胎盘细胞凋亡和自噬与妊娠高血压疾病

目前妊娠高血压疾病的病因及发病机制未完全明确。近年来,研究发现胎盘细胞凋亡和自噬在妊娠高血压疾病的发病中起重要作用。胎盘细胞凋亡和自噬的变化贯穿妊娠高血压疾病发病的多个方面。胎盘细胞凋亡和自噬失衡,可能为妊娠高血压疾病的病因之一。现就胎盘细胞凋亡和自噬对妊娠高血压疾病发生、发展的影响予以综述。     

自噬及其与疾病和凋亡的关系

自噬是由Ashford和Porter在1962年提出的.它是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物,以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新.自噬受多种途径的调节,并与心脏疾病、肿瘤、神经变性疾病等诸多疾病息息相关.凋亡是指机体细胞在发育过程或在某些因素作用下,通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种主动性程序性细胞死亡,当凋亡发生时,细胞膜发生皱缩,细胞核固缩、碎裂;接着,细胞破裂,碎片被胞膜包裹而保持完整,称为凋亡小体;最后,凋亡小体被巨噬细胞所吞噬,其成分在溶酶体中降解.凋亡参与了众多细胞的死亡,它主要受bcl-2/bax家族的调节;其检测方法包括半胱氨酸蛋白酶-3蛋白及Bel-2蛋白的检测、TUNEL.实验、电镜观察凋亡小体等.近来研究发现自噬与凋亡也存在密切关系,两者相互协同而对细胞的转让产生影响.目前,对自噬与疾病及凋亡的确切关系仍存在广泛争议,现综述如下.     

JNK信号通路在细胞凋亡与自噬中作用的研究进展

JNK信号通路在多种疾病的发生与发展中起着至关重要的作用,导致JN K信号通路激活的因素复杂多样,具体机制尚不明确.JN K信号通路参与细胞凋亡与自噬这两种密切相关的应激反应,但其之间的分子相互作用有待探究.本文主要综述了JN K信号通路及其在细胞凋亡与自噬中的部分机制.     

姜黄素诱导人胃癌SGC7901细胞自噬性凋亡的研究

目的 观察姜黄素体外诱导人胃癌SGC7901细胞自噬性凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制.方法 用不同浓度的姜黄素处理SGC7901细胞,MTT法检测细胞增殖;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin,MDC)荧光染色和Hoechst33342荧光染色观察细胞自噬和凋亡的发生;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白NF-κB、自噬相关蛋白Beclin1及LC3Ⅱ的表达.结果 姜黄素可呈剂量依赖性明显抑制SGC7901的生长.MDC染色显示,40μmol/L姜黄素在作用12h后即可诱导SGC7901细胞发生自噬,24 h自噬减少;Hoechst33342荧光染色显示,40μmol/L姜黄素诱导凋亡在24 h最明显;流式细胞术显示,40μmol/L姜黄素作用24h时SGC7901细胞凋亡率明显增加.Western blot检测显示,姜黄素诱导SGC7901细胞自噬性凋亡过程中,凋亡相关蛋白NF-κB、自噬相关蛋白Beclin1及LC3的表达均上调.结论 姜黄素通过诱导自噬性凋亡抑制人胃癌细胞SGC7901的生长,其机制与NF-κB、Beclin1及LC3蛋白的表达上调有关.     

缺氧对自噬双重作用调节的研究进展

自噬是维持细胞内环境稳定的一个重要机制,与缺氧引起的细胞凋亡密切相关。一般来说,自噬能够阻碍细胞凋亡的诱导,抑制细胞凋亡相关蛋白酶的活化从而减少细胞损伤。然而,在缺氧条件下,自噬或自噬相关蛋白可能有助于诱导细胞凋亡,而这可能会加重细胞的损伤。此外,凋亡相关蛋白Caspase的活化可以降低自噬相关蛋白的表达,如Atg3、Beclin1蛋白,从而抑制自噬。尽管自噬和细胞凋亡之间的关系已被研究很多年,但潜在的调控机制还没有被清楚地理解。文章对自噬的双重作用和在缺氧条件下自噬和细胞凋亡之间的相互作用和分子调控机制进行综述。     

细胞自噬在多柔比星诱导淋巴瘤细胞凋亡中的作用

目的 研究细胞自噬在阿霉素诱导Raji细胞发生细胞凋亡过程中所起的作用。 方法 采用Western Blot法观察阿霉素杀伤Raji细胞过程中自噬相关蛋白的表达,并用MDC染色法观察Raji细胞内的自噬体和自噬溶酶体的形成情况;并在给予阿霉素的同时使用PI3K通路抑制剂3-MA和自噬溶酶体抑制剂NH4Cl对细胞自噬进行抑制后利用MTT和流式细胞术测定Raji细胞的细胞活力与凋亡。 结果 阿霉素能诱导Raji细胞发生细胞自噬,并且通过抑制自噬能显著地增强阿霉素诱导的Raji细胞的细胞凋亡（p<0.05, p<0.01）从而增加阿霉素的疗效。 结论 在阿霉素杀伤Raji细胞的过程中,阿霉素诱导的细胞自噬能减弱阿霉素诱导的细胞凋亡作用;并且自噬抑制剂3-MA和NH4Cl抑制细胞自噬能增强阿霉素诱导的Raji细胞的细胞作用,增强对Raji细胞的杀伤,并提示抑制自噬可能能增强阿霉素对淋巴瘤的杀伤。     

氯化镉对大鼠胰岛瘤INS-1细胞自噬与凋亡的影响

目的 研究典型持久性有毒污染物氯化镉(CdCl2)对大鼠胰岛瘤INS-1细胞自噬和凋亡的影响及二者的关系,同时探索可能的分子机制和参与因素.方法 ①以免疫印迹法(Western blot)检测细胞自噬和凋亡标志蛋白及自噬调节相关蛋白;②以RNA干扰(RNAi)手段沉默INS-1细胞自噬必需基因即自噬相关基因7(Atg7),以检测CdC12所诱导的细胞自噬对凋亡的影响;③以2′,7′-二氯荧光素二乙酸盐(DCFH-DA)染色法检测胞内活性氧(ROS)水平变化,并用活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和CdC12联合处理INS-1细胞,以确定ROS是否参与CdCl2所诱导的INS-1细胞自噬和凋亡.结果 CdCl2通过刺激ROS的产生进而诱导INS-1细胞自噬和凋亡;CdCl2所诱导的INS-1细胞自噬为非哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)依赖途径,且可能起到抑制凋亡的作用.结论 CdCl2可能通过刺激活性氧的增加而诱导INS-1细胞自噬和凋亡,且自噬是凋亡的抑制因素.     

心肌细胞Fas/Fas_L系统与程序性细胞死亡相关研究进展

细胞程序化死亡 (programmed cell death,PCD )包括Ⅰ型程序性细胞死亡—凋亡(apoptosis)和Ⅱ型程序性细胞死亡—自噬(Autophagy)。在大多数心脏疾病中细胞程序性死亡均发挥重要作用,这一过程受到多层次,多信号途径的共同调控,其中心肌细胞的凋亡和自噬都与死亡受体体系（Fas/Fas_L）有密切关系。本文从凋亡和自噬角度探讨死亡受体体系在心肌的病理生理机制。     

自噬分子机制与疾病研究进展

自噬是不同于凋亡的另一种程序性细胞死亡。它可以清除体内的异常蛋白质、病原微生物以及一些受损的细胞器。另外在清除上述物质的同时,自噬还可以促进细胞衰老和细胞表面抗原的表达,维持基因组的稳定性和防止坏死,在预防一些疾病中有重要作用,如肿瘤、神经退化性疾病及免疫系统疾病等。本文就自噬在分子水平上是如何调控以及与疾病相关性做一简要综述。     

自噬与心血管疾病

心血管疾病已成为威胁人民健康的重要杀手,目前关于其发病机制的研究主要集中在炎症致病、免疫打击、细胞凋亡等方面。自噬是生物进化过程中高度保守的,与生长、发育、衰老、疾病状态等密切相关的生理活动,其与动脉粥样硬化等多种心血管疾病的发生、发展关系密切。血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和巨噬细胞自噬在不同疾病中起着不同的作用,探究自噬与疾病关系有望为疾病治疗提供新的靶点。     

吉西他滨诱导膀胱癌T24细胞自噬的实验研究

目的 观察吉西他滨(gemcitabine,GEM)处理膀胱癌T24细胞后引起凋亡的同时是否诱导T24细胞自噬的产生,并初步探究其自噬产生的机制,以及自噬与凋亡之间的关系.方法 体外培养T24细胞,应用CCK-8法测定细胞抑制率;Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP的活化,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ、底物蛋白P62和自噬潮,以及JNK通路相关蛋白Jnk1、P-Jnk、Bcl-2的表达情况;并通过透射电镜观察细胞超微结构自噬体的变化;Annexin V-PI双流式细胞术检测抑制自噬后细胞凋亡率的变化情况.结果 CCK-8检测结果显示吉西他滨能有效抑制膀胱癌T24细胞增殖;1.0 μg/mL吉西他滨处理T24细胞4h即可发生明显的自噬,透射电镜观察可见自噬体小体的形成;Western blot检测结果显示吉西他滨作用T24细胞后cleaved-Caspase-3、PARP和LC3-Ⅱ表达增高,P62表达降低;P-Jnk出现活化,Bcl-2发生降解;而抑制自噬后能显著增强吉西他滨诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡.结论 吉西他滨介导膀胱癌T24细胞凋亡的同时又诱导保护性自噬,JNK信号通路参与调控其自噬的发生,抑制自噬可以明显增强膀胱癌T24细胞对吉西他滨的化疗敏感性.     

自噬在双联苄类化合物诱导肿瘤细胞凋亡中的作用机制

目的 探讨自噬在天然萜类、双联苄类化合物诱导肿瘤细胞凋亡中的作用.方法 以前期筛选得到的具有抑制肿瘤细胞增殖活性的三萜化合物ST52和乙酰基-11-酮基-β-乳香酸(AKBA)、双联苄化合物H50、F41、H48和Riccardin D (RD)处理稳定表达GFP-LC3的人胶质瘤细胞株U87,荧光显微镜观察GFP-LC3的聚集斑点,确定化合物的自噬诱导作用.Western blot检测人激素非依赖前列腺癌细胞株PC-3细胞中的自噬相关蛋白LC3、Atg5、Beclinl和p62的表达以及凋亡标志蛋白多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的剪切情况.自噬抑制剂或siRNA阻断Atg5表达后进行化合物处理,流式细胞技术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞的增殖活力,确定自噬对化合物诱导凋亡的影响.结果 筛选结果显示,双联苄类化合物均有不同程度的自噬诱导作用,其中RD的作用较强.RD促进PC-3细胞中LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化,中等强度诱导Atg5和Beclin1的表达,并导致自噬底物p62的降解.抑制自噬后,能增加RD诱导的细胞凋亡与PARP剪切,但凋亡抑制剂Z-VAD-FMK并不影响RD对LC3-Ⅱ的诱导程度.结论 RD诱导PC-3细胞产生具有保护性作用的自噬现象,抑制自噬可提高RD的抗肿瘤作用.     

自噬与神经系统疾病

自噬是细胞内异常聚集蛋白和受损细胞器主要的降解和循环途径,维持着细胞正常的代谢平衡及物质更新。自噬具有神经保护作用,可通过调节神经元和胶质细胞的稳态、发育和凋亡等生理过程影响神经系统的功能状态。近年来大量研究表明,神经系统疾病与异常自噬密切相关,自噬的抑制或过度激活均能影响抑郁症、神经退行性疾病和精神分裂症的发生发展。了解自噬在神经系统疾病中的作用机制对于预防与治疗相关疾病具有重要意义。该文主要对当前自噬与上述神经系统疾病的研究进展进行综述,为以上疾病的进一步研究提供参考。     

高尔基体磷蛋白3通过促进细胞自噬抑制紫杉醇诱导的hela细胞凋亡

目的 探讨紫杉醇处理hela细胞时,高尔基体磷蛋白3（Golph3）对细胞自噬的调控和对紫杉醇引起的细胞凋亡的影响。方法 通过慢病毒感染的方法上调hela细胞中Golph3的表达;通过转染siRNA方法下调hela细胞中Golph3的表达;使用透射电镜观察细胞中的自噬小体;免疫印记检测自噬标记物LC3II的蛋白表达水平;通过流式细胞仪检测细胞凋亡率;使用自噬抑制剂 3-MA抑制 hela细胞自噬。结果 Golph3慢病毒可上调 hela细胞 Golph3蛋白表达,siRNA可抑制 hela细胞 Golph3蛋白表达。透射电镜观察结果显示,Golph3过表达组细胞自噬小体的数量增多,siRNA组细胞自噬小体的数量减少。免疫印迹结果显示,Golph3组细胞中自噬标记物LC3II表达增强,p62表达减弱;siRNA组LC3II表达抑制,p62表达增强。凋亡检测结果显示,Golph3组紫杉醇诱导的细胞凋亡率下降（P<0.01）,siRNA组细胞凋亡率上升（P<0.01）。自噬抑制剂3-MA单独处理不会显著增加hela细胞凋亡率。3-MA处理同时下调Golph3表达可以促进紫杉醇引起的细胞凋亡（P<0.01）。结论 紫杉醇处理hela细胞时,上调Golph3促进hela细胞自噬,抑制细胞凋亡;下调Golph3抑制hela细胞自噬,促进细胞凋亡。Golph3通过调控细胞自噬影响紫杉醇引起的hela细胞凋亡。     

MitoQ通过NIX介导的线粒体自噬对肺腺癌A549细胞迁移及凋亡的影响

目的 探讨Mitoquinone(MitoQ)通过NIX介导的线粒体自噬对人肺腺癌A549细胞迁移及凋亡的影响.方法 不同浓度的MitoQ诱导A549细胞12 h,利用CCK-8检测细胞存活率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测NIX、p62及Bax等线粒体自噬及凋亡相关蛋白表达.结果 与对照组比较,各MitoQ组细胞发生明显的增殖及细胞迁移抑制.并且随着凋亡的发生,自噬促进相关蛋白NIX表达上调,自噬抑制相关蛋白p62表达下调,凋亡促进相关蛋白BaX表达上调,并且伴随着MitoQ浓度的升高差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,MitoQ组细胞表现出迁移及增殖能力下降,线粒体自噬及凋亡水平升高.结论 MitoQ能抑制A549细胞的迁移及增殖,促进A549细胞凋亡,其机制可能与MitoQ调节线粒体自噬通路上的关键分子诱导A549细胞自噬有关,该自噬的关键分子可能为NIX蛋白.     

顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡与自噬的研究

目的 探讨顺铂对Hela细胞凋亡和自噬的影响.方法 用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)观察顺铂对HeLa细胞生长抑制情况;Hoechst 33342荧光染色检测细胞凋亡;间接免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3和P62的变化;免疫印记法检测细胞凋亡蛋白Bax/Bcl-2、Caspase-3和自噬标志蛋白LC3和P62的变化.结果 顺铂对Hela细胞生长抑制作用表现为时间剂量依赖关系;顺铂作用Hela细胞导致Bax/Bcl-2比值和Caspase-3表达增加,同时自噬标志蛋白LC3和P62活化.结论 顺铂诱导Hela细胞发生凋亡,伴有自噬发生.     

自噬及自噬性细胞死亡抑制紫杉醇诱导的胃癌细胞凋亡

目的明确自噬和自噬性细胞死亡在胃癌SGC-7901及BGC-823细胞紫杉醇处理过程中的存在,探讨其对紫杉醇诱导的凋亡敏感性的作用。方法流式细胞仪和MTT法分别检测紫杉醇诱导SGC-7901及BGC-823细胞的凋亡率和总死亡率,死细胞DAPI染色荧光显微镜检测非凋亡性细胞死亡,吖啶橙染色流式细胞仪和荧光显微镜分别定量、定性检测自噬和自噬性细胞死亡的存在,自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤和紫杉醇共同作用细胞后流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化。结果紫杉醇处理SGC-7901及BGC-823细胞早期(24h内)可出现明显的细胞自噬性变化,自噬高峰期出现紫杉醇诱导3~6h,自噬性细胞死亡存在并可能是紫杉醇诱导的非凋亡性细胞死亡的主要形式,抑制紫杉醇诱导的细胞自噬可以促进紫杉醇诱导细胞凋亡的发生。结论紫杉醇可以诱导胃癌SGC-7901及BGC-823细胞自噬及自噬性细胞死亡,并且紫杉醇诱导的胃癌细胞自噬会拮抗胃癌细胞凋亡的发生,从而为胃癌化疗耐受提供新的解释,可能为胃癌治疗提供新的途径。     

促凋亡蛋白NIX的研究进展

细胞凋亡又称为程序性细胞死亡,是多细胞生物维持生长发育和组织形态所特有的,由多种基因参与表达、精密调控的细胞主动死亡过程.NIX是近年来发现的隶属于Bcl-2家族中的BH3-only促凋亡家族成员.虽然具有Bcl-2家族特征性的BH3域和羧基末端跨膜结构域(TM),也能与Bcl-2形成二聚体,但NIX的促凋亡活动明显不同于其他Bcl-2家族成员,本文通过对NIX的促凋亡功能机制以及其在细胞自噬、线粒体自噬、肿瘤及心肌疾病发病机制等方面的研究进展作一综述.     

基于缺血性脑卒中中自噬与凋亡相互转化研究进展

众多研究发现,自噬与凋亡在多种疾病中共存。自噬是真核生物利用溶酶体降解受损或老化的细胞器达到物质的循环再利用,是细胞应对内外环境变化的重要保护机制;而凋亡是一种由不同细胞信号途径调控的主动过程,最终使细胞走向死亡。在正常生理状况下,自噬维持着细胞内环境稳定的基本状态,但当自噬被过度激活时,由于大量积聚的蛋白无法被消化降解,诱发细胞向凋亡转换。近年来,脑卒中急剧增长的发病率和致残率引起学者们的强烈关注,因此如何调节自噬与凋亡在缺血性脑卒中的相互转化一直是学术界共同关心的重点,现对过往的研究进行归纳整理,为基础或临床医学的发展提供参考。     

自噬在椎间盘退变中的作用研究进展

椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）是脊柱退行性疾病发生的始动因素,也被认为是导致下腰痛发生的重要原因。目前认为椎间盘细胞的凋亡与衰老下调了细胞的功能,是椎间盘退变的重要致病因素。自噬（autophagy）是哺乳动物细胞的一种宿主防御机制,不仅与细胞的代谢、增殖、凋亡紧密相关,更参与多种退行性疾病的病理过程。近年来细胞自噬在椎间盘退变中的研究逐渐成为热点,本文就自噬在椎间盘退变中的发生、诱导因素、作用及机制综述如下。