松龄血脉康预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 探讨松龄血脉康预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响.方法 45只雄性SD大鼠,随机分为松龄血脉康(SL-xmk)预处理组、假手术组和生理盐水对照组.SL-xmk预处理组采用SL-xmk悬浮液(937.5 mg/kg)对大鼠...     

白藜芦醇对大鼠脑缺血基质金属蛋白酶-9及其组织抑制因子-1表达的影响

目的探讨白藜芦醇在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中对脑水肿的影响,及对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法将健康雄性Wistar大鼠105只,随机分为假手术组(5只)、缺血再灌注组(对照组,50只)和白藜芦醇药物干预组(药物组,50只)。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,使用干湿重法测定脑含水量,免疫组织化学法观察MMP-9和TIMP-1的表达。结果药物组与对照组比较,脑组织含水量在缺血再灌注1、2、3天明显减轻,MMP-9和TIMP-1的表达在缺血再灌注1、2、3天明显减少,TIMP-1在再灌注6 h时亦减少,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论在缺血再灌注所致的血管损伤中白藜芦醇具有脑保护作用,通过抑制MMP-9的表达而减轻脑水肿,调节MMP-9和TIMP-1的活性可能是其作用机制之一。     

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1和血脑屏障的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)预处理对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1和血脑屏障的影响。方法 90只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、NBP预处理组低剂量组(NBPⅠ组)、NBP预处理组中剂量组(NBPⅡ组)、NBP预处理组高剂量组(NBPⅢ组),每组18只。采用线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2 h再灌注24 h后以干湿重法测定脑组织含水量,收集脑血管外伊文思蓝(EB)含量来评估血脑屏障的破坏程度,q PCR法检测MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达水平。结果脑缺血再灌注后,脑组织含水量及EB含量明显增加,MMP-9和TIMP-1表达均增强,与假手术组比较有显著差异(P0.01)。NBP预处理各组脑组织含水量及EB含量较模型组明显下降,MMP-9表达显著减少,TIMP-1表达明显增加(P0.01),NBPⅡ、Ⅲ组无显著差异(P0.05)。结论 NBP预处理对CIRI大鼠可通过调节MMP-9/TIMP-1的表达,降低血脑屏障通透性,减轻脑水肿,发挥预防性保护作用。     

粒细胞集落刺激因子对脑出血大鼠的治疗机制

目的探讨粒细胞集落刺激因子(C-CSF)对大鼠脑出血后脑组织水肿、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、星型胶质细胞活性(Ast)的影响。方法 SD大鼠96只,随机分为假手术组、脑出血组、治疗组。治疗组造模1 h后腹腔注射重组C-CSF,三组大鼠分别于术后6 h、24 h、48 h、72 h、7 d、10 d处死,测定脑组织含水率、血肿周围MMP-9、胶质生蛋白(GFAP)的表达。结果假手术组无明显脑水肿,脑出血组脑组织含水率明显增加,并于48⁷2 h达高峰,治疗组各时间点脑组织含水率和脑出血组相比明显减轻(P<0.05)。假手术组MMP-9仅有少量表达,脑出血组MMP-9表达明显增加,4872 h达高峰,治疗组各时间点脑组织含水率和脑出血组相比明显减轻(P<0.05)。假手术组MMP-9仅有少量表达,脑出血组MMP-9表达明显增加,48⁷2 h达高峰,治疗组各时间点MMP-9表达与脑出血组相比明显减轻(P<0.05)。假手术组脑组织含水率与MMP-9表达无相关性(r=0.429,P>0.05),脑出血组脑组织含水率与MMP-9表达呈正相关关系(r=0.922,P<0.05),治疗组脑组织含水率与MMP-9表达呈正相关关系(r=0.844,P<0.05)。假手术组未见GFAP阳性细胞表达;脑出血组6 h出现少量GFAP阳性细胞表达,48 h增多,72 h大量表达,7 d达高峰,10 d表达减弱;治疗组GFAP阳性细胞表达6 h与脑出血组相似,24 h、48 h、72 h、7 d、10 d较脑出血组明显减少(P<0.05)。结论 C-CSF能明显减轻脑水肿、降低基质MMP-9表达和Ast过度活化引起的脑损伤,保护大脑神经功能。     

脑出血大鼠脑水肿与血肿周围组织MMP-2、MMP-9表达的相关性

目的 探讨大鼠实验性脑出血后脑水肿与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的关系.方法 42只健康雄性Wistar大鼠采用自体血注入法建立右侧基底节区脑出血模型,随机分为脑出血模型组、假手术对照组,分别于造模后6h、12h、24 h、3d、5d、7d、14 d七个时间点取脑组织测定含水量,免疫组化检测MMP-2、MMP-9的表达.结果 模型组脑组织含水量在12h、24 h、3d、5d、7d时间点高于对照组(P＜0.05);模型组MMP-9表达在12h、24 h、3d、5d、7d时间点高于对照组(P ＜0.05);MMP-2自24 h开始表达,7d达高峰,14d仍有较高表达,在对照组无表达,模型组脑组织的重量变化与MMP-9的表达呈正相关,与MMP-2的表达呈负相关(P＜0.05).结论 大鼠脑出血后血肿周围脑组织MMP-9的表达与脑水肿相关,MMP-2的表达与神经损伤修复相关.     

糖尿病脑梗死大鼠在不同时间窗溶栓后MMP-9的表达变化

目的探讨糖尿病脑梗死大鼠在不同时间窗使用重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)溶栓治疗后的疗效,及其并发症出血性转化的内在机制。方法健康成年雄性Wistar大鼠120只,体重200g～250g,随机分为单纯脑梗死(CI)组、糖尿病(DM)合并CI组、假手术组。各组均在2h和4h给予rt-PA或生理盐水溶栓,溶栓24h后灌注固定取脑,分别行脑组织含水量计算、伊文思蓝(EB)测定血脑屏障通透性、免疫组织化学法测定基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果 DM合并CI 4h组较单纯CI 4h组脑组织含水量显著增加、血脑屏障通透性增加、MMP-9阳性表达显著升高(P<0.01)。结论 DM+CI大鼠3h以内行rt-PA溶栓治疗有效,而3h以外溶栓治疗后脑水肿明显,血脑屏障破坏严重,其机制可能是通过上调MMP-9的表达来实现的。     

大鼠脑出血后脑组织MMP-2、MMP-9表达及其与脑水肿关系的研究

目的研究大鼠脑出血后基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的表达规律及其与脑水肿之间的关系。方法采用向大鼠尾状核注射自体不凝血制作大鼠脑出血模型,实验动物随机分为假手术对照组和脑出血组,免疫组化法测定脑组织MMP-2、MMP-9的表达及干湿重法测定脑组织含水量。结果（1）血肿边缘MMP-9阳性微血管数在脑出血6h明显升高（P〈0.01）,48h达高峰,2w降至零表达（P〉0.05）;MMP-248h始在巨噬细胞上表达（P〈0.05）,120h达高峰,2w仍保持较高水平（P〈0.01）;（2）脑组织含水量在脑出血12h显著增加（P〈0.05）,72h达到高峰,2w与假手术对照组无差异（P〉0.05）。（3）脑出血后MMP-9与脑组织含水量之间呈正相关关系（r=0.8716,P〈0.01）。结论脑出血后MMP-2、MMP-9有高表达,MMP-9参与了脑出血急性期脑水肿的形成,MMP-2则可能参与了脑出血后期的脑组织损伤修复。     

丁苯酞联合甘露醇对弥漫性脑损伤大鼠咬合蛋白及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的观察丁苯酞对弥漫性脑损伤大鼠咬合蛋白及基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法 240只成年SD大鼠随机数字法分为模型组(80只)、甘露醇组(80只)、丁苯酞+甘露醇组(80只),甘露醇组静滴甘露醇(剂量1.0 g/kg),丁苯酞+甘露醇组,在给予甘露醇的同时还要给予丁苯酞软胶囊灌胃(剂量0.4 ml/kg)。每组分别在伤后3 h、12 h、24 h、72 h、144 h干湿法测定大鼠脑组织含水量、伊文思蓝法测定血脑屏障通透性、免疫组化和Werstern印迹测定咬合蛋白及MMP-9的表达变化。结果与模型组相比,甘露醇组在各时间点脑组织含水量明显减少(P0.05),血脑屏障通透性明显降低(P0.05),咬合蛋白及MMP-9的表达无明显差异(P0.05)。与甘露醇组相比,丁苯酞+甘露醇组各时间点脑组织含水量明显减少(P0.05),血脑屏障通透性明显降低(P0.05),咬合蛋白的表达明显增加(P0.05),MMP-9的表达明显减少(P0.05)。结论丁苯酞与甘露醇联合应用可明显减少弥漫性脑损伤大鼠脑水肿程度,改善血脑屏障通透性,增加咬合蛋白的表达,减少MMP-9的表达。     

老龄大鼠脑缺血再灌注损伤与明胶酶系基因表达的关系

目的研究老龄大鼠脑缺血再灌注不同时期微血管基底膜损伤与明胶酶系基因表达的关系。方法制备SD雄性大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将56只青年大鼠分为青年假手术组、青年模型组,56只老龄大鼠分为老龄假手术组、老龄模型组,其中青年与老龄模型组又分缺血3h和再灌注6、12、24h,3、6天时间点。观察脑微血管结构基底膜病理形态变化和明胶酶系的基因表达变化。结果老龄假手术组大鼠脑皮质微血管结构基本正常,老龄模型组与同时间点青年模型组比较病理损伤较重。随再灌注时间的延长,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达递增,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA和金属蛋白酶组织抑制-1(TIMP-1)mRNA表达呈先增强后降低趋势。与青年模型组相同时间点比较,老龄模型组MMP-2、MMP-9mRNA表达水平增强;TIMP-1mRNA仅在再灌注24h表达水平降低,差异均有显著性。结论随着增龄,大鼠脑微血管基底膜损伤改变与MMPmRNA、TIMPmRNA的变化有关。老龄大鼠较青年大鼠病理损伤严重。     

异氟烷对创伤性脑损伤大鼠的神经保护作用及作用机制研究

目的探讨异氟烷对创伤性脑损伤大鼠的神经保护作用及作用机制。方法选择成年健康雄性SD大鼠80只,采用随机数字表法分为假手术组、脑损伤组、异氟烷预处理组和异氟烷后处理组,每组20只。采用改良Feeney自由落体法制作大鼠创伤性脑损伤模型,假手术组大鼠仅做开窗手术处理,异氟烷预处理组大鼠在造模前给予异氟烷持续麻醉,脑损伤组和异氟烷后处理组大鼠造模成功后立即进行复苏,且异氟烷后处理组大鼠于复苏后给予异氟烷持续麻醉。采用神经功能缺损评分表(NSS)评定各组大鼠创伤性脑损伤后12 h、24 h神经功能缺损情况,免疫印迹法检测各组大鼠创伤性脑损伤后24 h损伤灶周围脑组织磷酸化Akt(P-Akt)、磷酸化糖原合酶激酶-3β(PGSK3β)、Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表达量,TUNEL法检测各组大鼠创伤性脑损伤后24 h损伤灶周围脑组织凋亡神经元数量。结果脑损伤组大鼠创伤性脑损伤后12 h、24 h NSS评分高于假手术组、异氟烷预处理组及异氟烷后处理组,异氟烷预处理组和异氟烷后处理组大鼠创伤性脑损伤后12 h、24 h NSS评分高于假手术组(P0.05)。脑损伤组、异氟烷预处理组及异氟烷后处理组大鼠创伤性脑损伤后24 h损伤灶周围脑组织P-Akt蛋白和P-GSK3β蛋白表达量高于假手术组,异氟烷预处理组和异氟烷后处理组大鼠创伤性脑损伤后24 h损伤灶周围脑组织P-Akt A蛋白和P-GSK3β蛋白表达量高于脑损伤组(P0.05)。脑损伤组大鼠创伤性脑损伤后24 h损伤灶周围脑组织Bcl-2蛋白表达量低于假手术组、异氟烷预处理组及异氟烷后处理组,cleaved-caspase-3蛋白表达量及凋亡神经元数量高于假手术组、异氟烷预处理组及异氟烷后处理组,异氟烷预处理组和异氟烷后处理组大鼠创伤性脑损伤后24 h损伤灶周围脑组织cleaved-caspase-3蛋白表达量、凋亡神经元数量高于假手术组(P0.05)。结论异氟烷对创伤性脑损伤大鼠具有神经保护作用,其可能通过激活Akt/GSK3β信号通路而发挥神经保护作用。     

抑制ERK1/2可减轻蛛网膜下腔出血大鼠脑水肿和下调基质金属蛋白酶-9表达

目的 研究细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)通路抑制剂U0126对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9...     

脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 探讨脑缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响.方法 154只Wistar大鼠随机分为假手术组(14只)、非缺血预处理(non-ischemic preconditioning,NIP)组(70只)和IP组(70只),后两组再随机分为5个亚组,每组14只.线栓法建立大脑中动脉闭塞模型,缺血预处理10 min,分别在IP后1、3、7、14和21 d进行再次缺血2 h再灌注22 h.采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测定脑梗死体积,通过测定渗出血管外的伊文思蓝(Evans blue,EB)含量评价血脑屏障通透性,采用于湿重法评价脑水肿程度,免疫组化染色和原位杂交法检测MMP-9蛋白和mRNA表达.结果 与NIP组相应亚组比较,IP组缺血预处理1、3和7 d亚组神经功能缺损评分显著降低,脑梗死体积显著缩小,EB含量和脑水含量显著降低,MMP-9蛋白和mRNA表达均显著下调(P＜0.05或P＜0.01).IP组1、3和7 d亚组梗死体积和MMP-9 mRNA表达较IP组14 d和21 d亚组显著缩小或下调,3 d和7 d亚组EB含量、脑水含量和MMP-9蛋白表达较其他亚组显著降低,其中以3 d亚组降低最显著(P＜0.05).结论 缺血预处理诱导的血脑屏障通透性改变和MMP-9表达下调在脑缺血耐受中发挥着重要作用.     

大鼠上矢状窦闭塞后MMP-9在脑组织中的表达

目的探讨上矢状窦闭塞后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在脑组织中的表达与作用。方法采用结扎法建立大鼠上矢状窦闭塞模型,干湿重法测量脑组织含水量,免疫组化法检测MMP-9蛋白质的表达,同时观察是否有白细胞浸润。结果与对照组比较,上矢状窦闭塞后6h,脑组织含水量和MMP-9表达开始增加并伴极少量白细胞浸润,第1天后,脑组织含水量、MMP-9表达和白细胞浸润数量迅速上升,第5天到高峰,第7天开始下降,第14天虽明显减少,但仍然明显高于对照组;在整个脑水肿形成过程中,MMP-9的表达与脑组织含水量呈高度正相关(r=0.92,P<0.01),与浸润的白细胞记数也呈高度正相关(r=0.84,P<0.01)。结论上矢状窦闭塞后脑组织含水量显著增加,MMP-9的表达明显增强,内皮细胞和渗出的中性粒细胞中MMP-9的过度表达,在血-脑脊液屏障破坏、白细胞浸润及血管源性脑水肿形成过程中发挥了关键作用。     

Expression and significance of angiostatin,vascular endothelial growth factor and matrix metalloproteinase-9 in brain tissue of diabetic rats with ischemia reperfusion

Objective: To discuss the expression and significance of angiostatin, vascular endothelial growth factor and matrix metalloproteinase-9 in the brain tissue of diabetic rats with ischemia reperfusion. Methods: A total of 60 male Wistar rats were randomly divided into the normal group, sham group, diabetic cerebral infarction group and single cerebral infarction group according to the random number table, with 15 rats in each group. The high sucrose diet and intraperitoneal injection of streptozotocin were performed for the modeling of diabetic rats, while the thread-occlusion method was employed to build the model of cerebral ischemia reperfusion. The immunohistochemical staining was performed to detect the expression of angiostatin, vascular endothelial growth factor(VEGF) and matrix metalloproteinase-9(MMP-9) in the brain tissue. Results: The expression of angiostatin after the reperfusion in the brain tissue of rats in the single cerebral infarction group and diabetic cerebral infarction group was increased 6 h after the reperfusion, reached to the peak on 1 d and then decreased gradually. The expression of angiostatin in the diabetic cerebral infarction group 6 h, 1 d, 3 d and 7 d after the reperfusion was significantly higher than that in the single cerebral infarction group(P0.05). VEGF began to be increased 1 h after the reperfusion in the single cerebral infarction group and diabetic cerebral infarction group, reached to the peak at 6 h and then decreased gradually. The expression of VEGF in the diabetic cerebral infarction group at each time point after the reperfusion was significantly lower than that in the single cerebral infarction group(P0.05). MMP-9 began to be be increased 1 h after the reperfusion in the single cerebral infarction group and diabetic cerebral infarction group, reached to the peak on 1 d and then decreased gradually. The expression of MMP-9 in the diabetic cerebral infarction group at each time point after the reperfusion was significantly higher than that in the single cerebral infarction group(P0.05). Conclusions: The high glucose environment in which the diabetic cerebral infarction is occurred is to induce the formation of MMP-9 at first and then activate and increase the expression of angiostatin. Afterwards, the expression of VEGF is inhibited, resulting in the poor angiogenesis after cerebral infarction, which thus makes the injury of brain tissue after cerebral infarction even worse than the non-diabetes mellitus.     

牛磺酸对重度颅脑创伤大鼠脑组织AQP4/牛磺酸转运体基因的影响

目的研究牛磺酸（Tau）对重度颅脑创伤（TBI）大鼠脑组织的脑组织含水量、水通道蛋白-4（AQP-4）/Tau转运体（TAUT）基因表达的影响。方法按随机数字表法将84只雄性SD大鼠分为7组：假手术组（Sham组）、脑外伤组（TBI组）、Tau治疗组（Tau组）,Tau预防组（Pre-Tau组）、β-丙氨酸组（β-Ala组）、维生素C组（Vc组）、叶酸组（Fa组）,每组12只。后6组均采用液压打击制作重度TBI模型。造模成功后即刻尾静脉给药200 mg/kg。Sham组和TBI组给予相同量等渗盐水,24 h后取脑。采用HE染色法观察TBI后各组脑组织形态学变化、测定脑组织含水量,用荧光定量RT-PCR方法检测AQP-4/TAUT基因表达。结果形态学检查：TBI 24 h后,神经细胞肿胀,细胞丢失,细胞核固缩,突起短小消失,坏死灶边缘可见炎性细胞浸润,β-Ala组同TBI组。但与TBI组比较,Tau组、Vc组、Fa组、Pre-Tau组形态上无显著改善;脑组织含水量：与Sham组相比,TBI组、β-Ala组伤后24 h显著升高（P〈0.05）。而Tau组、Vc组、Fa组明显降低,与Sham组无统计学差异;Pre-Tau组显著低于Sham组（P〈0.05）。基因表达：与Sham组相比,TBI组脑组织AQP-4 mRNA表达量显著升高（P〈0.05）,Fa组TAUT mRNA表达量显著升高（P〈0.05）。结论 Tau、Vc、Fa及Tau预防性治疗均可以显著降低脑水肿和AQP-4基因表达,对TBI后脑水肿有较好的治疗作用,但Tau、Vc对TBI早期的TAUT无调节作用,其对脑组织含水量的有效性并不是通过调节TAUT实现的。     

胸腺素β4对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的：观察胸腺素β4对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响,并探讨其作用机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、对照组、胸腺素β4组各24只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后,采用干湿重法测定缺血脑组织含水量,通过检测伊文蓝渗透到缺血侧脑组织的含量观察血脑屏障的通透性,应用RT-PCR法检测缺血脑组织紧密连接蛋白5（ Claudin-5）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9） mRNA表达。结果脑缺血再灌注损伤24 h后,与假手术组比较,对照组缺血侧脑含水量、伊文蓝含量、MMP-9 mRNA表达明显增加,Claudin-5 mRNA表达显著减少（ P均＜0．01）;与对照组比较,胸腺素β4组缺血侧脑组织含水量、缺血侧伊文蓝含量、MMP-9 mRNA明显降低,Claudin-5 mRNA表达明显升高（P均＜0．01）。结论胸腺素β4对大鼠脑缺血再灌注损伤后的血脑屏障具有保护作用,其作用机制可能是通过促进Claudin-5 mRNA表达和抑制MMP-9 mRNA表达实现的。     

脑创伤模型创伤区脑组织中miRNA-21的表达变化及意义

目的观察大鼠脑创伤模型创伤区脑组织中miRNA-21表达变化,探讨其与预后的关系。方法 196只大鼠随机分为假手术对照组（对照组）和创伤组,各98只。前者行头皮切开和磨除骨窗,保持硬膜完整,不进行打击;后者以液压打击法制作大鼠脑外伤模型后,分别在创伤后2、12、24、48、72 h和7、14 d行神经行为学评分,之后处死大鼠,取创伤区脑组织采用定量PCR检测miRNA-21,石蜡切片采用原位末端标记法（TUNEL法）行凋亡神经细胞染色并计数。采用Pearson积差相关检验分析miRNA-21表达水平与神经行为学评分和凋亡细胞的相关关系。结果对照组相当于创伤区脑组织中的miRNA-21表达并未随创伤时间的增加而变化。创伤组创伤区脑组织中miRNA-21表达随伤后时间延长而逐渐上升,于48 h达峰值,而后逐渐降至基础水平（P〈0.05）;神经行为学评分于48～72 h时升至最高而后逐渐恢复（P〈0.05）;凋亡的神经细胞计数于伤后72 h达高峰,而后逐渐减少,于伤后7～14 d稳定于一定水平（P〈0.05）。创伤组miRNA-21表达变化与神经行为学评分和凋亡的神经细胞呈正相关（r=0.430、0.411,P均〈0.01）。结论脑创伤模型创伤区脑组织中miRNA-21表达上调,其表达水平与脑创伤预后有关。     

全反式维甲酸对脑出血大鼠血肿周围脑组织基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对脑出血大鼠血肿周围组织基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响.方法 40只SD大鼠随机分为ATRA组和生理盐水对照组,每组分别设24 h、48 h、72 h和7 d等4个亚组,每个亚组5只.在立体定位仪引导下将自体血注入尾状核制备脑出血模型,模型制作成功后分别腹腔注射ATRA(1 mg/d)和等体积生理盐水.采用免疫组化染色法检测不同时间点脑组织MMP-9的表达情况.结果 脑出血后24 hATRA组和生理盐水对照组血肿周围微血管内皮细胞MMP-9表达均显著上调,48～72 h达高峰.在各个时间点,ATRA组MMP-9表达均显著低于生理盐水对照组(P均＜0.05).结论 ATRA能抑制脑出血大鼠血肿周围组织MMP-9表达,从而有可能减轻脑水肿.     

大鼠脑出血后血肿周围基质金属蛋白酶2和9及其组织抑制剂1的表达

目的观察大鼠脑出血后血肿周围组织基质金属蛋白酶2、9（MMP-2、MMP-9）及其组织抑制剂1（TIMP-1）的表达规律,探讨它们与脑出血后脑水肿的关系。方法取成年雄性SD大鼠156只,随机分为假手术组（18只）和脑出血组（138只）,脑出血组再分为出血后1、3、6、12、24、36、48、72h和7d亚组（每组15只）。采用自体血注入法建立大鼠脑出血模型,分别用脑组织伊文思蓝（EB）含量测血-脑屏障通透性,用干-湿重法测定脑组织的含水量,用Western blot法观察血肿周围MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达规律。每组3只大鼠用于透射电镜观察脑组织病理学形态。结果①血肿周围脑组织的含水量和EB含量在造模后1h起开始增高,48h达到高峰,各时点（除外术后7d的脑组织含水量）与假手术组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05～0.01）。②在脑出血后1h,同侧基底核MMP-2开始表达,24h达到高峰,48h前各时点与假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,术后48h恢复正常;MMP-9在脑出血后6h开始表达,48h达到高峰,7d前各时点与假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,术后7d恢复正常;TIMP-1在脑出血后12～36h表达降低,与假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0.05～0.01）。③同侧基底核脑组织含水量与EB含量（r=0.940,P〈0.01）、MMP-9表达（r=0.913,P〈0.01）、1～24h MMP-2表达（r=0.903,P〈0.05）呈正相关;与1～24hTIMP-1表达（r=-0.922,P〈0.05）呈负相关。EB含量与MMP-2表达呈正相关（r=0.930,P〈0.01）,与1～24hTIMP-1表达呈负相关（r=-0.950,P〈0.05）。④电镜观察显示,大鼠脑出血后48h,基底核区脑组织血管内皮基底膜遭到明显破坏。结论大鼠脑出血后血肿周围组织MMP-2、MMP-9的表达增加而TIMP-1表达减低,使MMPs与TIMPs之间的平衡遭到破坏,基底膜破坏增加,促进脑水肿的形成。