分泌抗人Clq单克隆抗体杂交瘤细胞系建株成功

Clq是补体经典活化途径中第一成份的亚单位。Clq识别免疫复合物后,能导致补体活化,在机体抗感染免疫、改变免疫复合物的致病性以及免疫调控中起着重要作用。为了进一步深入开展免疫复合物发病机理的研究,我校免疫学研究室在国内首次成功地建立了分泌小鼠抗人Clq单克隆抗体杂交瘤细胞系(四株)。     

分泌抗H_(615)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

用抗正常615纯系小鼠肝细胞抗体处理的H615瘤细胞免疫Balb/c小鼠、取其脾细胞与小鼠骨髓细胞融合、以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测、建立两株分泌抗H615单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615小鼠的肝、脾、肺、肾、心肌、横纹肌、胸腺的组织细胞和小鼠肿瘤细胞及人肝癌细胞无交叉反应,证明两种单克隆抗体具有一定的特异性。对两种单克隆抗体进行亚类检定均属IgG_1。     

分泌抗H_(615)单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

用抗615纯系小鼠的正常肝细胞抗体处理的H_(615)瘤细胞免疫BALB/c系小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,以间接免疫荧光法和细胞ELISA两种方法检测,建立两株分泌抗H_(615)单克隆抗体的杂交瘤细胞系8A58和12C_6。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615系小鼠的肝、脾、肺、肾、脑、心肌、横纹肌、胸腺组织细胞以及小鼠肿瘤细胞、人肝细胞性肝癌细胞均无交叉反应。证明两种单克隆抗体具有一定的特异性。两种单克隆抗体均属IgG_1。     

分泌抗HBsAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

纯化的HBsAg免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0—Ag14用PEG进行融合。杂交瘤出现后以PHA和ID法检测其上清,阳性孔的细胞两次克隆化,筛选出两个产生抗—HBs的杂交瘤细胞系—XM—B_5、XM—C_5。染色体99～106条,均包含有SP2/0的两条标记染色体。该两个细胞系所分泌的抗体皆为小鼠IgG_1。经传代(还用体外激发法)或冷冻复苏后的,都仍保持其分泌抗体的能力。XM—B5所分泌的抗—HBs抗体,经纯化后已建立了RPHA和ELISA法,并已由省防疫站应用于临床检测。     

分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以医用尿激酶免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Fo和Ns-1骨髓瘤细胞进行3次融合,筛选到6株分泌抗尿激酶单克隆抗体的杂立瘤细胞系,分别为IUB_5、IUD_2、3UA_2、3UD_12、3UG_2和3UH_7细胞株,对其中IUB和IUD_2两个细胞株进行克隆化培养、冷冻、储存、复苏传代和染色体分析等处理,结果显示IUB_5和IUD_2确系BALB/C鼠脾细胞与FO骨髓瘤细胞融合后获得的单个细胞的克隆。根据免疫双扩散法和ELISA方法鉴定,它属IgG_1和IgG_(2(?));其培养上清液的ELISA效价为10~(-2)～10~(-3),注入BALB/C×C_(57)第一代杂交鼠腹腔诱生的腹水抗体效价达10~(-6)～10~(-7)。经高纯度的低分子量尿激酶检测后,确定是抗高分子量尿激酶的单克隆抗体。     

分泌抗尿激酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

尿激酶(Urokinas;UK)能促进血栓的溶解,是临床上治疗脑血栓及肺栓塞的有效药物。商品UK由人尿中提取,还可由基因工程技术制备。从这两种途径所得到的UK,含杂质较多,必须经过有效的提纯才能达到临床应用的理想纯度。单克隆抗体(Mc Ab)由于其专一性强,特异性高,是纯化药物的理想手段。本工作的目的是制备抗UK的McAb,以用于粗制品UK的纯化。 用BALB/C小鼠,以市售的UK(上海     

分泌抗人恶性疟的单克隆抗体的杂交瘤细胞系

当前疟疾疫苗研究的突破点是如何获得足够纯化的保护性抗原,用具有保护性的单克隆抗体以亲和层析法提取相应的保护性抗原是获得高纯度保护性抗原的有效办法。因此,有些疟疾免疫的研究者已把淋巴细胞杂交瘤技术引用于疟疾疫苗的研究中。 Perrin、高敏新曾获得抗人恶性疟的单克隆抗体,在体外对原虫生长的抑制率分别在90％和60％以上,表明用保护性单克隆抗体获取人     

抗日本血吸虫循环抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

为检测日本血吸虫宿主循环抗原提供有价值的McAb,用小鼠骨髓瘤细胞SP2/O株与日本血吸虫循环抗原免疫的BALB/C小鼠脾细胞进行融合,融合率90.20%。经用ELISA和IFA检测,总阳性率34.13%。经多次筛选和克隆化后,获得2株分泌McAb的细胞株:G-A12和H-E9。它们均属IgG2a亚类。Western blot结果表明G-A 12所针对的靶抗原为sjCAg31KD,H-E9为SjAW 31 KD。IFA检测发现H-E9主要定位于成虫表膜;G-A12主要定位于成虫肠道。这2株杂交瘤细胞在体外培养下稳定地分泌特异性抗体迄今已达6个月。     

分泌血吸虫抗原杂交瘤的制备

目的 制备分泌血吸虫抗原的杂交瘤。方法 采用杂交瘤技术，将血吸虫成虫细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，ＨＡＴ选择性培养，结果 获得了１株培养上 有与血吸虫病人血清起反应的杂交瘤。其染色体数为７２－８４，该杂交瘤细胞可持续培养１１周以上，但其生长缓慢，在培养８周后，出现细菌逐渐死亡。结论 杂交瘤技术不适于远缘杂交，细胞死亡可能与ＤＮＡ隔离一染色体物质丢失有关。     

分泌抗SPA单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

以 SPA 作基础免疫 BALB/C 小鼠后,融合前三天直接脾内免疫,取脾细胞与 SP_2/O 瘤细胞常规融合,融合率100%;以快速 ELISA 法检测抗体,阳性率60%。5次有限稀释法克隆化后获得7株杂交瘤细胞,作中和抑制试验,证实为 SPA 特异性抗体。经鉴定属 IgG2a 及 IgG2b 亚类。电镜观察细胞融合,发现其细胞内含逆转录病毒。杂交瘤细胞液氮保存与体外连续传代一年,仍保持原有各种特性。     

分泌抗马来丝虫成虫单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

应用杂交瘤枝术,以小鼠骨髓瘤 SP~z/O 与用马来丝虫成虫免疫成功的BALB/C 小鼠脾细胞融合后,成功地建立了一株名 XM—H_7的杂交瘤细胞。间接免疫荧光试验检测其上清中特异性抗体的存在,用有限稀释法2次克隆化。XM—H_7的核型,染色体为85—104条,40%为92条。细胞生长良好,至今持续培养6个月以上仍不失其分泌特异抗体的效应。     

日本血吸虫成虫和虫卵主要血清学抗原的鉴定和理化学分析

应用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳、化学染色和免疫印斑对日本血吸虫成虫和虫卵的主要血清学抗原进行了鉴定和理化学分析。成虫有8个主要的血清学抗原分子,其分子量和化学性质分别为152kDa、脂蛋白;145kDa、脂蛋白;32kDa、脂蛋白;30kDa、脂蛋白;28kDa、糖脂蛋白;15kDa、糖脂蛋白;12kDa、糖脂蛋白;11kDa、糖脂蛋白。虫卵有7个主要血清学抗原分子,其分子量和化学性质性质分别为32kDa、脂蛋白;28kDa、脂蛋白;15kDa、糖蛋白;12.5kDa、脂蛋白;12kDa、糖蛋白;11kDa、糖蛋白;10.5kDa、糖蛋白。     

25个分泌抗SabinⅠ型疫苗株单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其在抗原分析中的应用

用Sabin Ⅰ型疫苗株建立25个杂交瘤细胞系,其中7个间接免疫荧光试验阳性,18个中和试验阳性,它们可分泌三种 McAb:型特异的 5个,株特异的 6个,二者之间的 13个;L_(76)号 McAb既和10株 Polio Ⅰ型病毒结合,又可与Ⅱ型 MEF-1 病毒起阳性荧光反应;株特异性McAb 可用微量中和试验鉴别 Sabin 株与非 Sabin株;文中初步分析10株 Polio Ⅰ型病毒的抗原性。     

分泌抗组胺单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立(简报)

本研究用1,4-对苯醌(Bq)做交联剂,制备组胺-Bq-牛血清白蛋白结合物(组胺-Bq-BSA)并免疫BALB/C小鼠,用Sp2/0.Ag14骨髓瘤细胞与免疫小鼠的脾细胞融合。应用ELISA间接法检测抗体,包被抗原为组胺-Bq-卵清蛋白结合物(组胺-Bq-OA).筛选出两株抗组胺单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株.即Z255B3和Z253E2。经三次克隆后分别注入同系小鼠腹腔内,所产生的腹水经ELISA间接法测定Z255B3     

分泌抗B型肉毒毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

我国由肉毒毒素引起的食物中毒以A、B型最常见。但用常规法制备的抗血清在两型间常有交叉反应,不适于分型鉴定之用。即使应用亲和层析交叉吸收纯化,仍难以获得B型特异性抗体。为获得高效价的型特异性抗体,本研究以B型肉毒类毒素免疫纯系BALB/c小鼠,注射3次后,血清抗体琼脂双     

10株分泌HSV—Ⅱ型单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

用HSV-ⅡUW268株免疫BALB/c鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆化后获得10株分泌抗HSV-ⅡUW268株单克隆抗体的细胞系。其中1株仅与HSV-ⅡUW268株发生特异免疫反应,9株与HSV-Ⅱ和HSV-IF_(17)均发生免疫反应。用免疫沉淀试验检测单克隆抗体的Ig类型为IgG_1。保存的杂交瘤细胞仍能稳定地分泌抗HSV-ⅡUW268株的单克隆抗体。     

分泌抗人A型红细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的血清学检验

本文报道对能分泌抗人A型红细胞单克隆抗体(McAb)的细胞株ZMC_9,进行血凝试验、抗体效价测定、吸收释放试验、亲和力、特异性测定,以及唾液抑制试验的结果。材料与方法一、McAb取自ZMC_9杂交瘤株培养上清液和该株细胞注射于小鼠腹腔后所抽出的腹水。二、血凝试验随机取巳知O型153例,A型192例(包括1例A_2型)、B型156例、AB型47例,共584例的2％红细胞悬液,每例1份,每份加等量ZMC_9上清液,置     

分泌抗人 B 型红细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的血清学检验

我们曾报道了 ZMB_1 细胞株的建立,本文着重对 ZMB_1 分泌的 McAh 进行了血清学检验,其结果报告如下。材料与方法一、抗 B 单克隆抗体取自 ZMB_1 培养上清液及 ZMB_1 接种于小鼠后诱生的腹水。二、血凝试验随机取已知 O 型201、A型182、B 型144、AB 型47共574例的2%红细胞悬液各1份,进行试验。三、上清液、腹水的效价测定按常规方     

分泌本周氏蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

本文报告了以人的本周氏蛋白(BJK)免疫BALB/C小鼠脾细胞与SP2/o—Ag14小鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)MW400作用下融合,并经7次克隆后获得二株抗人的BJK杂交瘤细胞系(E_6,H_4)。经染色体核型分析证实为杂交瘤细胞。本单克隆抗体经标准兔抗小鼠IgG亚类血清鉴定,属小鼠IgG_2a,IgG_2b。两株细胞经液氮冻存、复苏仍能正常分泌抗体。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定植瘤小鼠的腹水及其血清的抗体滴度分别为10~4—10~5,10~3—10~4。     

分泌抗精氨酸加压素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立(简报)

本文利用杂交瘤技术获得1株分泌抗精氨酸加压素(AVP)单克隆抗体杂交瘤细胞株,命名为1A_1。由此细胞株产生的单克隆抗体将用于研究AVP在体内的作用及激素和递质间的调控作用,并为神经内分泌的研究提供了一种良好的工具药。 以AVP为抗原,用碳二亚胺偶联,合成AVP-牛甲状腺球蛋白。将此结合物与等量福氏完全佐剂制成乳状物免疫BaL b/c小鼠,一月后用同样剂量加强一次,于细胞融合前3～4 d作脾脏免疫。取血清抗AVP抗体阳性反应(酶联免疫吸附测定法,ELISA)的免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/0(10:1)