察c-fos基因的表达,并用计算机图像分析系统进行定量分析.结果脊髓损伤后神经元C-FOS蛋白D值较正常组显著增加,表达高峰出现在损伤后2 h,而bFGF治疗组在各时相点均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01).结论碱性成纤维细胞生长因子能显著抑制脊髓损伤后c-fos基因的表达,这可能是bFGF保护神经元并减轻脊髓损伤的机制之一.     

人碱性成纤维细胞生长因子腺病毒表达载体的构建及其在人脐静脉内皮细胞中的表达

目的:构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast cell growth factor,bFGF)腺病毒载体,并观察其在体外血管内皮细胞中的表达.方法:采用同源重组的方法,构建重组腺病毒Ad5-bFGF.携有绿色荧光蛋白(green fluorescence protein, GFP)的Ad5腺病毒转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),检测最佳转染复数.Ad5-bFGF体外转染HUVEC,免疫细胞化学法、Western印迹法检测bFGF蛋白的表达.结果:Ad5转染HUVEC的最佳转染复数为200,转染率为90%.免疫细胞化学法和Western印迹结果显示bFGF基因以Ad5为载体可以在HUVEC的胞质和胞核表达,并且表达量较未转染的HUVEC明显增加.结论:成功构建了携带bFGF基因的腺病毒载体,体外可以成功表达,为bFGF基因治疗及肿瘤发病机制的研究奠定了基础.     

重组人bFGF蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定

【目的】构建人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因的原核表达载体,并对其进行诱导表达和蛋白质纯化,以获得大量重组人bFGF蛋白。【方法】人工合成bFGF基因,进行测序分析,将该基因克隆入原核表达载体pET22b中,转化感受态细胞大肠杆菌RPX,经IPTG诱导表达重组bFGF蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blotting检测分析。【结果】成功构建了人重组bFGF表达质粒pET22b-rhbFGF,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,分子量约在18×103Da处出现了一条新生的蛋白条带,经灰度扫描检测,表达量约占菌体总蛋白的28%,纯化后的蛋白质灰度扫描检测,纯度为95%。【结论】成功构建了重组人bFGF原核表达载体,并成功纯化了该基因的原核表达产物,为下一步人bFGF的产业化打下了基础。