非小细胞肺癌患者骨髓CK19和LUNX mRNA的实时荧光定量检测和意义

目的：检测非小细胞肺癌患者CK19mRNA和LUNXmRNA的表达情况，探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性．方法：选择初治的非小细胞肺癌（NSCLC）患者62例，以肺部良性疾病10例作为对照组，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）和普通RT—PCR技术，检测肺癌、良性病变肺组织和骨髓的CK19mRNA和LUNXmRNA的表达。结果：肺癌和良性病变肺组织RT—PCR检测结果显示CK19mRNA和LUNXmRNA表达阳性率为100％：62例NSCLC患者骨髓标本FQ—RT—PCR检测结果显示，NSCLC患者中骨髓CK19mRNA表达阳性率45．2％（28／62），明显高于肺良性病变组10％（1／10）（P=0．037），NSCLC组骨髓LUNXmRNA表达阳性率38．7％（24／62）明显高于肺良性病变组0％（0／10）（P=0．017）；骨髓CK19mRNA表达阳性率随病理分期升高，接近统计学意义（P=0．06），而与病理类型、肿瘤分化程度无关；骨髓LUNXmRNA表达阳性率随分期升高且有统计学意义（P=0．02），而与病理类型、肿瘤分化程度无关：骨髓CK19mRNA和LUNXmRNA表达明显相关（P〈0．001）结论：CK19mRNA和LUNXmRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物，可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床分期和治疗、     

肺特异性X蛋白与细胞角蛋白19在非小细胞肺癌中的表达及意义

背景与目的: 常规细胞学诊断肺癌患者淋巴结中的癌细胞具有重要的应用价值,然而对淋巴结和癌旁组织内微转移的诊断有限.本研究探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA的表达及其在NSCLC发生、转移和预后中的意义.方法:采用实时定量反转录(real-timeRT-PCR)方法检测20例经病理诊断为非小细胞肺癌(NSCLC)组织及42枚区域性淋巴结中LUNX mRNA和CK19 mRNA的表达情况并进行定量分析.以9例肺良性病变患者标本及6枚淋巴结作为对照组.对所有淋巴结进行常规病理切片并行HE染色,观察转移情况.结果: ①癌组织中LUNX mRNA水平显著高于对照组,但与患者淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关.②癌旁组织中LUNX mRNA水平明显高于对照组,与淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期有关.③淋巴结组织中CK19 mRNA水平接近对照组,与淋巴结转移及TNM分期有关,但与患者肿瘤大小无关.④淋巴结组织中LUNX mRNA水平接近对照组,但与患者淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期无关.⑤LUNX mRNA和CK19 mRNA均与患者年龄、性别、组织学分型无关.⑥real-time RT-PCR法和常规病理方法检测肺癌淋巴结转移的差异有显著性. 结论: LUNX mRNA与CK19 mRNA均可作为real-time RT-PCR检测NSCLC患者癌旁组织、区域性淋巴结微转移的分子标志物,但前者在特异性和敏感性上优于后者.本方法的建立可能有利于提高肺癌淋巴转移的检出率,从而指导临床分期和治疗.     

实时荧光定量RT—PCR检测NSCLC患者外周血CK19mRNA和LUNXmRNA实验研究

[目的]应用实时荧光定量RT—PCR检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19mRNA和LUNXmRNA,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义。[方法]选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT—PCR检测外周血CK19mRNA和LUNXmRNA相对定量分析结果。[结果]（1）肺癌组与健康对照组的CK19mRNA阳性表达率及相对表达量均有显著差异;肺癌组阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性,其相对表达量鳞癌患者高于腺癌患者（P〈0．05）。（2）肺癌组与健康对照组的LUNXmRNA阳性表达率有显著差异,其表达与临床病理特征无相关性。[结论]CK19mRNA和LUNXmRNA作为实时荧光定量RT—PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标志物,具有一定临床应用价值。     

LunX和CK19基因定量表达在肺癌诊断及疗效观察中的应用研究

目的：探讨采用荧光定量RT—PCR检测肺癌患者外周血LunX和CK19基因的表达，以及在肺癌诊断和疗效观察中的应用价值。方法：建立定量检测LunX和CK19 mRNA的荧光定量RT—PCR技术，检测在肺癌患者外周血的表达及治疗前后的表达水平的比较。结果：外周血标本中治疗前病例、治疗后病例和肺部良性病例LunX mRNA的表达分别为83．87％（26／31）、46．67％（7／15）和10％（1／10）。治疗前肺癌组和肺部良性病例组LunX mRNA的表达差异有统计学意义，X^2=15．2，P〈0．001；肺癌治疗前后LunX mRNA的表达也有统计学意义，X^2=4．9，P〈0．05。正常对照10例和非肺癌的肿瘤患者4例LunX mRNA的表达均为阴性，与LunX基因相比较，CK19基因灵敏度相近，但特异性较差。结论：荧光定量RT—PCR检测LunX基因的表达可以作为肺癌诊断及治疗前后疗效考核的重要参考指标，应用价值优于CK19基因。     

临床早期宫颈癌外周血CK19 mRNA的表达

目的：探讨RT-PCR法检测早期宫颈癌外周血CK19 mRNA的表达水平及临床意义。方法：应用RT-PCR法检测291例O～ⅡA期宫颈癌和162例妇科良性肿瘤术前外周血CK19 mRNA的表达情况，另取30名健康人作对照。结果：291例肿瘤患者CK19阳性率为19．93％(58／291)，妇科良性肿瘤和健康人阳性率均为O。结合临床病理资料分析，宫颈癌患者外周血CK19 mRNA阳性与临床分期、淋巴结转移、淋巴血管间隙受侵和深肌层浸润间存在明显相关性，P＜O．05；而与年龄、病理类型、分化程度和宫旁转移不相关．P＞O．05。结论：CK19 mRNA可作为检测宫颈癌外周血微转移的指标之一。     

检测LUNX mRNA表达诊断非小细胞肺癌微转移的可行性及其临床意义

背景与目的 微转移的检测对非小细胞肺癌的个体化治疗和指示预后具有重要意义。LUNX为近年新发现的人类肺组织特异性基因。本研究的目的是检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者LUNX mRNA的表达情况，探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法 选择初治的NSCLC患者62例，以肺部良性疾病10例与健康人10例作为对照组，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT—PCR）和普通RT—PCR技术，检测肺癌、良性病变肺组织、骨髓和外周血LUNX mRNA的表达。结果肺癌和良性病变肺组织中LUNX mRNA阳性表达率均为100％。肺良性病变组骨髓及外周血标本和健康对照组外周血标本中LUNX mRNA表达皆为阴性。62例NSCLC患者骨髓LUNX mRNA阳性表达率为38．7％（24／62），外周血LUNX mRNA阳性表达率为29．0％（18／62），至少一项阳性表达者占45．2％（28／62）；骨髓LUNX mRNA阳性表达率随分期升高且有统计学意义（P=0．02），与病理类型、肿瘤分化程度无明显关系；外周血LUNX mRNA表达与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度均无明显关系。NSCLC患者骨髓和外周血LUNX mRNA表达有相关性（P〈0．001）。结论 LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者微转移的特异、敏感的分子标志物，可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床分期和治疗。     

检测CK19 mRNA、CEA mRNA诊断非小细胞肺癌外周血微转移

目的 探讨检测细胞角蛋白(cytokeratin 19，CK19)mRNA、癌胚抗原(cancer embryonic antigen，CEA)mRNA诊断非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者外周血微转移的临床意义。方法 应用RT-PCR法检测35例NSCLC患者外周血中的CK19mRNA、CEAmRNA，并以20例良性病变、20例健康人作对照。结果 35例NSCLC患者外周血CK19mRNA、CEAmRNA阳性表达率分别为40％和57％，两者均阳性者40％，两者均阴性者43％；肺良性疾病患者20例，CK19mRNA阳性2例(10％)，无CEAmRNA阳性者；20例健康对照2个指标检测结果均为阴性。随访发现CK-19mRNA阳性、CEAmRNA阳性和二者均阴性患者的远处转移率分别为50％、56％和27％。结论CEAmRNA和CK19mRNA是检测肺癌患者外周血微转移的良好标志物，检测外周血微转移有助于预测肺癌患者预后。     

肺癌患者外周血CK19-mRNA的测定及其临床意义

目的：建立一种敏感的方法来检测肺癌患者外周血循环癌细胞,并探讨其临床应用的意义。方法：采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测肺癌患者患者外周血CK19－mRNA的表达情况。结果：40例肺癌外周血标本中16例（40％）CK19－mRNA阳性,15例肺良性病变中1例＊（6．6％）阳性,5例正常人为阴性,10例有转移的肺癌患者,其外周血CK19－mRNA均为阳性（100％）,30例检测时尚我转移证据者,有6例阳性（20％）,经过半定量分析,两组CK19－mRNA在量上判别有显著性,结论：CK19－mRNA可作为一个标志物来检测肺癌患者外周血微转移,定量检测外周血CK19－mRNA有助于诊断肺癌的血行转移,定期检测外周血CK19－mRNA,尚可作为疗效的观察指标。     

定量RT-PCR检测乳腺癌患者外周血中 CK19 mRNA表达的意义

目的:建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应法(RT-PCR)检测乳腺癌患者外周血细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达的状况,并探讨其临床意义.方法:70例经病理诊断的乳腺癌患者和30名健康对照者,以实时荧光定量RT-PCR检测其外周血CK19 mRNA的表达.结果:70例乳癌患者外周血CK19 mRNA表达的阳性率为32.9%(23/70),30例对照者的阳性率为3.3%(1/30),经统计学分析,两者差异具有显著性差异(P=0.002).在不同分期的乳腺癌患者中均存在不同程度CK19 mRNA的表达,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者外周血CK19 mRNA阳性率随分期增加而增高.结论:实时荧光定量RT-PCR方法可检测出各期乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA的表达,具有较高的敏感性和特异性,提示循环肿瘤细胞可能存在于乳腺癌发展的各个阶段.     

10例大肠癌患者外周血中CK20mRNA检测

目的：检测大肠癌患者外周血中的癌细胞，以确定其肿瘤是否有微转移发生。方法：应用逆转录酶链反应(RT-PCR)，检测10例大肠癌患者癌组织和外周血中CK20mRNA的表达。结果：10例大肠癌患者中有5例外周血检测出CK20mRNA，阳性率为50％。结论：外周血中CK20mRNA检测可作为大肠癌病人肿瘤微转移的参考指标，有助于肠癌转移的早期发现和选择更好的化疗方案。     

大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

肺癌患者外周血癌胚抗原 mRNA和细胞角蛋白19 mRNA的联合检测

目的　观察肺癌患者外周血循环细胞中癌胚抗原 (CEA)mRNA和细胞角蛋白 19(CK19)mRNA的表达情况 ,并探讨CEAmRNA和CK19mRNA联合检测的临床意义。方法　用RT PCR方法 ,分别检测 5 0例肺癌患者、2 5例肺部良性疾病患者和 37例健康志愿者外周血中CEAmRNA和CK19mRNA的表达 ,并对CEAmRNA和CK19mRNA联合检测与单项检测的阳性率进行比较 ,分析联合检测对肺癌诊断的灵敏度与特异性。结果　 5 0例肺癌患者中 ,CEAmRNA阳性表达率为 6 0 .0 % (30 / 5 0 ) ,CK19mRNA阳性表达率为 38.0 % (19/ 5 0 ) ,两者联合检测阳性率为 82 .0 % (41/ 5 0 )。联合检测与单项检测相比 ,能显著提高诊断灵敏度 ,且并不影响特异性。联合检测与单项检测相比 ,灵敏度差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,特异度差异无显著性 (P >0 .0 5 )。同时 ,肺癌患者的联合检测阳性率亦均显著高于肺部良性疾病组 (2 5例 ,阳性率 2 8.0 % )和健康对照组 (37例 ,阳性率 8.1% ;P <0 .0 0 1)。结论　外周血循环细胞中CEAmRNA和CK19mRNA的联合检测可提高肺癌细胞向外周血播散的检出率 ;随访并扩大样本含量有助于探讨其在检测微转移中的意义     

RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其表达的临床意义.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,分别检测非小细胞肺癌患者和对照组患者外周血中CK19 mRNA的表达.结果:43例非小细胞肺癌患者外周血中CK19 mRNA表达阳性率为56%,对照组阳性率为5%,两组外周血CK19 mRNA阳性率比较有显著性差异(P＜0.01);外周血CK19 mRNA阳性率与病理类型无相关性;淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19 mRNA阳性率分别为66%(21/32)和18%(2/11),二者差异显著(x2=6.65,P＜0.05).随TNM分期上升,CK19mRNA阳性率增加(x2=18.03,P＜0.01).结论:CK19 mRNA可作为RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的分子标志物,该方法敏感性高,有助于早期诊断肺癌血行转移,指导临床分期和治疗.     

肺癌患者三种微转移标志物临床意义的比较研究

目的评价肺癌患者外周血LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA诊断微转移的特异性、敏感性,探索肺癌患者微转移的早期诊断.方法以肺部良性疾病30例、健康人10例的外周血为对照,以LUNX mRNA 、CK19 mRNA、CEA mRNA的表达为指标,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例肺癌患者外周血、手术切除区域44个淋巴结的微转移,并根据淋巴结病理切片、临床分期、随访过程中复发转移率评价微转移的临床意义.结果①LUNX mRNA、CK19 mRNA、CEA mRNA在肺癌组织的表达率均为100%(35/35).②48例肺癌患者外周血中LUNX mRNA阳性30例(62.5%),CK19 mRNA阳性24例(50.0%),CEA mRNA阳性32例(66.7%);44枚肺癌患者手术切除的区域淋巴结,LUNX mRNA阳性16枚(36.4%),CK19 mRNA阳性12枚(27.3%),CEA mRNA阳性18枚(40.9%).③30例肺部良性疾病患者外周血中,CK19 mRNA表达阳性2例(6.7%),LUNX mRNA或CEA mRNA表达均阴性;10例健康人外周血和11枚取自肺良性疾病患者的淋巴结,3个指标检测结果均为阴性.④44枚肺癌区域淋巴结中,普通病理组织学检出6枚(13.6%)有癌转移,阳性率明显低于RT-PCR检测结果(P<0.05).⑤3种微转移指标的阳性率均随TNM分期的增加而升高(P=0.01).⑥随访发现外周血微转移阳性患者的复发率高于阴性患者.结论 LUNX mRNA、CK19 mRNA 、CEA mRNA有可能成为监测肺癌微转移的分子标志.