建立天麻药材中天麻苷及天麻苷元的有效测定方法探讨

目的:建立高效液相色潽法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量的方法。方法:选用美国热电Thermo Scientific Hypersil BDS色谱柱(4.6mm×250mm×5μm),以乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97)为流动相,检测波长为220nm,流速1.0ml/min。结果:该色谱条件下天麻苷与天麻苷元可有效分离。天麻苷及天麻苷元均呈良好的线性、重复性和准确度良好。结论:采用高效液相色潽法测定天麻药材中天麻苷及天麻苷元含量结果准确、可靠,可以将此方法用于天麻药材的质量控制。     

HPLC测定RGA胶囊中红景天苷的含量

红景天为多年生草本植物。红景天苷(salidro side)是其主要成分之一,其生理活性已被许多药理实验所证实。用高效液相色谱法测定红景天苷的含量虽有文献报道[1,2 ] ,但在复方中测定其含量却未见报道。以红景天、人参、黄芪多糖配方组成的中药保健品RGA胶囊,其红景天、人参分别以5 0 % ,70 %乙醇提取,黄芪水提酒沉(沉淀部分) ,提取物按一定比列混匀,制成胶囊。RGA胶囊具有滋补强壮、补肾壮阳、强心补血、降低血糖的功能。本文选择....     

HPLC测定不同产地天麻中巴利森苷C的含量

目的:建立高效液相色谱法测定天麻中巴利森苷C的含量。方法:色谱柱为Agilent Eclipse XDBC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(22∶78),检测波长为220 nm,柱温为25℃,流速为1.0 ml/min。结果:巴利森苷C在0.276~4.426μg范围内线性关系良好(r=0.9995);平均加样回收率为99.72%,RSD为1.15%(n=6)。不同产地天麻中巴利森苷C的含量相差较大。结论:该方法简便快速,准确可靠,可为天麻药材质量标准提供新依据。     

HPLC测定润肠通便丸中芍药苷的含量

目的建立HPLC测定润肠通便丸中芍药苷含量的方法。方法 HPLC法。结果芍药苷在0.3960～1.3200μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.56%,RSD=1.14%(n=6)。结论本方法操作简便,专属性强,结果准确,可用于润肠通便丸的质量控制。     

HPLC测定解毒消炎片中黄芩苷的含量

解毒消炎片由黄芩、蒲公英、板蓝根等中药组成 ,具有清热解毒、抗炎消肿之功 ,临床上主要用于治疗疖肿、腮腺炎、咽炎、淋巴腺炎、扁桃腺炎等疾病。笔者采用高效液相色谱法测定其成品中黄芩苷的含量 ,现将其结果报告如下。1　仪器与试药Agilen110 0高效液相色谱仪 ;浙江大学N2 0 0 0色谱数据工作站 ;甲醇、磷酸均为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,其他化学试剂均为分析纯 ;黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提供 ;解毒消炎片由湖南省中医药研究院制备。2　实验方法2 .1　色谱条件　色谱柱 :C18柱 - 4 6× 2 0 0mm ;流动相 :甲醇 -水 -磷酸 (4 …     

RP-HPLC测定天麻丸中天麻素含量

天麻丸为中国药典 2 0 0 0年版一部收载品种 ,由天麻、羌活、独活等 10味药组成 ,具有驱风除湿 ,舒筋活络等功效。天麻素为其活性成分 ,现行药典仅用薄层鉴别方法和常规检查来控制其质量 ,无含量测定方法。我们参考文献资料[1,2 ] ,对天麻素含量测定方法进行研究 ,现报道如下。1　仪器与试药GILSON高效液相色谱仪 ,HP110 0DAD检测器 ,eppen dorf柱温箱 ,Unipoint工作站。天麻素对照品由中国药品生物制品检定所提供 ,天麻丸购自重庆市中药材公司。乙睛为色谱纯 (Fisher公司 ) ,水为超纯水 ,其余试剂均为分析纯。2　色谱条件色谱柱 :Dia…     

HPLC测定黄牡丹不同部位中芍药苷的含量

目的:建立黄牡丹中芍药苷的含量测定方法并考察黄牡丹不同部位中芍药苷的含量.方法:采用高效液相色谱法,Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸溶液(12∶88),检测波长235 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:芍药苷进样量在0.40～4.00μg,与峰面积具有良好的线性关系,回归方程A=1095.3 C+31.608(r=0.999 9),平均回收率100.59％,RSD 1.66％.芍药苷在不同部位中的含量分布为果实＞叶＞栓皮＞皮部＞茎＞木部.结论:本方法简便、快速、准确,重复性好,芍药苷可作为控制黄牡丹药材质量的一个指标成分.     

反向高效液相色谱法测定天麻胶囊中天麻素的含量

目的:建立天麻胶囊中天麻素的含量测定的方法。方法:采用反向高效液相色谱(RP-HPLC)Kromasil ODS-C18(4.6mm×200mm)柱,流动相∶乙腈-0.2%磷酸水溶液(3∶97)检测波长220nm。结果:天麻素的线性范围在0.0092μg~0.046μg,r=0.9995,平均回收率:98.8%,RSD为0.6%。结论:该法灵敏、准确可用于控制天麻胶囊的质量。     

HPLC法测定正元胶囊中淫羊藿苷的含量

目的：建立正元胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法.方法：采用高效液相色谱法,以十八烷基键合硅胶柱为色谱柱,以甲醇-1％醋酸溶液（52∶48）为流动相;检测波长为270nm,柱温为30℃,流速为1.0mL/min.结果：淫羊藿苷在10.250～205.000μg/mL浓度范围内与其峰面积值呈良好线性关系,平均回收率为98.7％（RSD=0.3％）.结论：该方法测定结果准确,精密度高,耐用性好,可以作为正元胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法.     

HPLC测定八珍袋泡茶中芍药苷的含量

目的 建立高效液相色谱法测定八珍袋泡茶中芍药苷含量的方法.方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.1％磷酸溶液(13∶87)为流动相,检测波长为230 nm.结果 芍药苷在0.102 8 ～ 1.285 μg范围内呈良好线性,回归方程为A=1 189.9C+7.363 3,r=0.9999.平均加样回收率为102.0％,RSD=1.4％(n=6).结论 本法简便、准确、专属性强,测定结果重复性好,可以作为八珍袋泡茶中芍药苷的定量分析方法.     

天麻对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的:研究天麻对大鼠脑缺血再灌注引起脑损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法:线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,144只Wistar大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组、天麻提取物高剂量组(150 mg.kg-1)、天麻提取物中剂量组(100 mg.kg-1)、天麻提取物低剂量组(50 mg.kg-1)、尼莫地平组(25 mg.kg-1),各组再分为缺血再灌注6,12,24 h 3个亚组,分别于再灌注6,12,24 h处死,经海马CAI区连续冠状切片,分别用TUNEL法观察神经细胞凋亡细胞数,免疫组织化学法检测半胱氨酸蛋白酶8(caspase-8)蛋白阳性细胞数。结果:①再灌注6,12,24 h模型组与假手术组相比,神经元凋亡率明显升高(P<0.05),再灌注6,12,24 h天麻提取物低、中、高剂量组、尼莫地平组细胞凋亡率与模型组的比较,明显降低(P<0.05,P<0.01)。②再灌注6,12,24 h模型组与假手术组相比,caspase-8阳性细胞数明显升高(P<0.05,P<0.01),再灌注6,12,24 h天麻提取物低、中、高剂量组、尼莫地平组caspase-8阳性细胞数与模型对照组比较,明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:天麻能通过有效的抑制脑缺血再灌注后大鼠神经细胞的凋亡起到脑保护作用。     

大川芎方中天麻效应组分的体内移行研究

目的:借鉴血清药物化学的方法,探讨大川芎方中天麻的药效物质基础,为有效、全面地控制大川芎方及其制剂的质量奠定基础.方法:通过HPLC指纹图谱,比较空白血浆与含药血浆,空白脑脊液与含药脑脊液的成分异同,确定天麻效应组分的体内移行成分,并应用HPLC-DAD-MSn分析技术推测移行成分的化学结构.结果:灌胃大川芎方效应组分后,血浆中较明显来源于天麻效应组分的色谱峰有2个,经推断分别为天麻素和巴利森苷类成分;而脑脊液中未明显检测到来源于天麻效应组分的色谱峰.结论:天麻体内移行成分研究有助于阐明其效应物质基础.     

HPLC同时测定西藏栽培天麻中天麻素和8种核苷及碱基类成分

本实验建立了同时测定天麻药材中天麻素及8种核苷和碱基类成分的高效液相色谱法:Agilent Zorbax BonusRP(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-(0.04%冰乙酸)水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温36℃,流速1.0 m L·min-1,检测波长254 nm,进样量20μL。该方法分离度良好,天麻素、胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷和腺苷等的质量浓度在2.04~262.00,0.20~24.67,0.18~23.75,0.20~25.83,0.20~26.67,0.16~20.00,0.22~27.71,0.20~24.29,0.24~30.58 mg·L-1内,相关系数r在0.998 9~0.999 9,具有良好的线性。天麻素和8种核苷及碱基平均加标回收率在96.4%~99.6%,RSD均小于2.7%(n=6)。测定了7个西藏栽培天麻药材中上述9种成分的含量。结果表明,7个天麻样品中天麻素的含量均高于2.0 mg·g-1,均含有较高的腺苷、鸟苷、尿苷和胞嘧啶,而胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量较低。该方法简便、准确,重复性好,适用于天麻药材中天麻素和腺苷等8种核苷及碱基类成分的含量测定。     

HPLC测定不同生长期鸭跖草中异荭草素的含量

目的:研究中药鸭跖草中黄酮类成分异荭草素的含量测定方法,并比较不同生长期鸭跖草中异荭草素的含量,以确定最佳采收期。方法:采用AgilentTC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85)为流动相,流速1mL·min-1,紫外检测器检测。结果:异荭草素的线性范围0.08～1.00μg,平均回收率101.2%,不同生长期对样品的异荭草素含量有显著影响,成熟期含量最高。结论:该方法便捷、有效,适用于检测鸭跖草中异荭草素含量,为其质量标准的制定提供依据,对确定鸭跖草的最佳采收期提供参考。     

云南昭通天麻松弛血管平滑肌活性成分的筛选

目的:观察天麻血管平滑肌松弛作用,明确其作用物质基础。方法:采用大鼠离体胸主动脉环灌流实验方法,对天麻血管平滑肌松弛作用进行考察,采用柱色谱法、光谱法(MS,NMR)对其活性成分进行了分离鉴定。结果:天麻能够显著抑制KCl引起的大鼠胸主动脉环收缩,从天麻乙酸乙酯提取物中分离并鉴定了5个酯溶性酚性成分(Ⅰ～Ⅴ):对羟基苯甲醛(Ⅰ)、对羟苄基甲醚(Ⅱ)、对羟基苯甲醇(Ⅲ)、4,4′-二羟基二苯基甲烷(Ⅳ)、4,4′-二羟基二苄醚(Ⅴ),明确了天麻的血管平滑肌松弛作用是这5个成分共同作用的结果。结论:天麻具有显著的血管平滑肌松弛作用,其作用主要由5个酯溶性酚性成分共同发挥。     

高效液相色谱法测定天麻含片中天麻苷含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定天麻含片中天麻苷（gastrodin）含量的方法,以期为天麻含片建立质量控制标准提供依据。方法：采用HPLC,以gastrodin为对照品,ZorbaxSB-C18键合硅胶柱（4．6mm×150mm,5μm）,0．05％磷酸：乙睛（3：97）为流动相,流速1．0ml·min^-1,柱温为室温,检测波长220nm。结果：天麻苷在0．049～0．396ml^-1范围与峰面积呈良好线性关系,回归方程A=1．71×10^6＋5．864×10^7,r=0．9992（n=6）;测得2批天麻含片的天麻苷含量分别为1．0520mg／片和0．9692mg/片,平均回收率95．28％;方法精密度（RSD=0．98％,n=5）和重现性（RSD=0．78％,n=5）良好;天麻苷在4h内测定稳定RSD=1．16％。结论：该法用于测定天麻含片中天麻苷的含量,操作简便快速,结果准确可靠。     

HPLC法测定强力天麻杜仲胶囊中天麻素的含量

目的:建立测定强力天麻杜仲胶囊中天麻素含量的高效液相色谱方法。方法:采用Agilent Extend C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以甲醇-0.1%乙酸溶液(2∶98)为流动相,流速:1.0 mL·min-1;在220 nm波长处检测。结果:天麻素在(0.10~1.20)μg范围内呈线性关系,r=0.999 9;平均加样回收率为97.26%,RSD为2.10%(n=5)。结论:该方法简便快速,准确性和重复性好,可用于强力天麻杜仲胶囊中的天麻素的含量测定。     

HPLC测定长形肉豆蔻中木脂素类成分的含量

目的 :分析长形肉豆蔻中木脂素类成分,为质量评价提供依据。 方法 :采用高效液相色谱法,色谱柱为TC-C₁₈(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相乙腈-磷酸三乙胺(55 ∶45),柱温40 ℃,检测波长270 nm。 结果 :内消旋二氢愈创木酸在0.286 0~1.716 0 μg呈现良好的线性关系( r =0.999 8),长形肉豆蔻中内消旋二氢愈创木酸的平均含量为0.833 7 mg ·g^-1。erythro-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-4-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2, 3-dimethy lbutan在0.320~1.920 μg 呈现良好的线性关系( r =0.999 8),长形肉豆蔻中erythro-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-4-(3,4-methylenedioxy phenyl)-2, 3-dimethy lbutan的平均含量为0.572 4 mg ·g^-1。 结论 :高效液相色谱法可以准确的测定长形肉豆蔻中木脂素类成分的含量,方法简单可行。     

Protective effects of Gastrodia elata Blume on MPP-induced cytotoxicity in human dopaminergic SH-SY5Y cells

Aim of the study

Gastrodia elata (GE) Blume (Orchidaceae) has been traditionally used as a folk medicine in Oriental countries since centuries for their variety of therapeutic benefits. This study is an attempt to investigate the protective effects of GE extract against MPP⁺-induced cytotoxicity in human dopaminergic SH-SY5Y cells and explore the neuroprotective mechanisms involved.

Materials and methods

Human dopaminergic SH-SY5Y cells were used to demonstrate the protective effects of GE against multiple parameters such as MPP⁺-induced cell viability, oxidative damage, expression of Bcl-2 and Bax, caspase-3 and poly(ADP-ribose) polymerase proteolysis.

Results

GE effectively attenuated the cytotoxicity and improved cell viability in a dose-dependent manner. GE was effective in inhibiting both, the increased production of reactive oxygen species (ROS) and increase in Bax/Bcl-2 ratio, cleaved caspase-3 and PARP proteolysis.

Conclusion

Data from this study suggests the protective effects of GE on MPP⁺-induced cytotoxicity in dopaminergic cells, which may be ascribed to its significant anti-oxidative and anti-apoptotic properties, thus, GE might prove to be a valuable therapeutic agent for the treatment of various neurodegenerative diseases including progressive Parkinson's disease (PD).