参归软肝胶囊对大鼠肝纤维化保护作用的实验研究

目的 观察参归软肝胶囊(SGR)对猪血清所致大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型的影响.方法复制猪血清所致大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型,测定血清ALT,AST,Alb,TP,SA,Hyp,观察肝病理变化,判断SGR对猪血清所致的大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型的影响.结果SGR组ALT,AST, SA 和 Hyp降低 (P< 0.05),TP和 Alb增加 (P< 0.05),肝脏损伤和纤维化程度降低(中剂量组P< 0.05;高剂量组P< 0.01).结论SGR对猪血清所致大鼠免疫肝损伤、肝纤维化有保护作用.     

膈下逐瘀汤逆转猪血清诱导大鼠肝纤维化的作用及机制研究

目的:通过观察膈下逐瘀汤对实验性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)及金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响,探讨其抗肝纤维化的可能机制。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清2.0 mL.kg-1腹腔注射,每周2次共12周诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,同时膈下逐瘀汤每天按7.37 g.kg-1灌胃给药12周。Masson染色法观察肝组织病理学改变,ELISA检测肝组织MMP-13和TIMP-1含量,实时定量Rt-PCR检测肝组织MMP-13和TIMP-1 mRNA表达。结果:猪血清组肝组织胶原面积为(10.38±2.01)%;MMP-13蛋白(14.05±2.64)ng.g-1;MMP-13 mRNA(1.91±0.73)倍;TIMP-1蛋白(14.91±1.07)ng.g-1;TIMP1 mRNA(18.40±2.84)倍。与猪血清组比较,膈下逐瘀汤给药可显著降低肝组织胶原面积(6.66±1.04)%(P<0.05),增加肝组织MMP-13蛋白(20.03±2.14)ng.g-1和MMP-13mRNA(4.12±0.59)倍(P<0.05),降低肝组织TIMP-1蛋白(13.47±1.22)ng.g-1和TIMP-1mRNA(4.89±0.74)倍(P<0.05)。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维含量,其机制可能与调节MMP-13和TIMP-1的表达有关。     

膈下逐瘀汤对免疫性肝纤维化大鼠肝组织MMP-9和TIMP-2表达的影响

目的:观察膈下逐瘀汤对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。方法:大鼠随机分为空白对照组、膈下逐瘀汤组、猪血清组、猪血清+膈下逐瘀汤组。猪血清腹腔注射诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,同时膈下逐瘀汤灌胃给药干预。消化法检测肝组织羟脯氨酸含量,ELISA法检测肝组织MMP-9和TIMP-2蛋白含量,实时定量RT-PCR检测肝组织MMP-9和TIMP-2 mRNA表达。结果:与模型对照组比较,膈下逐瘀汤可显著降低肝组织羟脯氨酸、MMP-9及TIMP-2蛋白含量,下调肝组织MMP-9、TIMP-2 mRNA水平。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与调节MMP-9和TIMP-2的表达有关。     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝组织α-SMA和TGF-β1表达的影响

目的:观察膈下逐瘀汤抗猪血清诱导的大鼠肝纤维化作用及其可能的作用机制。方法:采用猪血清腹腔注射诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,VG染色法检测肝组织病理学改变,ELISA检测肝组织TGF-β1含量,定量RT-PCR检测肝组织TGF-β1和α-SMA mRNA表达。结果:与模型组大鼠比较,膈下逐瘀汤可显著降低猪血清诱导的肝纤维化程度,减少肝组织TGF-β1蛋白和mRNA表达,降低肝组织α-SMA mRNA表达。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制肝星状细胞活化有关。     

汉丹肝乐抗大鼠免疫性肝纤维化的实验研究

目的:探讨汉丹肝乐对大鼠免疫性肝纤维化的治疗作用。方法:腹腔注射猪血清复制大鼠免疫性肝纤维化模型后给予汉丹肝乐低、中、高3个剂量,持续12周,并进行相应指标检测。结果:汉丹肝乐中、高剂量能减轻模型大鼠的肝组织学病变,增加尿羟脯氨酸排出量,降低血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)及肝脏 MDA 水平、胶原蛋白含量。免疫组化染色显示,中、高剂量组大鼠肝脏Ⅰ型胶原阳性着色少而浅。电镜观察显示,汉丹肝乐组大鼠超微结构破坏轻。结论:汉丹肝乐可减轻猪血清所诱导的大鼠免疫性肝纤维化。     

雄芍汤抗大鼠免疫性肝纤维化作用研究

目的研究雄芍汤抗大鼠免疫性肝纤维化的作用。方法 84只SD大鼠随机分为对照组、模型组、扶正化瘀胶囊阳性对照组、雄芍汤预防组和雄芍汤高、低剂量(生药15.8、7.9 g/kg)组(造模后给药)。采用ip猪血清法制备大鼠肝纤维化模型,观察雄芍汤对肝纤维化大鼠血清肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、白蛋白与球蛋白比值(A/G)和肝纤维化血清标志物透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、III型前胶原(PCIII)、IV型胶原(CIV)水平,以及肝组织病理学的影响。结果与模型组比较,雄芍汤各给药组血清ALT、AST、HA、LN、PCIII水平明显降低(P<0.05、0.01),血清ALB水平和A/G值明显升高(P<0.01);雄芍汤预防组血清CIV水平明显降低(P<0.05);所有给药组肝细胞变性和坏死程度轻微,肝组织纤维增生较少,雄芍汤高剂量组和预防组的作用尤为明显。结论雄芍汤能减轻免疫性肝纤维化大鼠的肝细胞损伤,改善肝功能,调节细胞外基质的代谢,阻止或逆转肝纤维化。     

脂肝清胶囊对酒精性肝损伤的保护作用

目的探讨脂肝清胶囊对酒精性肝损伤的保护作用。方法采用白酒复制大鼠肝损伤模型,脂肝清胶囊按高、低剂量灌胃,连续8周,测定血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及三酰甘油(TG)的含量,并观察肝脏的病理组织学改变。结果脂肝清胶囊高、低剂量组可显著降低大鼠血清AST、ALT及TG含量,与肝损伤模型组比较有显著性差异(P<0.01或0.05);肝组织病理学改变较肝损模型组显著减轻(P<0.05)。结论脂肝清胶囊对大鼠酒精性肝损伤具有保护作用,呈一定的量效关系。     

芍药苷对大鼠慢性肝损伤及肝纤维化的保护作用

目的观察芍药苷(PF)对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损伤及纤维化的治疗作用。方法将大鼠随机分为6组,利用高脂低蛋白饲料和CCl4制作大鼠肝损伤模型,并同时给予相应药物灌胃,9周后取材送检。血液生化检测肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil);放射免疫法测定肝纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ);制备肝干粉,分光光度计检测羟脯氨酸(Hyp)。结果模型组大鼠血清ALT、AST、HA、CⅣ和肝组织中Hyp明显高于正常组(P<0.05或0.01);与模型组比较,芍药苷3个剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中ALT、AST;芍药苷408,0 mg/kg剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中HA含量及根据肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量计算的胶原蛋白量(P<0.05和0.01)。结论芍药苷对慢性肝损伤及纤维化有保护作用。     

加味膈下逐瘀汤对肝纤维化模型大鼠肝功能及纤维化指标的影响

目的:研究加味膈下逐瘀汤抗肝纤维化的效果及作用机制。方法:将大鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组及加味膈下逐瘀汤组,每组10只。秋水仙碱组按1 mg/kg药量给予秋水仙碱,加味膈下逐瘀汤组按生药量8.2 g/kg灌胃,正常组及模型组分别给予相同体积生理盐水。考察各组肝脏指数、血清肝功能和肝纤维化指标,并进行HE染色,观察肝组织病理改变。结果:与模型组比较,加味膈下逐瘀汤组大鼠肝纤维化明显改善,肝脏指数降低,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)水平降低,清蛋白(ALB)和总蛋白(TP)含量升高,差异有统计学意义(P0.05);组织病理学结果显示,加味膈下逐瘀汤能明显改善肝脏病理损伤程度。结论:加味膈下逐瘀汤能有效减轻肝纤维模型大鼠的肝脏损伤,降低肝纤维化程度。     

补阳还五汤对大鼠免疫性肝损伤的防治作用

目的:观察补阳还五汤对免疫性肝损伤大鼠的肝功能、免疫功能的影响。方法:采用猪血清腹腔给药方法,造成免疫性肝损伤模型,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量,光镜观察大鼠肝脏的病理组织学改变。结果:该方可明显降低猪血清所致免疫性肝损伤大鼠的血清AST、ALT含量,升高SOD水平,降低MDA含量,减轻肝脏损伤。结论:补阳还五汤对免疫性大鼠肝损伤模型具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抗免疫、抗脂质过氧化作用有关。     

膈下逐瘀汤治疗乙型肝炎肝硬化临床疗效Meta分析

目的:探讨膈下逐瘀汤对乙型肝炎肝硬化疗效的Meta分析.方法:检索国内外大型文献数据库中关于膈下逐瘀汤对乙型肝炎肝硬化的随机对照实验(RCT)文献,采用Cochrane系统评价的方法,以RevMan5.1软件对数据进行分析,对所得文献进行证据质量评价.结果:获得12篇RCT文献,未提及盲法,质量普遍偏低.膈下逐瘀汤治疗...     

下瘀血汤抗猪血清免疫性肝纤维化方证相关的药效学研究

目的：研究下瘀血汤抗大鼠猪血清肝纤维化方-证相关的药效学机制。方法：猪血清腹腔注射复制肝纤维化模型,造模8周后继续造模的同时以下瘀血汤、茵陈蒿汤、黄芪汤、二至丸和小柴胡汤进行干预治疗。测定大鼠血清ALT、AST、ALP和GGT活性,Alb、TP和TBil含量;Jamall法测定肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量。结果：与正常组比较,模型组大鼠血清ALT和AST活性增高、Alb和TP含量显著下降（P〈0.05）,ALP和GGT活性及TBiL含量虽有升高但无显著性差异（P〉0.05）;与模型组比较,下瘀血汤、茵陈蒿汤和小柴胡汤组大鼠血清肝功能有一定的改善,以下瘀血汤组为最佳;与正常组比较,模型组大鼠肝组织Hyp含量显著增加（P〈0.05）;与模型组比较,下瘀血汤组大鼠肝组织Hyp含量显著降低（P〈0.05）,其它各药物组无改善作用（P〉0.05）。结论：下瘀血汤可有效的抑制大鼠猪血清免疫性肝纤维化,提示本模型病理阶段的证候为瘀血阻络。     

芦根多糖抗免疫性肝纤维化作用及机制研究

目的观察芦根多糖对免疫性肝纤维化大鼠的保肝及抗肝纤维化作用,探讨其抗肝纤维化的机制。方法Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组及芦根多糖高、中、低剂量组。除正常组外,腹腔注射猪血清诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,造模7周后各给药组开始灌胃给予相应药物,正常组及模型组给予等量生理盐水。检测血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活性,丙二醛（MDA）含量及肝组织SOD、GSH-px活力和MDA含量。结果芦根多糖可降低模型大鼠血清AST、ALT活性,降低血清和肝组织MDA含量,升高血清和肝组织SOD、GSH-px活力。结论芦根多糖可改善肝纤维化模型大鼠肝功能,减轻纤维化,其机制可能与其保肝降酶、抗脂质过氧化有关。     

大黄(庶虫)虫超微粉剂对肝纤维化大鼠肝组织蛋白表达的影响

目的:利用荧光差异凝胶电泳技术(2D DIGE)研究大黄蜜虫超微粉剂对大鼠肝纤维化组织蛋白表达的影响.方法:采用超微粉碎技术对大黄(蜜)虫丸原药材进行剂型改进,用猪血清复制大鼠免疫性肝纤维化模型.实验动物分为正常组、模型组、给药组.正常组ip等渗生理盐水0.5 mL,其余组ip猪血清0.5 mL,每周2次,连续12周.药物组于造模之日起ig给予大黄蜜虫超微粉水溶液(剂量0.27 g·kg-1),正常组与模型组ig等容积生理盐水,每天1次,连续12周.第12周末处死大鼠,取血与肝组织.检测指标包括肝组织病理学变化:HE染色与Masson染色观察肝纤维化程度;血清纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C);血清肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST).同时利用2D DIGE和质谱分析技术比较模型组与给药组大鼠肝组织蛋白表达量的差异,用免疫印迹法及免疫组化法对差异蛋白进行验证.结果:模型组肝组织假小叶形成,肝组织胶原纤维含量与血清ALT,AST及HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C指标显著高于正常组(P＜0.01).给药组肝脏无假小叶形成,肝组织胶原纤维含量与血清ALT,AST及HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C指标显著低于模型组(P＜0.01).2D DIGE结果显示有58个表达量差异大于2倍的蛋白质点,初步鉴定了12个,并验证了Regucalcin,ERp57,CAⅢ蛋白在各组大鼠肝组织的表达,与2D DIGE结果一致.结论:大黄蜜虫超微粉剂能显著降低大鼠肝组织纤维化程度、降低血清纤维化及肝功能指标,提示其对实验性免疫性肝纤维化有较好防治作用;它能调节大鼠肝纤维化组织Regucalcin,ERp57,CAⅢ蛋白表达量,这些蛋白可能通过细胞钙稳态失调、过氧化应激、炎症反应、免疫反应、纤维组织癌变等机制参与肝纤维化的病理过程.     

膈下逐瘀汤对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏脂肪酸代谢酶的影响

目的:观察膈下逐瘀汤对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏脂肪酸代谢酶的影响,探讨膈下逐瘀汤防治NASH的作用机制。方法:30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、膈下逐瘀汤组,每组10只,正常组予标准饲料喂养,其他两组予高脂饲料喂养,同时膈下逐瘀汤组予14g/(kg.d)的膈下逐瘀汤流浸膏灌胃,正常组和模型组以等容量的蒸馏水灌胃,连续12周。HE染色后光镜下观察肝脏组织病理学改变;生化法测定肝组织匀浆TG、CHOL含量;ELISA法检测血清游离脂肪酸(FAA)和肝组织脂肪酸合酶(FAS)、乙酰CoA羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酸转移酶-1(CPT-1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)含量。结果:模型组大鼠肝组织出现重度脂肪变,肝细胞气球样变,肝小叶出现不同程度的炎细胞浸润和点片状坏死灶;肝脏NAFLD活动度积分(NAS)较正常组明显增高(P0.01),血清FAA和肝组织TG、CHOL含量较正常组明显增高(P0.01);肝组织ACC、FAS表达较正常组显著升高(P0.01),而CPT-1、SCD-1蛋白表达则较正常组明显下降(P0.01)。应用膈下逐瘀汤干预后,大鼠肝组织NAS较模型组明显下降(P0.05);血清FAA、肝组织TG、CHOL水平及ACC、FAS表达均较模型组显著下降(P0.01,P0.05);而肝组织CPT-1和SCD-1表达则较模型组明显升高(P0.01,P0.05)。结论:高脂饮食诱导的NASH大鼠存在着脂肪酸代谢紊乱;膈下逐瘀汤能一定程度纠正肝组织脂肪酸代谢酶的紊乱,减少脂肪酸对肝脏损伤有关,这可能是其防治NASH的作用机制之一。     

不同剂量丹参注射液抗肝纤维化临床研究

目的：探讨何种剂量丹参注射液治疗慢性乙型肝炎肝纤维化可取得最佳疗效。方法：选用诊断为慢性乙型肝炎肝纤维化且中医辨证为血瘀阻络证的患者64例,采用抽签法随机分为丹参高、中、低剂量治疗组及对照组。各组均给予中药膈下逐瘀汤加减。丹参高、中、低剂量组分别加丹参注射液24ml、16ml、8ml静脉滴注治疗。45天为1个疗程,观察各组治疗前后的临床症状、体征、肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB),肝纤维化指标：Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、透明质酸(HA)。结果：高、中、低剂量丹参注射液均有改善临床症状,降低ALT、AST的作用,并有显著降低HA、PCⅢ、ⅣC的作用。其中高剂量组的疗效优于中、低剂量组(均P<0．05),而中、低剂量组两者之间差异无显著性。结论：丹参高剂量组防治肝纤维化的作用优于中、低剂量组。