环磷酰胺联合柿叶乙酸乙酯部位对H22小鼠瘤组织抗氧化能力及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的: 通过研究环磷酰胺(CTX)联合柿叶乙酸乙酯部位(PE)对H22荷瘤小鼠瘤组织的抗氧化作用和对瘤组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白表达的影响,探讨两药联合应用的效果。 方法: 昆明种小鼠,取H22荷瘤鼠腹水接种于昆明种小鼠右前肢腋窝皮下,建立H22荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组,CTX组(0.1 g ·kg^-1),CTX联合PE高、中、低剂量组(2,1,0.5 g ·kg^-1),连续ig给药10 d,处死小鼠后计算抑瘤率,采用金氏q值法判断两者合用的效果,检测瘤组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量,采用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。 结果: 与模型组比较,各给药组抑瘤率明显升高,SOD水平和Bax蛋白表达均明显升高,MDA水平和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);CTX联合PE各剂量组的抑瘤率均高于CTX组,0.85<q<1.15,两药合用作用相加;与CTX组比较,联合用药各剂量组SOD水平和Bax蛋白表达均升高,MDA水平,Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax均降低(P<0.05,P<0.01)。 结论: CTX联合PE能使抑瘤作用相加,其机制可能与两药合用能明显增强H22小鼠机体抗氧化能力,下调Bcl-2蛋白及上调Bax 蛋白的表达有关。     

贞芪扶正颗粒辅助奥沙利铂治疗H22移植瘤小鼠的疗效及其对Bax、Bcl-2表达的影响

目的 探讨贞芪扶正颗粒辅助奥沙利铂治疗H22移植瘤小鼠的疗效及其对细胞凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X的蛋白质(Bax)的影响.方法 腹腔驯化H22细胞悬液,于前肢右侧腋下接种建立KM小鼠H22荷瘤模型,以奥沙利铂+贞芪扶正颗粒(高、中、低剂量)干预10 d,并进行常规观察、称重和检测瘤体变...     

强精煎对实验小鼠睾丸Bcl-2及Bax蛋白表达影响研究

目的:研究强精煎对实验小鼠睾丸Bcl-2、Bax蛋白表达及Bcl-2/Bax比值的影响。方法:80只成年健康雄性小鼠随机分成正常组、模型组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各20只。除正常组外,其余3组采用环磷酰胺腹腔注射建立小鼠生精障碍模型,造模结束后第1天开始正常组和模型组灌胃给蒸馏水,其余两组分别给强精煎冲剂、黄精赞育胶囊混悬液,连续30天。结果:与模型组相比,正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组睾丸生殖细胞凋亡基因Bax蛋白表达率较低(P0.01)、Bcl-2蛋白表达率较高(P0.01)、细胞内Bcl-2/Bax比值较高(P0.01),正常组、强精煎组和黄精赞育胶囊组各组间比较睾丸生殖细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值相近(P0.05)。结论:强精煎治疗小鼠睾丸生精障碍的疗效与Bcl-2、Bax蛋白表达率及Bcl-2/Bax比值密切相关。     

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠(POF)卵巢Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性卵巢早衰模型。设左归丸低、中、高剂量进行治疗,以泼尼松、己烯雌酚为阳性对照,免疫组化法检测卵泡、卵巢间质Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组大卵泡及小卵泡Bcl-2蛋白的表达均减少,Bax蛋白的表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,左归丸高剂量组大卵泡及小卵泡Bcl-2蛋白的表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.001);左归丸高、中、低剂量组卵巢间质Bcl-2蛋白的表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05～0.001),大卵泡及小卵泡Bax蛋白的表达均减少,差异有统计学意义(P<0.01～0.001);左归丸中剂量组卵巢间质Bax蛋白的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。左归丸各剂量组卵泡Bcl-2蛋白的表达呈现一定的量效关系。结论卵泡凋亡过快可能导致卵巢早衰,左归丸可能通过上调卵泡及卵巢间质Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,抑制卵泡的过快凋亡,从而改善卵巢功能。     

胃瘤安对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及哭免疫功能影响的研究

目的：观察胃瘤安对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：先建立H22荷瘤小鼠模型,小鼠接种24h后随机分为空白组、环磷酰胺组、胃瘤安高剂量组和胃瘤安低剂量组。分别给药处理后进行T淋巴细胞酯酶染色试验,计算T淋巴细胞酯酶染色率;溶血素抗体生成试验,计算HC50。取肿瘤称重,计算抑瘤率．比较各组差异。二硝基氯苯（DNCB）诱导的迟发型变态反应试验,以小鼠左右耳片重量差的毫克数作为鼠耳迟发型超敏反应的强度。并计算肿胀抑制百分率。结果：胃瘤安高、低剂量均可增加荷瘤小鼠T淋巴细胞酯酶染色率,促进小鼠溶血素抗体生成,与空白组比较具有显著性差异。胃瘤安高剂量对DNCB诱导的H22荷瘤小鼠迟发型超敏反应具有明显的免疫促进作用,与空白组比较有显著性差异。胃瘤安高、低剂量组小鼠的H22实体瘤也比空白组明显减小。结论：胃瘤安在抑制肿瘤的同时具有促进H22荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的作用。     

解氏肝癌2号方对肝癌H22荷瘤小鼠作用的研究

目的研究解氏肝癌2号方对肝癌H22荷瘤小鼠的抗肿瘤及免疫调节作用。方法建立H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组、解氏肝癌2号方组、中药半枝莲组和白细胞介素-2(IL-2)组共4组,每组10只,并予第2天始给予相应药物灌胃。第15天处死小鼠,取出肿瘤,称取瘤质量,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数等指标,并通过免疫组化的方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果 1解氏肝癌2号方组与IL-2组体质量增加更为明显。2解氏肝癌2号方组的抑瘤率与中药半枝莲组相仿,二者均显著高于IL-2组。3解氏肝癌2号方组与IL-2组的胸腺指数和脾脏指数无明显差异,均明显高于中药半枝莲组及模型组。4解氏肝癌2号方组Bcl-2水平与中药半枝莲组相仿,低于模型组和IL-2组,模型组最高;而Bax水平正好相反,解氏肝癌2号方组与中药半枝莲组均高于模型组和IL-2组,模型组最低。结论解氏肝癌2号方能明显改善小鼠的一般生活状态,增加小鼠体质量,对肿瘤有明显抑制作用,并且下调肝癌H22荷瘤小鼠的凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,上调Bax的表达,能够明显改善机体免疫功能,减轻恶性肿瘤对机体的损害,减轻病痛,使人体与癌肿长期共存,互不侵犯。本实验为临床"带瘤生存"理念提供了坚实的理论基础。     

白花蛇舌草和半枝莲配伍微粉对移植性小鼠肝癌肿瘤组织Bcl-2,Bax表达的影响

目的:观察白花蛇舌草和半枝莲微粉对移植性小鼠肝癌H22生长抑制作用及其对肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达的影响。方法:建立移植性H22动物模型,并将模型动物随机分为模型对照、软坚口服液7.8 mL.kg-1、白花蛇舌草和半枝莲普通粉15.6 g.kg-1、白花蛇舌草和半枝莲微粉高、中、低剂量(15.6,11.7,7.8 g.kg-1)6组,给药10 d后处死模型小鼠分离肿瘤,检测肿瘤大小、称质量,计算肿瘤抑制率,并将肿瘤组织切片,免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因。结果:白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组肿瘤抑瘤率达47.55%,与软坚口服液结果相近;白花蛇舌草和半枝莲微粉高、中、低剂量可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白基因表达,高、中剂量可升高Bax蛋白基因表达;与白花蛇舌草和半枝莲普通粉组相比,白花蛇舌草和半枝莲微粉高剂量组Bcl-2蛋白基因表达明显降低,Bax蛋白基因表达明显升高。结论:白花蛇舌草和半枝莲微粉可抑制H22瘤体生长,且下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达。     

左归丸对卵巢早衰小鼠性激素及Bcl-2/Bax表达的影响

目的:探讨左归丸对卵巢早衰小鼠性激素及Bcl-2/Bax表达的影响。方法:选取48只SPF级雌性小鼠,随机分为对照组、模型组、实验1组(左归丸高剂量组)、实验2组(左归丸低剂量组)。对照组每日腹腔注射生理盐水30ml/kg,其余三组注射环磷酰胺30 mg/kg,连续20d建立POF模型,干预30d。ELISA方法检测血清雌激素(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)、基础抑制素B(INHB)、抗透明带抗体(AZpAb),Western blot检测卵巢组织Bcl-2、Bax蛋白。结果:模型组E_2明显低于对照组,FSH明显高于对照组,说明造模成功。与对照组比较,模型组E_2、AMH、INHB、Bcl-2、Bcl-2/Bax明显降低,LH和FSH、AZpAb、Bax明显增高(P0.01);与模型组比较,实验1组、2组E_2、AMH、INHB、Bcl-2、Bcl-2/Bax明显增高,LH和FSH、AZpAb、Bax明显降低(P0.01)。结论:左归丸能够改善卵巢早衰小鼠性激素水平,抑制透明带抗体产生,使Bcl-2蛋白上调、Bax蛋白下调,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,提高卵巢储备功能,减少卵巢早衰。     

消癌解毒方对H22瘤荷小鼠 miRNAs表达谱的影响

目的通过对H22荷瘤小鼠肿瘤组织微小核糖核酸(miRNAs)表达谱的检测,探讨消癌解毒方抗肝癌的作用机制。方法将50只H22荷瘤小鼠随机分为模型组,消癌解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组和顺铂组,每组10只。应用病理组织学技术,检测各组H22荷瘤小鼠肿瘤组织光镜下的差异表现。应用miRNA芯片技术,检测各组H22荷瘤小鼠肿瘤组织差异表达miRNAs。应用统计学方法分析,找出与消癌解毒方作用机制相关的差异miRNAs。结果病理组织学检查结果显示,随着消癌解毒方剂量的增加,病理性核分裂像减少,癌细胞减小,抗癌效果增强。根据miRNA芯片的分析结果,消癌解毒方对H22瘤荷小鼠肿瘤组织内一些特异miRNAs如miR-1298-5p、miR-874-3p、miR-721、miR-298-5 p、miR-551 b-5 p、miR-346-5 p、miR-105表达显著上调;miR-24-3 p、miR-3963、miR-127-3 p、miR-434-5 p、miR-1187、miR-468-3 p、miR-221-5 p、miR-6695-5 p表达显著下调。结论消癌解毒方可能通过调控多种miRNAs的表达来发挥其抗肿瘤的作用。     

灵芝提取物对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究

近年来,从真菌及其代谢产物中提取了多种有效成分,其抗肿瘤活性已得到国际公认。灵芝是我国传统的补益中药,具有扶正固本、延年益寿之功效。大量临床及实验研究表明,灵芝及其提取物具有抗肿瘤,抗血栓及免疫调节等作用[1-4]。本实验以H22荷瘤小鼠作为研究对象,主要从免疫系统的     

蟾酥注射液对H22腹水型肝癌的抑制作用及对荷瘤小鼠生存周期的影响

目的探讨蟾酥注射液对H22腹水型肝癌小鼠肿瘤抑制作用的作用机理。方法将60只昆明种小鼠随机分为3组。蟾酥注射液组(治疗1组):每次注射蟾酥注射液1.5mL/只;环磷酰胺组(治疗2组):注射环磷酰胺0.5mg/只(用生理盐水组稀释);生理盐水组(对照组):注射生理盐水0.5mL/只。每组20只。各组均隔5d注射1次,共给药3次。每组中取10只最后1次注射后5d,采集血液,检测肿瘤坏死因子;另10只记录小鼠存活情况。结果蟾酥注射液能不同程度延长腹水型肝癌小鼠的生存期,能使肿瘤坏死因子水平明显下降,与对照组比较,P<0.01,治疗组之间比较,P<0.05。结论蟾酥注射液对H22腹水型肝癌小鼠肿瘤有抑制作用,能够延长生存期。     

三氧化砷对大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的:观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法:40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375 mg/kg、0.75 mg/kg、1.5 mg/kg 3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药16周,采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2/Bax的表达.结果:①与对照组相比,中剂量组(0.75 mg/kg)和高剂量组(1.5 mg/kg)生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P＜0.01).生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低(P＜0.01),Bpax表达明显升高(P＜0.01);②每日精子生成量与生精细胞凋亡呈负相关(r=-0.563,P＜0.01);③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关(r=-0.825.P＜0.01),与Bax表达呈正相关(r=0.710,P＜0.01),结论:一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的袁达,诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少,产生雄性生殖毒性.     

维肝力对贫血小鼠骨髓有核细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:研究复方维肝力对贫血小鼠骨髓有核细胞(BMNCs)凋亡及凋亡相关蛋白Bc l-2、Bax表达的影响,探索维肝力抑制贫血小鼠骨髓有核细胞凋亡的机制,发掘维肝力在临床上的新用途。方法:观察维肝力对贫血模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞数的影响;用流式细胞仪检测贫血小鼠BMNCs细胞周期;用TUNEL法检测贫血小鼠BMNCs的凋亡;用免疫组化SABC法检测BNMCs中Bc l-2及Bax蛋白的表达。结果:维肝力能显著提高骨髓抑制贫血小鼠外周血红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板以及BMNCs数目;可明显促进BMNCs从静止期进入细胞周期;能明显减少接受2.0Gy60Coγ射线辐射后诱导的BNMCs凋亡。同时,维肝力能使Bc l-2蛋白表达上调,而Bax蛋白表达则下调。结论:维肝力可能是通过上调Bc l-2的表达及降低Bax的表达,从而有效抑制辐射所致小鼠骨髓细胞的凋亡,保护造血细胞使其免受损伤,有利机体造血功能的恢复。     

三氧化砷对大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的:观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其相关基因表达的影响。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375mg/kg、0.75mg/kg、1.5mg/kg3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药16周,采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2/Bax的表达。结果:①与对照组相比,中剂量组(0.75mg/kg)和高剂量组(1.5mg/kg)生精细胞凋亡指数(AI)显著升高(P<0.01),生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低(P<0.01),Bax表达明显升高(P<0.01);②每日精子生成量与生精细胞凋亡呈负相关(r=(0.563,P<0.01);③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关(r=-0.825,P<0.01),与Bax表达呈正相关(r=0.710,P<0.01)。结论:一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的表达,诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少,产生雄性生殖毒性。     

肾精亏虚对小鼠视网膜细胞凋亡相关基因Bcl-2 Bax的影响

目的：肾精亏虚对小鼠视网膜细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax的影响。方法：将30只雄性昆明小鼠用计算机取随机数法随机分为正常对照组、模型组和补肝组3组。其中模型组和补肝组采用惊恐加房劳的复合伤肾法制造肾精亏虚模型。补肝组每天给予0.3mL/10g体重的一贯煎浓缩液灌胃。正常对照组及模型组予等量生理盐水灌胃,连续给药21天。制备小鼠视网膜石蜡切片行免疫组化ABC法染色,并对染色结果进行计算机图像分析系统观察分析。结果：Bcl-2和Bax在正常组阳性反应少见,且只出现于节细胞血管;模型组小鼠视网膜神经节细胞层（GCL）和内核层（INL）可见大量的阳性细胞;补肝组小鼠视网膜神经节细胞层（GCL）和内核层（INL）可见少数阳性反应细胞。各组小鼠视网膜细胞Bcl-2和Bax表达的阳性细胞率比较：模型组与正常组及补肝组比较有非常显著的差异（P〈0.01）;正常组与补肝组比较无显著的差异（P〉0.05）。结论：凋亡相关基因Bal-2和Bax在“惊恐、房劳”因素复制的肾精亏虚模型小鼠视网膜的表达增强,二者在肾精亏虚模型小鼠视网膜细胞凋亡中起重要作用。     

补肾养血方对卵巢早衰小鼠凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的：探讨补肾养血方对免疫性卵巢早衰（POF）小鼠卵巢凋亡调节基因B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响。方法：以小鼠透明带3（Zp3）为抗原,皮下多点注射免疫 BALB/c雌性小鼠,14 d后强化免疫,建立免疫性卵巢早衰模型。设补肾养血方低、中、高剂量（5.1,10.2,20.4 g·kg^-1）进行治疗,以补佳乐（戊酸雌二醇0.6 mg·kg^-1）为阳性对照,于造模后15 d开始灌胃给药1次/d,连续6周（每1周休息1 d）。放射免疫法检测小鼠血清激素水平,Western法检测卵巢组织 Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,模型组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达减少,Bax蛋白表达增加,（P<0.05）,模型组小鼠卵巢Bcl-2/Bax下降（P<0.01）,提示模型组卵泡Bcl-2蛋白的低表达、Bax蛋白的高表达可能加速了卵泡的凋亡,导致卵巢早衰;与模型组相比,补肾养血方高、中、低剂量组及西药组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达明显增加（P<0.01,P<0.05）,卵巢Bax蛋白的表达均减少（P<0.05）,Bcl-2/Bax明显降低（P<0.05）。结论：卵泡凋亡过快可能导致卵巢早衰,补肾养血方可能通过上调卵泡及卵巢间质Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,抑制卵泡的过快凋亡,从而改善卵巢功能。     

益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠脑细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的：研究益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠脑细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响。方法：将实验大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组和非穴组。针刺组取膻中、中脘、气海、血海和足三里行针刺法。采用原位TUNEL法检测细胞凋亡情况，免疫组织化学染色ABC法检测Bcl-2、Bax蛋白表达，所测数据进行统计学分析。结果：经检测发现模型大鼠存在较多细胞凋亡现象，针刺组大鼠皮层中Bcl-2表达数目、染色强度及胞浆着色面积较高，而Bax表达相对较低。结论：益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠能增加Bcl-2表达，抑制Bax表达，从而减少大鼠脑细胞凋亡，并促进其存活。     

巴豆生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bax,Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究巴豆生物碱(croton seed alkaloid,CA)对人肝癌SMMC-7721细胞的诱导凋亡作用并探讨其对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。方法:不同浓度CA分别处理SMMC-7721细胞24～48 h后,MTT法检测细胞的生长活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达。结果:10～200 mg.L-1 CA均能抑制SMMC-7721细胞增殖(P<0.05),其抑制率与作用时间及浓度相关;CA作用SMMC-7721细胞24 h后,对照组凋亡率为(0.26±0.14)%,10,50,100,200 mg.L-1 CA组细胞凋亡率分别为(5.85±0.47)%,(17.70±1.23)%,(33.25±2.08)%,(49.52±1.85)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果提示经CA作用24 h后,随着药物浓度的增加,Bax的表达逐渐增加,而Bcl-2的表达逐渐减少。结论:CA能抑制SMMC-7721细胞的生长并促进其凋亡,其发生与Bcl-2蛋白的减少和Bax蛋白表达增多有关。